Ещё про холеру. Еще про холеру. Методические указания методы контроля. Биологические и микробиологические факторы
 Скачать 1.24 Mb.
|
|
Пробы до отправки в лабораторию сохраняют при комнатной температуре (24,0±1,0) °С в биксах, ящике, шкафу и т.д. в специально выделенной комнате, закрывающейся на замок. Продолжительность сохранения проб в указанных условиях - до 24 ч. В случаях, когда температура в помещении превышает 25 °С, материал следует брать в 1%-ю пептонную воду с теллуритом калия. В лаборатории в пробы во флаконах доливают соответствующую среду накопления до 50 мл, а из пробирок все 5-10 мл транспортной среды с материалом переносят пипеткой в 50 мл среды накопления. На период выходного дня лаборатории в порядке исключения допускается следующий вариант: забор материала в 50 мл 1%-й пептонной воды с теллуритом калия (транспортная среда); допускаемое время сохранения проб до начала исследования при температуре (20,0±1,0) °С - 60 ч, (27,0±3,0) °С - 48 ч. В лаборатории 5-10 мл поверхностного слоя среды с материалом переносят в 50 мл 1%-й пептонной воды без теллурита калия (1 среда накопления) и делают высев на чашку щелочного агара с дальнейшим исследованием по изложенной схеме. б) Пептонную воду повышенной щелочности в качестве накопительной среды рекомендуется использовать только на первом этапе исследования с удлинением срока инкубации ее до 18-24 ч. Основной раствор пептона и 1%-ю пептонную воду с рН 9,5±0,5 можно готовить впрок по общепринятой методике с подщелачиванием до необходимого уровня и последующей стерилизацией при температуре 120 °С - 20 мин. Для подщелачивания пептонной воды используют 10-20% NaOH. 5.3. Идентификация культур холерных вибрионов Культуры, выделенные на различных этапах, идентифицируют с целью определения их принадлежности к виду Vibrio cholerae соответствующей серогруппы (О1, О139 или других). К виду V. cholerae относят грам отрицательные, аспорогенные, полиморфные палочки, слегка изогнутые или прямые, активно подвижные, с одним полярно расположенным жгутиком, образующие индофенолоксидазу, ферментирующие глюкозу в аэробных и анаэробных условиях до кислоты (без газа), расщепляющие маннит, маннозу, сахарозу, но не активные в отношении к арабинозе, инозиту, салицину и некоторым другим субстратам. Холерные вибрионы декарбоксилируют лизин и орнитин, но не обладают дигидролазой аргинина, образуют индол, обладают нитратредуктазой, не продуцируют сероводород. Таксономическое положение холерных вибрионов и признаки, дифференцирующие их от родственных микроорганизмов, приведены на рис.2 и в табл.2, 3, 4.  Рис.2. Классификация вибpиoнoв  Примечания: таксономия вибрионов представлена по Bergeys manyal of Deferminative Bacteriology, 1994;  типовые штаммы О2-О39 соответствуют Sakazaki (1970); О40-083, а также О12; О23 и О26 не изучены в сравнении с международной коллекцией типовых штаммов. Таблица 2 Основные дифференциальные признаки рода Vibrio и некоторых других микроорганизмов
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
