ГФ11-1. Общие методы анализа редакционная коллегия государственной фармакопеи ссср
 Скачать 1.83 Mb.
|
|
0 _ 0 M = x - x + -------, (III.3.3) b 0 0 А = 1 / SUM nw + 1 / SUM n w ; (III.3.4) 0 B = 1 / (SQ + SQ ); (III.3.5) _ _0 _0 _ у - у M = (x - x) + ---------- +/- H,B b(1 - g) (III.3.6) ------------------------- t / _ -0 2 р / (у - у ) +/- --------- / А(1 - g) + B -------- , b(1 - g) / 2 \/ b 2 2 где по-прежнему g = Bt / b , а величины SQ и SP вычисляются по формулам III.2.2 и III.2.3. III.4. КАЧЕСТВЕННОЕ СРАВНЕНИЕ ПРЕПАРАТОВ Когда какой - либо новый препарат изучается (например, по зависимости доза - эффект) при наличии другого препарата с аналогичным действием, может возникнуть необходимость сравнения эффективности этих препаратов при сопоставимых дозах (обычно при ED50 для каждого). Может потребоваться и доказательство эффективности препарата по сравнению с плацебо. + - Если n1 и n1 - числа тест - объектов, давших соответственно положительный и отрицательный ответы при действии первого + - препарата, a n2 и n2 - то же для второго препарата, то значимость различия между этими двумя препаратами проверяется при помощи критерия "хи - квадрат": ┌ + - - + 1 ┐2 ││n1n2 - n1n2│ - --- (n1 + n2)│ (n1 + n2) 2 └ 2 ┘ "хи" = -------------------------------------------- , (III.3.7) + + - - n1n2(n1 + n2)(n1 + n2) + - + - где n1 = n1 + n1, n2 = n2 + n2 (т. е. общее число тест - объектов, подвергавшихся действию соответственно первого и второго - + препаратов), а │n1n2 - n1n2│ обозначает абсолютное значение (т.е. без учета знака) соответствующего числа. Полученное по формуле 2 III.3.7 численное значение "хи" сравнивается с критическими 2 значениями "хи" (Р,f), полученными для числа степеней свободы 2 2 f = 1 и равными: "хи" (95%, 1) = 3,84; "хи" (99%, 1) = 6,63; 2 "хи" (99,9%, 1) = 10.83. Пример III.3. Для проверки эффективности вакцины против туберкулеза телятам сначала делали либо предохранительную прививку, либо прививку контрольных средств, а затем их заражали микобактериями туберкулеза. Результаты получились следующие: с вакцинацией заболели 6 из 20, без вакцинации - 16 из 19 животных. + - + - Следовательно, n1 = 6; n1 = 14; n2 = 16; n2 = 3; n1 = 20; n2 = 19, так что 2 2 (│6 х 3 - 14 х 16│ - 39 / 2) х 39 "хи" = --------------------------------- = 9,54. 20 х 19 х 22 х 17 2 Это значение превышает "хи" (95%, 1) = 6,63, поэтому с вероятностью более 99% вакцина эффективна. ПРИЛОЖЕНИЯ Таблица I Числовые значения контрольного критерия Q(Р, n) ┌────────┬───────────────────────────────────────────────────────┐ │ │ Q │ │ n ├─────────────────┬─────────────────┬───────────────────┤ │ │ P = 90% │ P = 95% │ P = 99% │ ├────────┼─────────────────┼─────────────────┼───────────────────┤ │ 3 │ 0,89 │ 0,94 │ 0,99 │ │ 4 │ 0,68 │ 0,77 │ 0,89 │ │ 5 │ 0,56 │ 0,64 │ 0,76 │ │ 6 │ 0,48 │ 0,56 │ 0,70 │ │ 7 │ 0,43 │ 0,51 │ 0,64 │ │ 8 │ 0,40 │ 0,48 │ 0,58 │ │ 9 │ 0,38 │ 0,46 │ 0,55 │ └────────┴─────────────────┴─────────────────┴───────────────────┘ Таблица II 2 Числовые значения критерия Стьюдента и критерия "хи" ┌─────────────┬─────────┬────────────────────────────────────────┐ │ │ │ Критерий Стьюдента t(Р, f) │ │ │ 2 ├────────────────────────────────────────┤ │ f │"хи"(Р,f)│ Р │ │ │(Р = 95%)├────────┬────────┬─────────┬─────┬──────┤ │ │ │ 50 % │ 90% │ 95% │ 98% │ 99% │ ├─────────────┼─────────┼────────┼────────┼─────────┼─────┼──────┤ │ 0 │ 1 │ 2 │ 3 │ 4 │ 5 │ 6 │ ├─────────────┼─────────┼────────┼────────┼─────────┼─────┼──────┤ │1 │ 3,84 │1,000 │ 6,31 │ 12,70 │31,82│ 63,70│ │2 │ 5,99 │0,816 │ 2,92 │ 4,30 │6,97 │ 9,92 │ │3 │ 7,82 │0,765 │ 2,35 │ 3,18 │4,54 │ 5,84 │ │4 │ 9,49 │0,741 │ 2,13 │ 2,78 │3,75 │ 4,60 │ │5 │ 11,07 │0,727 │ 2,01 │ 2,57 │3,37 │ 4,03 │ │6 │ 12,59 │0,718 │ 1,94 │ 2,45 │3,14 │ 3,71 │ │7 │ 14,07 │0,711 │ 1,89 │ 2,36 │3,00 │ 3,50 │ │8 │ 15,51 │0,711 │ 1,89 │ 2,36 │3,00 │ 3,50 │ │9 │ 16,92 │0,703 │ 1,83 │ 2,26 │2,82 │ 3,25 │ │10 │ 18,31 │0,700 │ 1,81 │ 2,23 │2,76 │ 3,17 │ │15 │ 25,00 │0,691 │ 1,75 │ 2,13 │2,60 │ 2,95 │ │20 │ 31,4 │0,687 │ 1,73 │ 2,09 │2,53 │ 2,85 │ │30 │ - │0,683 │ 1,70 │ 2,04 │2,46 │ 2,75 │ │40 │ - │0,681 │ 1,68 │ 2,02 │2,42 │ 2,70 │ │60 │ - │0,679 │ 1,67 │ 2,00 │2,39 │ 2,66 │ │120 │ - │0,677 │ 1,66 │ 1,98 │2,36 │ 2,62 │ │бесконечность│ - │0,674 │ 1,64 │ 1,96 │2,33 │ 2,58 │ ├─────────────┼─────────┼────────┼────────┼─────────┼─────┼──────┤ │ │ 2 │75% │ 95% │ 97,5% │99% │ 99,5%│ │ f │"хи"(Р,f)├────────┴────────┴─────────┴─────┴──────┤ │ │(Р = 95%)│ _ │ │ │ │ P │ └─────────────┴─────────┴────────────────────────────────────────┘ Таблица III Числовые значения критерия Фишера F(P,f1,f2) при Р = 99% ┌───┬─────────────────────────────────────────────────────────────────┐ │ │ f1 │ │f2 ├─────┬─────┬─────┬─────┬─────┬─────┬─────┬─────┬─────┬─────┬─────┤ │ │ 1 │ 2 │ 3 │ 4 │ 5 │ 6 │ 8 │ 10 │ 12 │ 16 │ 20 │ ├───┼─────┼─────┼─────┼─────┼─────┼─────┼─────┼─────┼─────┼─────┼─────┤ │1 │4052 │4999 │5403 │5625 │5764 │5859 │5981 │6056 │6106 │6169 │6208 │ │2 │98,49│99,00│99,17│99,25│99,30│99,33│99,36│99,40│99,42│99,44│99,45│ │3 │34,12│30,81│29,46│28,71│28,24│27,91│27,49│27,23│27,05│26,83│26,65│ │4 │21,20│18,00│16,69│15,98│15,52│15,21│14,80│14,54│14,37│14,15│14,02│ │5 │16,26│13,27│12,06│11,39│10,97│10,77│10,27│10,05│9,89 │ 9,68│ 9,55│ │6 │13,74│10,92│ 9,78│ 9,15│ 8,75│ 8,47│ 8,10│7,87 │7,72 │ 7,52│ 7,39│ │7 │12,25│ 9,55│ 8,45│ 7,85│ 7,46│ 7,19│ 6,84│6,62 │6,47 │ 6,27│ 6,15│ │8 │11,26│ 8,65│ 7,59│ 7,01│ 6,63│ 6,37│ 6,03│5,82 │5,67 │ 5,48│ 5,36│ │9 │10,56│ 8,02│ 6,99│ 6,42│ 6,06│ 5,80│ 5,47│5,26 │5,11 │ 4,92│ 4,80│ │10 │10,04│ 7,56│ 6,55│ 5,99│ 5,64│ 5,39│ 5,06│4,85 │4,71 │ 4,52│ 4,41│ │11 │9,65 │7,20 │6,22 │5,67 │5,32 │5,07 │4,74 │4,54 │4,40 │4,21 │4,10 │ │12 │9,33 │6,93 │5,95 │5,41 │5,06 │4,82 │4,50 │4,30 │4,16 │3,98 │3,86 │ │13 │9,07 │7,70 │5,74 │5,20 │4,86 │4,62 │4,30 │4,10 │3,96 │3,78 │3,67 │ │14 │8,86 │6,51 │5,56 │5,03 │4,60 │4,46 │4,14 │3,94 │3,80 │3,62 │3,51 │ │15 │8,68 │6,36 │5,42 │4,89 │4,56 │4,32 │4,00 │3,80 │3,67 │3,48 │3,36 │ │16 │8,53 │6,23 │5,29 │4,77 │4,44 │4,20 │3,89 │3,69 │3,55 │3,37 │3,25 │ │17 │8,40 │6,11 │5,18 │4,67 │4,34 │4,10 │3,79 │3,59 │3,45 │3,27 │3,16 │ │18 │8,28 │6,01 │5,09 │4,58 │4,25 │4,01 │3,71 │3,51 │3,37 │3,19 │3,07 │ │19 │8,18 │5,93 │5,01 │4,50 │4,17 │3,94 │3,63 │3,43 │3,30 │3,12 │3,00 │ │20 │8,10 │5,85 │4,94 │4,43 │4,10 │3,87 │3,56 │3,37 │3,23 │3,05 │2,94 │ │25 │7,77 │5,57 │4,68 │4,18 │3,86 │3,63 │3,32 │3,13 │2,99 │2,81 │2,70 │ │30 │7,56 │5,39 │4,51 │4,02 │3,70 │3,47 │3,17 │2,93 │2,84 │2,66 │2,55 │ │40 │7,31 │5,18 │4,31 │3,83 │3,51 │3,29 │2,99 │2,80 │2,66 │2,49 │2,37 │ │60 │7,08 │4,98 │4,13 │3,65 │3,34 │3,12 │2,82 │2,63 │2,50 │2,32 │2,20 │ └───┴─────┴─────┴─────┴─────┴─────┴─────┴─────┴─────┴─────┴─────┴─────┘ Таблица IV Вспомогательные величины для расчета эквивалентных доз и проверки линейности и параллельности дозовых зависимостей (при равноотстоящих логарифмах доз) ┌────┬─────┬───┬───┬───┬───┬───┬───┬───┬──┬──┬───────────────────┐ │Тип │Функ-│_0 │_0 │_0 │_0 │_ │_ │_ │_ │ │ │ │исп.│ ции │у1 │у2 │у3 │у4 │у1 │у2 │у3 │у4│z │ Дисперсия │ ├────┼─────┼───┼───┼───┼───┼───┼───┼───┼──┼──┼───────────────────┤ │1; 2│ Е │ │ │ │ │- 1│ 1│ │ │1 │А = 3V/2 │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ 2 │ │ │ F │- 2│ │ │ │ 1│ 1│ │ │2 │B = 2V/I │ ├────┼─────┼───┼───┼───┼───┼───┼───┼───┼──┼──┼───────────────────┤ │2; 2│ Е │- 1│ 1│ │ │- 1│ 1│ │ │2 │А = V │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ 2 │ │ │ F │- 1│- 1│ │ │ 1│ 1│ │ │2 │B = V/I │ │ │ G │ 1│- 1│ │ │- 1│ 1│ │ │1 │V = 4V │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ G │ ├────┼─────┼───┼───┼───┼───┼───┼───┼───┼──┼──┼───────────────────┤ │1; 3│ Е │ │ │ │ │- 1│ 0│ 1 │ │2 │А = 4 V/3 │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ 2 │ │ │ F │- 3│ │ │ │ 1│ 1│ 1│ │3 │B = V/2I │ │ │ H │ │ │ │ │ 1│- 2│ 1│ │1 │V = 6V │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ H │ ├────┼─────┼───┼───┼───┼───┼───┼───┼───┼──┼──┼───────────────────┤ │2; 3│ Е │- 1│ 1│ │ │- 2│ 0 │ 2│ │5 │А = 5V/6 │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ 2 │ │ │ F │- 3│- 3│ │ │ 2│ 2│ 2│ │6 │B = 2V/5I │ │ │ G │ 2│- 2│ │ │- 1│ 0│ 1│ │2 │V = 5V/2 │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ G │ │ │ H │ │ │ │ │ 1│- 2│ 1│ │1 │V = 6V │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ H │ ├────┼─────┼───┼───┼───┼───┼───┼───┼───┼──┼──┼───────────────────┤ │3; 3│ E │- 1│ 0│ 1│ │- 1│ 0│ 1│ │4 │A = 2V/3 │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ 2 │ │ │ F │- 1│- 1│- 1│ │ 1│ 1│ 1│ │3 │B = V/4I │ │ │ G │ 1│ 0│- 1│ │- 1│ 0│ 1│ │2 │V = V │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ G │ │ │ H │ 1│- 2│ 1│ │ 1│- 2│ 1│ │1 │V = 6V │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ H │ ├────┼─────┼───┼───┼───┼───┼───┼───┼───┼──┼──┼───────────────────┤ │3; 4│ E │- 2│ 0│ 2│ │- 3│- 1│ 1│ 3│14│A = 7V/12 │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ 2 │ │ │ F │- 4│- 4│- 4│ │ 3│ 3│ 3│ 3│12│B = V/7I │ │ │ G │ 5│ 0│- 5│ │- 3│- 1│ 1│ 3│10│V = 7V/10 │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ G │ │ │ H │ 2│- 4│ 2│ │ 3│- 3│- 3│ 3│5 │V = 6V/5 │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ H │ ├────┼─────┼───┼───┼───┼───┼───┼───┼───┼──┼──┼───────────────────┤ │4; 4│ E │- 3│- 1│ 1 │ 3│- 3│- 1│ 1│ 3│20│A = V/2 │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ 2 │ │ │ F │- 1│- 1│- 1│- 1│ 1│ 1│ 1│ 1│4 │B = V/10I │ │ │ G │ 3│ 1│- 1│- 3│- 3│- 1│ 1│ 3│10│V = 2V/5 │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ G │ │ │ H │ 1│- 1│- 1│ 1│ 1│- 1│- 1│ 1│1 │V = 4V │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ H │ └────┴─────┴───┴───┴───┴───┴───┴───┴───┴──┴──┴───────────────────┘ Таблица V Пробиты (верхние числа) и весовые коэффициенты (нижние числа), соответствующие процентам положительных ответов ┌───┬─────┬─────┬─────┬─────┬─────┬─────┬─────┬─────┬─────┬──────┐ │ p │0 │1 │2 │3 │4 │5 │6 │7 │8 │9 │ ├───┼─────┼─────┼─────┼─────┼─────┼─────┼─────┼─────┼─────┼──────┤ │0 │ - │2,67 │2,95 │3,12 │3,36 │3,44 │3,44 │3,52 │3,60 │3,66 │ │ │ - │ 072 │ 120 │ 159 │ 193 │ 224 │ 252 │ 277 │ 300 │ 322 │ │10 │3,72 │3,77 │3,82 │3,87 │3,92 │3,96 │4,01 │4,05 │4,08 │4,12 │ │ │ 342 │ 361 │ 379 │ 396 │ 411 │ 426 │ 440 │ 454 │ 466 │ 478 │ │20 │4,16 │4,19 │4,23 │4,26 │4,29 │4,33 │4,36 │4,39 │4,42 │4,45 │ │ │ 490 │ 501 │ 511 │ 521 │ 530 │ 539 │ 547 │ 555 │ 562 │ 569 │ │30 │4,48 │4,50 │4,53 │4,56 │4,59 │4,62 │4,64 │4,67 │4,70 │4,72 │ │ │ 576 │ 582 │ 588 │ 593 │ 598 │ 603 │ 607 │ 612 │ 615 │ 619 │ │40 │4,75 │4,77 │4,80 │4,82 │4,85 │4,87 │4,90 │4,92 │4,95 │4,98 │ │ │ 622 │ 625 │ 627 │ 629 │ 631 │ 633 │ 634 │ 635 │ 636 │ 636 │ │50 │5,00 │5,02 │5,05 │5,08 │5,10 │5,13 │5,15 │5,18 │5,20 │5,23 │ │ │ 637 │ 636 │ 636 │ 635 │ 634 │ 633 │ 631 │ 629 │ 627 │ 625 │ │60 │5,25 │5,28 │5,30 │5,33 │5,36 │5,38 │5,41 │5,44 │5,47 │5,50 │ │ │ 622 │ 619 │ 615 │ 612 │ 607 │ 603 │ 598 │ 593 │ 588 │ 582 │ │70 │5,52 │5,55 │5,58 │5,61 │5,64 │5,67 │5,71 │5,74 │5,77 │5,81 │ │ │ 576 │ 569 │ 562 │ 555 │ 547 │ 539 │ 530 │ 521 │ 511 │ 501 │ │80 │5,84 │5,88 │5,92 │5,95 │5,99 │6,04 │6,08 │6,13 │6,18 │6,23 │ │ │ 490 │ 478 │ 466 │ 454 │ 440 │ 426 │ 411 │ 396 │ 379 │ 361 │ │90 │6,28 │6,34 │6,40 │6,48 │6,56 │6,64 │6,75 │6,88 │7,05 │7,33 │ │ │ 342 │ 322 │ 300 │ 277 │ 252 │ 224 │ 193 │ 159 │ 120 │ 072 │ └───┴─────┴─────┴─────┴─────┴─────┴─────┴─────┴─────┴─────┴──────┘ Примечание. В значениях весовых коэффициентов опущены ноль и запятая; например, 593 следует читать как 0,593. МЕТОДЫ АНАЛИЗА ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ FOLIA ЛИСТЬЯ Листьями в фармацевтической практике называют лекарственное сырье, представляющее собой высушенные или свежие листья или отдельные листочки сложного листа. Листья собирают обычно вполне развитые, с черешком или без черешка. Внешние признаки. При определении внешних признаков мелкие и кожистые листья обычно исследуют сухими; крупные, тонкие листья, которые, как правило, бывают смятыми, предварительно размягчают во влажной камере или путем погружения на несколько минут в горячую воду, после чего раскладывают на стеклянной пластинке, тщательно расправляя. При этом обращают внимание на форму и размеры листовой пластинки и черешка, отмечают опушение листа (обилие и расположение волосков), характер края и жилкование, наличие эфирномасличных железок и других образований на поверхности листа или наличие вместилищ в мезофилле (лупа 10X). Свежие листья исследуют без предварительной обработки. Размеры - длину и ширину пластинки листа, длину и диаметр черешка - определяют с помощью измерительной линейки. Цвет определяют с обеих сторон листа на сухом материале при дневном освещении, запах - при растирании листа, вкус - пробуя кусочек сухого листа или его отвар (только у неядовитых объектов). Микроскопия. Цельное, резаное и дробленое сырье. Из тонких листьев готовят препараты листа с поверхности; из толстых и кожистых листьев при необходимости готовят поперечные срезы. Для приготовления микропрепарата листа с поверхности мелкие листья используют целиком, от крупных берут отдельные участки с учетом распределения важнейших диагностических элементов: край листа, зубчик по краю листа, участок главной жилки, верхушка листа и основание. При определении резаных листьев выбирают несколько кусочков - с крупной жилкой и краем листа. При рассматривании микропрепарата листа с поверхности обращают внимание на следующие основные диагностические признаки: строение эпидермиса, тип устьиц, характер трихом (волоски, железки), наличие и форму кристаллических включений, механической ткани, различных вместилищ, млечников, секреторных каналов и т. д. Эпидермис листьев характеризуется определенной формой клеток - изодиаметрической или удлиненной с прямыми или извилистыми боковыми стенками, с тонкими или утолщенными оболочками, часто встречаются четковидные утолщения боковых (антиклинальных) стенок. Характерен тип устьиц, определяемый числом и расположением околоустьичных клеток эпидермиса. У двудольных различают четыре основных типа устьичного комплекса: - аномоцитный (или ранункулоидный) - устьица окружены неопределенным числом клеток, не отличающихся по форме и размерам от остальных клеток эпидермиса; - анизоцитный (или круцифероидный) - устьица окружены тремя околоустьичными клетками, из которых одна значительно меньше двух других; - парацитный (или рубиацеоидный) - с каждой стороны устьица, вдоль его продольной оси расположены по одной или более околоустьичных клеток; - диацитный (или кариофиллоидный) - устьица окружены двумя околоустьичными клетками, смежные стенки которых перпендикулярны устьичной щели. У однодольных различают 5 типов: - аперигенный тип - устьица не имеют типичных околоустьичных клеток; - биперигенный тип - устьица окружены двумя околоустьичными клетками, расположенными латерально по отношению к замыкающим; - тетраперигенный тип - устьица окружены четырьмя околоустьичными клетками: из них две клетки расположены латерально, а две других - полярно или все клетки латеральные, по две с каждой стороны; - гексаперигенный тип - устьица имеют шесть околоустьичных клеток, из них две полярные и четыре латеральные; - мультиперигенный тип - число околоустьичных клеток больше шести; они расположены вокруг устьица кольцом или без определенного порядка. Для листьев некоторых растений характерно наличие водяных устьиц, которые отличаются крупным размером и расположены обычно на верхушке листа или зубчика, над гидатодой. В эпидермисе могут встречаться секреторные клетки или клетки, содержащие цистолиты. Эпидермальные клетки, окружающие волосок, нередко образуют розетку, что является важным диагностическим признаком. Обращают также внимание и на характер слоя кутикулы, покрывающей поверхность листа. Обычно кутикула лежит тонким ровным слоем, иногда она толстая или местами образует утолщения в виде складок. Важное диагностическое значение имеют трихомы благодаря большому разнообразию их строения. Наиболее распространенным типом трихом являются волоски. Они подразделяются на одно- и многоклеточные, простые и головчатые (железистые). Простые волоски могут быть однорядными, двухрядными, многорядными, пучковыми, неразветвленными или разветвленными (звездчатые, ветвистые, Т-образные), с тонкими или толстыми стенками. Их поверхность гладкая, бородавчатая или продольно - складчатая, что зависит от особенностей кутикулы, покрывающей волосок. Еще более разнообразны головчатые волоски, которые различаются как строением ножки (одно-, двух- или многоклеточной), так и формой и строением головки (шаровидной, овальной или иной формы, одно-, двух- или многоклеточной, с содержимым или без него). |