Бактерийные и вирусные препараты для профилактики, лечения и диагно. Бактерийные и вирусные препараты для профилактики, лечения и. Министерство здравоохранения СССР московский ордена ленина и ордена трудового
 Скачать 387.5 Kb.
|
|
щая моновалентная сыворотка. С профилактической целью сыворотки вводят людям, упот- реблявшим продукты, вызвавшие отравление. Антибактериальные и антивирусные сыворотки Антибактериальные сыворотки получают гипериммуннза- цией лошадей соответствующими убитыми бактериями или антигенами и содержат антитела с агглютинирующими, ли- тическимн и опсонизирующими свойствами. Они не нашли широкого применения в силу их малой эф- фективности. Антибактериальные сыворотки относятся к нетитруемым препаратам, так как общепринятой единицы измерения их лечебной силы re существует. Поэтому антибактериальные лечебные сыворотки дозируются в объемных единицах, непо- средственно у постели больного, исходя из степени тяжести заболевания. Для очистки и концентрации антибактериальных сыворо- ток и некоторых антивирусных используют метод, основанный на разделении белковых фракций нативных сывороток и вы- делении активных иммуноглобулинов этиловым спиртом при низкой температуре (метод водно-спиртового осаждения на холоду). 25 Среди антибактериальных сывороток (иммуноглобулинов) получили применение следующие препараты: 1. Противосибиреязвенный глобулин — содержит |3 и - гло- булины, извлеченные из сывороток лошадей, гипериммунизи- рованных сибиреязвенными бациллами. Применяются для профилактики людям, имевшим контакт с инфицированным материалом, и для лечения сразу после установления диаг- ноза. Глобулин вводят внутримышечно. 2. Гамма-глобулин' противолептоспирозный получают из сыворотки крови волов, гипериммунизированных патогенны- ми для человека лептоспирами (L. icterohaemorrhaqia, L. qrip- potyphosa, L. pomona, L. canicola, L. tarassovi). Активность препарата определяется в реакции агглютина- ции, агглютинационный титр должен быть не ниже 1 : 8000. Гамма-глобулины применяются для лечения лептоспиро- зов. Препарат дозируется в объемных единицах в зависимо- сти от тяжести заболевания и вводится внутримышечно. Пе- ред введением гамма-глобулина необходимо проверить чув- ствительность больного к гетерогенному воловьему белку. Антивирусные сыворотки также получают из сыворотки крови животных, иммунизированных вакцинными штаммами вирусов или соответствующими вирусами. Выпускают анти- вирусные сыворотки, очищенные методом спиртового фракцио- нирования при низкой температуре. Имеют применение следующие препараты: 1. Гамма-глобулин против клещевого энцефалита содер- жит гамма-глобулиновую и частично бета-глобулиновую (5— 30%) фракции, извлеченные из сыворотки лошадей, гиперим- мунизированных вирусом клещевого энцефалита. Гамма-глобулин применяют для лечения и профилактики клещевого энцефалита, омской геморрагической лихорадки и двухволнового менингоэнцефалита, вводят внутримышечно. 2. Антирабический гамма-глобулин (иммуноглобулин ге- терогенный) извлекается из сыворотки крови лошадей, гипе- риммунизированных вирусом fixe. Активность гамма-глобули- на должна быть не ниже 800 МЕ/мл. Антирабический гамма-глобулин рекомендуется вводить внутримышечно за 24 часа перед началом вакцинации анти- рабической вакциной всем пострадавшим людям, получившим 1 Более правильное название препаратов — «иммуноглобулины», но для многих выпускаемых сывороток еще сохранилось старое название «гам- ма-глобулины>. С 6 укусы бешеных животных, оцениваемые как укусы средней тяжести н тяжелые. Иммуноглобулины (гомологичные) Иммуноглобулины, получаемые из крови человека, готовят двух видов — противокоревой (или нормальный) и иммуно- глобулины направленного действия. Преимущество этих им- муноглобулинов перед гетерогенными в том, что они практи- чески нереактогенны и циркулируют в организме болеее про- должительное время, в течение 30—40 дней. Извлекают иммуноглобулины из сыворотки крови человека путем фракционирования (по методу Кона) этиловым спир- том при температуре ниже нуля. Противокоревой (или нормальный) иммуноглобулин полу- чают из донорской, плацентарной или абортной крови. Со- держит антитела против вируса кори, а также против вирусов гриппа, гепатита, полиомиелита, возбудителей коклюша и не- которых других вирусных и бактериальных инфекций. Препарат применяют для профилактики кори, инфекцион- ного гепатита, коклюша, полиомиелита, менингококковой ин- фекции и др. Для профилактики кори иммуноглобулины вводят всем де- тям старше 3 месяцев, бывших в контакте с больным и не привитым коревой вакциной. Иммуноглобулины вводят с про- филактической целью всем детям до 6 лет, контактировавшим с больным коклюшем и не привитым против этой инфекции. Профилактн? а гепатита А иммуноглобулином проводгтся в предэпидемичсский период и в эпидемических очагах. Пре- парат в некоторых случаях оказывает защитное действие или чаще смягчает клиническое течение болезни. Очень важно пра- вильное соблюдение дозировки иммуноглобулина (0,02 мл на 1 кг веса). Продолжительность профилактического действия препарата 3—6 месяцев. Иммуноглобулины направленного действия готовят из сы- воротки крови людей-добровольцев, подвергшихся специаль- ной иммунизации против определенной инфекции. Такие пре- параты содержат повышенные концентрации специфических антител и используются для лечебных целей. В настоящее время получают иммуноглобулины направленного действия против гриппа, бешенства, оспы, клещевого энцефалита, столбняка и стафилококковых инфекций. 1. Противогриппозный покорений гамма-глобулин (имму 27 HUIлииулин; 1 (ЛОВЯТ ИЗ СЫВОрОТКИ КрОВИ ДОНОрОВ, ИММунИЗИ- рованных живой гриппозной вакциной типов А и В. Применяется препарат для лечения, профилактики гриппа и вводится внутримышечно в определенных дозах в зависи- мости от возраста. 2. Антирабический гамма-глобулин (иммуноглобулин) из- влекают из сыворотки людей, иммунизированных вакцинным штаммом вируса бешенства. Этот препарат вводится людям, укушенным бешенными животными, и которым нельзя вводить гетерогенный антирабический гамма-глобулин из-за высокой чувствительности к лошадиному белку. Применяется препа- рат также при лечении осложнений, вызванных антирабиче- скими прививками. 3. Противооспенный донорский иммуноглобулин содержит гамма-глобулиновую фракцию крови доноров, специально ре- вакцинированных против оспы. Кровь для приготовления им- муноглобулина берут, начиная с 14—21-го дня после ревак- цинации при максимальном содержании в ней вируснейтрали- зуюших антител (не ниже 1 :4000). Препарат применяется при лечении осложнений после при- вивок против оспы и для лечения заболевания. 4. Иммуноглобулин человеческий противостолбнячный по- лучают из сыворотки крови людей-доноров, ревакцинирован- ных столбнячным анатоксином. Противостолбнячный иммуноглобулин применяется для экстренной профилактики столбняка у непривитых детей и взрослых и, в случае необходимости, при лечении столбняка. Препарат можно вводить отдельно или в сочетании с анаток- сином. Показанием к экстренной профилактике столбняка яв- ляются травмы, ожоги и обморожения II и III степени и в ряде других случаев, связанных с нарушением целости слизи- стых, кожи. Экстренная активно-пассивная профилактика столбняка при травмах введена в СССР с 1960 года. 5. Иммуноглобулин человеческий противостафилококко- вый представляет собой гамма-глобулиновые фракции сыво- ротки крови людей-доноров (иммунизированных стафилокок- ковым анатоксином) и из плацентарной крови. В 1 мл препарата должно содержаться 50 ME донорского иммуноглобулина и 20 ME плацентарного иммуноглобулина. Противостафилококковый иммуноглобулин применяется для лечения детей и взрослых различными стафилококковыми инфекциями, особенно при септическом течении заболеваний. 28 С этой же целью используется и антистафилококковая плазма, представляющая собой жидкую часть крови людей- добровольцев, иммунизированных стафилококковым анаток- сином. 2. Диагностические сыворотки В диагностике инфекционных болезней широко применя- ются иммунные реакции при идентификации возбудителя: при установлении родовой, видовой и типовой принадлежности микроба (вируса). Для постановки таких реакций необходимы специфические диагностические сыворотки, которые в зависи- мости от содержания соответствующих антител называются агглютинирующие, преципитирующие, гемо- литические, противовирусные. С диагностической целью используются люминесцирующие сыворотки, со- держащие антитела, меченные флюоресцирующими красите- лями. Иммунные диагностические сыворотки получают из крови ЖИВОТРЫХ (в основном кроликов), иммунизированных соот- ветствующими микробами или антигенами. Агглютинирующие сыворотки Агглютинирующую сыворотку получают иммунизацией кроликов (внутривенно, подкожно или внутрибрюшинно) взвесью убитых бактерий, начиная с дозы 200 млн., затем 500 млн., 1 млрд., 2 млрд., микробных тел в 1 мл, с интервалами 5 дней. Через 7—8 дней после последней иммунизации берут кровь и определяют титр антител. Титром агглютини- рующей сыворотки называется то макси- мальное разведение сыворотки, при котором происходит агглютинация с соответствую- щим микроорганизмом. Агглютинирующие сыворотки применяются при идентифи- кации микроба в развернутой реакции агглютинации. Если изучаемый микроорганизм агглютинируется сывороткой до титра или до половины значения титра, его можно считать принадлежащим к тому виду, название которого указано на этикетке ампулы. Неадсорбированкые агглютинирующие сыворотки облада- ют высоким титром — до 1 : 12 800 — 1 : 25 600. Недостатком таких сывороток является то, что они способ- ны давать групповые реакции агглютинации, так как они со- 29 держат антитела к бактериям, имеющим общие антигены в пределах семейства, группы и рода. Поэтому в настоящее время большинство агглютинирую- щих сывороток выпускаются адсорбированными, моно- рецепторными и адсорбированными поливалентными, содер- жащими только типовые или видовые антитела и соответст- вующими или определенному типу или виду микроорганизма. Эти сыворотки не подлежат разведению. Для получения таких сывороток нрименяют метод К а- стеллянн — метод адсорбции, который состоит в том, что при насыщении агглютинирующей сыворотки родственны- ми гетерогенными бактериями происходит адсорбция группо- вых антител, а специфические антитела остаются в сыворот- ке. В зависимости от полноты истощения групповых агглюти- нинов можно получить монорецепторные сыворотки — сыво- ротки, имеющие антитела только к одному рецептору-антигену или адсорбированные, поливалентные, дающие реакции агглю- тинации с двумя — тремя родственными бактериями, имею- щими общий антиген, в отношении которого проводилась ад- сорбция. Адсорбированные сыворотки применяют при идентифика- ции выделенных возбудителей в реакции агглютинации на стекле (пластинчатый метод). Агглютинирующие сыворотки наиболее широко применя- ются при диагностике заболеваний, вызываемых бактериями семейства Enterobacteriaceae. Так, при идентификации эше- рихий используются поливалентные и типовые ОК-сыворотки; при дифференциации сальмонелл — набор сывороток: агглю- тинирующая адсорбированная поливалентная сальмонеллез- ная О-сыворотка (групп А, В, С, Д, Е) — для определения принадлежности к роду Salmonella, при положительном ре- зультате— определяют отдельно с каждой сывороткой (входя- щей в смесь) серологическую группу и в заключение опреде- ляется серологический тип выделенного возбудителя с моно- рецепторными Н-сыворотками сальмонелл, входящих в данную группу. Преципчтирующие сыворотки Преципитирующие сыворотки получают иммунизацией кроликов убитыми микроорганизмами, антигенами бактерий, экстрактами микробов и т. п. Иммунизация проводится дли- тельно в течение нескольких месяцев по определенным схе- мам. По одной из схем иммунизацию начинают со 100 млн. 30 бактериальных клеток в 1 мл, увеличивая дозу в 2 раза, закан- чивая введением 10—20 млрд. в 1 мл, проводя 10—12 инъек- ций с интервалом в 4—6 дней. Титром преципитирующей сыворотки на- зывается то максимальное разведение ан- тигена, которое преципитируется цельной сывороткой. Сыворотки выпускают с титром не меньше 1 : 100000. Это связано с тем, что антиген, определяемый в ре- акции преципитации, имеет микроскопическую величину и в единице объема его может содержаться больше, чем в таком же объеме антител. Специфические преципитирующие сыворотки применяются при диагностике инфекционных заболеваний (менингит, сибир- ская язва, чума, туляремия, полиомиелит и др.); в судебно- медицинской практике для определения видовой принадлеж- ности белка крови; в санитарной практике для обнаружения соответствующих белковых веществ в продуктах (при подо- зрении на фальсификацию). Реакция преципитации может быть поставлена в виде коль- цепреципитации или реакции преципитации в геле, последняя дает возможность изучать тонкую антигенную структуру бак- терий и вирусов. Гемолитическая сыворотка Гемолитическую сыворотку получают путем 3—4-кратной иммунизации кроликов взвесью эритроцитов барана с интер- валом в 2—3 дня. Титром сыворотки называется то ее мак- симальное разведение, которое в объеме 0,5 мл в присутствии комплемента вызывает гемолиз 0,5 мл 3%-ной взвеси эритро- цитов барана в течение часа при температуре 37°С. Титр дол- жен быть не ниже 1 :1200—1 : 1500. Гемолитическая сыворотка применяется в реакции связы- вания комплемента (РСК) в индикаторной системе (гемоли- тическая сыворотка-(-эритроциты барана). Противовирусные сыворотки Иммунные противовирусные сыворотки, применяющиеся при идентификации вирусов, получают от различных живот- ных в зависимости от вида вируса. Так, например, сыворотку против вируса вакцины, оспы и аденовирусов получают иммунизацией соответствующими ви- русами кроликов; против вируса гриппа — белых хорьков, 31 крыс, кур, мышей; против вируса кори — морских свинок и т. п. В некоторых случаях предпочтительнее сыворотка рекон- валесцентов, например, при диагностике полиомиелита, хотя против каждого отдельного типа вируса сыворотки можно по- лучить иммунизацией обезьян. Необходимость строгого выбора животного для получения иммунных сывороток связана с учетом содержания в лих не- специфических ингибиторов, которые подавляют активность вирусов и неспецифических агглютининов. Поэтому перед проведением реакций обязательно освобож- дают иммунные сыворотки от термолабильных (прогревани- ем при 56°С — 30 мин.) и термостабильных (ферментировани- ем, обработкой углекислотой и др. методами в зависимости от вида вируса) ингибиторов и проверяют на наличие неспеци- фических агглютининов. Иммунные диагностические противовирусные сыворотки применяются для определения вида или типа вируса в реак- циях торможения гемагглютинации (РТГА), связывания ком- племента (РСК), реакции нейтрализации на лабораторных животных, в культурах клеток и развивающихся куриных эм- брионах. Люминесцирующие сыворотки Люминесцирующие сыворотки представляют' собой иммун- ные сыворотки, содержащие специфические антитела, мечен- ные флюоресцирующими красителями. При приготовлении лю- минесцирующих сывороток проводят присоединение к глобу- линовой фракции иммунной сыворотки различных флюорохро- мов путем прочной химической связи. Микроорганизмы, обработанные люминесцирующими сы- воротками, приобретают способность светиться при просмот- ре препаратов с помощью люминесцентных микроскопов (МЛ-I, МЛ-2, МЛ-3, МЛД-1). Для маркирования антител люминесцирующих сывороток чаще всего применяется изо- |