Инструменты
Зараженные шприцы, инструменты, термометры, пипетки и стеклянная посуда перед новым использованием должны быть обеззаражены. Если возможно, конечную обработку следует проводить паром для жаропрочных предметов или окисью этилена для неустойчивых к нагреванию и чувствительных к влаге материалов. В тех случаях, когда перед употреблением необходимо обеззараживание, для дезинфекции используют раствор 2%-ного глутарового альдегида. Предметы полностью погружают в раствор на 20-30 мин. При этом полная безопасность не гарантируется, если предмет не был предварительно вымыт или если раствор уже использовали ранее. Перед повторным употреблением инструменты необходимо тщательно прополоскать в дистиллированной воде, а если они предназначены для работы в полости тела животного или на его поверхности, то в стерильной дистиллированной воде.
Лабораторные пипетки обеззараживают погружением в дезинфицирующий раствор, например 2%-ный о-фенилфенол, налитый в вертикальную или горизонтальную емкость. Стеклянную посуду погружают полностью. Перед использованием стеклянную посуду стерилизуют паром.
Руки
Для обычного мытья рук в лаборатории, когда не имеют дела с инфекционными агентами, можно применять разные моющие средства. Тщательное мытье рук в течение 15-20 с дезинфектантом приводит к сокращению числа бактерий более чем на 50%.
Мыло в кусках использовать не рекомендуется не только из-за грязи в мыльнице, но также потому, что некоторые микроорганизмы сохраняют жизнеспособность на мыле в течение некоторого времени. Если в резервуар с жидким мылом не добавлять предохраняющих средств, то там могут постепенно вырасти многочисленные популяции бактерий. В этом случае резервуар следует вымыть обычным способом и налить туда новое мыло. Порошковые и листовые мыла имеют то преимущество, что они не загрязняются бактериями и бактерии не способны расти на них.
Быструю дезинфекцию рук после загрязнения производят одним из следующих способов:
1) моют руки щеткой 30-60 с смесью дезинфектанта и детергента и ополаскивают их водой;
2) моют руки щеткой 30-60 с смесью 4%-ного хлоргексидина и детергента и ополаскивают водой;
3) моют руки 20-30 с смесью фенольного дезинфектанта и детергента и затем ополаскивают водой (некоторые фенольные производные при слишком частом использовании в слишком больших концентрациях могут вызвать депигментацию смуглой кожи);
4) смачивают руки спиртом (50-70%) на 20-30 с, затем моют их щеткой с мылом в течение 10-15 с и ополаскивают водой.
3. Общие положения при работе.
Работа с патогенными биологическими агентами (ПБА) проводится в специфических условиях, которые могут отрицательно влиять на здоровье работающих. Важнейшей особенностью этой работы является риск заражения патогенными микроорганизмами лабораторных работников и лиц, непосредственно контактирующих с ними, а также загрязнения окружающей среды.
Все это обусловливает необходимость создания в лабораториях условий, обеспечивающих безопасность персонала и окружающей среды от возможного воздействия патогенных агентов. Поэтому параллельно развитию микробиологии постоянно разрабатываются и и совершенствуются методы безопасной работы и средства защиты персонала и окружающей среды.
Существующие в настоящее время приемы и правила работы с ПБА (защитные устройства, противоэпидемические и технические мероприятия, определенный уровень автоматизации) в значительной мере обеспечивают предотвращение внутрилабораторных заражений, но полностью исключить их не могут, на что указывают периодически возникающие случаи заболевания вследствие заражения при лабораторной работе.
Обеспечение биологической безопасности при работе с ПБА включает два основных фактора: человеческий и технический.
Правильность действий человека в комплексе мер, обеспечивающих безопасное проведение работ с биоматериалом, в значительной степени обусловлена уровнем профессиональной подготовки и характерологическими особенностями индивидуума. Готовность сотрудника к самостоятельным действиям в случаях непредвиденных обстоятельств (авариях) может быть повышена соответствующей подготовкой и тренировкой. Хорошее знание основ обеспечения биологической безопасности, представление о возможных источниках заражения, свойствах используемых агентов, принципах функционирования защитных устройств и приспособлений, причинах возникновения аварий, а также владение навыками предупреждения и устранения таких ситуаций позволяет свести к минимуму значение «человеческого фактора» в возникновении лабораторных заражений.
Технический осмотр (оборудование, планировка, защитные системы, средства индивидуальной защиты, безопасные методы работы и др.) поддается совершенствованию, ведению контроля и страховочных механизмов. Необходимость четкой регламентации условий и организации работы с ПБА обусловила потребность в разработке соответствующей классификации микроорганизмов по степени их опасности непосредственно работающему («индивидуальная опасность») и окружающим («общественная безопасность»).
В соответствии с санитарными правилами (СП 1.3.1285-03) все микроорганизмы разделены на 4 группы патогенности (отдельные микроорганизмы приведены в приложении 1):
I группа – высокая индивидуальная и общественная опасность (высокая контагиозность инфекции, отсутствие эффективного лечения и профилактики, тяжелое течение заболевания, высокая летальность);
II группа – высокая индивидуальная опасность (возможность распространения инфекции ограничена);
III группа – невысокая опасность для окружающих; IV группа – условно- патогенные микроорганизмы(как правило они не вызывают заболевания у работающих с ними лиц).
В ветеринарной практике кроме названной выше используется классификация микроорганизмов, основанная на степени их опасности для животных. При определении уровня защиты персонала необходимо руководствоваться классификацией микроорганизмов, патогенных для человека.
Классификация патогенных биологических агентов, принятая в РФ, отличается от классификации в других странах, где наиболее опасные агенты отнесены к IV группе, а наименее опасные к I группе.
Лабораторные заражения
Причина инфицирования – это совокупность условий, ведущих к нарушению изоляции инфекционного материала в результате аварий или несоблюдения правил работы, что создает возможность заражения персонала или распространения инфекции в лаборатории, а также ее выхода в окружающую среду.
Анализ случаев лабораторного заражения или аварий имеет важное практическое значение. Он позволяет выявить наиболее опасные процедуры, источники и причины инфицирования персонала, а также пути распространения инфекции. На основе анализа должна проводиться разработка необходимых мероприятий, направленных на обеспечение безопасности персонала и охрану окружающей среды.
Существенную роль в оценке опасности внутрилабораторных заражений играют пути и способы переноса и распространения патогенных агентов.
Источники, пути и причины заражения лабораторного персонала весьма разнообразны. Потенциальным источником инфекции в лабораторных условиях является любой инфекционный материал (культуры, пробы, экспериментальные животные, отработанный материал и т.д.).
Анализу источников инфекции при лабораторном заражении посвящено много публикаций, в основном зарубежных авторов (A.Wedum, R.Pike, C.Collins и д.р.). Источники инфекции могут быть разделены на две группы – первичные и вторичные. Первичные источники связаны непосредственно с объектами исследований; вторичные – опосредованно, как результат неконтролируемого выхода инфекции и загрязнения поверхностей, оборудования, воздуха и т.д.
Пути поступления патогенных агентов в организм человека различны (через рот, органы дыхания, кожу, слизистые).
Для оценки относительной опасности инфицирования человека различными патогенными агентами важно знать заражающую дозу каждого агента, то есть число микроорганизмов, вирусных частиц или других агентов, приводящее к заражению. Заражающие дозы варьируют в больших пределах, и величина дозы зависит от пути поступления и состояния организма человека.
ЗАРАЖАЮЩИЕ ДОЗЫ НЕКОТОРЫХ ПАТОГЕННЫХ
БИОЛОГИЧЕСКИХ АГЕНТОВ
R.Clarke, C.Collins
Патогенный биологический агент
|
Путь заражения
|
Доза
|
Лихорадка Денге
|
Ингаляционный
|
2,0*100
|
Лихорадка Цуцугамуши
|
Внутрикожный
|
3,0*100
|
Лихорадка Ку
|
Ингаляционный
|
1,0*101
|
Туляремия
|
Ингаляционный
|
1,0*101
|
Шигелла Флекснера
|
Скармливание
|
1,8*102
|
Сибирская язва
|
Ингаляционный
|
1,3*103
|
Сап
|
Ингаляционный
|
3,2*103
|
Холера
|
Скармливание
|
1,0*108
|
Кишечная палочка
|
Скармливание
|
1,0*108
|
Заражение человека микроорганизмами, с которыми ведется работа в лаборатории, регистрируются на протяжении всего периода существования микробиологии и рассматриваются как убедительное подтверждение профессиональной опасности и профессионального риска, связанного с работой в лаборатории.
К сожалению, в России статистика лабораторных заражений в доступной литературе отсутствует.
Первые случаи документированных лабораторных заражений исследователей (брюшным тифом) относятся к 1885г., а сообщение о них было опубликовано в 1915г. В последующие годы число зарегистрированных случаев возрастало пропорционально расширению исследований с патогенным материалом.
R.Pike провел обстоятельный анализ 3921 случая внутрилабораторных заражений, имевших место в 1930-74 годы в США и некоторых европейских странах. Из опубликованных данных следует, что лабораторные заражения были вызваны более чем 160 видами микроорганизмов, в том числе бактериями – 37, вирусами – 90, риккетсиями – 9, хламидиями – 3, грибками – 9, простейшими – 16.
Заболевания, вызванные бактериями, составили 42,6% (1669 случаев, из них с летальным исходом – 4,1%); вирусами – 26,7% (1049 случаев, летальных – 5,1%); риккетсиями – 14,6% (573 случая, летальных – 5,6%). Наибольшее число заболеваний зарегистрировано вследствие заражения бруцеллезом – 423 человека (10,8%). Высокая летальность отмечена автором при лабораторных заражениях гепатитом В – 71%, чумой – 40%, холерой – 33%, желтой лихорадкой – 22%, пятнистой лихорадкой скалистых гор – 18%, лептоспирозом – 15%.
По данным R.Pike и J.Richardson отмечены редко встречающиеся групповые внутрилабораторные заражения в одной и той же лаборатории: из 423 случаев заражения бруцеллезом – 45, из 60 случаев болезни Кьясанурского леса – 53, из 45 случаев кожной формы сибирской язвы – 23.
Описаны вспышки заболеваний натуральной оспой в Англии (1979г.) и ФРГ (1980г.); туберкулеза – США (1980г.); лихорадки Ку – США и ФРГ (1982г.). Большинство из них связано с выносом инфекции за пределы лабораторий и заболеванием лиц, не имеющих непосредственного отношения к экспериментальным исследованиям.
Из всех лабораторных заражений на долю аварий пришлось только 17,9% и, таким образом, аварии не могут рассматриваться как ведущая причина их возникновения. Аэрозоль являлся причиной документально подтвержденных заражений в 13,3% случаев. Контакт с зараженными животными и эктопаразитами обусловил возникновение 16,8% случаев инфицирования; проливание и разбрызгивание инфицированной жидкости – 26,7%; аварии со шприцами и иглами – 25,2%. К настоящему времени показано, что при работе с животными одним из основных источников инфекции является аэрозоль, образующийся из-за распыления высыхающих инфицированных частиц выделений животных. В значительной части случаев (827 или 21,1%) в качестве заражения указан только факт работы с инфекционным материалом. С большей долей вероятности можно предположить, что источником заражений явился аэрозоль. Случаи лабораторных заражений, в которых аэрозоль явился установленной причиной заражения, или его роль можно предполагать, составляют большинство – 71,2% (по данным других авторов – 75%). Некоторые факторы риска, связанные с использованием технических средств и инструментов, приведены в таблицах (1,2)
Таблица 3
Вид оборудования,
инструментария
|
Фактор риска
|
Шприцы для инъекций, иглы
|
Укол, образование аэрозоля,
утечка материала
|
Центрифуга
|
Аэрозоль, разбрызгивание материала,
повреждение пробирок
|
Анаэробные стаканы
|
Взрыв, разбрызгивание инфекционного
Материала
|
Гомогенизаторы, измельчители
Тканей
|
Аэрозоль, протечка
|
Культуральные мешалки и
Шейкеры
|
Аэрозоль, разбрызгивание,
Разливание
|
Аппараты лиофильной сушки
|
Аэрозоль
|
Ферментаторы
|
Аэрозоль, разбрызгивание, разливание
|
Пипетирующие средства
|
Аэрозоль, разбрызгивание
|
Боксы биологической безопасности
|
Аэрозоль (при нарушении правил пользования)
|
Многочисленными исследованиями показано, что образованием инфекционного аэрозоля сопровождается большинство манипуляций, проводимых и инфицированным материалом. По данным отдельных авторов при исследовании по определению количественных показателей образования инфекционного аэрозоля при выполнении различных видов лабораторных работ проведены расчёты для каждой манипуляции фактора распыления (отношение количества частиц вирусов или бактерий, выбрасываемых в воздух за 1 мин., к их концентрации в 1 мл исходного материала). Приводимые авторами факторы распыления для отдельных манипуляций имеют следующие значения: работа пипеткой с образованием пузырьков жидкости – 1*104, с каплями жидкого инфекционного материала – 3*105; внутриносовое заражение белых мышей – 2*107; удаление пробки из пробирки с инфекционным материалом – 2*109.
Ниже представлены следующие отдельные причины и частота лабораторных заражений при проведении различных работ.
Таблица 4
№ п/п
|
Вид происшествия (аварийная ситуация)
|
%
|
1
|
2
|
3
|
1
|
Случайное попадание в организм заразного материала в результате укола или пореза (иглы, скальпели, бой посуды и т.д.)
|
41,1
|
1
|
2
|
3
|
2
|
Заглатывание материала при пипетировании ртом, прием пищи в лабораториях, курение и т.д.
|
13,1
|
3
|
Разбрызгивание инфицированной жидкости, что обычно бывает при нарушении правил работы с микроорганизмами (недостаточном закреплении иглы в шприце, падение капли с пипетки на рабочую поверхность стола, ненадлежащей фиксации животных и т.д.
|
25,2
|
4
|
Работа с экспериментальными или экспериментально инфицированными животными:
1) приматы являются носителями гепатита В в 1-3%, и лабораторное заражение им характеризуется тяжелым течением и высокой летальностью;
2) кормление животных, перемещение, укусы, царапины, укус эктопаразитов, вдыхание высохших экскрементов, слюны и т.д.
- укусы, царапины;
- частота выделения микроорганизмов из мочи и фекалий лабораторных животных при
- сибирской язве, бруцеллезе и мелиоидозе;
- лихорадке Ку;
- пситтакозе;
- венесуэльском энцефаломиелите лошадей;
- клещевом энцефалите
|
87,5
13,5
100
72,7
75
50
80
|
5
|
Использование оборудования и инструментария, способных создать потенциальную опасность заражения
|
|
6
|
Вторичные (опосредованные) источники заражения, к которым относятся:
- контаминированный персонал;
- аэрозоль, проникающий из других помещений;
- средства индивидуальной защиты;
- неисправное оборудование;
- системы водоснабжения, вентиляции, кондиционирования воздуха, канализации;
- жидкие отходы;
- мусор;
- и .т.д.
|
|
Одними из наиболее опасных за последние годы (2004 – 2005 гг.), по официальным сообщениям (Приложение к ЕИКЗР «ООИ в мире» 2004 г.) внутрилабораторными заражениями явились случаи заражения связанные с вирусом Эбола:
2004 г. (февраль): Форт Детрик, Мэриленд (США) – ранение при проколе иглой (выздоровление);
2004 г. ( май): Государственный исследовательский центр вирусологии и биотехнологии (Вектор), Кольцово, РФ – ранение при проколе иглой (летальный исход 19 мая)
Таким образом, к настоящему времени достаточно изучены возможные источники и пути заражения персонала микробиологических лабораторий, а также пути попадания инфекционного агента в окружающую среду. Эти данные должны использоваться для оптимизации техники лабораторной работы и надлежащей организации технологического процесса с целью обеспечения соответствующего уровня биологической безопасности.
Необходимо отметить, что основной причиной, обеспечивающей эффективность мероприятий по профилактике внутрилабораторных заражений персонала и недопущения эпидемиологических осложнений, является «человеческий фактор», т.е. квалификация и дисциплинированность сотрудников.
Проблема профилактики внутрилабораторных заражений и предотвращение попадания контаминированного материала в окружающую среду имеет важное противоэпидемическое и социально-экономическое значение. Изучение и оценка различных аспектов опасности при работе с микроорганизмами должны являться одной из главных задач санитарно-эпидемиологической службы. Только на основе этих данных можно обоснованно и грамотно разрабатывать комплекс санитарно-гигиенических, профилактических и противоэпидемических мероприятий, направленных на защиту персонала и окружающей среды. Эти данные также могут служить основой для объективной оценки организации работ с микроорганизмами.
В России разработан комплекс организационных мероприятий по обеспечению биологической безопасности при работе с микроорганизмами I-II групп патогенности. Эти мероприятия изложены в документах, перечисленных в разделе 2 «Нормативные ссылки». В дополнение к регламентированному комплексу мероприятий в последние годы в учреждениях с целью своевременного выявления специфических заболеваний, ретроспективного подтверждения факта воздействия ПБА на персонал и контроля динамики уровня специфических антител за рубежом создаются банки сывороток крови сотрудников, а при оформлении на работу с ПБА – определяться чувствительность сотрудников к специфическим лечебным препаратам (антибиотикам, иммуноглобулинам и т.д.).
В настоящее время имеется реальная возможность использования ПБА в качестве биологического оружия в террористических целях. В учреждениях, проводящих работы с ПБА, имеются условия по наработке микробной массы. Для предупреждения наработки ПБА в непроизводственных целях и их несанкционированной передачи, для осуществления Госсанэпиднадзора на объектах, использующих микроорганизмы I-II групп патогенности, необходимо в обязательном порядке проводить контроль учета условий хранения, целевого использования ПБА согласно пояснительной записке по организации работ с ними.
Общие правила.
Базовые лаборатории – уровни
биологической безопасности 4 и 3
Работа с микроорганизмами 3-й и 4-й группами риска осуществляется согласно общим правилам и рекомендациям для базовых лабораторий с уровнями безопасности для этих групп. Хотя некоторые из мер предосторожности могут не потребоваться при работе с микроорганизмами группы риска 4, однако они желательны в учебных целях для обеспечения адекватной (т.е. безопасной) техники микробиологических исследований.
Поскольку ни в одной больничной или клинической лаборатории нет полного контроля за поступающими образцами, возможен случайный и неожиданный контакт персонала с агентами более высокого риска. Вероятность такого контакта следует предусматривать при разработке мер и действий по обеспечению безопасности.
Представленные общие рекомендации для 3-й группы биологической безопасности являются всеобъемлющими и подробными, поскольку служат основой для работы всех классов лабораторий. Общие правила для изолированной лаборатории – биологической безопасности 2-й группы и максимально изолированной лаборатории – биологической безопасности 1-й группы представляют собой правила для 3-й группы, модифицированные для работы с более опасными микроорганизмами.
Код практической работы
Представленный код – это перечень жизненно важных лабораторных процедур, которые служат основой безопасности лабораторной практики. В ряде лабораторий и национальных лабораторных программ такие коды могут иметь статус «Правил». В данной главе и других разделах публикации подробно изложены и разъяснены различные составляющие кода практической работы.
Правильно организованная работа – это основа биобезопасности лаборатории. Она не может быть заменена специальным оборудованием, которое лишь дополняет ее.
Перечисленные ниже важнейшие правила изложены в порядке, который необязательно соответствует степени их важности.
Международный код биологической опасности должен быть изображен на дверях комнат, где проводятся работы с микроорганизмами групп риска 1,2,3.
Не разрешается прием и хранение пищи и питья, курение и применение косметических средств в лабораторной зоне.
В лабораторных помещениях должны поддерживаться порядок и чистота, в них не должно быть материалов, не имеющих отношения к работе.
Рабочие поверхности следует немедленно дезинфицировать после загрязнения потенциально опасным материалом и в конце рабочего дня.
Работники лаборатории должны мыть руки после манипуляций с инфекционным материалом и в конце рабочего дня.
Все технические процедуры следует проводить таким образом, чтобы свести к минимуму возможность образования аэрозолей.
Все зараженные материалы, образцы и культуры должны быть обеззаражены перед удалением из лаборатории или повторным использованием. Они должны быть помещены в герметичные пластиковые пакеты с разноцветными метками (обозначает класс отходов) для автоклавирования или хранения. Эти емкости должны храниться в жестких контейнерах. При необходимости перемещения пакетов вне лаборатории для обеззараживания их следует поместить в герметичные (т.е. с твердым дном) контейнеры, которые необходимо закрыть перед выносом из лаборатории.
В лаборатории следует носить специальную одежду или халаты. В этой одежде нельзя находиться вне лабораторных помещений, а именно в офисах, библиотеках, комнатах персонала или хранилищах. Зараженная одежда должна быть дезинфицирована соответствующими средствами.
Нельзя носить обувь с открытым носом.
Защитная лабораторная одежда не должна храниться в тех же шкафчиках или ящиках, что и личная.
При необходимости предохранить глаза и лицо от брызг и попадания инфицированного материала следует надевать защитные очки, экраны, козырьки, маски и другие защитные средства.
В рабочую зону лаборатории должны допускаться лишь лица, которые прошли инструктаж по технике безопасности и выполнили специфические защитные требования (например, иммунизация); двери лаборатории должны быть закрыты во время работы; доступ в виварий разрешается только специальному персоналу; в рабочих зонах недопустимо пребывание детей.
Следует разработать программы, определяющие порядок работы с насекомыми и грызунами.
Животных, с которыми не производится непосредственная работа, следует содержать вне лаборатории.
Шприцы и иглы должны использоваться только для парентеральных инъекций и аспирации жидкости у лабораторных животных. Их использование для забора содержимого из емкостей должно быть ограничено (емкости следует открывать и использовать пипетки). Шприцы и иглы нельзя использовать как заменители автоматических пипеток при манипуляциях с инфицированными жидкостями. Там, где возможно, острые иглы следует заменить канюлями.
При всех процедурах, которые могут сопровождаться случайными прямыми контактами с кровью, инфекционным материалом или зараженными животными, необходимо надевать перчатки.
Обо всех случаях разлива инфекционного материала, ситуациях, чреватых неопределенными последствиями, подозрениях на контакт с инфекционными материалами следует немедленно доложить руководителю лаборатории. Необходимо подготовить письменное донесение (рапорт) о происшествии.
Необходимо обеспечить соответствующую медицинскую оценку, наблюдение, экстренную профилактику и лечение.
У всего лабораторного и другого, имеющего отношение к инфекционному материалу персонала, рекомендуется периодически собирать фоновые пробы сыворотки крови. Они должны храниться соответствующим образом. Дополнительные пробы следует периодически повторно собирать в зависимости от агентов, с которыми работают и лаборатории, и выполняемых задач (рекомендация).
Руководитель лаборатории отвечает за обучение персонала по технике безопасности лабораторных работ. Следует иметь инструкции по технике безопасности и лабораторные пособия, определяющие известную и потенциальную опасность работ, а также приемы и методы, сводящие к минимуму или исключающие такую опасность. Персонал должен быть информирован об особенностях работы с опасным материалом, а также обязан изучать соответствующие инструкции по применению стандартных правил и техники безопасности работ, и следовать им. Руководитель лаборатории должен быть уверен, что персонал их понимает.
Особенности проектирования и
оборудования базовых лабораторий
Для безопасного проведения лабораторных процедур необходимо обеспечить достаточное пространство.
Стены, потолок и полы должны быть гладкими, легко моющимися, непроницаемыми для жидкостей, устойчивыми для реактивов и дезинфицирующих средств, обычно употребляемых в лаборатории. Полы не должны быть скользкими. Выступающие и проходящие трубы должны располагаться на достаточном расстоянии от стен. С горизонтально расположенных поверхностей необходимо удалять пыль.
Для проведения любых работ необходимо обеспечить достаточное освещение. Следует избегать нежелательного отражения.
Поверхность сидений и полок должна быть водонепроницаемой и устойчивой к действию дезинфицирующих средств, кислот, щелочей, органических растворителей и достаточно жаропрочной.
Лабораторная мебель должна быть прочной. Открытые поверхности между и под полками, скамьями, шкафами и оборудованием должны быть доступны для уборки.
Для размещения приборов и оборудования первой необходимости следует выделить достаточное пространство, чтобы не создавать беспорядок на полках и в проходах. Необходимо обеспечить также достаточные складские помещения, которые следует удобно располагать вне рабочей зоны лаборатории.
Раковины, по возможности с проточной водой, следует размещать в каждой лабораторной комнате, предпочтительно ближе к выходу.
Двери должны соответствовать правилам противопожарной безопасности, быть самозакрывающимися и иметь окна для наблюдения.
Автоклав (или приемлемый его заменитель) для обеззараживания должен размещаться в том же здании, что и лаборатория.
Помещения для хранения верхней одежды и личных вещей, а также для приема пищи и курения должны располагаться вне рабочей зоны лаборатории.
Следует выделить помещения для безопасной работы с растворителями, радиоактивными материалами и сжиженными (или под давлением) газами и для их хранения.
Системы безопасности должны предусматривать противопожарную и электробезопасность, душ срочной обработки и средства промывания глаз.
Необходимо обеспечить готовность соответственно оборудованных помещений или зон для оказания первой помощи.
Важно, чтобы в лаборатории была регулируемая подводка воды хорошего качества. Не должно быть соединений между источниками воды для лабораторных целей и для питья.
Необходимо иметь надежный источник электропитания соответствующей мощности, а также дежурное освещение с указанием запасного выхода. Желательно наличие резервного генератора для обеспечения основного оборудования - инкубаторов, термостатов, холодильников и т.п.
Требуют специального внимания три аспекта удаления отходов в соответствии с требованиями контроля загрязнения окружающей среды:
- автоклавы для обработки твердых отходов нуждаются в специальных помещениях и обслуживании;
- печи для сжигания отходов должны быть специально спроектированы и оборудованы устройствами для сбора воды и дымоуловителями;
- отработанные и сточные воды, удаляемые из лаборатории, должны подвергаться специальной обработке.
17.Лаборатории и помещения для животных иногда бывают объектами актов
вандализма. Для исключения возможных конфликтов должны быть обес-
печены надежная защита и противопожарная безопасность. Из соображе-
ния безопасности необходимы прочные двери и зарешеченные окна, ко-
личество ключей должно быть ограничено.
5. Медицинский контроль и наблюдение за здоровьем
Целью медицинского контроля и наблюдения за здоровьем персонала лаборатории являются:
- выявление высокочувствительных к лабораторной инфекции лиц для предотвращения профессиональных заболеваний, а также регулярное обследование вновь принятых на работу;
- проведение в установленные сроки активной и пассивной иммунизации работающих;
- обеспечение ранней диагностики внутрилабораторной инфекции;
- оценка эффективности защитного оборудования и процедур.
Руководство лаборатории в лице ее заведующего несет ответственность за проведение медицинского контроля и наблюдения за здоровьем лабораторного персонала.
Принципы медицинского наблюдения сотрудников, работающих с
микроорганизмами группы риска 4
Данные микроорганизмы не вызывают заболеваний человека или инфекции лабораторных животных ветеринарного значения. В идеале, однако, персонал лаборатории должен подвергаться анамнестическому обследованию, относящемуся к периоду до принятия на работу. Желательна своевременная информация о заболеваниях и происшествиях в лаборатории, которые могут к ним привести; персонал лаборатории должен сознавать необходимость поддержания мер и средств техники безопасности на соответствующем уровне.
Принципы наблюдения сотрудников, работающих с
микроорганизмами группы риска 3
Необходим медицинский контроль лиц, вновь принимаемых на работу, или лиц, переходящих на новое рабочее место. Такой контроль должен предусматривать сбор анамнестических данных. Могут быть полезными, а в некоторых случаях и необходимыми, клиническое обследование и забор исходящих проб сыворотки крови.
В лаборатории должен быть список врачей, у которых наблюдаются члены семей сотрудников.
Руководитель лаборатории должен вести записи о заболеваниях сотрудников и пропусках ими рабочих дней; в обязанности каждого сотрудника и его лечащего врача входит информирование руководителя лаборатории обо всех пропусках работы, связанных с болезнью.
Женщины детородного возраста должны ясно осознавать риск бесплодия, связанный с лабораторным заражением такими микробиологическими агентами, как вирус краснухи. Необходимые меры защиты плода варьируют в зависимости от микроорганизма, с которым женщина находилась в контакте.
6. Организация предупредительного
санитарно-эпидемического надзора
Ответственным за организацию работы с ПБА по учреждению в целом является его руководитель, а по подразделениям – их заведующие.
Контроль выполнения требований биологической безопасности при работе с микроорганизмами I-IV групп патогенности осуществляют: в учреждении – комиссия по контролю за соблюдением требований биологической безопасности, в подразделении – лицо, определенное приказом по учреждению.
Государственный санитарно-эпидемиологический надзор за работой с патогенными биологическими агентами осуществляют учреждения госсанэпидслужбы, руководствуясь действующими нормативными документами, регламентирующими порядок организации и условия проведения исследований с ПБА. Общегигиенические параметры (площади рабочих помещений, освещенность, микроклимат и др.) регламентированы соответствующими санитарными правилами и нормами.
С целью адекватной оценкой условий труда лиц, работающих с ПБА, соблюдения требований биологической безопасности, профилактики внутрилабораторных заражений и охраны окружающей среды необходимо особо тщательно рассматривать предлагаемый порядок организации работ на этапе получения санитарно-эпидемиологического заключения и лицензии. При проведении санитарно-эпидемиологической экспертизы условий работы с ПБА необходимо тщательно изучить имеющиеся в подразделении следующие организационные и инструктивно-методические документы:
1. Пояснительную записку по организации работ с ПБА, в которой должно быть указано:
Наименование подразделения.
Перечень возбудителей, с которыми планируется проведение работ.
Место размещения подразделения. К текстовой части прилагается графический материал (схема планировочного решения подразделения с указанием назначения помещений, размещения оборудования, разводки систем вентиляции, отопления, канализации, водоснабжения и воздухообеспечения изолирующих средств индивидуальной защиты, а также схемы движения инфекционного материала, персонала и отходов).
Отделка помещений (стены, полы, герметизация оконных проемов, дверей и т.д.).
Краткое описание технологии работ, проводимых в каждом помещении (выполняемые операции).
Виды проводимых исследований (диагностические, экспериментальные, производственные). Объем биомассы, с которым будет проводиться работа. Используемые лабораторные животные, членистоногие и т.д., порядок их содержания.
Наличие и порядок использования защитных укрытий (боксы, ламинарные шкафы, стекла Фурко и т.д.).
Режим работы защитных вентилируемых укрытий (направленность воздушных потоков, очистка воздуха, обработка отходов, место выброса вытяжного воздуха и т.д.).
Методы, кратность и результаты оценки эффективности работы вытяжных вентиляционных систем, а также защитная эффективность используемых фильтров.
Наличие и порядок работы санитарных пропускников. Место надевания и снятия, а также порядок и метод дезинфекционной обработки отдельных видов средств индивидуальной защиты.
Порядок дезинфекционной обработки помещений, использованного материала, лабораторной посуды, оборудования, жидких и твердых отходов. Перечень используемых средств и методов дезинфекции. Методы и кратность контроля качества дезинфекции.
Организация контроля за контаминацией поверхностей, воздуха и стоков.
Условия и порядок транспортировки (переноса) ПБА.
Данные о специальной подготовке персонала по безопасности работ с патогенными биологическими агентами.
Сроки вакцинации сотрудников, методы и результаты контроля ее эффективности (уровень специфических антител в сыворотке крови, результаты аллергических проб и т.д.).
Порядок допуска персонала к работе с ПБА (номер приказа и дата). Наличие журнала регистрации ежедневной термометрии и медицинских осмотров и ответственных за их ведение.
Использование неутвержденных методов (не сертифицированные тест-системы) и методических приемов.
Наличие и дата утверждения документа о порядке организации работ с ПБА и соблюдению требований биологической безопасности в учреждении.
Порядок ведения и перечень используемых учетных форм.
Место и условия хранения патогенного материала (включая музейные культуры), порядок допуска в хранилище.
Организация медицинского наблюдения за состоянием здоровья работающих. Результаты прохождения периодического медицинского осмотра (последний акт и дата утверждения).
При работе с микроорганизмами 1-й – 2-й группами патогенности (опасности) требуется наличие плана мероприятий на случай выявления лиц, подозрительных на специфическое заболевание (кем утвержден, кем согласован, дата). Примерная схема плана дана в приложении 1.
Наличие документа о порядке проведения мероприятий при авариях или чрезвычайных ситуациях, а также материально-техническое обеспечение их проведения. Примерная схема плана дана в приложении 1.
Сведения о назначении ответственного за соблюдение требований биологической безопасности (номер приказа, дата).
Контроль качества проведения дезинфекционных мероприятий.
Наличие предыдущего санитарно-эпидемиологического заключения на проведение работ с ПБА (кем выдано, дата и номер).
Сведения о регистрации в подразделении в течение последнего года аварий (кратко причина и последствия).
2. Акт объектовой комиссии по контролю соблюдения требований биологической безопасности с заключением комиссии о готовности лаборатории к проведению работ, ограниченной готовности (с указанием причин), отсутствия готовности (с обоснованием заключения). При проведении обследования необходимо оценить и проверить:
Реальную возможность выполнения предполагаемого вида и объема работ в конкретных помещениях.
Соответствие планировочных решений и оснащения сведениям, указанным в пояснительной записке, подготовленной подразделением.
Соответствие положений имеющегося внутреннего документа по организации работ и соблюдению требований биологической безопасности требованиям действующих нормативных документов. Указанный внутренний документ должен быть утвержден руководителем учреждения и согласован с учреждением госсанэпиднадзора. В нем подробно излагается технология проведения работ с ПБА, операции, выполняемые в каждой комнате, меры безопасности персонала, мероприятия по защите окружающей среды, порядок организации медицинского наблюдения за персоналом в рабочие и выходные дни, сроки ревакцинации, объем и порядок проведения дезинфекционных мероприятий, контроль автоклавирования и т.д.
Реальность выполнения плана мероприятий по локализации и ликвидации возможных аварий и плана мероприятий на случай появления среди сотрудников специфических заболеваний с учетом имеющегося материально-технического, лечебно-профилактического и кадрового обеспечения (приложения 2 и 3).
Наличие необходимой учетной и иной документации, предусмотренной СП 1.3.1825-03, СП 1.2.735-99, СП 1.2.036-95 и другими нормативными документами.
Наличие документа о порядке проведения работ с зараженными животными или на отдельных видах потенциально опасного оборудования, разработанных с учетом соблюдения требований биологической безопасности.
Наличие в подразделении аптечки для оказания экстренной помощи пострадавшим в случае аварии, ее комплектность.
Эффективность функционирования систем вентиляции, оснащенность фильтрами тонкой очистки воздуха на вытяжке, методы, кратность и результаты оценки их защитной эффективности.
Наличие необходимого количества и номенклатуры используемых средств индивидуальной защиты. При использовании изолирующих средств и принудительной подачей воздуха оценить производительность системы воздухообеспечения, эффективность работы узлов воздухопроводки (очистка, подогрев, охлаждение).
Порядок и используемые методы контроля защитной эффективности противогазов, фильтрующих коробок, изолирующих костюмов и т.д.
Организацию обучения персонала правилам пользования средствами индивидуальной защиты, особенно изолирующими. Каждый сотрудник должен пройти теоретическую и практическую подготовку по их использованию.
Работу объектовой комиссии по контролю за соблюдением требований биологической безопасности (приложение 4).
Условия хранения и использования различных химических, радиоактивных и других веществ, применяемых при проведении отдельных операций в связи с угрозой сочетанного воздействия этих веществ и ПБА.
7. Организация
текущего санитарно-эпидемиологического надзора
При осуществлении текущего санитарно-эпидемиологического надзора необходимо обратить внимание на:
Соответствие организации проводимых работ данным, изложенным в пояснительной записке, представленной учреждению Госсанэпиднадзора для получения санитарно-эпидемиологического заключения на работу с ПБА (перечень ПБА, объём биоматериала и т.д.).
Работоспособность систем инженерного обеспечения (вентиляция, вентилируемые укрытия, обработка стоков, автоклавирование, герметичность ограждающих строительных конструкций, передаточные устройства, воздухоподготовка для шланговых средств индивидуальной защиты и т.д.), а также на организацию и методическую базу контроля эффективности их работы.
Порядок использования санитарных пропускников, средств индивидуальной защиты, наличие запаса средств индивидуальной защиты. Особое внимание следует обратить на порядок использования и организацию контроля защитной эффективности шланговых средств индивидуальной защиты, используемых при работе с аэрозолями и вирусами I группы патогенности.
Результаты и методы оценки контаминации ПБА воздуха рабочей зоны, поверхностей, оборудования, а также обработанных сточных вод (особенно при работе со споровыми формами).
Используемые дезинфицирующие средства, концентрации, условия и порядок приготовления рабочих растворов.
Наличие аварийных комплектов средств индивидуальной защиты, запасов дезинфекционных средств, распыливающих устройств, а также укомплектованность аптечек для оказания первой медицинской помощи пострадавшим при авариях.
Правильность ведения учетных форм и условия хранения ПБА.
Наличие и порядок ведения журналов медицинского наблюдения (термометрии), своевременность проведения инструктажей по соблюдению требований биологической безопасности и ревакцинации.
Наличие утвержденных инструкций по безопасной эксплуатации отдельных «опасных» видов оборудования и их знание сотрудниками.
Знание сотрудниками порядка обращения за медицинской помощью в случае заболевания на дому и их действия при возникновении аварий.
Использование в работе неутвержденных методик и приемов.
Наличие и реальность выполнения утвержденных планов мероприятий по ликвидации аварий и мероприятий при выявлении лиц, подозрительных на специфическое заболевание.
Организацию работы комиссии учреждения по контролю за соблюдением требований биологической безопасности в подразделениях.
Полноту, правильность и своевременность проведения мероприятий при имевших место авариях.
Использование лабораторной мебели и оборудования, отделка которых не позволяет проводить качественную дезинфекционную обработку.
Объем проводимых мероприятий, направленных на борьбу с грызунами и членистоногими.
Периодичность и полнота проверок, проводимых объектовой комиссией по контролю за противоэпидемиологическим режимом.
Техника обращения с центрифугами
Общие замечания
Техническая безопасность является необходимым условием микробиологической безопасности при использовании лабораторных центрифуг.
Работа с центрифугами должна проводиться в соответствии с инструкциями изготовителя.
Центрифуга должна быть расположена так, чтобы оператор даже ниже среднего роста мог видеть камеру и правильно размещать на ее дне стаканы и цапфы.
Вращающиеся части центрифуги и емкости должны ежедневно осматриваться для выявления возможных коррозии и трещин.
Центрифужные стаканы и цапфы, расположенные в центрифуге напротив друг друга, должны быть спарены по весу и тщательно уравновешены.
Для уравновешивания используется 70% пропанол. Во избежание коррозии металлических частей не разрешается использовать для уравновешивания раствор гипохлорита натрия.
По окончании центрифугирования емкостей, в которые помещаются пробирки, следует держать в вертикальном положении, чтобы полностью вытек балансировочный раствор.
При работе центрифуги могут образовываться взвешенные в воздухе частицы инфекционных материалов. Эти частицы двигаются слишком быстро, чтобы обеспечить их улавливание, если центрифуга помещена в обычные боксы I и II классов биологической безопасности.
Грамотное обращение с центрифугами и герметизация центрифужных пробирок («безопасные чашки») обеспечивают адекватную защиту от инфекционных аэрозолей и дисперсных частиц микроорганизмов агентов групп риска 3, 2 и 1.
Дополнительная информация на работе с центрифугами изложена в публикациях, указанных в списке литературы.
Центрифугирование микроорганизмов и материалов группы риска 3
Центрифужные пробирки и контейнеры с образцами, подлежащие центрифугированию, должны быть выполнены из толстостенного стекла или пластика; для выявления возможных дефектов их следует проверять перед центрифугированием.
Центрифужные пробирки и контейнеры для образцов должны быть снабжены крышками.
Внутреннюю поверхность центрифужной камеры следует ежедневно осматривать для выявления пятен грязи на уровне ротора. При их наличии результаты центрифугирования считаются неверными.
Угловые насадки не следует использовать для микробиологических исследований, за исключением случаев применения их в специальных высокоскоростных центрифугах.
За исключением ультрацентрифужных и малых протромбиновых пробирок уровень жидкости в обычной центрифужной пробирке должен быть ниже ее краев не менее чем на 2 см.
Центрифугирование микроорганизмов и материалов групп риска 1 и 2
Центрифугирование материалов, которые содержат микроорганизмы групп риска 2 и 1, должно производиться партиями, отдельными от остального материала.
Центрифужные пробирки или сосуды должны быть снабжены завинчивающимися крышками и маркированы с указанием принадлежности содержащегося в них материала к группам риска 2 и 1.
Необходимо использовать центрифужные стаканы с герметично закрывающимися предохранительными крышками.
Роторы следует загружать, закрывать и открывать в боксах биологической безопасности.
Роторы и центрифужные стаканы следунт регулярно деконтаминировать.
9. Безопасная транспортировка
образцов и инфекционных материалов.
Определения
|
Скачать 0.54 Mb.