впп. Лабораторные исследования при кожновенерических заболеваниях Поспелова Ольга Александровна

• Название: Лабораторные исследования при кожновенерических заболеваниях Поспелова Ольга Александровна
• Дата: 26.03.2020
• Размер: 1.45 Mb.
• Имя файла: laboratornye_issledovania.pptx
• Тип: Документы; #113566

Лабораторные исследования при кожно-венерических заболеваниях

Поспелова Ольга Александровна

Классификация инфекций передаваемых половым путём

Классификация ВОЗ

I Классические венерические болезни:

• сифилис,

• гонорея,

• шанкроид (мягкий шанкр);

• лимфогранулематоз паховый;

• гранулема венерическая.

II Инфекции, передающиеся половым путем, с преимущественным поражением половых органов:

• мочеполовой хламидиоз;

• мочеполово трихомониаз;

• кандидозные заболевания (вульвовагиниты и баланопоститы);

• мочеполовой микоплазмоз;

• генитальный герпес;

• остроконечные бородавки;

• генитальиый контагиозный моллюск;

• гарднереллез;

• лобковый педикулез;

• чесотка,

. Инфекции с преимущественным поражением других органов, способные передаваться половым путем (не относятся к венерическим болезням):

• инфекция, вызываемая вирусом иммунодефицита человека;

• гепатит В;

• цитомегаловирусная инфекция

Сифилис

Сифилис-хроническая венерическая болезнь, характеризующаяся поражением кожи, слизистых оболочек,внутренних органов, костей и нервной системы.

Различают четыре периода: инкубационный, первичный, вторичный и третичный сифилис.

Первичный сифилис-стадия заболевания, характеризующаяся появлением твёрдого шанкра и увеличением регионарных лимфоузлов. (Первичный серонегативный, первичный серопозитивный сифилис, первичный скрытый период).

Вторичный сифилис-стадия заболевания, обусловленная гематогенным распространением возбудителей из первичного очага, проявляющаяся высыпаниями на коже и слизистых оболочках.

Третичный сифилис характеризуется деструктивными поражениями внутренних органов и нервной системы с возникновениями в них гумм.

Трепонема совершает характерные виды движения: вращательные, поступательные, волнообразные и сгибательные.

Микроорганизм может существовать в виде цист и L-форм.

Циста является формой выживания бледной трепонемы в неблагоприятных условиях среды и рассматривается как стадия покоя, обладает антигенной активностью.

L-форма является способом выживания бледной трепонемы, обладает слабой антигенной активностью.

Пути инфицирования

-половой(наиболее частый и типичный путь инфицирования; заражение происходит через повреждённую кожу, либо слизистые оболочки);

-трансплацентарный (передача инфекции от больной матери к плоду через плаценту, ведущее к развитию врождённого сифилиса);

-трансфузионный (при переливании крови от донора, больного сифилисом в любой стадии);

-контактно-бытовой(является редкостью; встречается преимущественно при бытовом контакте с детьми родителей, имеющих высыпания на коже/слизистых оболочках);

-профессиональный (заражение персонала лабораторий,акушеров-гинекологов,хирургов,стоматологов,патологоанатомов при выполнении профессиональных обязанностей).

Возможно заражение сифилисом грудных детей через молоко кормящих матерей, больных сифилисом. Также к заразным биологическим жидкостям относятся слюна и сперма больных с клиническими проявлениями соответствующих локализаций. Случаев заражения через пот и мочу не наблюдалось.

Клиническая картина Инкубационный период

Начинается с внедрения через повреждённую кожу или слизистую оболочку возбудителя сифилиса и заканчивается появлением твёрдого шанкра.

В среднем продолжительность инкубационного периода от 2 недель до 2 месяцев(может сократиться до 8 дней или удлинится до 190 дней.

Сокращение инкубационного периода наблюдается при реинфекции, при внедрении возбудителя сифилиса в организм из нескольких входных ворот, что ускоряет генерализацию инфекции.

Удлинение инкубационного периода наблюдается при применении антибиотиков.

Первичный сифилис

Начинается с появления в месте внедрения бледных трепонем эрозии или язвы диаметром от 2-3 мм до 1,5-2см и более, округлых очертаний, с ровными краями, гладким, блестящим дном розового или красного цвета, дно язвы грязно-жёлтого цвета, края эрозии чётко отграничены.блюдцеобразной формы, со скудным серозным отделяемым, отсутствие признаков острого воспаления, безболезненная при пальпации. Появление шанкра сопровождается увеличением регионарных лимфоузлов.Первичный период продолжается 7-8 недель

Вторичный сифилис

Обусловлен гематогенной диссеминацией инфекции и проявляется: полиаденитом, высыпаниями на коже и/или слизистых оболочках, выпадением волос, возможны поражения внутренних органов, опорно-двигательного аппарата и нервной системы.

Третичный сифилис

Третичный сифилис характеризуется деструктивными поражениями внутренних органов и нервной системы с возникновениями в них гумм.

Лабораторные исследования

Для лабораторной диагностики сифилиса применяются прямые и непрямые методы.

Прямые методы диагностики выявляют самого возбудителя или его генетический материал.

К непрямым методам относятся тесты, выявляющие антитела к возбудителю сифилиса в сыворотке крови и цереброспинальной жидкости.

К прямым методам диагностики сифилиса относятся:

-микроскопия нативного препарата в тёмном поле зрения(обнаружение бледной трепонемы в образцах, полученных из очагов поражения);

-прямая иммунофлюоресценция;

-полимеразная цепная реакция (выявление специфической ДНК и РНК возбудителя).

Методы используются для диагностики ранних форм заболевания с клиническими проявлениями, для подтверждения врождённого сифилиса.

Серологические методы диагностики(не прямые методы)

Нетрепонемные тесты:

-Реакция микропреципитации с плазмой и инактивированной сывороткой и её аналоги;

-RPR-тест быстрых плазменных реагинов;

-TRUST-тест с толуидиновым красным и непрогретой сывороткой, и т.д.

Общая характеристика нетрепонемных тестов:

-применяется антиген нетрепонемного происхождения-стандартизированный кардиолипиновый антиген;

-позитивируются через 1-2 недели после образования первичной сифиломы;

-имеют невысокую чувствительность (до 70-90% при ранних формах сифилиса и до 30% при поздних)-часто дают ложноположительные результаты(более 3%).

Преимущества:

Низкая стоимость, техническая простота и быстрота получения результатов.

Показания к применению нетрепонемных тестов:

-проведение скрининга населения на сифилис;

-определение активности течения инфекции (определение титров антител);

-контроль эффективности терапии (определение титров антител).

Трепонемные тесты

Трепонемные тесты

- ИФА-иммуноферментный анализ;

-РПГА-реакция пассивной гемагглютинации;

-РИФ-реакция иммунофлуоресценции, в том числе в модификациях РИФабс и РИФ200;

-Иммуноблотинг;

-РИБТ(РИТ)-реакция иммобилизации бледных трепонем.

Общая характеристика трепонемных тестов

-применяется антиген трепонемного происхождения;

-чуствительность 70-100%(в зависимости от вида теста и стадии сифилиса);

-специфичность 94-100%;

-РИФ, ИФА, иммуноблотинг становятся положительными с 3-й недели от момента заражения и ранее,РПГА и РИБТ-с 7-8.

Преимущества: высокая чуствительность и специфичность.

Показания к применению трепонемных тестов:

-подтверждение положительных результатов нетрепонемных тестов;

-подтверждение в случае расхождения результатов скринингового трепонемного теста и последующего нетрепонемного теста;

-проведение методами ИФА,РПГА скрининга отдельных категорий населения на сифилис(доноры, беременные, ВИЧ-инфицированные и т.д.).

Дают положительные результаты при невенерических трепонематозах и спирохетозах.

Могут давать ложноположительные реакции у больных с аутоиммунными заболеваниями, онкопатологией, эндокринной патологией, проказой и др.

Заболеваниях.

Новыми для использования являются методы выявления трепонемспецифических антител, основанные на методах иммунохемилюминесценции (ИХЛ),и иммунохроматографии ИХГ).

Шанкроид (мягкий шанкр)

Шанкроид (мягкий шанкр)

Возбудителем мягкого шанкра являются стрептобациллы Дюкрея-Унны-Петерсена, которые вмазке гноя располагаются в виде цепочек или «стаек рыб». Заражение возникает во время полового сношения, когда стрептобациллы попадают на поврежденную кожу и слизистую оболочку половых органов .

Стрептобациллы грамотрицательны и хорошо окрашиваются основными красителями (в центральной части более интенсивно).

Длина стрептобацилл 1,5-2 мкм, толщина 0,4-0,5 мкм; они имеют закругленные концы и перетяжку в середине.

Внеполовое заражение мягким шанкром наблюдается крайне редко. Отмечаются случаи бациллоносительства. Такая женщина может заражать мужчин. Болезнь иммунитета не оставляет.

Клиника

Клиника

Через 2-3 дня на месте внедрения стрептобацилл появляется ярко-красное пятно, затем узелок, гнойничок. После вскрытия гнойничка образуется язвочка, которая довольно быстро становится размером с 10-15-копеечную монету и больше. При мягком шанкре обычно бывает много язв, которые находятся в разных стадиях развития. Они характеризуются неправильной формой, подрытыми краями и мягкой консистенцией (отсюда название «мягкий шанкр»). В отличие от твердого шанкра дно язв неровное и покрыто обильным гнойным, отделяемым. Резкая болезненность язв также весьма характерна. Через 2-3мес язвы заживают, оставляя рубец.

Гонорея

Гонорея передаётся почти исключительно половым путём. В отдельных случаях возможно внеполовое заражение через бельё губки, полотенца, на которых сохранился невысохший гонорейный гной.

Гонококки поражают слизистые оболочки:

-мочеиспускательного канала

-влагалища

-прямой кишки

-конъюктивы глаза

-полости рта, носа, гортани.

Формы гонореи:

1)Свежая(острая подострая, торпидная);

2)Хроническая(развивается при отсутствии или недостаточном лечении).

Клиническая картина

Мужчины

-Появление гнойного отделяемого из уретры.

-Болезненное и учащенное мочеиспускание.

-Зуд, жжение, дискомфорт в области мочеиспускательного канала.

-Появление слизистых выделений из мочеиспускательного канала.

-Боли в промежности с распространением на прямую кишку

Женщины

Женщины

Влагалищные выделения больше обычного (густые, или, напротив, водянистые, имеющие желтый или зеленоватый цвет).

Могут появиться межменструальные кровотечения, боль внизу живота.

Боль и чувство дискомфорта при мочеиспускании.

Зуд, жжение, дискомфорт в области половых органов.

Нарушение менструального цикла.

Лабораторная диагностика

Методы обнаружения гонококковой инфекции:

1)Бактериоскопический

Исследуются препараты, окрашенные 1% метиленовым синим и по Граму.

Метод обладает высокой чувствительностью (90—100%) и специфичностью(90-100%) при исследовании уретрального отделяемого у мужчин с клиническими проявлениями.

Характеризуется низкой чувствительностью(45-64%) при исследовании цервикальных, фарингеальных и ректальных проб, а также при бессимптомной инфекции.

а)Морфология(диплококк);

Гонококк снаружи защищен многослойной капсулой, под которой находится мембрана, сохраняющая внутреннее строение гонококка. На внешней стенке гонококка имеются микроскопические нити, которые способствуют активному воздействию гонококка на здоровые клетки. Гонококк может проявлять свою активность как во внутриклеточном пространстве, так и вне клеток. Гоноккок размножается путем поперечного деления. Удивительная способность гонококка при неблагоприятных для него внешних условиях образовывать так называемые L-формы (подобно анабиозу), позволяет ему «переждать» лечение и спровоцировать в последующем рецидив заболевания.

б)Грамнегативность;

в)Внутрилейкоцитарное расположение;

д)Особое расположение гонококков по отношению дру к другу (в виде пчелиного роя)

Окраска по Граму

Окраска по Граму

На фиксированный мазок наложить кусочек фильтровальной бумаги, на который налить избыток генцианового фиолетового карболового и выдержать при комнатной температуре (+18 -25°С) в течение 1 — 2 мин.

· Снять бумагу, слить краску и, не промывая мазок водой, налить на мазок 0,7 — 1,0 мл раствора Люголя и выдержать мазок при комнатной температуре в течение 1 — 2 мин.

· Слить раствор Люголя и, не промывая, погрузить стекло с мазком в стакан со спиртом этиловым 96°, покачивая стекло до тех пор, пока с мазка не перестанут отходить струйки краски (не более 30 сек).

· Извлечь стекло с мазком из спирта, ополоснуть мазок дистиллированной водой, залить поверхность мазка раствором фуксина Пфейфера и выдержать мазок при комнатной температуре в течение 30 — 60 сек.

· Слить краску со стекла, промыть мазок дистиллированной водой, высушить стекло с помощью фильтровальной бумаги или естественной сушкой в наклонном положении при комнатной температуре и провести микроскопию с использованием иммерсионной системы при увеличении X (900 — 1000).

Грамположительные микроорганизмы окрашиваются в фиолетовый или фиолетовый с синим оттенком цвет, грамотрицательные микроорганизмы — в красный цвет.

-качественной подготовки больного к обследованию(отмена антибиотиков, задержка мочеиспускания 4ч. перед взятием материала у мужчин, исключение местного лечения перед обследованием, использование провокаций);

-правильный забор материала для исследования;

-повторные исследования.

1)Бактериологическое исследование с использованием селективных питательных сред и определением ферментативных свойств Neisseria gonorroeae (оксидазный тест и тесты ферментации сахаров).

Является более достоверным методом диагностики, позволяющим определить чувствительность гонококков к антимикробным препаратам.

2)Молекулярно-биологические методы(ПЦР,ЛЦР) ,направленных на обнаружение специфических фрагментов ДНК/РНК возбудителя гонореи.

3)Иммунофлюоресцентный метод(ПИФ);

4)Иммуноферментный анализ(ИФА).

Исследования гонококков в последние годы указывают на изменение их биологических свойств(наличие капсул,в-лактамазы,снижение чувствительности к антибиотикам, появление L-форм).

Урогинетальный трихомониаз

Трихомониаз относят к заболеваниям, передающимся половым путем. Возбудитель – влагалищная трихомонада (Trichomonas vaginalis).

Различают формы трихомониаза:

1)Свежая(острая ,подострая торпидная(малосимптомная))

2)Хроническая(давность заболевания более 2 месяцев)

3)Трихомонадоносительство (при наличии трихомонад отсутствуют симптомы заболевания).

Пути инфицирования

Пути инфицирования

У мужчин и женщин:

-половой контакт

У детей:

-прохождение через родовые пути больной матери;

-половой контакт;

-контактно-бытовой (в исключительных случаях девочки младшего возраста могут инфицироваться при нарушении правил личной гигиены).

Инкубационный период при трихомониазе равен в среднем 5-15 дней, но может колебаться от 1-3 дней до 3-4 недель.

Симптомы трихомониаза

Симптомы трихомониаза у женщин:

- выделения из влагалища (обычно жёлтые, иногда с неприятным запахом)

- зуд и покраснение наружных половых органов

- боль при мочеиспускании

- боль при половых контактах

У мужчин заболевание в большинстве случаев протекает бессимптомно. Иногда при трихомониазе у мужчин возникают следующие симптомы:

- выделения из мочеиспускательного канала

- боль и жжение при мочеиспускании

- при поражении предстательной железы – симптомы простатита.

-сочетанное использование различных методов диагностики;

-неоднократные исследования изучаемого материала;

-забор материала из разных очагов (уретра, мочевой пузырь, вульва, вагина, протоки больших вестибулярных желёз);

-правильная техника забора материала.

Особенности возбудителя:

Особенности возбудителя:

• Вне тела человека способна жить не более нескольких часов, при условии сохранения влажности.
• Быстро погибает при высушивании, действии прямого солнечного света, нагревании.
• Способна уходить от надзора иммунной системы, маскируясь под клетки хозяина.
• Другие бактерии могут проникать внутрь трихомонады, где находят защиту от иммунной системы и лекарств. А благодаря своей подвижности, она способна заносить возбудителей других инфекций, передающихся половым путем, в верхние отделы мочеполовой системы.
• В свою очередь, инфекции, передающиеся половым путем, могут создавать более благоприятные условия для развития трихомонад. Наиболее благоприятные условия для данного паразита: анаэробная среда, pH 5,2 – 6,2.

Способна повреждать эпителиальный барьер, что снижает его защитную функцию, облегчая тем самым инфицирование другими ИППП, в том числе и ВИЧ (вирус иммунодефицита человека).

Строение трихомонады

Строение трихомонады

Тело трихомонады состоит из оболочки, протоплазмы, блефаробласты, ядра, аксостиля, четырех жгутиков, ундулирующей мембраны, фибрилл. В расширенной передней части тела трихомонады располагается удлинённое ядро с ядрышком. В ядре хорошо просматриваются глыбки хроматина. Обнаружение ядра существенно для идентификации трихомонад, так как фрагменты цитоплазмы, кусочки слизи и другие обрывки тканей могут иметь схожую с трихомонадами окраску. При электронно-микроскопическом исследовании установлено, что все тело трихомонады, включая жгутики, покрыто трёхслойной осмиофильной мембраной-перипластом; ядро состоит из мелкозернистой кариоплазмы; парабазальный аппарат — из системы нитей, расположенных в один или два ряда, а в цитоплазме находятся большие пищеварительные вакуоли.

1)Микроскопическое исследование нативного препарата (световое, фазово-контрастное, темнопольное).

Особенностью данного метода является немедленное исследование после получения клинического материала.

Наибольшая чувствительность и специфичность метода установлена при клинически выраженных формах заболевания.

2)Микроскопическое исследование препарата, окрашенного раствором 1% метиленового синего, по Граму и Романовскому-Гимзе.

Является наиболее доступным методом исследования, но чувствительность не превышает 40-60% в связи с субъективной оценкой результатов.

3)Молекулярно-биологические методы исследования (ПЦР,ЛЦР), обнаружение специфических фрагментов ДНК/РНК.

4)Культуральное исследование

Показано при мало- и бессимптомных формах заболевания.

Другие методы лабораторных исследований, в том числе ПИФ и ИФА недопустимо использовать для диагностики трихомониаза.

Хламидийная инфекция

Хламидийная инфекция

Хламидии могут поражать у человека различные органы и системы:

• Половые органы как наружные так и внутренние;
• Дыхательные пути;
• Сердце и сосуды;
• Суставы;
• Глаза;
• Органы слуха.

Хламидии (Chlamydia trachomatis) - это неподвижные, кокковидные, грамотрицательные облигатные внутриклеточные микроорганизмы.

• Вагинальный контакт;
• Анальный;
• оральный;
• От матери к ребёнку вследствие прохождения плода по родовым путям матери зараженной хламидиозом.
Во время полового контакта заражается 1 из 5 партнеров. Женщины более подвержены заражению хламидиозом в связи с особенностью строения половых органов. Инкубационный период длится от 2-х недель до 1 месяца.

• Внутриклеточное паразитирование — объединяет хламидии с вирусами, при этом хламидии не способны синтезировать АТФ и полностью зависят от энергетических ресурсов клетки — то есть в процессе паразитирования полностью разрушают клетку.
• Хламидии имеют клеточную оболочку, что объединяет хламидии с бактериями .
• Тропность к эпителию определённых органов (мочеполовые органы, конъюнктива).
• Наличие особенного жизненного цикла.
От всех других микроорганизмов хламидии отличаются совершенно особым жизненным циклом, который начинается с инфицирования чувствительных клеток хозяина посредством специфичного для хламидий процесса фагоцитоза.

• Элементарные тельца (ЭТ) — или внеклеточные инфекционные тельца.
• Ретикулярные тельца (РТ) — внутриклеточная форма возбудителя.
Хламидия напоминает вирус тем, что является полностью внутриклеточной бактерией: зависит от питательных веществ и энергии клетки — хозяина, не синтезирует АТФ, являясь энергетическим паразитом. Но, как и все бактерии, содержит как ДНК, так и РНК, размножается делением.

Клинические проявления хламидиоза

Хламидиоз очень часто протекает бессимптомно или с минимальными проявлениями. Если симптомы присутствуют, то совершенно скудные и часто незаметные для больного.

Симптомы хламидиоза у женщин:

• Слизистые или слизисто-гнойные выделения из влагалища с неприятным запахом или желтоватым оттенком;
• Умеренные боли внизу живота, в области половых органов, боли часто усиливаются перед менструацией;
• Межменструальные кровотечения;
• Лёгкие симптомы интоксикации: лёгкая слабость, небольшая температура.

Хламидиоз протекает у мужчин как затяжной, подострый уретрит часто переходящий в хронический. Мужчину беспокоит:

• Выделения из мочеиспускательного канала слизистого, стекловидного характера, больше по утрам;
• Зуд и жжение при мочеиспускании;
• Боль в уретре, яичках, пояснице;
• Иногда появляется субфебрильная температура;
• Если помочиться в прозрачную баночку, видны уретральные нити;
• Редко появляется гемоспермия- кровь в сперме;
• Общая слабость, подавленность, уход в проблему.

Если у человека сильный иммунитет, который эффективно подавляет развитие хламидий то симптомов и осложнений может вообще не быть.

Диагностика хламидиоза

Диагностика хламидиоза сложна, так как Chlamydia trachomatis — внутриклеточный паразит. Для выявления хламидий используются следующие лабораторные методы:

-Полимеразная цепная реакция (ПЦР)- определение ДНК хламидий;

-Посев на хламидии (культуральный метод) с определением чувствительности к антибиотикам.

Другие методы лабораторных исследований, в том числе ПИФ, ИФА, микроскопический недопустимо использовать для диагностики хламидийной инфекции.

Возбудителями урогенитальных уреаплазмозов и микоплазмозов являются Ureaplasma spp. Mycoplasma hominis-условно-патогенные микроорганизмы, проявление патогенных свойств которых происходит при определённых условиях. Частота обнаружения Ureaplasma spp и Mycoplasma hominis широко варьирует в различны популяционных группах, составляя от 10 до 50%(по данным ряда авторов до 80%).Могут выявлятся у клинически здоровых лиц.

-мелкие микроорганизмы(200-300 нм);

-форма-сферические, грушевидные, нитевидные, звёздчатые,овоидные;

-клеточная стенка отсутствует,имеют трёхслойную мембрану;

-содержат ДНК и РНК;

-пластичны,осмотически неустойчивы;

-растут в бесклеточной среде;

-Обычно формируют колонии типа «яичницы-глазуньи».

В большинствае случаев уреаплазмы, находясь в организме, не вызывает заболевания. Если болезнь все же развилась, она может проявиться как:

• воспалительные заболевания матки и придатков;
• цистит;
• самопроизвольные аборты и преждевременные роды;
• уретрит у мужчин.

Симптомы микоплазмозов:

Симптомы микоплазмозов:

Инкубационный период заболевания (от момента заражения до появления симптоматики) составляет от нескольких дней до месяца, иногда дольше (нескольких месяцев). В период, когда симптомы заболевания еще не проявились, а инфекция в организме уже есть, человек сам является носителем уреаплазм/микоплазм и может заразить ими половых партнеров.

Очень часто заболевание имеет скрытую симптоматику, иногда заболевание вообще не проявляется.

Клиническая картина:

Женщины

-слизисто-гнойные выделения из половых путей;

-ациклические «мажущие» кровянистые выделения;

-болезненность во время половых контактов;