Микробиология Борисов Л.В. Микробиология Борисов Л. Литература для студентов медицинских вузов
 Скачать 27.52 Mb.
|
|
Профилактика. Инактивированная вакцина, полученная Дж. Сол- ком в США путем обработки вируса раствором формалина, обеспечивает достаточно напряженный типоспецифический гуморальный иммунный ответ. К недостаткам инактивированной вакцины следует отнести необходимость ее трехкратного введения парентеральным путем. Кроме того, она не обеспечивает надежного местного иммунитета кишечника. А. Себиным в США были получены аттенуированные варианты нирусов полиомиелита, из которых в конце х годов советскими нирусологами А.А. Смородинцевым и М.П. Чумаковым была приго- говлена живая полиовирусная вакцина. Вакцинные штаммы оказались генетически стабильны. Они не реверсировали к дикому типу при пассажах через кишечник людей и не репродуцировались в клетках ЦНС. Основное отличие вакцинных от исходных, диких, штаммов состоит в их безвредности для человека. Живая вакцина имеет ряд преимуществ по сравнению с инакти вированной. Она обеспечивает не только общий гуморальный иммунитет, но и местный иммунитет кишечника за счет синтеза секреторных иммуноглобулинов класса А. Вместе стем в результате интерференции вирусов с дикими типами полиовируса в эпителиальных клетках слизистой оболочки тонкого кишечника происходит элими нация последних из организма. И наконец, живая вакцина вводится естественным путем — через рот, что в значительной мере облегчает ее применение. Недостатком живых вакцин является необходимость постоянного контроля над генетической стабильностью вакцинного штамма. Для пассивной профилактики полиомиелита применяют человеческий иммуноглобулин. Вирусы Коксаки Впервые выделены в 1948 г. Г. Долдорфом и Г. Сиклсом в местечке Коксаки (США) из кишечника детей с полиомиелитопо добными заболеваниями путем инфицирования мышей-сосунков. Антигены. Известно 30 серотипов Коксаки-вирусов, из которых 24 относятся к группе Аи к группе В. Вирусы групп Аи В имеют общий комплементсвязывающий антиген и различаются по ти поспецифическим антигенам в реакции нейтрализации. Некоторые штаммы вирусов Коксаки обладают гемагглютинирующими свойствами в отношении эритроцитов человека группы О, вследствие чего они могут быть идентифицированы в РТГА. Патогенез и иммунитет Вирусы Коксаки А характеризуются сравнительно высокой миотропностью, так как у мышей-сосунков вызывают вялые параличи, ау выживших животных наблюдается мышечная дегенерация. У людей они встречаются при различных клинических синдромах, сопровождающихся лихорадкой и менинге- альными явлениями. Вирусы Коксаки А были выделены при а) диареи у детей б) герпангине, сопровождающейся высыпаниями назад ней стенке глотки, головными болями в) пузырчатке полости рта и конечностей г) асептическом серозном менингите и других заболе ваниях. Вирусы Коксаки В характеризуются более высокой нейротропно- стью. У новорожденных мышей вызывают энцефаломиелит. Выделяются при асептическом серозном менингите, миокардите и энцефа ломиокардите у детей до летнего возраста. Вирусы обеих групп могут вызывать у детей и взрослых полиомиелитоподобные заболевания, острые респираторные и кишечные инфекции у детей. В целом для вирусов Коксаки характерен полиорганный тропизм. После перенесения заболевания остается напряженный типоспе цифический иммунитет. В сыворотке крови сохраняются вируснейт- рализующие антитела в течение многих лет. Комплементсвязываю- щие антитела исчезают через несколько месяцев. Вакцинопрофилактика не применяется. Вирусы Название представляет собой аббревиатуру, состоящую из первых букв английских слов enteric cytopatogenic human orphans — кишечные цитопатогенные вирусы-сироты человека. Впервые были изолированы из фекалий людей в 1951-1953 гг. Дж. Мельником и др. Поскольку их роль в патологии человека оставалась неизвестной, они были названы вирусами-«сиротами». В отличие от вирусов полиомиелита и Коксаки вирусы ECHO не патогенны для лабораторных животных Антигены. Известно 34 серотипа вирусов ECHO, имеющих общий комплементсвязывающий антиген. Они дифференцируются в реакции нейтрализации. Некоторые серотипы вирусов ECHO способны агглютинировать эритроциты человека 0 группы крови. Патогенез и иммунитет Вирусы ECHO, подобно вирусам Кок саки, являются возбудителями различных заболеваний, преимущественно детского возраста. Многие серотипы вирусов способны поражать ЦНС, вызывая полиомиелитоподобные заболевания, асептический менингит, иногда энцефалит. Эпидемические вспышки серозного менингита, вызванного вирусами Коксаки и ECHO водного происхождения, встречаются в последние годы в Хабаровском крае и других регионах Дальнего Востока, в Ленинградской области. Описаны вспышки внутрибольничного ЕСНО-вирусного энцефалита в палатах для новорожденных детей с летальным исходом. Некоторые штаммы вызывают воспалительные процессы в поперечно-полосатых мышцах, проявляющиеся в виде эпидемической миалгии, миокардита. Возможны поражения кишечника (гастроэнтериты), респираторного тракта (ОРЗ у детей, сосудистой оболочки глаза (увеит), паренхиматозных органов. Нередко вирусы ECHO вызывают заболевания, сопровождающиеся лихорадкой и сыпью. После перенесения заболевания формируется гуморальный типос пецифический иммунитет, продолжительность которого колеблется в разных пределах. Специфическая профилактика и лечение ЕСНО-вирусных инфекций не разработаны 21.1.1.1.4. Энтеровирус типа Данный серотип является возбудителем острого эпидемического геморрагического конъюнктивита. Вспышки этого заболевания были впервые зарегистрированы в 1969 г. Они получили распространение в различных странах Африки и Юго-Восточной Азии, а также в Японии, Индии, Англии, Нидерландах, Бельгии, Югославии. Известны случаи заболевания в нашей стране. Этот вид имеет склонность к пандемическому распространению Заболевание характеризуется субконъюнктивальными кровоизлияниями различной выраженности. Возможно развитие кератита. В неосложненных случаях заболевание заканчивается в течение недели. Иногда развиваются осложнения со стороны ЦНС, сопровождающиеся вторичным подъемом температуры, болями в области корешков спинномозгового нерва, слабостью мышц конечностей, паре зами лицевого или языкоглоточного нервов. Вирус репродуцируется в культурах почечных клеток и фибробластов человека с выраженным ЦПД при оптимальной температура С. Имеются данные об эволюционных связях энтеровируса-70 с вирусами Коксаки Аи А. Выявлена нейротропность для обезьяна также способность поражать двигательные нейроны спинного мозга человека. Вакцинопрофилактика не разработана. Энтеровирус типа Данный серотип был впервые выделен в 1970-1972 гг. в США от больных асептическим менингитом и энцефалитом. В 1975 г. этот вирус вызвал эпидемию полиомиелитоподобной инфекции в Болгарии. В дальнейшем вспышки заболевания были зарегистрированы в ряде стран Европы и Америки. По своим свойствам энтеровирус-71 занимает промежуточное положение между полиовирусами и нейротропным штаммом вируса Коксаки А. Он с трудом адаптируется к культурам клеток и, подобно вирусам Коксаки А, патогенен для новорожденных белых мышей. В нашей стране разработана эффективная инактивированная вакцина. Энтеровирус типа Классифицирован как возбудитель гепатита А см. 21.3) 21.1.1.1.7. Лабораторная диагностика энтеровирусных инфекций Лабораторная диагностика энтеровирусных инфекций проводится путем выделения вируса из организма больного, атак же по нарастанию титра вирусспецифических антител. Вирусы выделяют из фекалий, крови, смывов носоглотки и другого материала в зависимости от периода заболевания одновременно на первичных и перевиваемых культурах клеток, а также путем заражения мышей-сосунков. Для идентификации вируса применяется реакция нейтрализации. Гемагглютинирующие варианты вирусов ECHO и Коксаки можно идентифицировать с помощью РТГА, которая, подобно реакции ви- руснейтрализации, характеризуется типоспецифичностью. Выделение энтеровирусов из организма больного, особенно из фекальных масс, не является абсолютным основанием для постановки диагноза, учитывая распространение бессимптомного носительства. І Іозтому необходима серологическая диагностика с использованием парных сывороток, взятых впервые дни и на 2-3 неделе после нача- ма заболевания. В положительном случае отмечается нарастание титра антител во второй сыворотке не менее чем в 4 раза в реакциях нейтрализации, РСК, РТГА. 21.1.1.2. Риновирусы Эта группа вирусов впервые была выделена в 1960 г. от пюдей, больных острым ринитом. Вирионы риновирусов имеют сферическую форму и кубический тип симметрии, достигая 20-30 нм в диаметре. Они похожи на энтеровирусы, нов отличие от них теряют свои инфекционные свойства в кислой среде. Хорошо сохраняются при низких темпе ратурах. Для культивирования риновирусов используют культуру клеток, приготовленную из фибробластов легких эмбриона человека или эпи гелия трахеи человека и хорьков. В оптимальных условиях культивирования проявляется ЦПД. Выделено более 100 серотипов риновирусов, вызывающих острые респираторные инфекции. Многие из них имеют идентичные пнтигены, ответственные за перекрестные серологические реакции. Они не обладают гемагглютинирующими свойствами. Патогенез и иммунитет Заражение происходит воздушно-ка пельным путем. Риновирусы локализуются в эпителиальных клетках лизистой оболочки носа, ау детей — и бронхов, вызывая насморк, оронхиты и бронхопневмонии. После заболевания сохраняется непродолжительный иммунитет, который определяется не столько сывороточными антителами, сколько секреторными иммуноглобулинами типа IgA. Специфическая профилактика не разработана. Лабораторная диагностика основана на выделении вируса в чувствительных культурах клеток. Для экспресс-диагностики применяется иммунофлюоресцентный метод, который позволяет обнаружить вирусный антиген в цитоплазме эпителиальных клеток слизистой оболочки. Афтовирусы К роду афтовирусов относится вирус ящура — возбудитель высококонтагиозного заболевания парнокопытных домашних животных, вирусная природа которого была установлена еще в 1898 і Ф. Леффлером и П. Фрошем. Вирус ящура мало чем отличается oi других пикорнавирусов. Существует 7 серотипов вируса ящура, отличающихся друг от друга типоспецифическими антигенами. Патогенез. Вирус репродуцируется в средних слоях эпителия кожи и слизистых оболочек. Затем проникает в кровь, вызывая вирусемию При этом может произойти поражение миокарда и паренхиматозных органов. После перенесения заболевания сохраняется непродолжительный типоспецифический иммунитет (около 1-1,5 лет). Эпидемиология. Источником инфекции являются больные живої ные. Человек заражается главным образом при уходе аз ними, реже при употреблении в пищу зараженных продуктов (сырого молока и мяса) без достаточной термической обработки. Вирус ящура в течение 2 мес. сохраняется в некоторых пищевых продуктах (масле, жирах, а также в сгустках крови и костном мози погибших животных. Лабораторная диагностика Исследуемый материал (содержимое везикул) вводится в кожу стопы морской свинки. Через 24-48 ч вместе введения, а также в полости рта появляются везикулы. Виру* можно выделить в культуре клеток. Серодиагностику проводят в рс акции вируснейтрализации и РСК с парными сыворотками. Семейство калицивирусов (Calicivi ridae) Калицивирусы ранее относили к пикорнавирусам. У этих вирусов отсутствует внешняя оболочка. Они имеют икосаэдральный кап сид. Геном представлен молекулой плюс-РНК. Калицивирусы отличаются от пикорнавирусов своеобразной морфологической особенностью, заключающейся в наличии 32 чашеобразных углублений ня поверхности капсида, которые располагаются в соответствии с кубической симметрией. Отсюда и название (лат. calix — чаша). Патогенным для человека является вирус Норфолк, который выявлен с помощью электронной микроскопии в фекалиях детей, больных острым гастроэнтеритом, а также у свиней и телят. В настоящее время в состав данного семейства включен вируї гепатита Е 21.1.3. Семейство реовирусов (Название семейства расшифровывается согласно первым буквам английских слов respiratory enteric orphan viruses — респираторные, кишечные вирусы-«сироты». Многочисленные представители этого семейства широко распространены в природе. Они поражают как млекопитающих, таки птиц, насекомых и растения. Патогенные для человека реовирусы относятся к трем родам собственно реовирусы, ротавирусы, орбивирусы. Они объединены водно семейство на основании структуры вириона, в котором содержится двунитевая фрагментированная РНК, окруженная капсидом с двухслойной оболочкой (внутренний и наружный капсид). РНК связана с вирусоспецифической транскриптазой. 21.1.3.1. Реовирусы Структура и химический состав Вирионы сферической формы, в диаметре 60-80 нм (рис. 21.2). Капсид построен по икосаэдрическому типу симметрии. Двунитевая РНК состоит из 10 фрагментов, каждый из которых является отдельным геном. В составе внутреннего и наружного капсидов обнаружено до 8 отдельных белков. Один из белков наружного капсида ответствен за связывание со специфическим клеточным рецептором. Он в тоже время является ге- магглютинином, представляющим собой типоспецифический антиген. С помощью другого белка вирус проникает в клетку хозяина. Вирус- специфическая РНК-полимераза (транскриптаза) освобождается только после разрушения наружного капсида протеолитическими фермен тами. Культивирование и репродукция Реовирусы культивируют в различных первичных и перевиваемых культурах клеток. ЦПД появляется поздно и напоминает неспецифическую дегенерацию клеточного монослоя. % ' Рис. 21.2. Реовирусы. Слева — негативный контраст справа — ультратонкий срез. Видны капсомеры и сердцевина вириона. ЭМ. Ув. 200 000 После проникновения вириона в клетку путем эндоцитоза происходит его частичная депротеинизация в составе эндоплазматической вакуоли, заканчивающаяся потерей наружного капсида. При этом освобождается сердцевина вириона и начинает функционировать РНК-транскриптаза. На одной нити каждого фрагмента двунитевой РНК синтезируется плюс-нить, выполняющая функцию иРНК. Эти же плюс-нити являются матрицами для синтеза минус-нитей, что приводит к образованию вирионной двунитевой РНК, состоящей из плюс и минус-нитей. Вирусные белки синтезируются на клеточных рибосомах, которые объединяются одной иРНК в вирусспецифические полисомы. Цикл репродукции продолжается 14 и более часов. Водной клетке образуется до 1000 вирусных частиц. Выход вирусных частиц происходит путем взрыва, сопровождающегося лизисом клетки. Антигены. Различают три серотипа реовирусов. Они имеют общий комплементсвязывающий антиген и типоспецифические антигены (белок наружного капсида), которые выявляются в реакции нейтрализации. Все три типа обладают гемагглютинирующими свойствами. Патогенез и иммунитет Реовирусы первично репродуцируются в эпителиальных клетках слизистой оболочки рта, глотки и тонкой кишки, регионарных лимфатических узлах, откуда проникают в лимфу и кровь. Реовирусная инфекция характеризуется поражением респираторного или кишечного тракта. Особенно тяжело протекает инфекция у новорожденных и детей до месячного возраста, у которых возникают пневмония и энцефалит. Доказана способность реовирусов проходить через планцету и оказывать эмбриопатическое действие. После перенесения инфекции синтезируются вируснейтрализую- щие, комплементсвязывающие антитела и антигемагглютинины. Ви- руснейтрализующие антитела ко всем трем типам вируса обнаруживаются почтив случаев. Экология и эпидемиология Реовирусы способны в естественных условиях вызывать заболевание у различных животных грызунов, кошек, собак, крупного рогатого скота, свиней, овец, обезьян. Распространено бессимптомное носительство вируса. Выделенные от человека и животных реовирусы идентичны по антигенными биологическим свойствам, что закономерно ставит вопрос о роли животных в инфицировании человека. Основной путь передачи — воздушно-капельный. По-видимому, важное значение имеет и алиментарный способ заражения, особенно с инфицированными пищевыми продуктами. Реовирусы примерно в такой же степени, как и энтеровирусы, устойчивы к физическими химическим факторам. Вакцинопрофилактика не производится Лабораторная диагностика Для выделения вируса из организма больных используют культуру клеток и новорожденных мышей. Идентификацию выделенного штамма проводят в реакции нейтрализации и РТГА, серологическую диагностику — в РТГА. 21.1.3.2. Ротавирусы Название рода связано со своеобразием морфологии ви рионов (лат. rota — колесо). Возбудитель был обнаружен впервые в 1973 г. в эпителиальных клетках слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки детей сост рым гастроэнтеритом. Структура и химический состав Вирионы ротавирусов при электронно-микроскопическом исследовании имеют вид колес диаметром 70 нм с круговым ободком по периферии и отходящими от него внутрь спицами (рис. 21.3). Они, также как и реовирусы, окружены наружными внутренним капсидом, внутри которого содержится двунитевая фрагментированная РНК. Наряду с двухкапсидны- ми встречаются однокапсидные вирионы. В отличие от реовирусов наружный капсид разрушается не протеазами, а Р-галактозидазой. Образующиеся при этом субвирусные однокапсидные структуры теряют инфекционные свойства. В составе ротавирусных частиц обнаружено до 10 структурных полипептидов и РНК-транскриптаза. Культивирование и репродукция Ротавирусы человека в отличие от ротавирусов животных плохо адаптируются к культуре клеток. Однако их культивируют в роллерных культурах первичных и перевиваемых почечных клеток зеленых мартышек. ЦПД характеризуется уплотнением и округлением клеток, объединением их в конгломераты, соединенные между собой тяжами. Процесс репродукции рота вирусов протекает также, как и у других реовирусов. Антигены. По антигенному составу ротавирусы человека и животных очень близки между собой. Их перекрестные антигенные связи позволяют использовать ротавирус телят (Небраски) и обезьян в качестве антигена для серологической диагностики ротавирусной инфекции, а также для получения диагностических сывороток. По антигенным свойствам ротавирусы разделены на 3 подгруппы и 4 серотипа. Перекрестные антигенные связи между ротавирусами, реовирусами и орбивирусами не обнаружены. Гликопротеин наружного капсида ротавирусов определяет их гемагглютинирующие свойства и типовую антигенную специфичность. |