Микра (копия). Методы микробиологической диагностики
 Скачать 5.53 Mb.
|
|
1) МИКРОБИОЛОГИЯ (греч.mikros — малый, лат.bios — жизнь) — наука, предметом изучения которой являются микроскопические существа, названные микроорганизмами, или микробами, их биологические признаки, систематика, экология, взаимоотношения с другими организмами, населяющими нашу планету, - животными, растениями и человеком. Основной задачей ТЕХНИЧЕСКОЙ (промышленной) микробиологии является разработка биотехнологии синтеза микроорганизмами биологически активных веществ: белков, витаминов, ферметов, спиртов, органических кислот, антибиотиков и др. СЕЛЬСКО ХОЗЯЙСТВЕННАЯ микробиология занимается изучением микроорганизмов, которые участвуют в круговороте веществ, используются для изготовления удобрений, вызывают заболевания растений, и другими проблемами. ВЕТЕРИНАРНАЯ микробиоллгия изучает возбудителей заболеваний животных, разрабатывает методы их биологической диагностики, спецйифической профилактики и этиотропного лечения, направленного на уничтожение микробов-возбудителей в организме больного животного. Предметом изучения МЕДИЦИНСКОЙ микробиологии являются болезнетворные (патогенные) и условно-патогенные для человека микроорганизмы, а также разработка методов микробиологической диагностики, специфической профилактики и этиотропного лечения вызываемых ими инфекционных заболеваний. Методы микробиологической диагностики: • микроскопический ― изучение морфологических свойств микроорганизмов с использованием приборов для микроскопии; • микробиологический (бактериологический и вирусологический) ― выделение чистых культур бактерий и их идентификация; • биологический ― заражение лабораторных животных с воспроизведением инфекционного процесса на чувствительных моделях (биопроба); • иммунологический (варианты ― серологический, аллергический); • молекулярно-генетический ― ДНК-зонды, полимеразная цепная реакция (ПЦР) и др. 2,3) Этапы развития микробиологии • Эвристический ― Дж. Фракасторо • Описательный (микрографический) ― А. Левенгук • Физиологический ― Л. Пастер, Р. Кох • Иммунологический ― И.И. Мечников, П. Эрлих • Вирусологический ― Д.И. Ивановский • Современный (молекулярно-генетический) 2. Описательный (микрографический) период занял около двухсот лет. Антони ван Левенгук в 1675 г. впервые описал простейших, в 1683г. ― основные формы бактерий. 3. Физиологический период (с 1875 г.) ― эпоха Луи Пастера и Роберта Коха. Открытия Л. Пастера: • Промышленная микробиология (брожение). • Разработка принципов асептики и методов стерилизации. • Открытие возбудителей инфекционных заболеваний: сибирской язвы, родильной горячки, нагноений. • Профилактика инфекционных заболеваний ― разработка вакцин против куриной холеры, сибирской язвы, бешенства. Открытия Р. Коха: • Методологические основы изучения микроорганизмов ― триада Генле- Коха. • Усовершенствование микробиологических методов исследования. • Открытие возбудителей холеры (1882), туберкулеза (1883). 4.Иммунологический период. И.И.Мечников создал новую эпоху в микробиологии ― учение о невосприимчивости (иммунитете), разработав теорию фагоцитоза и обосновав клеточную теорию иммунитета. Открытия И.И. Мечникова: • Фагоцитарная теория иммунитета (лауреат Нобелевской премии, 1908). • Учение об антибиозе. • Основы геронтологии. Одновременно с развитием клеточной теорию иммунитета накапливались данные о выработке в организме антител против бактерий и их токсинов, позволившие П.Эрлиху разработать гуморальную теорию иммунитета. В последующей многолетней и плодотворной дискуссии между сторонниками фагоцитарной и гуморальной теорий были раскрыты многие механизмы иммунитета и родилась наука иммунология. 5. Вирусологический период. 12 февраля 1892 г. на заседании Российской академии наук Д.И. Ивановский сообщил, что возбудителем мозаичной болезни табака является фильтрующийся вирус. Эту дату можно считать днем рождения вирусологии, а Д.И. Ивановского ― ее основоположником. Впоследствии оказалось, что вирусы вызывают заболевания не только растений, но и человека, животных и даже бактерий. Вирусология ― наука, изучающая морфологию, физиологию, генетику, экологию и эволюцию вирусов, эпидемиологию, методы лабораторной диагностики, специфической профилактики и лечения вызываемых ими заболеваний. 6. Современный (молекулярно-биологический) период (со 2-й половины XX в.). Основные достижения: • расшифровка молекулярной структуры и молекулярно- биологической организации большинства бактерий и вирусов; • открытие новых форм жизни (инфекционных белков ― прионов и инфекционных РНК ― вироидов); • разработка методов культивирования животных и растительных клеток; • разработка принципиально новых способов диагностики инфекционных и неинфекционных заболеваний (ИФА, РИА, иммуноблотинг, гибридизация НК, ПЦР); • открытие новых возбудителей вирусных и бактериальных инфекций (ВИЧ, возбудители геморрагических лихорадок, легионелл и др.); • создание принципиально новых вакцин и других лечебных, профилактических и диагностических препаратов. 4) Систематика занимается всесторонним описанием видов организмов, выяснением степени родственных отношений между ними и объединением их в различные по уровню родства классификационные единицы (таксоны). Классификация — составная часть систематики. Занимается распределением организмов в соответствии с их общими признаками по различным таксонам. Таксономия — наука о принципах и методах распределения (классификации) организмов в иерархическом плане. Основной таксономической единицей в биологии является вид (species). Вид – это эволюционно сложившаяся совокупность микроорганизмов, имеющих единое происхождение, сходный генотип и максимально близкие фенотипические признаки и свойства. Высшие таксоны: • царство • отдел • класс • порядок • семейство • род • вид Низшие таксоны:• морфовар • хемовар • биовар • патовар • серовар • фаговар Принципы систематики • Филогенетический (для крупных таксонов). • Фенотипический. В нем используются: • царство • отдел • класс • порядок • семейство • род • вид • морфовар • хемовар • биовар • патовар • серовар • фаговар 9 ◊ тинкториальные свойства — способность окрашиваться различными красителями; ◊ культуральные свойства — особенности роста бактерий на жидких и плотных питательных средах; ◊ подвижность; ◊ спорообразование — форма и характер расположения споры в клетке; ◊ физиологическиесвойства—типпитания,типдыхания; ◊ биохимические свойства — способность ферментировать различные субстраты; ◊ антигенные свойства. • Генотипический. Для классификации бактерий, помимо изучения их фенотипических свойств, все более широко используют методы геносистематики. В ее основе лежит изучение нуклеотидного состава ДНК и наиболее важных характеристик генома, в частности, его размера (величина, объем, молекулярная масса) и других параметров. Наиболее точным методом установления генетического (геномного) родства между бактериями является определение степени гомологии ДНК. Чем больше идентичных генов, тем выше степень гомологии ДНК и ближе генетическое родство. • Смешанный (нумерический). В основе нумерической таксономии лежит принцип сопоставления организмов по возможно большему количеству учитываемых признаков при допущении, что все они для систематики равноценны. Однако принцип равнозначности является основным недостатком этого метода. В составе 4-х отделов главных категорий прокариот выделяют: • Отдел I. (Грамотрицательные эубактерии, имеющие клеточную стенку, или Gracilicutes). • Отдел II. (Грамположительные эубактерии, имеющие клеточную стенку, или Firmicutes). • Отдел III. (Эубактерии, лишенные клеточной стенки, или Tenericutes). • Отдел IV. (Архебактерии, или Mendosicutes). Штаммом называют культуру, выделенную из определенного источника, или из одного и того же источника в разное время. Штаммы обозначают либо протокольными номерами, либо по источнику выделения (человек, животное, внешняя среда), либо по местности (городу), где он был выделен. Штамм — более узкое понятие, чем вид. Штаммы одного и того же вида могут быть идентичными или различаться по некоторым признакам, не выходящим за пределы вида. Чистая культура представляет собой микробные особи одного и того же вида, полученные из одной изолированной колонии, выращенной на плотной питательной среде. Клоном называют культуру микроорганизма, выделенную из одной клетки (одноклеточная культура). 5) Морфология микроорганизмов включает: • форму; • размеры; • взаимное расположение особей в препарате; • структурные компоненты (защитные ― спора, капсула и дополнительные ― жгутики, включения); • тинкториальные свойства (способность воспринимать окраску простыми методами, по Граму, специальными методами и негативную). Бактерии имеют определенную форму и размеры, которые выражаются в микрометрах (мкм). Они варьируют в широких пределах — от 0,1−0,2 мкм до 10−15 мкм в длине и от 0,1 мкм до 2,0−2,5 мкм в диаметре. Большая часть бактерий имеет размеры 0,5−0,8 мкм х 2−3 мкм. Различают следующие основные формы бактерий: • шаровидные (сферические), или кокковидные (от греч. kokkos — зерно); • палочковидные (цилиндрические); • извитые (спиралевидные); • нитевидные. 1. Различают: 1. Поверхностные структуры: - капсула - клеточная стенка - ЦПМ - жгутики, ворсинки 2. Внутренние, входящие в протопласт. - нуклеоид, - рибосома, - мезосома -споры, -включения, -плазмиды и др. внехромосомные генетические структуры Постоянные структуры: – клеточная стенка, - ЦПМ, - нуклеоид, рибосома, мезосома 2. Непостоянные структуры: - ворсинки, жгутики, капсула, споры, включения, плазмиды и др. внехромосомные генетические структуры 6) Световая микроскопия обеспечивает увеличение до 2–3 тысяч раз, цветное и подвижное изображение живого объекта, возможность микрокиносъемки и длительного наблюдения одного и того же объекта, оценку его динамики и химизма. Изображение в световом микроскопе формируется вследствие того, что объект и различные его структуры избирательно поглощают свет с различной длиной волны (абсорбционный контраст) или вследствие изменения фазы световой волны при прохождении света через объект (фазовый контраст). Основными характеристиками любого микроскопа являются разрешающая способность и контраст. Разрешающая способность – это минимальное расстояние, на котором находятся две точки, демонстрируемые микроскопом раздельно. Разрешение человеческого глаза в режиме наилучшего видения равно 0,2 мм. Контраст изображения – это различие яркостей изображения и фона. Если это различие составляет менее 3–4 %, то его невозможно уловить ни глазом, ни фотопластинкой; тогда изображение останется невидимым, даже если микроскоп разрешает его детали. На контраст влияют как свойства объекта, изменяющие световой поток по сравнению с фоном, так и способности оптики уловить возникающие различия в свойствах луча. Возможности светового микроскопа ограничены волновой природой света. Физические свойства света – цвет (длина волны), яркость (амплитуда волны), фаза, плотность и направление распространения волны изменяются в зависимости от свойств объекта. Эти различия и используются в современных микроскопах для создания контраста. Увеличение микроскопа определяется как произведение увеличения объектива на увеличение окуляра. У типичных исследовательских микроскопов увеличение окуляра равно 10, а увеличение объективов – 10, 40 и 100. Соответственно, увеличение такого микроскопа составляет от 100 до 1 000. Некоторые из микроскопов имеют увеличение до 2 000. Еще более высокое увеличение не имеет смысла, так как при этом разрешающая способность не улучшается. Напротив, качество изображения ухудшается. Иммерсионная микроскопия – это методика микроскопического исследования различных объектов, основанная на введении между объективом и предметным стеклом иммерсионных жидкостей. Данный иммерсионный метод микроскопии применяется для того, чтобы свет проходил через рассматриваемый предмет, иммерсионную жидкость, при этом луч не преломлялся. Благодаря этому происходит получение изображения более высокого качества и разрешения. 7) Фазово-контрастная микроскопияпозволяет более четко наблюдать живые прозрачные объекты, которые имеют коэффициенты преломления, близкие к коэффициентам преломления среды. Действие фазово-контрастного микроскопа основано на интерференции света в плоскости изображения, обусловленной сдвигом по фазе (при использовании фазового кольца в апертурной диафрагме). При фазово-контрастной микроскопии часто применяют биологические микроскопы с обратным расположением оптики – инвертированные микроскопы. У таких микроскопов объективы расположены снизу, а конденсор – сверху. С помощью фазово-контрастной микроскопии изучают форму, размеры, взаимное расположение клеток, их подвижность, размножение, прорастание спор микроорганизмов и т. д. Благодаря применению этого способа микроскопии контраст живых неокрашенных микроорганизмов резко увеличивается и они выглядят темными на светлом фоне (позитивный фазовый контраст) или светлыми на темном фоне (негативный фазовый контраст). Темнопольная микроскопия основана на освещении объекта косыми лучами света. При таком освещении лучи не попадают в объектив, поэтому поле зрения выглядит темным. Такое освещение препарата достигается использованием специального темнопольного конденсора. Темнопольная микроскопия является очень простым, но эффективным методом и хорошо подходит для получения изображения живых и неокрашенных биологических образцов. Учитывая простоту установки, качество получаемых изображений весьма хорошее. При микроскопировании в темном поле можно увидеть объекты, величина которых измеряется сотыми долями микрометра, что находится за пределами разрешающей способности обычного светлопольного микроскопа. Однако наблюдение за объектами в темном поле позволяет исследовать только контуры клеток и не дает возможности рассмотреть их внутреннюю структуру. 8) Электронная микроскопия позволяет обнаружить объекты, которые не разрешаются при использовании световых или ультрафиолетовых лучей. Теоретическиразрешение просвечивающего электронного микроскопа составляет 0,002 нм; реальное разрешение современных электронных микроскопов приближается к 0,1 нм. На практике разрешение для биологических объектов достигает 2 нм. Люминесцентная (флуоресцентная) микроскопия основана на способности ряда веществ биологического происхождения или некоторых красителей светиться при их освещении невидимым ультрафиолетовым или синим светом. При использовании ультрафиолетового света разрешающая способность микроскопа может достигать 0,1 мкм. Клетки микроорганизмов обрабатывают специальными красителями – флуорохромами (акридиновый оранжевый, примулин, родамин и др.) в виде сильно разбавленных водных растворов: 1:500–1:100 000. Такие растворы слабо токсичны, что дает возможность изучать неповрежденную клетку. В зависимости от химического состава, клеточные структуры в разной степени адсорбируют красители и люминесцируют различным образом. Кроме того, флуорохромы неодинаково адсорбируются живыми и мертвыми клетками. Это позволяет использовать данный вид микроскопии для цитологических и иммунологических исследований, определения жизнеспособности клеток и т. д. 9) Этапы приготовления мазка для иммерсионной микроскопии Приготовление окрашенного препарата состоит из следующих эта- пов: приготовление мазка, высушивание, фиксация, окраска. 1. Обезжиренное предметное стекло и бактериологическую петлю прожигают в пламени горелки. Пробирку с изучаемой культурой держат между указательным и большим пальцами левой руки. Петлю берут правой рукой, мизинцем правой руки прижимают пробку пробирки к ладони. Если мазок готовится с жидкой питательной среды, то каплю культуры наносят петлей на предметное стекло. Если мазок делают из культуры с агара, то петлю с культурой вносят на предметное стекло и добавляют каплю физио-логического раствора, в котором эмульгируют внесенный материал. Петлю обжигают в пламени горелки. Мазок должен быть тонким, равномерно рас- тертым, округлой формы, размером 1,5-2см. 2. Высушивание мазка производится на воздухе или для ускорения предметное стекло с мазком, обращённым кверху, можно подержать в струе теплого воздуха высоко над пламенем горелки, но не вносить в огонь. 3. После высушивания производят фиксацию (прикрепление к стеклу) препарата. Для этого стекло с мазком, обращённым кверху, медленно про- водят через пламя 3-4 раза. При этом микробы погибают, приклеиваются к стеклу и не смываются при дальнейшей обработке. 4. После охлаждения стекла производится окраска препарата про- стым или сложным методами: - простыми методами, когда окрашивается вся клетка и используется только один краситель (водный фуксин Пфейффера или метиленовая синь- ка Леффлера); - сложными методами, когда определяются клеточные структуры (методы Грама, Циля-Нильсена и др.). После окраски мазок промывают водой, высушивают фильтроваль- ной бумагой и микроскопируют под иммерсией. 10) Жгутики являются органами движения бактерий, состоят из белка флагеллина. По количеству и характеру расположения жгутиков различа- ют бактерии: монотрихи, лофотрихи, амфитрихи и перитрихи. Жгутики обладают антигенными свойствами (Н-антиген) и дают возможность бак- териям перемещаться в жидкой среде. О наличии жгутиков можно судить по характеру движения бактерий в «раздавленной» и «висящей» каплях при опущенном конденсоре и ча- стично прикрытой диафрагме микроскопа. Метод «раздавленной капли». Культуру в изотоническом растворе хлорида натрия наносят на предметное стекло и сверху накладывают по- кровное. Капля материала должна быть такой величины, чтобы она запол- няла все пространство между покровным и предметным стеклом и не вы- ступала за пределы покровного. Препарат рассматривают с иммерсионной системой и слегка опущенным конденсором. Метод «висячей капли». Необходимо иметь предметное стекло с лупочкой. Каплю культуры наносят на покровное стекло. Сверху наклады- вают предметное стекло с лупочкой посредине, края которого предвари- тельно обмазаны вазелином. Затем предметное стекло слегка прижимают к покровному, и препарат переворачивают покровным стеклом кверху. По- лучается герметично закрытая камера, в которой капля долго не высыхает. 11) Клеточная стенка грамотрицательных бактерий значительно тоньше (14—18 нм) и состоит из двух слоев. Первый – представлен одним или двумя рядами пептидотликана.В составе клеточной стенки содержится много липопротеинов, фосфолипидов, липополисахарид, больше белка и, как правило, отсутствуют тейхоевые кислоты. Второй слой – бислой фосфолипидов, пронизанный транспортными белками, в нем крепиться липополисахарид (ЛПС). Способность грамположительных бактерий при окраске по Грамуудерживать генциановый фиолетовый в комплексе с йодом (сине-фиолетовая окраска бактерий) связана со свойством многослойного пептидогликана взаимодействовать с красителем. Кроме этого, последующая обработка мазка бактерий спиртом вызывает суживание пор в пептидогликане и тем самым задерживает краситель в клеточной стенке.Грамотрицательные бактерии после воздействия спиртом утрачивают краситель, что обусловлено меньшим количеством пептидогликана (5—10 % массы клеточной стенки); они обесцвечиваются спиртом и при обработке фуксином приобретают красный цвет. При нарушении синтеза клеточной стенки бактерий под влиянием лизоцима, пенициллина, защитных факторов организма и других соединений образуются клетки с измененной формой: протопласты— бактерии, полностью лишенные клеточной стенки; сферопласты— бактерии с частично сохранившейся клеточной стенкой. После удаления ингибитора клеточной стенки такие измененные бактерии могут реверсировать, т. е. приобретать полноценную клеточную стенку и восстанавливать исходную форму 12) Метод Грама — метод окраски микроорганизмов для исследования, позволяющий дифференцировать бактерии по биохимическим свойствам их клеточной стенки. На фиксированный мазок наливают один из осно́вных красителей на 2—3 минуты. Во избежание осадков окрашивают через фильтровальную бумагу. Сливают краску, аккуратно удаляют фильтровальную бумагу. Мазок заливают раствором Люголя или йодистым раствором по Граму (водный раствор йодида калия и кристаллического йода в соотношении 2:1) на 1—2 минуты до почернения препарата. Раствор сливают, мазок прополаскивают 96° этиловым спиртом или ацетоном, наливая и сливая его, пока мазок не обесцветится и стекающая жидкость не станет чистой (приблизительно 20—40—60 секунд). Тщательно промывают стекла в проточной или дистиллированной воде 1—2 мин. Для выявления грамотрицательной группы бактерий препараты дополнительно окрашивают фуксином или сафранином (2—5 мин). Промывают в проточной воде и высушивают фильтровальной бумагой. 13) Окраска по Циль-Нильсену. 1. Фиксированный на пламени мазок покрывают полоской фильтровальной бумаги, наливают на нее карболовый раствор фуксина и подогревают; при появлении паров прекращают нагревание и оставляют краску на препарате еще на несколько минут (2—3 минуты). Дав препарату остыть, удаляют пинцетом бумажку и обмывают мазок водой. 2. Обесцвечивают препарат 5—10% водным раствором серной кислоты в тече ние 3—5 секунд (до желтоватого оттенка мазка). Вместо серной кислоты можно применить 5% раствор азотной или 3% раствор соляной кислоты. Мазок тщательно промывают водой. Споласкивают 96°спиртом. 5. Снова промывают водой. 6. Докрашивают в течение 3—5 минут леффлеровской метиленовой синькой или водным раствором 1: 1000 малахитовой зе лени или метиловой зелени. 7. Краску смывают водой и препарат высу шивают. Микроскопическая картина: туберкулезные палочки - рубиново красные, остальные, за исключением возбудителя паратуберкулеза, кислото - и спиртоустойчивых сапрофитов, - синие. Для обесцвечивания мазков при окраске по Циль-Нильсену вместо растворов кислот и спирта особо рекомендуется применение солянокислого алкоголя (соляной кислоты 3 мл+96° спирта 97 мл) до слабо заметного розоватого оттенка препарата. После этого мазок ополаскивают водой и докрашивают метиленовой синькой и т. д. по основной прописи. Указанным методом достигается одновременное испытание бацилл на кислото - и спиртоустойчивость. Среди видов кислотоустойчивых сапрофитов встречаются спиртоподатливые разновидности, палочки же туберкулеза и паратуберкулеза всегда кислото - и спиртоустойчивы. 14) Окраска по методу Ожешко для выявления спор На высушенный нефиксированный препарат (мазок готовится толстым и на краю стекла) наливают несколько капель 0,5%-ного раствора соляной кислоты и подогревают 1 – 2 мин. над пламенем горелки до закипания, после чего остатки кислоты сливают. Остывший препарат промывают водой, подсушивают на воздухе и фиксируют на пламени горелки. Окрашивают карболовым фуксином Циля (фуксин наливают на фильтровальную бумажку) с подогреванием до появления паров. Обесцвечивают 5%-ным раствором серной кислоты в течение нескольких секунд. Промывают водой. Докрашивают синькой Леффлера или 1%-ным водным раствором малахитовой зелени в течение 3 – 5 мин. Споры, окрашенные фуксином, имеют рубиново-красный цвет, вегетативные тела микробных клеток при докрашивании синькой Леффлера – синий цвет, при применении малахитовой зелени – зеленый цвет. 15)  16)   17)   18)  1  9) Отсутствие ригидной клеточной стен ки, полиморфизм клеток, пластичность, осмотическую чувс твительность, резистентность к различным агентам, подавляющим синтез клеточной стенки, в том числе к пенициллину и его производным. Грам «-», луч ше окрашиваются по Романовскому—Гимзе; различают подвижные и неподвижные виды. Клеточная мембрана находится в жидкокристаллическом состоянии; включает белки, погруженные в два липидных слоя, основной компонент которых — холестерин. 20) 20. Простейшие— эукариотические одноклеточные микроорганиз мы, составляющие подцарствоProtozoaцарства животных (Animalia). Простейшие включают 7 типов, из которых четыре типа (Sarcomastigophora,Apicomplexa,Ciliophora,Microspora) имеют представите лей, вызывающих заболевания у человека.Размерыпростейших колеблются в среднем от 5 до 30 мкм. Снаружи простейшие окруженымембраной (пелликулой) — аналогом цитоплазматической мембраны клеток животных. Не которые простейшие имеют опорные фибриллы. Цитоплазма и ядросоответствуют по строению эукариотическим клеткам: ци топлазма состоит из эндоплазматического ретикулума, митохон дрий, лизосом, многочисленных рибосом и др.; ядро имеет яд рышко и ядерную оболочку. Передвигаются простейшиепосред ством жгутиков, ресничек и путем образования псевдоподий. Простейшие могут питатьсяв результате фагоцитоза или обра зования особых структур. Многие простейшие при неблагопри ятных условиях образуют цисты — покоящиеся стадии, устой чивые к изменению температуры, влажности и др. Простейшие окрашиваютсяпо Романовскому—Гимзе (ядро — красного, ци топлазма — синего цвета). Тип Sarcomastigophora.Подтип Mastigophora(жгутико носцы) включает следующих патогенных представителей: трипаносому — возбудителя африканского трипаносомоза (сонная болезнь); лейшмании — возбудителей кожной и висцеральной форм лейшманиозов; трихомонады, передающиеся половым пу тем и паразитирующие в толстой кишке человека; лямблию — возбудителя лямблиоза. Эти простейшие характеризуются нали чием жгутиков: один — у лейшмании, четыре сво бодных жгутика и короткая ундулирующая мембрана — у три-хомонад. К подтипу Sarcodina(саркодовые) относится дизен терийная амеба — возбудитель амебной дизентерии человека. Морфологически сходна с ней непатогенная кишечная амеба. Эти простейшие передвигаются путем образования псевдоподий. Питательные вещества захватываются и погружаются в цитоплазму клеток. Половой путь размножения у амеб отсутствует. При неблагоприятных условиях они образуют цисту. Тип Apicomplexa. В классеSporozoa(споровики) па тогенными представителями являются возбудители токсоплазмоза, кокцидиоза, саркоцистоза и малярии. Жизненный цикл возбудителей малярии характеризуется чередо ванием полового размножения (в организме комаровAnopheles) и бесполого (в клетках тканей и эритроцитах человека они раз множаются путем множественного деления). Токсоплазмы имеют форму полулуний. Токсоплазмозом человек заражается от живот ных. Токсоплазмы могут передаваться через плаценту и поражать центральную нервную систему и глаза плода. Тип Ciliophora. Патогенный представитель — возбудитель ба-лантидиаза — поражает толстый кишечник человека. Балантидии имеют многочисленные реснички и поэтому подвижны. Тип Microspora включает микроспоридии — маленькие (0,5—10 мкм) облигатные внутрик леточные паразиты, широко распространенные среди животных и вызывающие у ослабленных людей диарею и гнойно-воспалительные забо левания. 2  1) Грибы – эукариоты. Они имеют хорошо оформленное ядро, митохондрии и вакуоли. Грибная клетка содержит одно или несколько ядер. Клеточная стенка грибов состоит на 80-90% из полисахаридов (45% приходится на хитин) и 10-20% приходится на белки и липиды. Соотношение химических ингредиентов клеточной стенки различных грибов определяет их вирулентность. Строение клеточной стенки определяет выбор антибиотических средств.  |