Руководство по управлению Axio Observer Z1 new. Методические указания для студентов и аспирантов химических, биологических и физических специальностей высших учебных заведений
Скачать 1.09 Mb.
|
Info 3.5.5.4 Страница Settings-Info содержит только закладку Firmware (Фирменное обеспечение). В этой закладке пользователь может считать версию фирменного программного обеспечения. Рис. 1-56 Страница Microscope -> Settings -> Info -> Firmware 3.5.6 Display (Дисплей) При нажатии на кнопку Display в навигационной панели на стартовой странице Home пользователь переключается на страницу Display. На странице Display пользователь может настраивать яркость TFT-дисплея с помощью кнопок . Нажимайте на кнопку Display на навигационной панели дольше одной секунды, чтобы затемнить TFT-дисплей. При повторном касании в любом месте на TFT-дисплее он слова включается. При нажатии на кнопку Display off TFT-дисплей выключается. Повторное нажатие включает TFT-дисплей. Рис. 1-57 Страница Home -> Display После выключения TFT-дисплей переключается со страницы Display обратно на страницу, с которой была вызвана страница Display. Она отображается после повторного включения. 3.6 Методы освещения и контрастирования 3.6.1 Настройка светлого поля в проходящем свете по КЁЛЕРУ 3.6.1.1 Общий принцип действия Микроскопия светлого поля в проходящем свете – наиболее распространенный из всех оптических микроскопических методов, т.е. с ее помощью можно быстро и просто наблюдать высококонтрастные или окрашенные препараты (напр. мазки крови). Для максимально достоверного отображения объекта большое значение имеют не только так называемые прямые пучки лучей, но и отраженные, т.е. изогнутые и рассеянные частями препарата. Чем больше при этом доля отраженных пучков (апертура), тем более достоверно микроскопическое отображение образца по АББЕ. Для максимального использования оптической мощности микроскопа, особенно объектива, необходимо настроить конденсор, полевую диафрагму и апертурную диафрагму по правилам принципа освещения по КЁЛЕРУ. Эти фундаментальные правила регулировки микроскопа будут детально описаны в разделе 3.6.1.3. 3.6.1.2 Оборудование прибора для работы в светлом поле в проходящем свете Оборудование каждого микроскопа Axio Observer позволяет осуществлять метод светлого поля в проходящем свете. 3.6.1.3 Настройка светлого поля в проходящем свете по КЁЛЕРУ
14 13 14 Колесо с накаткой для регулировки интенсивности освещения 15 Поворотная кнопка или ползунок для деления лучей vis / doc 16 Поворотная кнопка/ ползунок для линзы Бертрана и ручного затвора 17 Бинокулярная часть бинокулярного тубуса 18 Окуляр 19 Установочное кольцо окуляра 20 ПоляризаторD с переключателем 2-х илит3-х фильтров 21 Колесо с накаткой для полевой диафрагмы 22 Установочное колесо для бокового порта 23 Кнопка Standby (Z1)
13 Кнопка TL для включения/ выключения галогенного осветителя Рис. 1-58 Axio Observer
Без окулярной сетки: на белую точку, с окулярной сеткой: на красную точку.
• Центрируйте полевую диафрагму с в проходящем свете по КЁЛЕРУ помощью центровочных винтов и откройте настолько, чтобы край диафрагмы пропал из поля зрения. • Для настройки апертурной диафрагмы удалите один окуляр из окулярной трубки и настройте апертурную диафрагму примерно на 2/3 диаметра выходного зрачка объектива. Оптимальная регулировка контрастности зависит от соответствующего образца.
При каждой смене объектива изменяются размер поля зрения и апертура объектива, так что для получения оптимальных результатов необходимо заново проводить регулировки полевой и апертурной диафрагмы. 3.6.2 Настройка фазового контраста в проходящем свете 3.6.2.1 Общий принцип действия Метод фазового контраста идеально подходит для исследований тонких неокрашенных препаратов, например клеток культур. Человеческий глаз вообще не может воспринимать разность фаз (разность показателя преломления и толщины) в различных компонентах клетки. С помощью оптических модуляторов «Диафрагмы кольцевой фазовой пластинки и кольцевой фазовой пластинки» и процессов интерференции при возникновении промежуточного изображения метод фазового контраста преобразует незначительные разности фаз в разность интенсивности и цвета, видимые для глаза. Оптический кольцевой канал «Диафрагма кольцевой фазовой пластинки и кольцевая фазовая пластинка» гасит прямой свет с высокой интенсивностью и обусловливает в нем постоянный сдвиг фаз. Преломленный в различных компонентах клетки отраженный свет, наоборот, обходит этот оптический канал; фазы влияют на него через разность показателя преломления и толщины в препарате. Разделенные лучи, на которые оказано различное воздействие, интерферируют в промежуточном изображении и усиливаются или ослабляются – в зависимости от фазы. В результате такой интерференции возникают изображения с разницей интенсивности и цвета, которые может воспринимать человеческий глаз. Благодаря применению объективов с двумя кольцевыми фазовыми пластинками при простой смене диафрагм в турели конденсора можно быстро переключаться между положительным и отрицательным контрастом. Положительный фазовый контраст удобен при очень тонких клеточных структурах (например, Filopodien), отрицательный – в толстых областях клетки, т.к. даже мелкие структуры распознаются значительно лучше. 3.6.2.2 Оборудование прибора
Рис. 1-59 Центрирование диафрагмы кольцевой фазовой пластинки на конденсоре Рис. 1-60 Центрирование диафрагмы кольцевой фазовой пластинки (свелая на конденсоре) относительно кольцевой фазовой пластинки (темная в объективе) 4.7.2.3 Настройка фазового контраста в проходящем свете
При применении фототубуса можно также включить линзу Бертрана для наблюдения выходного зрачка объектива. При использовании линзы Бертрана установочным колесом револьверного устройства Optovar следует настроить коэффициент 1х.
Как правило, центровка не обязательна, так как кольцевые диафрагмы центрируются на заводе. Для повышения контрастности изображения можно вставить в устройство для замены фильтров широполосный интерференционный фильтр, зеленый 32 х 4. Полный фазовый контраст появляется только тогда, когда в ходе лучей освещения происходит точное наложение темной кольцевой фазовой пластинки (в объективе) на светлую кольцевую диафрагму (в конденсоре) (3-60/B). Необходимо проводить юстировку кольцевых фазовых пластинок для всех применяемых фазово-контрастных объективов. При исследовании жидких образцов в маленьких емкостях ход лучей должен быть направлен в центр сосуда, т.к. жидкости действуют у края сосуда как линзы и, тем самым, ухудшается микроскопическое изображение. 3.6.3 Настройка дифференциального интерференционного контраста (DIC) в проходящем свете 3.6.3.1 Общий принцип действия Метод DIC в проходящем свете позволяет контрастно и пластично представлять прозрачные части препарата. Линейно поляризованный поляризатором свет разделяется в призме с двойным преломлением на два луча. Они проходят на небольшом расстоянии через два соседних участка препарата; из-за анизотропности образца выходящие лучи отличаются разностью хода. Оба луча объединяются затем во второй призме с двойным преломлением и после прохождения через анализатор имеют одинаковое направление колебаний. Таким образом, оба луча интерферируют друг с другом в промежуточном изображении, при этом отличные разницы хода преобразуются в разные значения по шкале серых цветов (интенсивность). 3.6.3.2 Оборудование прибора
3.6.3.3 Настройка DIC в проходящем свете
(1) Настройка DIC в проходящем свете с задвижкой анализатора, жесткой
|