Микробиология Борисов Л.В. Микробиология Борисов Л. Литература для студентов медицинских вузов
 Скачать 27.52 Mb.
|
|
Вирус контагиозного моллюска является неклассифицированным поксвирусом, патогенным только для человека. Он репродуцируется в культурах клеток человека. Вызывает образование красных узелков на коже в области гениталий, которые превращаются в нагноившиеся папулы. Обильные высыпания наблюдаются у людей с иммунодефи- цитными состояниями, например при СПИДе. Передача вируса происходит при прямом и непрямом контактах. ВИРУСЫ ГЕПАТИТА К гепатоцитотропным вирусам, вызывающим гепатиту людей, относятся разнообразные ДНК- и РНК-содержащие вирусы, принадлежащие к разным семействам (табл. 21.2). Это ДНК-содержащий вирус гепатита В и группа РНК-содержащих вирусов вирус гепатита D (дельта-вирус), вирусы гепатита АС и Е 1 .3 .1 . Вирус гепатита A (Возбудитель гепатита A (HAV — Hepatitis A virus) относится к семейству пикорнавирусов, роду энтеровирусов. Вызывает наиболее распространенный вирусный гепатит, который имеет несколько исторических названий (инфекционный, эпидемический гепатит, болезнь Боткина и др. В нашей стране около 70% случаев вирусного Таблица Сравнительная характеристика вирусов гепатита человека Н азвание вируса Раз меры вирн- она, им С емейство Тип нуклеиновой кислоты Н али чие супер к апсида О нко ген- ностъ К ультнви- руемостъ в клеточных культурах П ути передачи Вирус гепатита А (H A V ) 2 7 32 Picamaviridae Однони- тевая плюс-РНК Перевивае мая культура гепатомы Фекально оральный вода, пища) Вирус гепатита В (HBV) 4 2 52 Hepadna- viridae Кольцевая, двуни тевая, неполная + + Парэнтераль- ный, половой Вирус гепатита С (HCV) 80 Flaviviridae Однони- тевая плюс-РНК + + Парэнтераль- ный, половой Вирус гепатита D (дельта вирус) 3 6 Неклассифи цированный Однони- тевая РНК Дефектный вирус Парэнтераль- ный Вирус гепатита Е (HEV) 3 2 3 4 Calciviridae Однони- тевая плюс-РНК Фекально оральный (вода) гепатита вызывается вирусом гепатита А. Вирус впервые был обнаружен С. Фейстоуном в 1979 г. в фекалиях больных методом иммунной электронной микроскопии. Структура и химический состав По морфологии и структуре вирус гепатита А близок ко всем энтеровирусам см. 21.1.1.1). В РНК вируса гепатита А обнаружены нуклеотидные последовательности, общие с другими энтеровирусами. Вирус гепатита А имеет один вирусспецифический антиген белковой природы. HAV отличается от энтеровирусов более высокой устойчивостью к действию физических и химических факторов. Он частично инактивируется при нагревании до Св течение 1 ч, при С разрушается в течение 5 мин, чувствителен к действию формалина и УФ-излучению. Культивирование и репродукция Вирус гепатита обладает пониженной способностью к репродукции в культурах клеток. Однако его удалось адаптировать к перевиваемым линиям клеток человека и обезьян. Репродукция вируса в культуре клеток не сопровождается ЦПД. HAV почти не выявляется в культуральной жидкости, поскольку ассоциирован с клетками, в цитоплазме которых он репродуцируется Патогенез и иммунитет HAV также, как и другие энтеро вирусы, с пищей попадает в желудочно-кишечный тракт, где репродуцируется в эпителиальных клетках слизистой оболочки тонкой кишки и регионарных лимфатических узлах. Затем возбудитель проникает в кровь, в которой он обнаруживается в конце инкубационного периода ив первые дни заболевания. В отличие от других энтеровирусов основной мишенью поражающего действия HAV являются клетки печени, в цитоплазме которых происходит его репродукция. Не исключена возможность поражения гепатоцитов клетками (натуральными киллерами, которые в активированном состоянии могут взаимодействовать сними, вызывая их разрушение. Активация клеток происходит ив результате их взаимодействия с интерфероном, индуцированным вирусом. Поражение гепатоцитов сопровождается развитием желтухи и повышением уровня трансаминаз в сыворотке крови. Далее возбудитель с желчью попадает в просвет двенадцатиперстной и тонкой кишки и выделяется с фекалиями, в которых отмечается высокая концентрация вируса в конце инкубационного периода ив первые дни заболевания (до развития желтухи. Гепатит А обычно заканчивается полным выздоровлением, летальные исходы редки. После перенесения клинически выраженной или бессимптомной инфекции формируется пожизненный гуморальный иммунитет, связанный с синтезом противовирусных антител. Иммуноглобулины класса IgM исчезают из сыворотки через 3-4 мес. после начала заболевания, в то время как IgG сохраняются в течение многих лет. Установлен также синтез секреторных иммуноглобулинов Эпидемиология Источником инфекции являются больные люди, в том числе и с распространенной бессимптомной формой инфекции. Вирус гепатита А широко циркулирует среди населения. На Европейском континенте сывороточные антитела против HAV содержатся у 80% взрослого населения, достигшего летнего возраста. В странах с низким социально-экономическим уровнем инфицирование происходит уже впервые годы жизни. Гепатитом А часто болеют дети. Больной наиболее опасен для окружающих в конце инкубационного периода ив первые дни разгара болезни (до появления желтухи) в связи с максимальным выделением вируса с фекалиями. Основной механизм передачи — фекально-оральный — через пищу, воду, предметы обихода, детские игрушки. Лабораторная диагностика проводится путем выявления вируса в фекалиях больного методом иммуноэлектронной микроскопии. Вирусный антиген в фекалиях может быть также обнаружен с помощью иммуноферментного и радиоиммунного анализа. Наиболее широко применяется серодиагностика гепатита выявление теми же методами в парных сыворотках крови антител класса IgM, которые достигают высокого титра в течение первых 3-6 недель. Профилактика. Вакцинопрофилактика гепатита А проводится в разных странах. Испытываются инактивированная и живая культураль ные вакцины, производство которых затруднено в связи со слабой репродукцией вируса в культурах клеток. Наиболее перспективной является генно-инженерная вакцина. Для пассивной иммунопрофилактики гепатита А используют иммуноглобулин, полученный из донорских сывороток 1 .3 .2 . Вирус гепатита В (Впервые частицы вируса гепатита В были обнаружены Д. Дейном в 1970 г. и впоследствии названы частицами Дейна. Структура и химический состав Вирионы. или частицы Дей на, имеют сферическую форму диаметром 42 нм. Сердцевина вирио на — нуклеокапсид в форме икосаэдра — состоит из 180 капсомеров. Снаружи он окружен липосодержащей внешней оболочкой (рис. 21.17). В состав вириона входят ДНК, белки, ферменты липиды и углеводы. Структура генома HBV необычна. Он состоит из кольцевой дву нитевой молекулы ДНК, которая в отличие от ДНК других вирусов имеет однонитевой участок (см. рис. 21.17). Его длина непостоянна и составляет 15-60% длинной цепи. Кольцевая молекула ДНК может принимать линейную форму. В изолированном виде она не обладает инфекционными свойствами. В составе вирусного генома обнаружено около 6 генов, которые контролируют образование антигенов, структурных белков и не менее двух ферментов (ДНК-полимераза, проте- инкиназа) (рис. Антигены В составе вируса гепатита В обнаружено 4 антигена HBs, НВс, Нве и НВх. HBs-антиген (ранее именовался австралийским антигеном) представляет собой гликопротеин с липидным компонентом, который содержится во внешней оболочке вириона. В его составе обнаружено два полипептидных фрагмента. Один из них (preS2) является поли- глобулиновым рецептором, ответственным за адсорбцию вируса на аналогичных рецепторах гепатоцитов. Он связывается с сывороточным альбумином, который при полимеризации превращается в поли альбумин. Таким образом, в составе внешней оболочки вируса гепатита В имеются те же полиальбумины, которые содержатся в сыворотке крови человека. Второй фрагмент (preS,) обладает выраженными иммуногенными свойствами. Этот пептид, полученный генноинже нерными методами, может быть использован для приготовления вакцины. антиген обнаруживается в крови ІХ і і а м Д блок оболочка НВ С р « А « » * 6 . Л О * • . оболочка НВ* Ч 1 Ш Ч І .........' Г*Ф Ю DK Рис. 21.17. Полная вирусная частица гепатита В в разрезе Б ольш ой белок обол о ч кв Кап сн д Н В св в гаг в в Г Л І І 1 М І О « л око б о л очка большой и бод с рода а к блок 'А Ев о * в « ж ибо л о ч кв залп с а л • Л ПС МА Рис. Структура генома и кодируемые им белки НВс-антиген является нуклеопротенном. Он содержится в сердцевине вирионов, находящихся в ядрах гепатоцитов и не поступает в кровь. НВе-антиген отщепляется от НВс-антигена при его прохождении через мембрану гепатоцитов, вследствие чего обнаруживается в крови. НВх-антиген наименее изучен. Возможно, он имеет отношение к раковой трансформации гепатоцитов. В организме больных гепатитом В синтезируются антитела к трем антигенам HBs, НВс, НВе. Репродукция. Вирус гепатита Вне репродуцируется в культурах клеток и куриных эмбрионов. Репликация и транскрипция вирусного генома происходит в ядрах гепатоцитов. При этом короткая цепь в кольцевой молекуле ДНК достраивается подлинной цепи с помощью вирусной ДНК-полимеразы, после чего начинается репликация обеих нитей. Необычным является возможность транскрибирования с вирусной ДНК молекулы РНК, выполняющей функцию матрицы для синтеза вирусной ДНК путем обратной транскрипции. Это происходит при участии вирусиндуцированной обратной транскриптазы. Данный процесс, понятный в случае РНК-содержащих вирусов, которые Р с помощью обратной транскрипции получают возможность встроить свой геном (ДНК-транскрипт) в хромосому клетки хозяина, остается загадочным для ДНК-содержащего вируса гепатита В. Одновременно с вирусного генома транслируется информация для синтеза на рибосомах гепатоцитов НВс- и НВs-антигенов, вирусоспе цифических ферментов и капсидных белков. Синтезированные нити ДНК собираются в нуклеокапсиды. При выходе из клетки они приобретают внешнюю оболочку си НВс-антигенами. Патогенез и иммунитет Поскольку входными воротами инфекции при гепатите В являются кровеносные сосуды, вирус сразу же попадает в кровь, с которой разносится по всему организму, фиксируясь прежде всего на гепатоцитах. Однако репродукция вируса не сопровождается цитолизом данных клеток. Это свидетельствует о том, что вирус гепатита Вне обладает прямым цитопатическим действием, а патологический процесс в печени возникает нес момента внедрения возбудителя в гепатоциты, а только после распознавания им- муноцитами его антигенов на наружной мембране этих клеток. Таким образом, поражение клеток печени при гепатите В является иммунообусловленным. Многообразие патогенетических форм данного заболевания (острые, подострые, хронические или персистирующие) определяется антигенами возбудителя и характером его взаимодействия с гепато- цитами, в результате которого развивается продуктивная или интегративная инфекция, с одной стороны, формой иммунного ответа и выраженностью иммунопатологических процессов — с другой. При острых формах гепатита В подавляется активность Т-хелпе- ров, при хронических — в процесс вовлекаются Т-супрессоры. При стабильном подавлении клонов Т-супрессоров формируются условия для развития аутоиммунных реакций направленных против собственных клеточных антигенов и прежде всего печеночного липопротеи- на. При ингибировании Т-хелперов нарушается распознавание вирусных антигенов, что в конечном итоге приводит к подавлению антите- лообразования. В тоже время HBV наряду с гепатоцитами может взаимодействовать с макрофагами и даже встраивать свою ДНК в их клеточный геном. При нормальном развитии иммунного ответа представленные на мембране макрофагов вирусные антигены индуцируют гуморальный ответ, который заканчивается синтезом HBs-, НВс-, НВе-антител. Это приводит к формированию напряженного гуморального иммунитета, вследствие чего повторные заболевания встречаются редко. При поражении HBV макрофагов также, как и Т-хелперов, возникают дефекты в системе распознавания антигенов, что сопровождается развитием иммунодефицитных состояний, являющихся основной причиной персистирующих форм гепатита В Интеграция вирусной ДНК в геном гепатоцитов происходит как при острой, таки хронической форме гепатита. При этом она носит случайный характер, так как в каждом случаев хромосому гепатоци тов встраивается неопределенный участок вирусной ДНК. При этом интегрированная вирусная ДНК может оказаться дефектной, что делает невозможным экспрессию ее генов, в том числе и тех, которые контролируют образование антигенов. При интеграции полноценной вирусной ДНК синтезируются вирусные антигены, из которых HBs поступают в кровь. Притом реакции иммунного цитолиза не происходит вследствие отсутствия мишени на мембране гепатоцитов для Т-киллеров и клеток. Упомянутые клетки атакуют лишь гепато- циты, несущие НВс-антиген: чем больше данного антигена представлено на их мембране, тем интенсивнее они разрушаются в результате иммунного цитолиза. При этом происходит массовый выход вирусов из разрушенных клеток и генерализация инфекции. После перенесения гепатита В может развиться гепатома. Эпидемиология. Источником инфекции являются больные люди и вирусоносители. Считается, что около 5% населения нашей планеты являются вирусоносителями, судя по выявлению у них в крови HBs- антигена. Заражение вирусом гепатита В часто происходит при медицинских манипуляциях в результате парентерального попадания хотя бы следов инфицированной крови в организм здорового человека. Это имеет место при переливании донорской крови, использовании недостаточно простерилизованных шприцев и других медицинских инструментов, взятии крови для анализов, массовых прививках и т.д. Доказана передача возбудителя при половом контакте. Кроме того, может произойти трансплацентарное заражение плода, а также новорожденных при прохождении через инфицированные родовые пути матери. Основные группы риска — медицинские работники, лица, получающие гемотрансфузии или препараты крови, наркоманы, больные гемофилией, гомосексуалисты и проститутки. Вирус гепатита В обладает необыкновенно высокой устойчивостью к высоким температурам выдерживает кипячение в течение 15-20 мина при С — до нескольких часов. Инфекционные и антигенные свойства вируса сохраняются после УФ-облучении плазмы крови и ее хранении при — С. Вирус чувствителен к формалину и детергентам. Лабораторная диагностика Серологическая диагностика основана на выявлении вирусных антигенов и антител к ним иммунофер- ментным или радиоиммунным методом. Основное диагностическое значение имеет определение в сыворотке больных антигена, которые появляется в инкубационном периоде и исчезает при благоприятном течении острого гепатита через 6-8 мес. после начала заболевания. Однако при переходе заболевания в хроническую форму и при вирусоносительстве данный антиген циркулирует в крови длительное время. Динамика синтеза антител против различных антигенов неодинакова в продромальный период появляются НВс-антитела, затем — НВе-антитела и лишь в последнюю очередь после исчезновения HBs- антигенов из крови — антитела. По наличию антител к тем или иным антигенам вируса можно судить о периоде заболевания. Для постановки диагноза острого гепатита В важное значение имеет обнаружение антител класса IgM против НВс-антигена. В настоящее время используют метод выявления ДНК вируса гепатита Виз исследуемого материала. Специфическая профилактика Существует вакцина первого поколения, полученная из плазмы крови хронических носителей HBs- антигенов. Она состоит из частиц антигенов и является достаточно эффективной, хотя ее производство затруднено из-за ограниченных резервов исходного материала плазмы крови. Широкое использование вакцин первого поколения позволило выработать тактику вакцинации. Вакцины нового поколения получены генноинженерным путем при встраивании гена, контролирующего образование антигенов, в генном клеток эукариот или вируса осповакцины. 2 1 .3 .3 . Вирус гепатита D (дельта-вирус) Дельта-вирус — возбудитель гепатита, впервые был обнаружен в 1977 г. в ядрах гепатоцитов у больных хроническим гепатитом В. Частица вируса имеет сферическую форму диаметром около 36 нм. Ее сердцевина содержит РНК и внутренний белок (антиген, представляющий собой единственный вирусоспецифический продукт генома дельта-вируса. Внешняя оболочка последнего содержит HBs- антиген. Геном дельта-вируса представлен однонитевой молекулой РНК. Необычайно малым геномом этого вируса можно объяснить его дефектность проявляющуюся в неспособности к самостоятельной репликации в гепатоцитах хозяина. Для репродукции данного вируса необходимо участие вируса-«помощника», роль которого играет вирус гепатита В (HBV). Облигатная связь обоих вирусов определяет возможность возникновения инфекции, которая проявляется либо при одновременном заражении этими вирусами, либо при суперинфици ровании дельта-вирусом больного гепатитом В. Механизм повреждающего действия дельта-вируса на гепатоци- ты, по-видимому, связан с прямым цитопатическим действием вот личие от HBV. При этом сочетанное действие обоих вирусов приводит к развитию более тяжелых форм патологического процесса Эпидемиология гепатита, вызываемого дельта-вирусом, практически не отличается от эпидемиологии гепатита В. Дельта-вирус, также как HBV, передается парентеральным путем. Серологическая диагностика дельта-инфекции основывается на выявлении антител к антигену вируса в сыворотке крови иммуно- ферментным или радиоиммунным методами. Специфическая профилактика не разработана. Вирусы гепатита ни Ани В. К этой группе относится ряд вирусов, являющихся возбудителями таких форм вирусных гепатитов, которые по своим клиническими эпидемиологическим особенностям отличаются от гепатитов А, В, а также гепатита, вызываемого дельта-вирусом. В тоже время эти вирусы не имеют специфических антигенов, свойственных HAV и Наиболее изученными из них являются вирусы гепатита Си Е 1 .3 .4 . Вирус гепатита С (HCV) HCV относится к семейству Flaviviridae. Содержит однони- тевую плюс-РНК. Размер вирусной частицы менее 80 нм, имеет су- перкапсид. Гепатит С чаще протекает в субклинической форме. Однако у 70% больных развивается хронический гепатит, осложняющийся во многих случаях циррозом печени или гепатомой. Источник инфекции — человек. Вирус передается также, как и вирус гепатита В парентеральным или половым путем. |