Методические указания по диагностике, лечению и профилактике маститов. Методические указания по диагностике, лечению и профилактике мас. Методические указания
 Скачать 257.5 Kb.
|
|
ИССЛЕДОВАНИЕ МОЛОКА (СЕКРЕТА) НА НАЛИЧИЕ ПАТОГЕННЫХ СТРЕПТОКОККОВ При учете роста колоний на чашках Петри с кровяным или сывороточным агарами (второй день исследования) отсевают ро-синчатые, мелкие однотипные колонии, характерные для роста стрептококков, на элективную питательную среду для стрептококков (среда В. М. Карташовой), которая готовится следующим образом: к 500 мл МПБ с рН 7,2—7,3 добавляют 2,5 г лактозы, 1 мл спиртового или водного раствора 1 : 100 бромкрезолпурпура (1 г порошка растворяют в 50 мл спирта и добавляют 50 мл дистиллированной воды). Затем МПБ ставят в водяную баню, доводят до кипения и кипятят 5—7 минут. После остывания до -50—55° в колбу добавляют 50 мл стерильной сыворотки без консерванта и 0,5 мл раствора неомицина, в котором содержится 55 000 ЕД антибиотика (500 000 ЕД неомицина растворяют в 10 мл •физиологического раствора). В стерильных условиях среду разливают по 5 мл в пробирки. Цвет ее сине-фиолетовый. Посевы инкубируют в течение 24 часов при 37°. Изменение сине-фиолетового цвета среды в лимонный или желто-зеленый указывает на рост стрептококков. Из пробирок с измененным цветом среды готовят мазки и окрашивают по Граму. При наличии стрептококков проводится их дальнейшая дифференциация с помощью КАМП-теста. Постановка КАМП-теста. Суточную культуру бета-гемолитического стафилококка высевают на агар с 5%| крови крупного рогатого скота или барана. Посев делают петлей сплошной линией по диаметру чашки. Перпендикулярно к линии посева стафилококка, не доходя 5—6 мм, высевают ровным штрихом испытуемую культуру стрептококков. На одной чашке можно проверить 8— 10 культур. Чашки помещают в термостат на 24 часа при 37", КАМП-тест считается положительным, если четко выражен гемолиз испытуемого стрептококка в виде усеченного треугольника или полукруга в зоне бета-гемолитического стафилококка. Положительный КАМП-тест дают только агалактийные стрептококки. На этих же чашках кровяного агара учитывают и тип гемолиза стрептококков. Светлая зона вокруг штриха культуры стрептококков указывает на бета-гемолиз, зеленая зона — на альфа-гемолиз (зеленящие стрептококки). Для дифференциации непатогенных стрептококков (группа D—фекальные стрептококки и группа N—молочнокислые стрептококки) делают высевы на бульон с 6,5% хлористого натра, на бульон с 40% желчи крупного рогатого скота и на стерильное обезжиренное молоко с добавлением метиленовой сини 1 : 1000 (на 5 мл молока—0,5 мл 1%-ного раствора метиленовой сини). Посевы инкубируют в термостате при 37° и на другой день проводят учет по следующей схеме:
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||