|
Ситуационные задачи к итоговому опросу по частной микробиологии
К итоговому №2 по Частной микробиологии
36. При плановом обследовании сотрудников детского дошкольного учреждения с помощью реакции Вассермана серопозитивных лиц не было выявлено. Но при заборе крови медсестра обратила внимание на многочисленные пустулы на руках одной из нянь. Диагностику какого заболевания проводят с помощью этой реакции? На чем основано проведение реакции Вассермана? Какие дополнительные исследования можно провести, чтобы исключить наличие этого заболевания у няни?
Реакция Вассермана (РВ)
Для пробы на реакцию Вассермана исследуется кровь из локтевой вены. При заражении больного сифилисом проба на реакцию Вассермана дает положительный результат не сразу, а только через 6—7 недель.
При сероотрицательной стадии первичного сифилиса отрицательная реакция Вассермана не может служить показателем отсутствия болезни и для того, чтобы подтвердить или опровергнуть диагноз, используются более точные методы диагностики
Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)
Эта проба основана на том, что бледные трепонемы, которые берут от зараженного сифилисом кролика, при взаимодействии с сывороткой больного сифилисом человека дают желто-зеленоватое свечение при микроскопировании в люминесцентном микроскопе. Если сифилиса у испытуемого человека нет, то свечения не наблюдается. Если же свечение выявлено, то его интенсивность оценивается так же, как при пробе на реакцию Вассермана:
1+ или отсутствие свечения — отрицательная проба 2+, 3+, 4+ — положительная проба
Важно то, что РИФ дает положительный результат на более ранних стадиях сифилиса, чем РВ, из-за ее большей чувствительности.
Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ)
Эта проба позволяет распознать ложноположительный результат РВ, который иногда может быть у здорового человека, поэтому обычно при положительном анализе на РВ его подтверждают или опровергают при помощи анализа на РИБТ. В некоторых случаях используются и другие методы диагностики, например, компьютерная томография для диагностирования нейросифилиса, но эти методы не столь распространены и применяются в редких случаях по решению венеролога. Точнейшим методом диагностики возбудителя является ПЦР-диагностика( до 95% точности)
| 35. У пациента, обратившегося за медицинской помощью, обнаружены многочисленные язвочки на слизистой оболочке рта и образование, похожее на твердый шанкр на внутренней поверхности щеки. Какой материал нужно взять от больного для проведения микробиологического исследования? Какие исследования нужно провести с учетом особенностей локализации возбудителя?
Это сифилис (первичный период), Для проведения микробиологического исследования необходимо взять отделяемое твёрдого шанкра и материал из язвочек. Биоптат регионарных лимфоузлов.
Можно провести серологические МИ: ИФА, РПГА. РИФ. РИТ( в качестве АГ используют ультразвуковой экстракт трепонем. выращенных в яичке кролика.) Реакция Вассермана с кардилипиновым и трепонемным АГ-ом.
| 33. В поликлиническое отделение обратился мужчина 30 лет с жалобой на высокую температуру, слабость и ломоту в коленных суставах. При осмотре выявлена эритема диаметром 10см на внутренней стороне левой голени. При опросе выяснили, что примерно месяц назад в тайге его укусил клещ, а так как мужчина был привит от клещевого энцефалита, то за медицинской помощью не обращался. Врач назначил проведение бактериологического исследования биоптатов кожи из эритемы, которое оказалось безрезультатным – возбудитель в чистой культуре не был выделен. Какой предварительный диагноз поставил врач? Какой метод исследования следует использовать для подтверждения диагноза?
Ответ:
Клещевой риккетсиоз. При укусе инфицированного клеща ч\з 3-5 дней появляется, первичный аффект в виде папулы с последующим некрозом в центре.
Для подтверждения диагноза необходимо использовать серологический метод с применением РСК, РА, РНГА, РИФ, ИФА. Также возможно применение ПЦР
| 28. Из фекалий больного с сильной диареей была выделена чистая культура грамотрицательных палочковидных микроорганизмов, по совокупности морфологических, культуральных, биохимических свойств отнесенная к виду Escherishia coli. На основании полученных результатов был поставлен диагноз «эшерихиоз» и назначена антибиотикотерапия. Какой метод исследования был применен? Правомерен ли вывод врача? Какие дополнительные исследования нужно было провести?
Ответ: Было проведено бактериологическое исследование, Вывод врача правомерен, потому что по совокупности всех признаков было верно установлено что это Escherishia coli т.к. Биохимические свойства, составляющие основу дифференциальной диагностики при проведении бактериологического исследования, следующие:
• продукция кислоты и газа при ферментации глюкозы,
• ферментация лактозы,
• неспособность образовывать сероводород,
• продукция индола.
Дополнительно можно провести ПЦР
| 21. Из фекалий женщины, контактировавшей с больными холерой, была выделена чистая культура микроорганизмов, морфологически подобных холерному вибриону. Дальнейшее исследование было решено не проводить. Достаточно ли фактов для постановки диагноза? С помощью каких исследований можно отдифференцировать возбудителя холеры от холероподобных вибрионов?
Ответ: При подозрении на холеру применяют ускоренные методы бактериологической диагностики: люминесцентно-серологический. иммобилизации вибрионов холерной 0- сывороткой с последующей микроскопией в тёмном поле и др. Анализ занимает от 15 мин до 2 ч. К методам экспресс-диагностики также можно отнести выявление антигенов холерных вибрионов в исследуемом материале в РА. PПГА. ИФА. ПЦР Результаты всех перечисленных методов расценивают как ориентировочные. Бактерии, не агглютинируемые противохолерной О-сывороткой, называют НАГ-вибрионами. Они могут вызывать сходные с холерой заболевания. Кроме стабильного эндотоксина, выделяющегося при разрушении микроорганизма. НАГ-вибрионы образуют термолабильный эндотоксин и способны вызывать холероподобные заболевания.
| Среди сотрудников большой организации в течение недели было зарегистрировано три случая холеры. Какие исследования необходимо провести по эпидемиологическим показателям для выявления носителей и больных в этом коллективе?
| 12. К участковому врачу в поликлиническом отделении обратилась молодая женщина с жалобами на боли в желудке и частую изжогу. Свое недомогание связывает с недавно выявленным хеликобактериозом у старших членов семьи. При эндоскопическом исследовании был выявлен эрозивный гастрит, промывные воды и желудочный сок взяли для проведения микробиологического исследования. Хеликобактер в материалах от больной не обнаружили. В чем заключалась методологическая ошибка врача? Какие методы исследования следует применить для уточнения диагноза?
Ответ: Методологическая ошибка врача заключается в том, что он неправильно взял материал для исследования. Хеликобактерии имеют тропность к эпителию ЖКТ, поэтому следовало взять биоптаты слизистой оболочки желудка и двенадцатиперстной кишки.
Фиброгастроскопия с взятием биопсии с пораженных участков слизистой. Требует правильного забора, соблюдения правил транспортировки материала и зависит от качества гистологического обследования. Хорошо применять для первичного обследования с целью установления характера поражения слизистой и места локализации. После проведения курса антибактериальной терапии применение фиброгастроскопии нежелательно - доказано что даже при самой тщательной обработке зонда могут сохранится хеликобактерии
Бактериоскопический метод. Выявляют бактерии в препаратах, окрашенных гематоксилин-эозином или акридиновым оранжевым. Это грамотрицательные, короткие, извитые S-образные бактерии средних размеров, подвижные, имеют 4-5 жгутиков. В фазовоконтрастном микроскопе определяют характерную подвижность.
Бактериологический метод. Производят посев материала на кровяной агар с амфотерицином. культивируют в термостате 5-7 суток при 37° в микрофильных. аэробных и анаэробных условиях. Вид микроба определяют по характерной морфологии и виде колоний, способности к росту только в микроаэрофильных условиях, по наличию оксидазной и уреазной активности . Хорошо растут в микроаэрофильных условиях, в аэробных и анаэробных условиях не растут. Температурный оптимум 37°С, не растут при температуре 25-28 и 42°С, хорошо растут на кровяном агаре, на средах, содержащих 10% сыворотки. Не растут на средах, содержащих глицерин, желчные соли и NaCl. Биохимические свойства. Оксидазо- и каталазоположительны, проявляют выраженную уреазную активность, обладают фосфатазой, образуют H2S, не свертывают молоко. Антигены. Имеется О-АГ - ЛПС, Н-АГ, а также поверхностные мембранные белковые АГ (OMP-белки), по которым определяют типоспецифичность возбудителя с помощью моноклональных АТ.
Серологический метод основан на определении уровня антител, которые вырабатываются в ответ на хеликобактерии:
1) для определения острой стадии - определение IgA
2) для определения наличия инфекции - определение IgG
Определение уровня иммуноглобулинов является наиболее достоверным (специфичность 91%, чувствительность 97%), наиболее доступным (кровь взятая натощак), наименее инвазивным методом диагностики хеликобактерной инфекции и наиболее приемлемым для контроля излеченности, т.к при проведении ФЭГДС после лечения возможно повторное инфицирование.
| 11. В поликлиническое отделение обратилась женщина с жалобами на периодическую диарею в течение последних трех месяцев. Других клинических проявлений заболевания не было выявлено. При опросе выяснили, что среди коллег в последнее время многие болели шигеллезной дизентерией. Принимая во внимание давность заболевания, какое исследование следует провести?
Ответ: Принимая давность заболевания, используется серологический метод (РНГА) — определение в крови специфических противошигеллезных антител. В качестве стандартных антигенов используют эритроцитарные диагностикумы из шигелл Флекснера и Зонне. Диагностическим для шигеллеза Зонне считают титр 1:100, шигеллеза Флекснера — 1:200.
Также используют бактериологический метод как основной. Он предполагает выделение возбудителя из испражнений при посевах на питательные среды, определение чувствительности к антибиотикам и должен проводиться до начала этиотропной терапии. Посев лучше делать у постели больного. Если это невозможно, то взятый материал (испражнения с патологическими примесями, за исключением крови) следует поместить в пробирку с консервирующей средой и не позже, чем через 2 ч доставить в лабораторию. Посев материала осуществляют на сложные питательные среды Плоскирева, Левина. Предварительный результат исследования может быть получен на 2-й день, окончательный - на 4-5-й день. Возбудитель: Shigella dysenteriae.
| 8. При исследовании фекалий больного с подозрением на брюшной тиф (1 неделя заболевания) чистую культуру возбудителя выделить не удалось. На основании чего диагноз «брюшной тиф» был снят. Какой метод исследования был использован? В чем заключается методическая ошибка врача? Какой дополнительный метод исследования следует применить для уточнения диагноза?
|
При исследовании сыворотки крови больного с подозрением на сыпной тиф получены следующие результаты РСК: титр антител с антигеном из риккетсий Провачека 1:50, с антигеном из риккетсий Музера 1:400. Как вы расцените результаты исследования?
|
В лабораторию поступила кровь больного с подозрением на сыпной тиф (14 сутки заболевания). Какой метод исследования следует применить с диагностической целью, учитывая необходимость дифференциации эпидемического и эндемического сыпного тифа?
Эталон ответа: РСК, ИФ, на титр антител
|
7. При исследовании сыворотки крови больного с подозрением на сыпной тиф обнаружены следующие результаты РСК: Как вы расцените результаты исследования?
Иссл.
сыворотка
| Разведение сыворотки
| 1:100
| 1:200
| 1:300
| 1:400
| 1:500
| 1:600
| 1:700
| 1:800
| 1:1000
| КС
| КА
| Необработ
| +
| +
| +
| +
| +
| +
| +
| +
| -
| -
| -
| Обработ.
2-меркап-
тоэтанолом
| +
| +
| +
| +
| +
| +
| +
| -
| -
| -
| -
|
| Ответ: Диагностические титры РСК 1: 640 и 1: 1280 на 12—20-й день болезни. В данной задаче диагностический титр 1: 800. После обработки 2-меркаптоэтанолом он стал
1: 400. Следовательно, в сыворотке крови больного много иммуноглобулинов М, что свидетельствует о первичном заболевании.
При исследовании сыворотки больного с подозрением на сыпной тиф получены следующие результаты РСК: титр антител с антигеном из риккетсий Провачека 1:400, с антигеном из риккетсий Музера 1:50. Как вы расцените результаты исследования?
|
6. В инфекционное отделение поступил больной с подозрением на сыпной тиф (11 сутки заболевания). Какой метод исследования следует применить для установления диагноза? Как отдифференцировать текущее заболевание от перенесенного в прошлом?
Ответ: Необходимо провести серологическое исследование (определение специфических антител в крови). С этой целью применяют РСК, РА,РНГА,РИФ,ИФА. Так как у больного уже идет 2-я неделя заболевания, то это исследование будет обосновано, так как на 1-ой неделе заболевания у больных невозможно выявить специфические антитела. (сыпь появляется ко 2 неделе) максимальных величин титры антител достигают на 15-30 сутки при отсутствии лечения антибиотиками. Отличить текущее заболевание от перенесенного в прошлом можно, если использовать непрямую реакцию иммунофлюоресценции, которая позволяет дифференцировать антитела, появляющиеся при возникновении заболевания (IgM), от циркулирующих после перенесенного сыпного тифа (IgG).
|
5. В инфекционное отделение больницы в тяжелом состоянии поступил больной с диагнозом «сыпной тиф». Из анамнеза установлено, что он болеет 10 дней. С целью подтверждения предварительного диагноза врач назначил исследование. Какой материал необходимо взять у больного для проведения исследования? Какое исследование необходимо провести?
Ответ: Необходимо для исследования взять у больного кровь и провести серологическое исследование (определение специфических антител в крови). С этой целью применяют РСК, РА,РНГА,РИФ,ИФА. Так как у больного уже идет 2-я неделя заболевания, то это исследование будет обосновано, так как на 1-ой неделе заболевания у больных невозможно выявить специфические антитела. (сыпь появляется ко 2 неделе) максимальных величин титры антител достигают на 15-30 сутки при отсутствии лечения антибиотиками.
Чаще используют РСК с риккетсиозным антигеном (приготовленным из риккетсий Провачека), диагностическим титром считается 1:160 и выше, а также нарастание титра антител. Используют и другие серологические реакции (реакция микроагглютинации, гемагглютинации и др.).
| При исследовании фекалий больного с диареей была выделена чистая культура возбудителя – грамотрицательные мелкие одиночные палочки. На агаре Эндо образовывали ярко-красные колонии, на агаре Плоскирева – бесцветные полупрозрачные колонии, в питательном бульоне давали равномерную муть. Штамм бихимически оказался очень активным: ферментировал глюкозу и лактозу с выделением кислоты и газа, сахарозу, манит и мальтозу. Какие микроорганизмы обладают подобными свойствами? Достаточно ли данных для идентификации культуры и постановки диагноза? Какие методы исследования кроме использованного можно предложить?
| |
|
|