Микробиология Борисов Л.В. Микробиология Борисов Л. Литература для студентов медицинских вузов
 Скачать 27.52 Mb.
|
|
Морфология и физиология T.pallidum имеет форму спирали, протоплазматическнй цилиндр, который скручен в 8-12 завитков. От концов клетки отходят 3 периплазматических жгутика. Бледная трепонема плохо воспринимает анилиновые красители, поэтому ее окрашивают краской Романовского-Гимза. Однако наиболее эффективным методом является ее изучение в темнопольном или фазово контрастном микроскопе (рис. 20.52.). Микроаэрофил. На искусственных питательных средах не растет. Т. pallidum культивируют в ткани яичка кролика, где она хорошо размножается и полностью сохраняет свои свойства, вызывая у животного орхит. Антигены. Антигенная структура Т. pallidum сложная. Она связана с белками наружной мембраны, липопротеидами. Последние являются перекрестно-реагирующими антигенами, общими для человека и крупного рогатого скота. Они используются в качестве антигена в реакции Вассермана для серодиагностики сифилиса. Патогенность и патогенез К факторам вирулентности бледной трепонемы относят белки наружной мембраны и ЛПС, проявляющие свои токсические свойства после освобождения из клетки. Вместе стем, по-видимому, способность трепонемы при делении образовывать отдельные фрагменты, проникающие вглубь тканей, также можно отнести к факторам вирулентности. В патогенезе сифилиса различают три стадии. При первичном сифилисе наблюдается образование первичного очага — твердого шанкра вместе входных ворот инфекции, с последующим проникновением в регионарные лимфоузлы, где возбудитель размножается и накапливается. Первичный сифилис продолжается около 6 недель. Вторая стадия характеризуется генерализацией инфекции, сопровождающейся проникновением и циркуляцией возбудителя в крови, что сопровождается кожными высыпаниями. Продолжительность вторичного сифилиса у нелеченых больных колеблется в пределах 1-2 лет. В третьей стадии обнаруживаются инфекционные гранулемы (гуммы, склонные к распаду, локализующихся во внутренних органах и тканях. Данный периоду нелеченых больных продолжается несколько лети заканчивается поражением ЦНС прогрессивный паралич) либо спинного мозга (спинная сухотка). Иммунитет. При сифилисе имеет место гуморальный и клеточный иммунный ответ. Образующиеся антитела не обладают протек- тивными свойствами. Клеточный иммунный ответ связан с фиксацией возбудителя и образованием гранулем. Однако элиминации трепо- нем из организма при этом не происходит. Вместе стем неблагоприятные условия среды индуцируют образование трепоне- мами цист, которые локализуются в стенке кровеносных сосудов. Полагают, что это свидетельствует о переходе заболевания в стадию ремиссии. Наряду с цистами трепонемы образуют формы. При сифилисе формируется ГЗТ, которая может быть выявлена кожно-ал лергической пробой с убитой взвесью трепонем. Полагают, что проявление третичного периода сифилиса связано с ГЗТ. Экология и эпидемиология Сифилис — типично антропонозная инфекция. Болеют только люди, которые являются резервуаром инфекции в природе. Передача инфекции происходит половым путем и значительно реже — через белье и другие предметы. Во внешней среде воздух) трепонемы быстро погибают. Лабораторная диагностика При первичном сифилисе материалом для исследования является отделяемое твердого шанкра, которое подвергается темнопольной микроскопии. В последующие стадии проводят серодиагностику. С этой целью используют следующие серологические реакции РСК с трепонемным антигеном (озвученный антиген) либо с кардиолипидным антигеном, реакция преципитации Определяемое твердого шанкра, пунктат лимфатических узлов, отделяемое слизистых и кожных поражений при вторичном сифилисе Микроскопическое исследование Микроскопия нативного препарата в темном поле О тв е т Сыворотка крови, плазма, спинномозговая жидкость Серодиагностика (комплекс серологических реакций Реакция Вассермана _ Реакция микропреципитации _ Реакция иммобилизации трепонем _ Реакция имм унофлю оресценции О тв е т С хе м а 20.18. Микробиологические исследования при сифилисе с неспецифическими антигенами. Недостатком этих реакций является возможность получения ложноположительных результатов. Более специфическая серодиагностика проводится в реакции иммобилизации трепонем, иммунофлюоресценции и при иммуноферментном анализе, где обнаруживаются белки наружной мембраны. Применяют также иммуноблотинг — исследование сыворотки больного с разными антигенами трепонем (схема Профилактика и лечение Вакцинопрофилактика не разработана. Лечение проводится антибиотиками (пенициллин и др. Антибиотико резистентные штаммы трепонем практически не регистрируются. Другие патогенные трепонемы Т. p e r t e n u e — возбудитель фрамбезии. По многим биологическим свойствам не отличается от бледной трепонемы. Однако в отличие от нее возбудитель фрамбезии патогенен не только для человека, но и для некоторых животных (обезьяны, кролики, крысы, хомяки. При фрамбезии также как и при сифилисе различают три стадии болезни я стадия заключается в появлении вместе входных ворот инфекции болезненной язвочки или папилломы. Через 2-3 мес. начинается я стадия болезни, заключающаяся в генерализации процесса с характерными кожными высыпаниями (малинопо добные узелки. Продолжительность й стадии 2-3 года. Для й стадии характерны дистрофические процессы в коже и костях. Источник инфекции — больной человек. Заболевание носит характер семейных вспышек. Встречается в тропических странах Африки, Центральной Америки, Индии и др. Заражение происходит половым путем. Дети инфицируются через поврежденную кожу. Лабораторная диагностика такая же, как и при сифилисе. Бактериоскопия в й период болезни, серодиагностика — в последующие периоды. Вак цинопрофилактика не разработана, для лечения применяют пенициллин и другие антибиотики . c a r a t e u m — возбудитель пинты. По многим биологическим признакам напоминает T.pallidum. Пинтой болеют только люди. Инфекция передается путем бытового контакта и, возможно, через насекомых (мошки. Заболевание, также как и сифилис, протекает в 3 стадии. Начинается с появления коричневой папулы, затем происходит генерализация процесса. На коже появляются разного цвета пятна, возникает гиперкератоз подошв и ладоней, поражаются волосы. Отмечаются изменения со стороны сердечно-со судистой, нервной и костной системы. Лабораторная диагностика заключается в бактериоскопическом исследовании экссудата из пораженных участков кожи и серодиагностике. В последнем случае применяют реакцию Вассермана, осадочные реакции и реакцию иммобилизации трепонем. Т. В ее возбудитель беджеля, относящегося к хроническим трепонематозам (эндемический сифилис, распространенного в основном в арабских странах. По биологическим признакам не отличается от бледной трепонемы. Патогенез заболевания сходен с сифилисом и фрамбезией. Болезнь характеризуется появлением сыпи на коже и слизистых оболочках в первый периода затем поражений, сходных с сифилитическими гуммами. Источник инфекции — человек. Заболевание распространяется бытовым путем. Лабораторная диагностика и лечение проводятся также, как и при сифилисе, фрамбезии и пинте. Боррелии Род Borrelia включает около 20 видов, из которых для человека патогенны только два возбудитель эпидемического (вшивого) возвратного тифа В. recurrentis и эндемического (клещевого) возвратного тифа — В. duttoni, В. burgdorferi и др. Боррелии эпидемического возвратного тифа Открыты в 1868 г. О. Обермейером. Морфология и физиология Боррелии имеют форму тонкой спирали стремя крупными завитками с заостренным концом рис. 20.53 на цв. вкладке Они окрашиваются краской Романовского-Гимза с сине-фиолетовый цвет, грамотрицательны. Боррелии — строгие анаэробы. Их культивируют на питательных средах, с животными белками (сыворотка крови, асцитическая жидкость, кусочки паренхиматозных органов или свернутый яичный белок. Хорошо размножаются в куриных эмбрионах. Антигены. Поверхностные антигены чрезвычайно вариабельны вследствие внутригеномных рекомбинаций. Поэтому серологическая идентификация боррелий не может иметь практического значения. Патогенность и патогенез Видимо, в инвазии боррелий участвует белок наружной мембраны. После проникновения в клетки лимфомакрофагальной системы боррелии размножаются в них, аза тем поступают в кровяное русло. Компоненты клеточной стенки, которые освобождаются при лизисе боррелий, оказывают токсическое действие по типу эндотоксина. Поступление боррелий в кровь является причиной первого лихорадочного приступа. В крови больного в этот период накапливаются спирохетолизины, которые лизируют бор релии с освобождением эндотоксина. При этом часть боррелий с измененной антигенной структурой сохраняется и дает новую генерацию, нечувствительную к образовавшимся антителам. При повторном поступлении возбудителя в кровь начинается второй приступ. Одновременно образуются спирохетолизины, растворяющие вторую генерацию боррелий. Такие приступы болезни повторяются 5-6 раз, вызываемые новыми генерациями боррелий с измененной антигенной структурой. Эти приступы повторяются до прекращения поступления в кровь генераций боррелий с измененной антигенной специфичностью, после чего наступает выздоровление больного. В капиллярах внутренних органов под влиянием антител могут образоваться аггрегаты боррелий и тромбоцитов, в результате чего нарушается местное кровообращение с развитием геморрагических инфарктов. Иммунитет. При возвратном тифе наблюдается гуморальный иммунный ответ. Постинфекционный иммунитет нестойкий. Регистрируются случаи повторных инфекций. Экология и эпидемиология Резервуаром инфекции в природе является больной человек. Переносчик — платяная вошь. Боррелии вместе с кровью попадают в кишечник вши и размножаются в гемо лимфе. Заражение человека возможно только при втирании гемолим фы при расчесах. Для вшей боррелии непатогенны и сохраняются в течение всей жизни насекомого. Трансвариально не передаются. Лабораторная диагностика Материал для исследования — кровь, взятая вовремя приступа. Для диагностики используется ми к Кровь Сыворотка крови Н С х ем а 0 .1 Микробиологические исследования при возвратном тифе роскопический метод из крови приготавливаются мазки, которые окрашивают краской Ромаиовского-Гимза. Серодиагностика проводится в реакции лизиса, РСК, реакции иммобилизации. Биопроба применяется для отличия эпидемического возвратного тифа от эндемического. С этой целью морской свинке вводят кровь больного. Боррелии эпидемического тифа не вызывают заболевания животного схема Профилактика и лечение Вакцинопрофилактика не проводится. Для лечения применяют антибиотики бета-лактамы и др. Боррелии клещевого возвратного тифа Возбудителями клещевого (эндемического) возвратного тифа являются следующие виды боррелий: В. caucasica, В. persica, В. duttonii и др. Кроме них сравнительно недавно была описана В. burgdorferi — возбудитель Лаймской болезни Данные боррелии, в отличие от возбудиеля вшивого эпидемического возвратного тифа, переносятся клещами, паразитирующими в определенных эндемических очагах. Отсюда и название — эндемический (клещевой) возвратный тиф. Для каждого природного очага характерен определенный вид возбудителя. По морфологическим свойствам они очень близки кВ. Различаются между собой по антигенной структуре. Заболеваемость людей клещевым возвратным тифом регистрируется только в тем странах, где имеются эндемические очаги данной болезни. Резервуаром боррелий в природных очагах служат мышевидные грызуны разных видов, а переносчиками — клещи рода Omithodoros. Клещи могут передавать возбудителя трансовариально. Патогенез и клиническая картина болезни у человека сходна с эпидемическим возвратным тифом. Особняком стоит болезнь Лайма, вызванная В. burgdorferi, которая передается иксодовыми клещами. Факторами вирулентности у B.borgdorferi являются адгезины, к которым относят коллагенсвязывающий белок, реагирующий с определенными интег- ринами на поверхности тромбоцитов, и белок, связывающий фермент урокиназу. В. borgdorferi сейчас подразделяют натри подвида, которые способны поражать разные ткани кожу, суставы, ткани головного мозга. Болезнь часто переходит в хроническую форму при добавлении аутоиммунного компонента. Кроме того, у данных боррелий обнаружено 5 белков (антигенов) наружной мембраны, антитела к которым обладают протективными свойствами. Экология и эпидемиология Резервуаром инфекции являются дикие грызуны, переносчик — иксодовые клещи. Заражение происходит при укусе клеща, зараженного боррелиями, которые содержатся у него в кишечнике, гемолимфе и слюне. Вместе укуса начинается размножение боррелий, после чего возбудитель попадает в лимфоуч лы ив кровь Лабораторная диагностика проводится путем иммунофлюорес- центного исследования материала, взятого из места укуса вначале болезни. Начиная с конца й недели, заболевания проводят сероди агностику. Вакцинопрофилактика находится на стадии разработки. Для лечения применяют антибиотики беталактамы, тетрациклин и др. Лептоспиры К роду Leptospira относятся свыше десяти видов, из которых только один — L. interrogans — патогенен для человека. Возбудитель изучен в 1925 г. А. Инадой с соавт. Морфология и физиология Гибкие спиралевидные клетки, слабо- окрашивающиеся анилиновыми красителями, грамотрицательны. Хорошо заметны в темном поле и при фазово-контрастной микроскопии. Один или оба конца клетки загнуты в виде крючков. На обоих концах имеются по одному периплазматичес- кому жгутику (рис. 20.54.). В жидкой среде видны характерные движения клеток как вращение тов одну, тов другую сторону вокруг длинной оси и поступательное движение вперед. Для размножения нуждаются в присутствии в среде сыворотки крови. Аэробы. Хемоорганотрофы, использующие в качестве источника углерода и энергии жирные кислоты. Углеводы и аминокислоты не используют. Антигены. L.interrogans на основании их антигенного различия диф- Рис. 20.54. Лептоспиры ференцируются на многочисленные в темном поле зрения серогруппы и серовары. Патогенность и патогенез К факторам вирулентности I,. interrogans относятся способность к инвазии, устойчивость к фагоцитозу. Их длительная персистенция приводит к повреждению шдотелиальных клеток и появлению геморрагий, а также очагов некроза в печени. Липогликопротеид клеточной стенки синтезируется в избытке и включается в цитоплазматическую мембрану кле- 1 'ок хозяина. Лептоспиры проникают в организм человека через слизистые оболочки и поврежденную кожу. Затем по лимфатическим путям попадают в кровь ив паренхиматозные органы. Для исптоспироза наиболее характерно поражение печени, развитие желтухи. Могут поражаться почки, лептоспиры также обнаруживаются в селезенке, костном мозге, лимфатических узлах. Болезнь Схема Микробиологические исследования при лептоспироз ах чаще всего претерпевает обратное развитие и заканчивается выз доровлением. Иммунитет. При лептоспирозе имеет место гуморальный иммунный ответ. Постинфекционный иммунитет связан с антителами, которые сохраняются в течение многих лет. Однако иммунитет носит специфический характер, вследствие чего могут возникнуть повторные заболевания, вызванные другими сероварами лептоспир. Экология и эпидемиология Лептоспиры широко распространены в природе. Сапрофитные лептоспиры встречаются в водоемах, почве, иле и других объектах окружающей среды. Патогенные лептоспиры поражают многие виды животных ив первую очередь грызунов (полевки, крысы, песчанки, хомяки и др. Лептоспироз — зоо нозная инфекция. Она может протекать у животных в хронической форме с выделением их с мочой. Заражение человека происходит, главным образом, через воду и пищу (молоко, мясо, хлеб, инфицированную больными грызунами. Вводе и почве лептоспиры сохраняют жизнеспособность в течение 2-3 недель, в пищевых продуктах — несколько дней. Лабораторная диагностика Используют микроскопический, микробиологический методы, а также биопробы и серодиагностику. Нативные препараты для микроскопии готовят из мочи и микроско- пируют в темном поле зрения. Чистую культуру выделяют из крови или мочи с последующей микроскопией экссудата из брюшной полости. Кровью больного заражают внутрибрюшинно морскую свинку. Серодиагностику проводят со й недели заболевания в реакции агг лютинации-лизиса живых культур лептоспир разных сероваров (схема Профилактика и лечение Вакцинопрофилактика не разработана. Для лечения используют антибиотики (пенициллин и др, атак же иммуноглобулин против лептоспир наиболее распространенных сероваров. 20.12. Микоплазмы (молликуты) Эту группу составляют мелкие прокариоты, лишенные клеточной стенки. Их клетки отграничены только цитоплазматической мембраной и неспособны к синтезу пептидогликана (см. рис. 3.11). І Іозтому данные микроорганизмы устойчивы к пенициллину и другим антибиотикам, блокирующим синтез клеточной стенки. Микоплазмы плеоморфные микроорганизмы. Репликация генома предшествует, ноне всегда соответствует делению. Как правило, неподвижны, грамотрицательны. Могут расти на синтетических питательных средах разной сложности. Большинство видов нуждается для роста в стеролах и жирных кислотах. Некоторые штаммы легче выделить при Рис. 20.55. Колонии микоплазмы пневмонии Ю Ом км использовании культур клеток. Большинство видов факультативные анаэробы. Образуют колонии, имеющие характерный вид яичницы- глазуньи (рис. 20.55). Некоторые из них патогенны для человека. Микоплазма пневмонии Возбудитель вьщелен М. Итоном в 1944 г. и на основании способности проходить через бактериальные фильтры был отнесен к вирусам. Род Mycoplasma включает несколько десятков различных видов, из которых патогенным для человека является Мак условно-патогенным и сапрофитическим видам принадлежат ММ, ММ и др. (см. рис. Морфология и физиология Морфологические признаки М. pneu moniae в основном соответствует таковым других микоплазм. Клетки окружены трехслойной мембраной. Для своего роста нуждается в стеролах. На твердых средах определенного состава образует типичные колонии в виде яичницы-глазуньи (см. рис. 20.55). Хемоорганот- роф, в качестве источника энергии используют глюкозу или аргинин. Относится к факультативным анаэробам. Антигены. Мембрана содержит видоспецифический антиген. Для серологической идентификации и дифференцировки широкое применение получил тест ингибиции роста — подавление размножения на твердой питательной среде с гомологичной антисывороткой. |