|
гиста итоговое. Предмет и задачи гистологии, св с мб и к дисц. Значение Гистология
Предмет и задачи гистологии, св с м-б и к дисц. Значение
Гистология — это наука, изучающая закономерности развития, строения и функции тканей, а также межтканевые взаимодействия, в историческом и индивидуальном развитии человека и многоклеточных организмов
Предмет: клеточные комплексы в их взаимодействии друг с другом, с межклеточной и внешней средой.
Задачи: 1 изучение эволюции тканей, развития их в организме; 2 изучение строения и функций клеток, тканей, органов и межклеточного вещества; 3 выяснение взаимодействия клеток в пределах одной ткани и окружающих тканей; 4 изучение регенерации тканей и регуляторных механизмов; 5 выяснение процессов эмбрионального развития человека; 6 изучение процессов морфогенеза в системе мать – плод.
Связь с др дисц: с анатомией, физиологией, генетикой, биохимией, биофизикой, молекулярной биологией *науками, изучающими растительный и животный мир, закономерности его развития, строение и функции на всех уровнях - от организменного до молекулярного. Эта связь базируется на общности методов исследования многоклеточных организмов и их взаимопроникновении
Значение: Знание нормального строение и функции всех частей тела человека на всех уровнях необходимы для понимания изменений, происходящих в организме больного человека. На этом основано преподавание патанатомии и патфизиологии – дисциплин, непосредственно связанных с клиникой. Данные гистологии широко используются в клинических дисциплинах (методы морфологического анализа – изучение клеток крови, красного костного мозга, пунктатов и биоптатов печени, селезенки и других органов)
Методы исследования. Основ этапы приготовл преп. Гистохимия. Основ этапы пригот гист препарат. М замор. Культ ткан. Микрургия. Кл инжен. Гетерокарион и гибридизация
Методы: микроскопирование, метод замораживания-скалывания: Клетки замораживают при t жидкого азота (196О С) в присутствии криопротектора и используют для изготовления сколов. Плоскости скола проходят через гидрофобную середину двойного слоя липидов. Обнажённую внутреннюю поверхность мембран оттеняют платиной, полученные реплики изучают в сканирующем ЭМ.
метод культуры клеток и тканей: выращивание клеток и тканей вне организма в искусственных питательных средах. Метод позволяет изучать реакции клеток на различные воздействия, механизмы регуляции пролиферации, дифференцировки и гибели.
клеточная инженерия: создание клеток нового типа на основе их гибридизации, реконструкции и культивирования.
Этапы приготовл препаратов: I. 1. Взятие материала 2. Фиксация (формалин, спирт, ацетон) II. 3. Промывание 4. Обезвоживание (в спирту с увеличивающейся концентрацией: 50-60-70-80-96) 5. Уплотнение (для свет.мкрп-парафин, для электр.мкрп-смолы) III. 6. Приготовление срезов (при пом. микротома) IV. 7. Окрашивание (основ-гематоксилин-ядра в син.цв, эозин и эритрозин –кислый- цитоплазму в красн, нейтральн.) 8. Обезвоживание срезов 9. Просветление срезов 10. Заключение срезов (наносят канадский бальзам и покрывают стеклом)
Гистохимия – раздел Г. об анализе хим природы компонентов тканей с помощью микроскопич методов.
Микрургия: микр хир, осущ-ся с помощью микроманипулятора под микроскопом. Клетки разрезают, извлекают части, пересаживают ядро от одной к другой.
Гетерокарион - соматическая клетка, образованная в результате слияния родительских клеток с гаплоидными генетически различными ядрами. Образовавшиеся гетерокарионы дают начало двум одноядерным гибридным клеткам.
Гибридизация — процесс искусственного слияния соматических клеток с образованием жизнеспособной гибридной клетки с последующим формированием от нее клеточной линии. Используется для получения гибридом, в исследовании механизмов реактивации генома покоящейся клетки и степени фенотипического проявления (экспрессивности) отдельных генов, клеточного деления, в картировании генов в хромосомах человека и в анализе причин злокачественного перерождения клеток
Метод выявл жир эл нерв тканей. Виды микроскопии.
Виды микроскопии: В светлом поле: испол-ся спектр видимого света 400-760 нм, исследование тканей и клеток, темнопольная: живые клетки и бактерии, прямые лучи не проходят в объектив, а только периферич, формируются диафрагмой или спец конденсором и падают на препарат под косым углом (для изуч. живых неокраш-х обьектов: клеток и бактерий) ; - фазовоконтрастный (При прохождении света через окрашенные объекты изменяется амплитуда световой волны, а при прохождении света через неокрашенные - фаза световой волны, что и используют для получения высоко контрастного изображения. для изуч. живых неокраш-х обьектов) -люминесцентный (объект облучают УФ лучами, возбуж-ими флуоресц в-ва к излучению света видимой частью спектра, опр хим. Состав в-ва, для изуч. живых неокраш-х обьектов, бывает: первичная флуор-ция-облад некот пигменты и витамины, вторич-обработка спец красителями-флуорохромами-аурамин, н-р); -уф (используется УФ-излучение, длина волны 200-400 нм, благодаря этому разрешающая способность 0, 1 мкм, в 2 раза выше светового) -поляризационный ( позволяет изучать ультраструктурную организацию тканевых компонентов на основе анализа анизотропии)св-во по –разному преломлять поляриз свет) и/или двойного лучепреломления. для иссл. обьектов с упорядоч. располож. молекул—скелет, муск-ра, коллаген. волокна) -интерфекренционная (пучок света расщепляется системой линз на две части. Одна часть проходит через препарат, другая - нет. По сдвигу фаз одного пучка относительно другого можно с высокой точностью определять толщину и массу клеток или других изучаемых тканевых структур.)
Электронная микроскопия: -трансмиционная (изг-ние ультратонк срезов на ультрратоме с пом. Алмазных или стеклянных ножей) -сканирующий (3х мерное объёмное изоб-ние, объект напыляют тонк слоем золота, тонк пучок электронов пробегает по поверх-ти золотой реплики, отраж-ся, инф-ция передаётся на электронно-лучевую трубку) -высоковольтная ( ускоряющее напряжение 1-3 млн В, более высок разрешающая способ-ть, позволяет исследовать срезы толщиной 1-10 мкм)
Методы выявления: Эластические воловна: пикриновая кис-та – жёлтый, резорцин-фуксин – тёмно синий, орсеин - коричневый; Жировая ткань: судан III – оранжевый, осмиевая кисл-та - чёрный
Импрегнация нитратом серебра. Нервная система (волокна, клетки и т.д.) в чёрный цвет
Гистохимия – раздел Г. об анализе хим природы компонентов тканей с помощью микроскопич методов.
Особенности приготовления препаратов эмбрионов: 1) использование быстро проникающих фиксирующих смесей с более "мягким" действием на ткани, 2) постепенное обезвоживание в спиртах возрастающей крепости, начиная с 50°, 3) пропитка в смеси парафина и толуола не более суток, 4) заливка в парафин - не более 3 ч, 5) широко применяется окрашивание срезов гематоксилином и пикрофуксином
История разв гистологии. Зарубежн гист школы 19 в. Развитие гист в россии. Вклад в развитие нейрогистологии профессоров Догеля и смирнова
3 периода развития: 1) домикроскопический (2000 лет), 2) микроскопический (
300), 3) современный (с середины 20 в.). 1590 г. – Ганс и Янсен - несовершенный микроскоп.
Р. Гук ввёл термин «клетка» 1665, А. Левенгук открыл красн кров тельца простейш животных, сперматозоиды; Немецкая шк: и. мюллер: концепция о специф энергии органов чувств, попытка объяснения психич процессов деят-ю г\м. Чешская шк: ян пуркинье: исп-л методы обработки и окраски препаратов, участие в создании 1-ого микротома, описал ганглиозные кл и нервные волокна, структуру зуба, эпидермис, пот железы. Клетки пуркинье – грушевид нейроны мозжечка, атипичные кардиомиоциты в желудочках мердца – волокна Пур. Итал шк: гольджи-разработал метод избират окраш-я Н. ткани (небольшая доля клеток, но полностью) – хром-серебрян метод импрегнации нейронов ЦНС. Исп шк: с. рамон –и-кахал: изуч части НС, создал нейронную теорию
Россия: преподавание Г. ввёл Бэр (описал 3 зарод листка). Максимов – автор унитарной теории (кроветвор). СПб шк: 1ый зав кафедрой-Овсянников 1864 (исслед НС и органы чувств, создал 1ое в РФ фундамент рук-во по Г.; Мск шк: была создана А. И. Бабухиным (1827-1891). Вопросы гистогенеза и гистофизиологии
различных тканей, особенно мышечной и нервной, вопросам теории микроскопа. А. И. Бабухину принадлежат открытие исследования развития и строения сетчатки глаза, развития осевых цилиндров нервных волокон. киев шк: Кафедру возглавил в 1868 г. П. И. Перемежко. Развитие и строение поперечнополосатой и гладкой мускулатур, описаны фигуры митотического деления клеток.
казанская шк: К. А. Арнштейном морфология концевых нервных волокон и узлов в различных тканях и органах (в мочевом пузыре, мочеточнике, половых органах, роговице, легком, пищеводе, коже и др.).
Томская шк: 1ый заведующий А. С. Догель – классические работы по строению вегетативной НС и классификации ее нейронов, иннервации органов чувств. Разработал метод суправитальной окраски Н. ткани метиленовой синью. Один из основоположников нейрогистологии. Смирнов 1895-1910 завкаф (изуч НС , мозжечок, нервные окончания органов). Основным научным направлением проф. А.Е. Смирнова была нейрогистология. Под его руководством выполнены 3 диссертации на степень доктора медицины. В 1908 г. проф. А. Е. Смирнов один из первых в России организовал Студенческое научное общество им. Н.И. Пирогова.
Наука о клетке как составная часть гистологии. Опр клетка. Основ постулаты кл теории
Цитология - это наука изучающая строение наименьшей структурной единицы всего живого, самовоспроизводящейся и объединяющейся в ткани при развитии многоклеточных организмов. Поэтому любые нарушения в человеческом организме имеют в своей основе патологию клеток и их производных. Клетка – самовоспроизводящаяся элементарная живая система, ограниченная плазмолеммой, содержащая ядро и цитоплазму, являющаяся основой развития, строения и жизнедеятельности организмов.
Основные постулаты клеточной теории: - клетка является наименьшей единицей живого; - клетки гомологичны по строению; - размножение клеток происходит путём деления; -многоклеточный организм представляет собой ансамбли клеток и их производных, объединённых в системы тканей.
Неклет структуры: симпласт, синцитии, межкл в-во посткл структ, локализация, строение функции
Симпласт – неклеточная многоядерная структура. 2 способа образования: - путем обьединения клеток, между которыми исчезают межклеточные границы. – В результате деления ядер без цитотомии (образования перетяжки). Примеры: скелетная мышечная ткань, симпластотрофобласт плаценты. Синцитий (соклетие) – образуется после того как исходные клетки делятся и остаются связанными между собой с помощью цитоплазматических перемычек. сперматогенные клетки - предшественники сперматозоидов Межклеточное в-во – продукт жизнедеятельности клетки, состоит из 2 основных частей: - аморфное основное в-во: гелеозоль, протеогликаны, гликозаминогликаны, гликопротеиды. – волокна: коллагеновые – определяют прочность на разрыв; эластические – определяют прочность на растяжение и ретикулярные коллаген 3 типа.
Кл ядро, компоненты, функции. Строение, хим состав, фунции, хроматина, ядрышка. Уровни компакт днк. Митотические хромосомы. Кариотип. Кариолемма и кариоплазма
Ядро клетки — главный центр с генетической информацией, так как в нем находятся хромосомы, содержащие наследственные признаки, ДНК. Форма ядра различных клеток неодинакова: окр, овал, боб, палочк, многолопа, сегмент. Величина ядра в среднем 5-10 мкм.
Компоненты ядра. Кариолемма - или ядерная оболочка, хроматин, ядрышко и кариоплазма. Функции ядра: 1. Хранение, реализация, воспроизведение и передачу генетической информации.
Ядрышко - место образования рибосом в клетке. Ядрышко выявляется в интерфазном ядре, окраш. основными красителями. В ядрышке обнаруживают 3 компонента: 1. центральный фибриллярный светлый компонент - окрашивается бледно, где находится ДНК ядрышкового организатора, содержащей информацию о р-РНК. 2. периферический фибриллярный компонент - в виде тонких нитей и представляет собой транскрипты р-РНК. 3. гранулярный компонент - субъединицы рибосом. Хроматин представлен гетерохроматином (функционально неактивные отделы и целые хромосомы, переферия, которые конденсированы, образуя глыбки) и светлыми областями - эухроматином это функционально активные, участвующие в транскрипции части хромосом, которые находятся в деконденсированном состоянии. Весь хроматин в целом - это совокупность 46 хромосом. Каждая из них – двуцепочечную молекулу ДНК. Одним из компонентов гетерохроматина может быть т.н. половой хроматин. Кариоплазма - жидкий компонент ядра. Функции: передачи раздражения, обмен веществ, взаимодействие ядерных компонентов. Совокупность числа, размеров и особенностей строения хромосом – кариотип.
Упаковка ДНК: 1. Нуклеосомный. Нуклеосома – белковая частица, сост из основных белков - гистонов. Основа - глобула из 8 молекул гистонов (октамер). Двуцепочечная молекула ДНК "намотана" на такие глобулы, делая 2 оборота (1,75 раз). Бусы. деконденсированный хроматин имеет гранулярную структуру. 2. Нуклеомерный. Формируется суперспираль. Ее витки образуют нуклеосомы обвитые ДНК. Каждый виток суперспирали обр-н 6-ю нуклеосомами – нуклеомера. Супербусы и бусы (гистон белки – Н1 стягивает) 3. Хромомерный. Негистоновые белки сшивают суперспираль в боковые петельные домены (разжатая пружина), с образованием хромомеры. 4. Хромонемный - боковые петли переплетаются и образуют кластеры, которые формируют хромонему. Кластер – компонент гетерохроматина. Суперпетли (сзжатая пружина).
Митоз. Мейоз. Полиплоидия
МЕЙОЗ– деление клетки с уменьшением числа хромосом в дочерних клетках в двое.
Первое деление: Профаза I 2n4c – спаривание гомологичных хромосом, образование аппарата деления. (Фаза Лептотены – упаковка хромосом; Фаза Заготена – конъюгация (соединение) гомологичных хромосом с образованием бивалент (тетрад) (2n4c); Фаза Пахитена – кроссинговер (перекрест), обмен м/у участками гомологичных кромосом; Фаза Диплотена – частичная деконденсация (отталкивание) хромосом, хиазмы – перекрёсты сохраняются; Фаза Диакенез – конденсация ДНК, растворение ядерной оболочки, центроли расходятся к полюсам. Метафаза I – бивалентные хромосомы встраиваются вдоль экватора клетки. 2n4c. Анафаза I – биваленты делятся и хромосомы расходятся к полюсам. (2n4c) Телофаза I – хромосомы деспирализуются и появляется ядерная оболочка (образуются дочерние клетки) n2c Второе деление: Профаза II – конденсация хромосом, деление клеточного центра и расхождение центриоль к полюсам ядра, разрушение ядерной оболочки, образование веретено деления n2c Метафаза II – униваленты (хромосомы состоящие из 2-х хромотид) располагаются на экваторе образуя метофазную пластинку. N2c Анафаза II- униваленты делятся и хроматиды расходятся к полюсам клетки. 2n2c Телофаза II – хромосомы деспирализуются и появляется ядерная оболочка (образуются 4 гаплойдные клетки)(nc). МИТОЗ –(кариокинез) непрямое деление клетки. Профаза 2n4c – ядро увеличивается, хромосомы начинают спирализоваться, центроли расходятся к полюсам и начинается веретено деления. Метафаза 2n4c– хромосомы располагаются в экваторе клетки, нити веретена деления прикрепляются к каждой хромосоме Анафаза 4n4c– дочерние хроматиды отделяются и расходятся к полюсам клетки. Телофаза 2n2c– хроматиды раскручиваются и вокруг них формируются ядерные оболочки = 2
ядра. Происходит деление цитоплазмы и органоидов. Полиплоидия - это процесс увеличения количества хромосом в ядре клетки. образуются полиплоидные клетки. Это может происходить в результате блокирования одной из фаз митоза, либо нарушения цитотомии во время телофазы. Н-р, гепатоциты, мегакариоциты красного костного мозга, гландулоциты ацинусов слюнных желез.
Клеточный цикл. Морфофункциональная характеристика периодов интерфазы. Реакция клеток на воздействие. Гибель клеток. Морфологические отличия некроза и апоптоза.
Клеточный цикл - это время существования клетки от одного деления до другого, или от деления до гибели. Клеточный цикл = митоз и интерфаза.
Интерфаза не менее 90% клеточного цикла и подразделяется на 3 периода:
G1 постмитотический - активный ростом клетки и синтез белка и РНК, клетка достигает норм размеров и восстанавливает необходимый набор органелл (продолжительность от неск часов до неск дней).
S синтетический - удвоение (репликация) ДНК и синтезом белков, нуклеосомная упаковку ДНК. удваивается число центриолей.
8-12 ч. G2 постсинтетический – непосредственная подготовку к делению. созревание центриолей, запасается энергия, синтезируется РНК и белки 2-4 часа.
Некот клетки могут выходить из клеточного цикла, G0. Клетка, вошедшая в этот период, утрачивает способность к митозу. если временно утрачивает способность к делению, она подвергается начальной дифференцировке, после чего она способна вновь возвратиться в клеточный цикл (гепатоциты). Те клетки, которые окончательно утрачивают способность к делению, не могут возвратиться в клеточный цикл и погибают. Реакция на воздействие: Изменения в ядре: набухание ядра и сдвиг его на периферию клетки; расширение перинуклеарного пространства; образование инвагинаций кариолеммы (впячивание внутрь ядра его оболочки); конденсация хроматина. К патологическим изменениям ядра относят: пикноз — сморщивание ядра и коагуляция (уплотнение) хроматина; кариорексис — распад ядра на фрагменты; растворение ядра. Изменения в цитоплазме: уплотнение, а затем набухание митохондрий; дегрануляция зернистой эндоплазматической сети (слущивание рибосом); распад на вакуоли пластинчатого комплекса Гольджи; набухание лизосом и активация их гидролаз; в процессе митоза — распад веретена деления и развитие патологических митозов. Некроз – под воздействием неблагоприятных факторов изменяется ионный состав, падает активность синтетических и метаболических процессов, набухание мембраны, активируются лизосомальные ферменты и происходит гибель. Апоптоз – запрограммированная гибель к-ки, активируются рецепторы самоуничтожения, при этом синтетические процессы остаются в норме. Мембрана не изменяется, происходит активация эндонуклеаз под их влиянием к-ка рассыпается на фрагменты. запускается в двух случаях: 1) при воздействии на клетку некоторых белков или гормонов 2) если на клетку не поступают регулирующие сигналы. 4 стадии: 1) разделение ДНК на нуклеосомные фрагменты. Цитоплазма становится конденсированной. 2) образование ограниченных мембраной апоптозных телец (содержат один или более фрагментов ядра, другие могут быть представлены только фрагментами цитоплазмы). 3) - фагоцитоз апоптозных телец макрофагами. 4) наличие остаточных телец в фагоцитах. |
|
|
Скачать 62.26 Kb.