Основымикробиологиии иммунологии
 Скачать 213.43 Kb.
|
|
РАЗДЕЛ 1. ТЕМА 1. «Общая микробиология». Предмет микробиологии болезнь желудка, гастриты, гепатиты, инфаркт миокарда, скле роз, отдельные формы бронхиальной астмы, шизофрения и др.). Появилось понятие о новых и возвращающийся инфекциях (emerging and reemerging infections). Примеры реставрации ста рых патогенов — микобактерии туберкулеза, риккетсии группы клещевой пятнистой лихорадки и ряд других возбудителей при родноочаговых инфекций. Среди новых патогенов — вирус им мунодефицита человека (ВИЧ), легионеллы, бартонеллы, эше рихии, хеликобактер, хламидии (Chlamydia pneumoniae). Нако нец, открыты вироиды и прионы — новые классы инфекцион ных агентов. Вироиды — инфекционные агенты, вызывающие у растений поражения, сходные с вирусными, однако эти возбу дители отличаются от вирусов рядом признаков: отсутствием бел ковой оболочки (голая инфекционная РНК), антигенных свойств, одноцепочечной кольцевой структурой РНК (из виру сов — только у вируса гепатита D), малыми размерами РНК. Прионы (proteinaceous infectious particle — белковоподобная ин фекционная частица) представляют лишенные РНК белковые структуры, являющиеся возбудителями некоторых медленных инфекций человека и животных, характеризующихся необрати мыми поражениями центральной нервной системы по типу губ кообразных энцефалопатиий — куру, болезнь Крейтцфельдта — Якоба, синдром Герстманна–Штраусслера–Шайнкера, амниот рофический лейкоспонгиоз.Предполагается, что прионы могут иметь значение в этиологии шизофрении, миопатий. Суще ственные отличия от вирусов, прежде всего отсутствие собствен ного генома, не позволяют пока рассматривать прионы в каче стве представителей живой природы. 1.4. Задачи медицинской микробиологии Задачи медицинской микробиологии — изучение этиологии инфекционных болезней, изыскание и практическое примене ние методов микробиологической диагностики, специфической профилактики и терапии. При решении этих задач она исполь зует достижения общей биологии, эпидемиологии, гигиены, клиники инфекционных болезней, биофизики, биохимии, ки бернетики и математики. Объекты медицинской микробиоло гии — такие виды микробов, которые в процессе эволюционного 16 О СНОВЫ МИКРОБИОЛОГИИ И ИММУНОЛОГИИ развития адаптировались к человеческому организму, в нем на капливаются, размножаются, ведут паразитическую деятель ность, вызывая инфекционные заболевания. Подобные виды микроорганизмов называются патогенными, или болезнетвор ными. Кроме патогенных микробов в природе, в организме жи вотных и человека обитает обширная группа микроорганизмов. Их называют сапрофитами, или непатогенными микробами. По общности происхождения, морфологическому строению и не которым биологическим признакам патогенные микробы сход ны с непатогенными, например, возбудитель сибирской язвы — с антракоидами, возбудитель холеры — с холероподобными виб рионами, возбудитель дифтерии — с дифтероидами и т. д. 1.5. Роль микроорганизмов в жизни человека и общества Жизнедеятельность микроорганизмов — необходимое усло вие существования на Земле органического мира. Благодаря де ятельности микробов осуществляется минерализация органи ческих остатков, что обеспечивает непрерывное поступление в атмосферу углекислоты, без которой невозможен фотосинтез растениями. На протяжении миллионов лет макро и микроор ганизмы взаимно приспосабливались и стали необходимыми друг другу. Микробы — нормальные обитатели организма чело века или животного, стали неотъемлемыми спутниками макро организма и играют значительную роль в его жизни. Так, пред ставители нормальной микрофлоры кишечника завершают пе реваривание питательных веществ, способствуют более эффек тивному их использованию макроорганизмом. Многие микробы, обитающие в кишечнике, являются антагонистами гнилостных и болезнетворных бактерий, а также вырабатывают витамины, которые используются организмом человека или животного. Микроорганизмы вездесущи. Они находятся в воздухе, воде, почве. Без них невозможна жизнь. Роль их в жизни человека, животных и растительных организмов, в процессах преобразова ния различных субстратов разнообразна. Многие из них прино сят пользу и являются активными помощниками человека. Без них невозможна выпечка хлеба, изготовление пищевых продук тов, спирта, уксуса, добыча полезных ископаемых и многое дру 17 РАЗДЕЛ 1. ТЕМА 1. «Общая микробиология». Предмет микробиологии гое. Они являются продуцентами многих витаминов, стимуля торов роста, антибиотиков и других необходимых метаболитов. Чтобы понять обширную и разнообразную роль микроорганиз мов, в первую очередь необходимо освоить основы микробиоло гии, разобраться в их физиологии, понять их эволюционные и экологические требования. 1.6. Классификация микроорганизмов по степени их биологической опасности (отдельные представители) Áàêòåðèè I ãðóïïà 1 Yersinia pestis ÷óìû II ãðóïïà 1 Bacillus anthracis ñèáèðñêîé ÿçâû 2 Brucella abortus Brucella melitensis Brucella suis áðóöåëëåçà 3 Francisella tularensis òóëÿðåìèè 4 Burkholderia mallei ñàïà 5 Burkholderia pseudomallei ìåëèîèäîçà 6 Vibrio cholerae 01 òîêñèãåííûé õîëåðû 7 Vibrio cholerae non 01 (0139) òîêñèãåííûé õîëåðû III ãðóïïà 1 Clostridium botulinum áîòóëèçìà 2 Clostridium tetani ñòîëáíÿêà 3 Corynebacterium diphtheriae äèôòåðèè 4 Mycobacterium tuberculosis Mycobacterium bovis Mycobacterium avium òóáåðêóëåçà 5 Shigella spp. äèçåíòåðèè 6 Treponema pallidum ñèôèëèñà 7 Vibrio cholerae 01 íå òîêñèãåííûé äèàðåè 8 Vibrio cholerae non 01 (0139) íå òîêñèãåííûé äèàðåè, ðàíåâûõ èíôåê- öèé, ñåïòèöåìèè è äð. 18 О СНОВЫ МИКРОБИОЛОГИИ И ИММУНОЛОГИИ IV ãðóïïà 1 Aerobacter aerogenes ýíòåðèòà 2 Salmonella spp. ñàëüìîíåëëåçîâ Âèðóñû II ãðóïïà 1 Âèðóñ ãåïàòèòà Ñ ïàðåíòåðàëüíîãî ãåïàòèòà, ãåïàòîöåëëþëÿðíîé êàðöèíîìû ïå÷åíè 2 Ðîä Hantavirus: âèðóñû Õàíòààí, Ñåóë, Ïóóìàëà, ×èëè, Àèäî è äð. ãåìîððàãè÷åñêèõ ëèõîðàäîê ñ ïî÷å÷íûì ñèíäðîìîì (ÃËÏÑ) è ñ ëåãî÷íûì ñèíäðîìîì 3 Rhabdoviridae, ðîä Lyssavirus: âèðóñ óëè÷íîãî áåøåíñòâà Äèêîâàíèÿ, Ëàãîñ-áàò áåøåíñòâà ïñåâäîáåøåíñòâà è ýíöåôàëîïàòèé 4 Hepadnaviridae: âèðóñû ãåïàòèòà  Ïàðåíòåðàëüíûõ ãåïàòèòîâ 5 Retroviridae: âèðóñû èììóíîäåôèöèòà ÷åëîâåêà (ÂÈ×-1, ÂÈ×-2), âèðóñ Ò-êëåòî÷íîãî ëåéêîçà ÷åëîâåêà (ÍÒLV) CÏÈÄà Ò-êëåòî÷íîãî ëåéêîçà ÷åëîâåêà 6 Nodaviridae: âèðóñû ãåïàòèòîâ D (äåëüòà) è Å Èíôåêöèîííûõ ãåïàòèòîâ III ãðóïïà 1 Orthomyxoviridae: âèðóñû ãðèïïà À,  è Ñ Ãðèïïà 2 Picornaviridae, Ðîä Enterovirus: Âèðóñû ïîëèîìèåëèòà äèêèå øòàììû Âèðóñû ãåïàòèòîâ À è Å Âèðóñ îñòðîãî ãåìîððàãè÷åñêîãî êîíúþíêòèâèòà (ÀÍÑ) ïîëèîìèåëèòà ýíòåðàëüíûõ ãåïàòèòîâ ãåìîððàãè÷åñêîãî êîíúþíêòèâèòà 19 РАЗДЕЛ 1. ТЕМА 1. «Общая микробиология». Предмет микробиологии IV ãðóïïà 1 Adenoviridae: àäåíîâèðóñû âñåõ òèïîâ ÎÐÂÈ, ïíåâìîíèé, êîíúþíêòèâèòîâ 2 Coronaviridae: êîðîíàâèðóñû ÷åëîâåêà ÎÐÂÈ (ïðîôóçíîãî íàñìîðêà áåç òåìïåðàòóðû), ýíòåðèòû Õëàìèäèè II ãðóïïà 1 Clamydophila psittaci îðíèòîçà-ïñèòòàêîçà III ãðóïïà 1 Clamydia trachomatis òðàõîìû, óðîãåíèòàëüíîãî õëàìèäèîçà 2 Clamydophila pneumoniae ïíåâìîíèè, àðòðèòîâ Ãðèáû II ãðóïïà 1 Blastomyces dermatitidis áëàñòîìèêîçà 2 Histoplasma capsulatum ãèñòîïëàçìîçà 3 Coccidioides immitis êîêöèäèîèäîìèêîçà 4 Paracoccidioides brasiliensis ïàðàêîêöèäèîèäîìèêîçà (þæíîàìåðèêàíñêîãî áëàñòîìèêîçà) III ãðóïïà 1 Aspergillus flavus Aspergillus fumigatus àñïåðãèëëåçà 2 Candida albicans êàíäèäîçà 3 Cryptococcus neoformans êðèïòîêîêêîçà IV ãðóïïà 1 Aspergillus niger Aspergillus nidulans àñïåðãèëëåçà 2 Candida brumptii Candida crusei Candida intermedia Candida pseudotropicalis Candida tropicalis Candida guill ermondii êàíäèäîçà 20 О СНОВЫ МИКРОБИОЛОГИИ И ИММУНОЛОГИИ Ïðîñòåéøèå III ãðóïïà 1 Leishmania donovani âèñöåðàëüíîãî ëåéøìàíèîçà 2 Plasmodium vivax Plasmodium malariae Plasmodium falciparum ìàëÿðèè 3 Trichomonas vaginalis ìî÷åïîëîâîãî òðèõîìîíèàçà IV ãðóïïà 1 Babasia caucasica áàáåçèîçà 2 Entamoeba hystolytica àìåáèàçà 3 Toxoplasma gondii òîêñîïëàçìîçà Ãåëüìèíòû III ãðóïïà 1 Echinîcoccus multilocularis àëüâåîëÿðíîãî ýõèíîêîêêîçà 2 Echinîcoccus granulosis ãèäàòèäîçíîãî ýõèíîêîêêîçà IV ãðóïïà 1 Enterobius vermicularis ýíòåðîáèîçà 2 Trichinella spiralis òðèõèíåëëåçà 3 Toxocara canis òîêñîêàðîçà 4 Ascaris lumbricoides àñêàðèäîçà ÷åëîâåêà ßäû áèîëîãè÷åñêîãî ïðîèñõîæäåíèÿ II ãðóïïà 1 Áîòóëèíè÷åñêèå òîêñèíû âñåõ òèïîâ 2 Õîëåðíûé òîêñèí 3 Ñòîëáíÿ÷íûé òîêñèí III ãðóïïà 1 Ìèêîòîêñèíû ìèêîòîêñèêîçû 2 Äèôòåðèéíûé òîêñèí 3 Ñòðåïòîêîêêîâûé òîêñèí ãðóïïû À 21 РАЗДЕЛ 1. ТЕМА 1. «Общая микробиология». Предмет микробиологии 1.7. Номенклатура микробиологических лабораторий Вся работа с микробами проводится в лабораториях, которые в зависимости от основных задач могут быть научноисследова тельскими, диагностическими или производственными. В сис теме органов здравоохранения имеются: 1) клиникодиагностические лаборатории общего или спе циального (биохимическая, бактериологическая, иммуно логическая, цитологическая и др.) типов, входящие в со став больниц, поликлиник, диспансеров и других лечеб нопрофилактических учреждений; 2) бактериологические лаборатории; 3) санитарнобактериологические лаборатории; 4) санитарнохимические лаборатории; 5) центральные (ЦНИЛ), проблемные, отраслевые, учебные лаборатории вузов; 6) специализированные лаборатории (особо опасных инфек ций и др.). В настоящее время лаборатории и более крупные лаборатор ные учреждения (отделы, институты, производственные пред приятия), как правило, специализированные и работают с той или иной группой микробов. С вирусами работают в вирусоло гических лабораториях, располагающих соответствующим обо рудованием и использующих специальные методы исследова ния. Существуют микологические и протозоологические лабо ратории. Специализированный характер приобретают и бакте риологические лаборатории, в которых работа концентрируется на определенных группах бактерий, например риккетсиозные, туберкулезные, лептоспирозные, анаэробные и др. Иммуноло гические исследования проводятся в иммунологических лабо раториях, хотя отдельные виды исследований могут выполнять ся и в микробиологических лабораториях, например серодиаг ностика инфекционных болезней. Лабораторная работа с пато генными микробами проводится в специально оборудованных лабораториях, обеспечивающих режим работы и технику безо пасности, исключающих возможность заражения персонала и утечку микробов за пределы лаборатории. Необходимость чет 22 О СНОВЫ МИКРОБИОЛОГИИ И ИММУНОЛОГИИ кой регламентации условий работы с микробами, в различной степени опасными для сотрудников лабораторий и окружающе го населения, обусловила разработку классификации микробов, разбив их на 4 группы по степени их биологической опасности (классификация ВОЗ). В России в соответствии с рекоменда циями ВОЗ патогенные микробы также делят на 4 группы: 1я группа — возбудители особо опасных инфекций; 2я группа — возбудители высококонтагиозных эпидемических заболева ний человека; 3я группа — возбудители инфекционных бо лезней, выделяемые в самостоятельные нозологические груп пы; 4я группа — условнопатогенные микробы — возбуди тели оппортунистических инфекций. Нумерация групп мик робов, принятая в России, отличается обратным порядком от классификации ВОЗ, где к 1й группе относятся микробы са мой низкой патогенности, а к 4й группе — особо опасные. 1.8. Организация микробиологической лабораторной службы В соответствии с делением микробов на группы по степени биологической опасности лаборатории также делят на катего рии. По номенклатуре ВОЗ выделяют 3 категории микробиоло гических лабораторий: базовые (основные или общего типа) ла боратории, которые в связи с конкретными особенностями ра боты могут быть оборудованы различными защитными устрой ствами; режимные (изолированные) лаборатории и лаборатории особого режима (максимально изолированные). Безопасность работ в лабораториях всех категорий обеспечивается выполне нием распорядка и правил работы в лаборатории, выполнением требований к лабораторным помещениям и их оснащению, обес печением лабораторий соответствующим оборудованием, меди цинским наблюдением за состоянием здоровья сотрудников, обучением и тренировкой персонала технике безопасности в лаборатории. Материалом для микробиологических исследова ний служат выделения человека (кал, моча, рвотные массы, мок рота, отделяемое ран), а также кровь, желчь, спинномозговая жид кость, промывные воды желудка, бронхов, трупный секционный материал и др. 310 О СНОВЫ МИКРОБИОЛОГИИ И ИММУНОЛОГИИ СОДЕРЖАНИЕ УЧЕБНОГО МАТЕРИАЛА Значение своевременного и адекватного взятия материала для микробиологических исследований. Меры предосто рожности при сборе и транспортировке исследуемого мате риала. Предохранение от контаминации исследуемого материала нормальной микрофлорой. Правила взятия, сро ки, температурные и другие условия транспортировки ма териала для бактериологических, микологических, парази тологических и вирусологических исследований, поддер живающие жизнедеятельность возбудителя, предотвраща ющие избыточный рост сопутствующей микрофлоры и обеспечивающие безопасность людей и окружающей среды. Количество отбираемого материала. Посуда, инстру менты и химические реагенты, используемые для сбора ма териала, их перечень. Подготовка к работе, утилизация. Оформление сопровождающих документов. 11.1. Значение своевременного и адекватного взятия материала для микробиологических исследований Цель микробиологического исследования — установить эти ологическую роль тех или иных микроорганизмов при возник шем заболевании или клиническом синдроме. Среди факторов, влияющих на достоверность микробиологической диагностики, можно выделить следующие условия взятия и транспортировки биологического материала: адекватный выбор методов микро 11 Т Е М А СБОР, ХРАНЕНИЕ И ТРАНСПОРТИРОВКА МАТЕРИАЛА ДЛЯ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ 311 РАЗДЕЛ 2. ТЕМА 11. Сбор, хранение и транспортировка материала биологического исследования; полноценность сведений о состо янии обследуемого пациента, важных с точки зрения оценки по лученных результатов. 11.2. Меры предосторожности при сборе и транспортировке исследуемого материала Правила работы в базовой лаборатории включают: запрет ра бот с пипеткой при помощи рта; запрет приема пищи, питья, курения, хранения пищи и применения косметических средств в рабочих помещениях; поддержание чистоты и порядка; дезин фекцию рабочих поверхностей не реже 1 раза в день и после каж дого попадания на них заразного материала; мытье рук персона лом после работы с заразным материалом, животными, перед уходом из лаборатории; проведение всех работ таким образом, чтобы свести к минимуму возможность образования аэрозоля; обеззараживание всех инфицированных материалов перед вы бросом или повторным использованием. Правила взятия исследуемого материала: знание оптимальных сроков для взятия материала на исследование; взятие материала с учетом места максимальной локализации возбудителя путем его выделения в окружающую среду; отбор материала для иссле дования в необходимом и достаточном объеме с обеспечением условий, исключающих контаминацию проб; по возможности взятие материала до применения антибиотиков и других химио терапевтических препаратов или после отмены антибиотиков через 2–3 дня. Материал доставляется в контейнерах, исключая их опрокидывание. При транспортировке не допускаются сма чивание ватных пробок и замораживание материала. Материал доставляется в течение 1–2 ч после взятия. При невозможности доставки в указанные сроки биоматериал хранят в холодильнике (кроме крови и материала, исследуемого на наличие менинго кокка). При увеличении времени доставки проб до 48 ч необхо димо использовать транспортные среды. Собранный материал должен быть доставлен в лабораторию и подвергнут исследованию в максимально сжатые сроки, по скольку некоторые микробы не выдерживают высушивания, дли тельного пребывания при измененном температурном режиме 312 О СНОВЫ МИКРОБИОЛОГИИ И ИММУНОЛОГИИ (гонококки, менингококки и др.). К тому же если исследуемый материал наряду с патогенными микробами содержит и другую микрофлору, то последняя может оказать антагонистическое дей ствие на возбудителей данного заболевания. Для взятия и транспортировки биологического материала следует использовать одноразовые стерильные тубсеры (пробир ки с тампонами) промышленного производства или транспорт ные системы со средой. Ватные (хлопковые) тампоны, изготов ляемые непосредственно в лаборатории из медицинской ваты, могут быть использованы только в крайнем случае, так как меди цинская вата может обладать антимикробными свойствами. 11.3. Предохранение от контаминации исследуемого материала нормальной микрофлорой Для сбора исследуемого материала должны использоваться стерильные посуда, инструменты и должны соблюдаться прави ла асептики, чтобы предупредить загрязнение исследуемого ма териала посторонней микрофлорой. Внесение случайной мик рофлоры в исследуемый материал может помешать выделению микроба — возбудителя данного заболевания. Во избежание загрязнения материала посторонней микро флорой тот, кто берет материал, должен вымыть руки. При неко торых видах исследований необходимо руки берущего материал, а также место взятия материала у больного дезинфицировать. При необходимости берущий исследуемый материал должен работать в эластичных перчатках. Пробирки и флаконы должны быть закрыты стерильными пробками, а баночки — крышками или бумажными стерильны ми колпачками. Следует помнить, что если ватная пробка смо чена жидкостью, то она становится проницаемой для микробов и, следовательно, не может обеспечить стерильность материала. Персонал, доставляющий материал в лабораторию, должен быть предупрежден об этом и должен нести материал больного, не взбалтывая содержимое пробирок или флаконов. Нельзя дос тавлять в лабораторию материал в антисанитарном состоянии, когда посуда, пробка или бумага загрязнены этим материалом 313 РАЗДЕЛ 2. ТЕМА 11. Сбор, хранение и транспортировка материала снаружи. Это может служить источником для заражения окру жающих. 11.4. Количество отбираемого материала Посуда, инструменты и химические реагенты, используемые для сбора материала, их перечень. Подготовка к работе, утилизация. Исследуемый материал должен соответствовать месту локализа ции инфекционного процесса (мокрота при пневмонии, кровь при сепсисе, испражнения при дизентерии и пр.). Для обеспе чения тщательного исследования материал должен быть собран в достаточном количестве. Для микробиологических исследова ний необходима различная стеклянная посуда. Чашки Петри (диаметр 10 см, высота 1,5 см) применяют для выделения чистых культур, количественного учета микроорганизмов, анализа качественного состава микрофлоры на плотных питательных сре дах и других исследований; стеклянные поплавки — для изуче ния процессов брожения; пробирки биологические — для хране ния чистых культур и проведения микробиологических исследо ваний; пастеровские пипетки с оттянутым капилляром. Кроме специальной посуды широко используют обычную химическую посуду: колбы плоскодонные конические Эрленмейера, кругло донные, мерные, пипетки, градуированные на 1 мл, пипетки Мора, мензурки, мерные цилиндры, бюксы, склянки и т.д. Колбы и пробирки, используемые для приготовления и сте рилизации питательных сред и выращивания микроорганизмов, закрывают ватномарлевыми пробками, которые изготовляют вручную или при помощи специальной машины. Правильно изготовленная пробка для пробирок должна иметь длину 3–4 см, умеренно туго входить в пробирку, быть плотной и не менять своей формы при многократном применении. В микробиологи ческой практике применяют петли, иглы, пинцеты, ножницы, пластмассовые и металлические штативы для пробирок, метал лические лотки и др. Петли и иглы изготовляют из платиновой, никелевой или хромоникелевой проволоки и закрепляют в ме таллическом петледержателе. Для лабораторных исследований в микробиологии использу ются специальные химические реактивы — реагенты. В процессе 383 Содержание ОСНОВЫ МИКРОБИОЛОГИИ И ИММУНОЛОГИИ Îòâåòñòâåííûé çà âûïóñê Ìîðîçîâà Î. Òåõíè÷åñêèé ðåäàêòîð Ëîãâèíîâà Ã. Âåðñòêà: Ïàòóëîâà À. Формат 84 х 108 1 / 32 . Бумага офсетная. Тираж 2 000. Заказ № Учебное издание ООО «Феникс» 344011, Россия, Ростовская обл., г. РостовнаДону, ул. Варфоломеева, 150. Тел. (863) 2618959, тел./факс 2618950 Сайт издательства: www.phoenixrostov.ru Интернетмагазин: www.phoenixbooks.ru Изготовлено в России Дата изготовления: 10.2017 КАМЫШЕВА Карина Сергеевна |