Фарш SBOR6-_novaya_red. Спектроскопические методы в анализе лекарственных средств

• Название: Спектроскопические методы в анализе лекарственных средств
• Анкор: Фарш SBOR6-_novaya_red.doc
• Дата: 14.03.2018
• Размер: 0.52 Mb.
• Имя файла: Фарш SBOR6-_novaya_red.doc
• Тип: Документы; #16677
• страница: 2 из 4

ПРИМЕР: Определите содержание рибофлавина в порошках состава: Рибофлавина 0,005, Сахара 0,1 методом фотоколориметрии, используя способ расчета по калибровочному графику.

Методика: 0,02 г (a₁) порошка растворяют в 10,0 мл (W₁) воды при нагревании на водяной бане, охлаждают. К 1,0 мл (V) раствора прибавляют 9,0 мл (W₂) воды, перемешивают. Измеряют оптическую плотность полученного раствора (А_х) на ФЭК при длине волны 445 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно воды.

Для приготовления стандартного раствора 0,0100 г (а_ст) рибофлавина, соответствующего требованиям ФС, растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 250,0 мл (W₃) при нагревании на водяной бане, охлаждают. Доводят объем раствора водой до метки, перемешивают (1,0 мл стандартного раствора содержит 0,00004 г рибофлавина).

Для построения градуировочного (калибровочного) графика готовят серию стандартных разведений: в колбы вносят соответственно 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5; 3,0 мл (V_i) стандартного раствора, доводят объем раствора водой до 10,0 мл (W₄), перемешивают. Измеряют оптическую плотность на ФЭК при длине волны 445 нм в кюветах с толщиной слоя 10 мм относительно воды.

Значения оптической плотности анализируемого раствора (А_х) равно 0,48; серии стандартных разведений – соответственно 0,09; 0,18; 0,27; 0,36; 0,45; 0,54.

РЕШЕНИЕ: По полученным значениям оптических плотностей стандартных разведений строят калибровочный график (рис.3), предварительно рассчитав концентрации серии стандартных разведений согласно схеме их приготовления:




Для удобства расчета концентрацию стандартных растворов выражают в г/мл; г/10 мл; %. Например, концентрация стандартного раствора рибофлавина в г/10 мл равна:


Концентрация того же раствора в г/мл и % соответственно равна:



Рисунок 3 – Калибровочный график стандартного раствора рибофлавина
С помощью градуировочного (калибровочного) графика по значению оптической плотности анализируемого раствора (А_х) методом интерполяции находят концентрацию стандартного раствора (С_х) с равным значением оптической плотности. Найденное значение С_х пересчитывают на массу порошка по прописи (Р) по формуле 3.25:
(3.25)
где C_х – концентрация стандартного раствора со значением оптической плотности, равным оптической плотности анализируемого раствора (найдена по калибровочному графику), г/мл, %, г/10 мл; W₁; W₂ – соответственно вместимость мерных колб, использованных для приготовления анализируемого раствора, мл; V – аликвота для приготовления фотометрируемого раствора, мл; a₁ – навеска (объем) лекарственной формы, взятая на анализ, г (мл); Р – масса (объем) лекарственной формы по прописи, г (мл).
Независимо от градуировки калибровочного графика – концентрация стандартного раствора по оси ординат г/мл (1); % (2); г/10 мл (3) – содержание анализируемого вещества (g, г) составляет:

(1)

(2)

(3)

ОТВЕТ: Содержание рибофлавина в порошках – 0,0055 г.

Расчет по градуировочному (калибровочному) графику удобен при проведении серийных анализов окрашенных веществ (рибофлавин, фурацилин (нитрофурантоин) и др.) в условиях заводского или аптечного производства. Градуировочный (калибровочный) график нужно периодически проверять (один раз в месяц), т.к. удельный показатель поглощения и оптическая плотность зависят от температуры окружающей среды.

Достоинства расчета по калибровочному графику:

♦ простота и удобство при рутинном анализе однотипных по химическому составу растворов (серийные фотометрические анализы);

♦ возможность проводить количественное определение анализируемого вещества при несоблюдении закона Бугера-Ламберта-Бера. В этом случае градуировочный (калибровочный) график строят для узкого интервала концентраций, в пределах которого зависимость оптической плотности наиболее линейна.

Недостатки:

♦ появление погрешностей, связанных с субъективностью построения калибровочного графика, несоответствием графических (масштабных) погрешностей, погрешностей измерений оптических плотностей, связанных с изменением условий (например, температуры) и невоспроизводимостью установки длины волны.

В то же время расчет количественного содержания ЛВ в анализируемом образце по уравнению градуировочного (калибровочного) графика позволяет получить наиболее точные результаты.


3.2.1.2. Способ расчета количественного содержания

по удельному показателю поглощения

Способ расчета основан на использовании указанного в НД или предварительно вычисленного (см. пример) значения удельного или молярного показателя поглощения. В НД чаще используется значение удельного показателя поглощения.

Согласно математическому выражению закона Бугера-Ламберта-Бера, оптическая плотность испытуемого раствора (А_х) пропорциональна С_х, удельному показателю поглощения () и толщине поглощающего слоя (l):
(3.26).
Преобразовав уравнение (3.26), находят содержание действующего вещества в фотометрируемом растворе:
(3.27).
Для расчета содержания действующего вещества в исходном образце (из которого приготовлен фотометрируемый раствор), необходимо учесть все выполненные операции по обработке исходного образца (приготовление исходного раствора, отбор аликвоты и последующие разведения).

В случае количественного определения фармацевтической субстанции (индивидуального ЛВ) методом фотометрии со способом расчета по удельному показателю поглощения содержание (g, %) рассчитывают по формуле:
(3.28)
где А_х – оптическая плотность фотометрируемого раствора; W₁ ;W₂ – вместимость мерных колб для приготовления фотометрируемого раствора, мл; V – аликвота исходного раствора, взятая для приготовления фотометрируемого раствора, мл; а – навеска анализируемого образца, взятая для приготовления исходного раствора, г; l – толщина кюветы, см.
ПРИМЕР: Оцените качество образца фурадонина (нитрофурантоина) по количественному содержанию (согласно ФС должно быть не менее 98,0% и не более 102,0%), если 0,0986 г (а) субстанции внесли в мерную колбу вместимостью 100,0 мл (W₁), растворили в 2,5 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида, довели водой до метки, перемешали.

0,6 мл (V) полученного раствора довели водой до метки в мерной колбе вместимостью 100,0 мл (W₂) (испытуемый раствор).

Оптическая плотность испытуемого раствора, измеренная на спектрофотометре при длине волны 360 нм (или фотоэлектроколориметре при фиолетовом светофильтре) относительно воды в кювете с толщиной слоя (l) 1,0 см составила 0,274 (А_х).

Удельный показатель поглощения () раствора фурадонина–стандарта в тех же условиях равен 466,7.

РЕШЕНИЕ: Согласно закону Бугера–Ламберта–Бера оптическая плотность испытуемого раствора (А_х) равна: отсюда концентрация фурадонина в фотометрируемом растворе, приготовленном согласно методике по схеме, равна: .




Учитывая схему разведения, содержание фурадонина (нитрофурантоина) в анализируемом образце (g, %) равно:

ЗАКЛЮЧЕНИЕ: Образец фурадонина (нитрофурантоина) соответствует требованиям ФС по количественному содержанию (99,2%).
В случае фотометрического количественного определения ЛВ в готовых лекарственных формах (ГЛФ) или лекарственных формах индивидуального изготовления содержание ингредиентов (g, г) рассчитывают по формуле:
(3.29)
где Р – в зависимости от лекарственной формы:

♦ жидкие лекарственные формы (растворы для внутреннего употребления, глазные капли и т.д.) – объем лекарственной формы по прописи, мл;

♦ растворы для инъекций –- 1 мл;

♦ растворы для инфузий – 100 мл (%);

♦ порошки, суппозитории – масса одной дозы по прописи, г;

♦ таблетки – средняя масса одной таблетки или масса одной таблетки (таблетки, покрытые оболочкой), г;

♦ мази – прописанное количество мази, г;

♦ гранулы – в пересчете на 100,0 г массы, г.


ПРИМЕР: Оцените качество раствора адреналина гидротартрата 0,18% для инъекций по количественному содержанию действующего вещества (согласно ФС должно быть 0,0016–0,0020 г/мл), если 5,0 мл препарата (а) довели водой до метки в мерной колбе вместимостью 100,0 мл (W₁) (раствор А).

Оптическая плотность раствора, полученного после соответствующей обработки 10,0 мл (V) раствора А, при длине волны 520 нм в кювете с толщиной слоя 1,0 см составила 0,428 (А_х).

Удельный показатель поглощения () стандартного образца адреналина гидротартрата в тех же условиях равен 47,5.

РЕШЕНИЕ: Схема приготовления фотометрируемого раствора:



Содержание адреналина гидротартрата (g, г) в растворе для инъекций составляет:


ЗАКЛЮЧЕНИЕ: Раствор адреналина гидротартрата 0,18% для инъекций соответствует требованиям ФС по количественному содержанию (0,0018 г/мл).

Достоинством способа расчета по удельному показателю поглощения является простота, удобство, малые затраты времени на расчеты.

Недостаток заключается в невоспроизводимости значений удельного показателя поглощения, связанный с колебаниями оптической плотности в пределах одного опыта (десятые доли процента), в разных опытах (несколько процентов) и межприборной ошибкой (около 10% и более).

3.2.1.3. Способ расчета количественного содержания действующего вещества по оптической плотности стандартного образца
В НД для количественного определения фармацевтических субстанций и ингредиентов лекарственных форм наиболее часто используется способ расчета, основанный на сравнении поглощения раствора анализируемого образца с поглощением раствора ГСО (РСО) субстанции аналогичного наименования, измеренных в одинаковых условиях. Такой подход позволяет учитывать влияние многочисленных факторов (погрешности разведения, установки длины волны, влияние температуры и т.д.). Это приводит к более высокой точности данного способа расчета по сравнению с двумя предыдущими (по градуировочному графику и по удельному показателю поглощения).

Для анализа готовых лекарственных форм (ГЛФ) в качестве рабочих стандартных образцов (РСО) разрешено использовать образцы серийных фармацевтических субстанций, удовлетворяющие требованиям соответствующих ФС. Однако для фармацевтических субстанций способ расчета по оптической плотности стандартного образца предусматривает обязательное использование Государственного стандартного образца (ГСО) соответствующего наименования. Перечень необходимых ГСО фармацевтических субстанций включен в ГФ.

Способ расчета по оптической плотности раствора стандартного образца основан на использовании следующей зависимости оптической плотности анализируемого (А_х) и стандартного образца (А_ст):



Преобразование этой системы уравнений приводит к соотношению:
отсюда: (3.30)

Содержание ЛВ в субстанции (g, %) рассчитывают, учитывая разведения, в зависимости от способа выражения концентрации фотометрируемого стандартного раствора (см. раздел 3.2.1.):
♦ если концентрация раствора стандартного образца выражена в г/мл (формула 3.31):

(3.31)
♦ если концентрация раствора стандартного образца выражена в процентах (формула 3.32):

(3.32)
♦ если концентрация раствора стандартного образца выражена в г/W, мл (формула 3.33):

(3.33)
♦ если фотометрируемые растворы анализируемого и стандартного образцов приготовлены по аналогичной схеме и концентрация исходного раствора стандартного образца (С_ст) выражена в процентах, содержание испытуемого вещества (g,%) рассчитывают по формуле 3.34:

(3.34)
где А_х; А_ст – соответственно оптическая плотность анализируемого и стандартного растворов; W₁;W₂ – вместимость мерных колб для приготовления анализируемых растворов, мл; а – навеска испытуемого образца, взятая на анализ, г; V – аликвота, взятая для приготовления фотометрируемого раствора, мл.
Содержание действующих веществ в ГЛФ или лекарственных формах индивидуального изготовления (g, г) рассчитывают по формулам (например, формула 3.35), аналогичным формулам 3.31–3.33, в пересчете на массу (Р) лекарственной формы по прописи:
(3.35)
где Р равно в случае анализа:

♦ порошков, суппозиториев – массе одной дозы, г;

♦ мазей – массе мази по прописи, г;

♦ растворов для инъекций – 1 мл;

♦ глазных капель, микстур, растворов для внутреннего употребления – объему

лекарственной формы по прописи, мл;

♦ таблеток – средней массе одной таблетки или массе одной таблетки, г; и т.д.:

ПРИМЕР: Оцените качество таблеток феназепама по 0,001 г по количественному содержанию действующего вещества (согласно ФС должно быть 0,0009–0,0011 г в пересчете на среднюю массу таблетки).

Согласно методике ФС 0,5345 г (а) порошка растертых таблеток феназепама поместили в мерную колбу вместимостью 50 мл (W₁), добавили 30 мл 95% этанола, взболтали в течение 10 минут для растворения феназепама. Довели объем раствора до метки, профильтровали.

2,5 мл (V) фильтрата довели до метки 95% этанолом в мерной колбе вместимостью 25,0 мл (W₂) (анализируемый раствор).

Оптическая плотность анализируемого раствора, измеренная относительно этанола на спектрофотометре при длине волны 231 нм в кювете с толщиной слоя 1,0 см, составила 0,688 (А_х).

Оптическая плотность стандартного раствора, содержащего в 1 мл 0,000005 г (0,000005 г/мл) феназепама, измеренная в аналогичных условиях, равна 0,625 (А_ст). Средняя масса одной таблетки 0,214 г (Р).

РЕШЕНИЕ: Содержание феназепама в фотометрируемом растворе (С_х) рассчитывают по формуле:

Содержание феназепама (g,г) в пересчете на среднюю массу одной таблетки (Р), учитывая схему разведения раствора, равно: