Гнойно-воспалительные, желудочно-кишечные, анаэробные инфекции. Тема занятия. Микробиологические аспекты лабораторной
 Скачать 444.63 Kb.
|
|
Тема занятия. Микробиологические аспекты лабораторной диагностики гнойно- воспалительных, желудочно-кишечных, анаэробных инфекций. Цель. После прохождения курса общей микробиологии студенты должны: иметь представление о современном состоянии проблемы перечисленных инфекций, этиологии, патогенезе, клинических проявлениях. Знать основные принципы лабораторной диагностики, профилактики и лечения данных патологий.Уметь рационально использовать полученные знания для решения клинических ситуационных задач. Оснащение занятия. Слайды, таблицы, ситуационные задачи. Демонстрация роста микробов на питательных средах, оснащение для микроскопической и микробиологической диагностики микроорганизмов ( микроскопы, краски, бактериологические петли, препаровальные иглы,покровные и предметные стекла, спиртовки) Время проведения занятия. 180 минут Место проведения. Кафедра микробиологии, учебная комната. Интеграция темы занятия “ Лабораторная диагностика гнойно-воспалительных инфекций” Истоки Выход Кафедра биологии Общая характеристика бактерий как класса. Факты: морфология класса бактерий Кафедра инфекционных болезней,хирургии Дифференциальная диагностика, лечение и Факты:этиология,патогенез,лечение профилактика гнойно-воспалительных инфекций. Кафедра фармакологии Основные группы антибиотиков. Фармакодинамика лекарственных препаратов Ориентировочная карта для самоподготовки к практическому занятию дома по теме « ГНОЙНО-ВОСПАЛИТЕЛЬНЫЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ» План для самоподготовки Цель Задание для самоконтроля Характеристика возбудителей Использование терминологии Составить таблицу возбудителей Морфология,культуральные признаки бактерий Знать для дифференциальной диагностики Составить алгоритм лабораторной диагностики Клинические проявления Знать, чтобы назначить лечение Выбрать исследуемый материал Лечение и профилактика Специфическая терапия Назвать основные группы химиопрепаратов План самостоятельной работы Наименование работы Описание работы Цель Время мин. Микроскопическое изучение бактерий Приготовление мазка Тренировка навыков диагностики 60 мин Оформление протокола Зарисовка препарата Формирование тактики постановки диагноза 30 мин. Схемы лабораторной диагностики Выбор алгоритма метода постановки диагноза Тактика постановки диагноза 30 мин. Решение ситуационных ззадач Самостоятельно решить задачу по диагностике инфекции, выбирая оптимальные методы лабораторной диагностики,сравнивая с эталоном Формирование умения врачебных навыков тактики постановки диагноза, используя лабораторные приемы. 60 мин. Блок информации. Гнойно-воспалительные инфекции характеризуются образованием воспалительных очагов в различных органах и тканях с последующим гнойным отделяемым из пораженного органа. Возбудители этой группы инфекций относятся к разным семействам, родам и видам. Одними из основных возбудителей гнойно-воспалительных инфекций являются бактерии шаровидной формы. В основе их классификации лежат морфология и окраска по методу Граму. Классификация Патогенные кокки Грам + Грам - Семейство Семейство Micrococcaceae Streptococcaceae Neisseriaceae Род Род Род Staphylococcus Streptococcus Neisser ia Вид Вид Вид aureus pyogenes meningi tidis epidermidis viridans gonorrhoeae saprophyticus pneumoniaе На втором месте стоят грамотрицательные бактерии родов – Escherichia, Proteus, Klebsiella, Pseudomonas. Эпидемиология Источник инфекции- больной человек, бактерионосители, больное животное.Стафилококки,являясь постоянными обитателями кожи и слизистых могут, вызвать аутоинфекцию.Микроорганизмы этой группы могут вызывать внутрибольничную инфекцию. Путь передачи – контактно-бытовой, воздушно-капельный, алиментарный. Патогенез Стафилококки проникают в любые органы и ткани.Это свойство связано с наличием у них факторов патогенности- экзотоксина и ферментов агрессии. Экзотоксин пантропен и состоит из множества фракций, обладающих органотропностью. Фракции экзотоксина: гемотоксин, лейкотоксин, некротоксин, нейротоксин, летальный токсин, энтеротоксин, эксфолиативные токсины, экзотоксин, вызывающий синдром токсического шока и т.д. Стафилококк имеет весь набор ферментов агрессии – гиалуронидазу, плазмокоагулазу, лецитиназу, фибринолизин и другие. Клиника Стафилококки проникают в организм через повреждения кожи и слизитых оболочек, вызывая самые разнообразные заболевания - от банальной угревой сыпи до тяжелейшего перитонита, эндокардита, сепсиса и септикопиемии, менингита, пневмонии, при которых летальность достигает до 80%.Стафилококки играют ведущую роль в гнойной хирургии. Инфицирование стафилококками пищевых продуктов – частая причина пищевых отравлений (пищевых интоксикаций). Лабораторная диагностика. Исследуемый материал зависит от клинических проявлений инфекции. Это может быть кровь, спинномозговая жидкость, мокрота, гнойное отделяемое пораженного органа, рвотные массы. 1.микроскопический метод – определяет род. В мазках из исследуемого материала – грамположительные бактерии шаровидной формы в виде гроздьев винограда. 2.бактериологический метод - ведущий,служит для определения вида стафилококка. Исследуемый материал засевают на элективные среды - желточно-солевой агар (ЖСА) с целью выделения чистой культуры. Кровь и спинномозговую жидкость предварительно обогащают на 1% сахарном бульоне. В бульоне возбудитель дает равномерное помутнение, на агаре - гладкие, пигментированные колонии с ровными краями. Идентификацию стафилококка проводят по факторам патогенности: лецитиназная активность определяется на ЖСА (вокруг колоний отмечается перламутровая зона помутнения среды); гемолитическая активность определяется путем посева культуры стафилококка на кровяной агар; плазмокоагулаза определяется посевом в цитратную плазму; биохимическая активность – посевом в пестрый ряд. По патогенности выделяют три вида стафилококка (см. таблицу).Для обнаружения типа энтеротоксина используют реакцию преципитации в геле(РП). Таблица дифференциальной диагностики видов стафилококков Дифференциальный признак Staphylococcus аureus Staphylococcus epidermidis Staphylococcus saprophyticus Плазмкоагулаза + - - Гемолизин + - - Лецитиназа + - - Сбраживание маннита + - + Сбраживание глюкозы + + - Экзотоксин + - - Преимущественное место локализации Пантропен Кожа и слизистые Слизистые . С целью определения источника инфекции проводят фаготипирование с помощью типового стафилококкового бактериофага. 3. Серологический метод – реакция пассивной гемагглютинации( РПГА), иммуноферментная реакция ( ИФА) для определения специфических антител в сыворотке крови больного к тейхоевой кислоте, содержащейся в клеточной стенке стафилококка. 4. Биологический метод – биопроба на котятах (пероральное введение фильтрата бульонной культуры стафилококка) для обнаружения энтеротоксина. Токсины вызывают у котят рвоту и понос. 5. Аллергический метод не применяется. Лечение и специфическая профилактика. Этиотропная терапия назначается с учетом антибиотикочувствительности. Для лечения используют главным образом β – лактамные антибиотики, макролиды, полипептидные антибиотики. Специфическая иммунотерапия применяется при тяжелых и хронических стафилококковых инфекциях – в виде противостафилококкового человеческого иммуноглобулина, антистафилококковой плазмы. Специфическая плановая профилактика – стафилококковый анатоксин. Показана беременным женщинам перед родами. Иммунитет кратковременный. Блок контроля теоретических знаний. Вопросы для контроля 1. Дайте общую характеристику возбудителю стафилококковой инфекции. 2. Назовите основные патогенетические факторы стафилококка. 3. Назовите видовые названия стафилококков и опишите их свойства. 4.Назовите источники стафилококковой инфекции, пути передачи, входные ворота. 5.Назовите клинические формы стафилококковой инфекции 6.Назовите исследуемый материал и методы лабораторной диагностики стафилококковой инфекции. 7. Назовите средства специфической и этиотропной терапии стафилококковой инфекции. 8. Какова специфическая профилактика стафилококковой инфекции? 9.Как определить источник стафилококковой инфекции? Тестовый контроль обязательного уровня знаний 1.Выберите, к какому роду относятся возбудители гнойно-воспалителных инфекций а) Staphуlococcus б) Proteus в)Esherichia г)Neisseria д)Corynebacterium е) Klebsiella ж)Pseudomonas 2. Выберите методы лаб. диагностики стафилококковой инфекции а).микроскопический б).бактериологический в).серологический г).аллергический д).биологический 3.Укажите морфологические признаки возбудителя стафилококковой инфекции а).грамотрицательный б).грамположительный в).диплококк г).бобовидная форма д). гроздекокк 4.Перечислите патогенетические факторы патогенного стафилококка а).ферменты агрессии б).капсула в).пили г).эндотоксин д)экзотоксин 5.Выберите средства специфической профилактики и терапии при стафилококковых инфекциях а)аутовакцины б)гемотерапия в) анатоксин г)поливалентная вакцина д)противостафилококковый человеческий иммуноглобулин е)ампициллин ж) антистафилококковая плазма Ситуационные задачи Задача 1. У новорожденного с клиникой гнойного отита в мазке, приготовленном из исследуемого материала, обнаружено большое количество лейкоцитов и различные микроорганизмы. Среди микробов был виден стафилококк, расположенный вне и внутри лейкоцитов (активный фагоцитоз). 1.Можно ли на основании изучения мазка считать стафилококк возбудителем заболевания? Обоснуйте ответ. Каковы Ваши дальнейшие действия. 2. Как нужно было предупредить стафилококковую инфекцию у плода, если беременная женщина (мама ребенка) являлась стафилоносителем? Обоснуйте ответ. 3.Какие лечебные мероприятия необходимы для лечения матери и ребенка? Задача 2 У ребенка на 5-ый день после рождения развилась флегмона поясничной области, которая по показаниям была вскрыта хирургом. 1. Каковы Ваши действия в расшифровке этиологии воспаления и организации лечения? Обоснуйте ответ. 2.Назовите основные методы лабораторной диагностики и их значимость. 3. Какие средства специфической терапии и профилактики этого заболевания Вам известны? Задача 3. Больной с хрониосепсисом неоднократно лечился в клинике, где ему лабораторно была подтверждена стафилококковая этиология сепсиса. Сразу после последнего лечения антибиотиками была взята кровь и проведено бактериологическое исследование. Результат посева оказался отрицательным. 1. Можно ли на основании этого результата считать, что больной окончательно излечен от стафилококкового сепсиса, нужно ли повторить исследование крови? Обоснуйте ответ. 2.Какие группы антибиотиков можно использовать для лечения данной клинической формы стафилококковой инфекции? 3. Как выбрать оптимальный антибиотик для лечения хрониосепсиса? Задача 4. Больному с пневмонией стафилококковой этиологии, протекающей с явлением высокой температуры, выраженной интоксикации, общим тяжелым состоянием, проводится антибиотикотерапия. 1. Как Вы считаете, достаточно ли здесь ограничиться антибиотикотерапией? Обоснуйте ответ. 2.Какие средства специфической терапии необходимы в данном случае? Перечислите и обоснуйте необходимость их использования. 3.Существуют ли средства специфической профилактики стафилококковой инфекции? Блок контроля практических навыков Овладеть методом изучения лабораторой диагностики стафилококконосительства среди студентов в связи с предстоящим посещением стационара строгой асептики. Протокол № 1. Обследование студентов …… группы на носительство патогенного стафилококка в связи с предстоящим посещением стационара строгой асептики Оформить протокол. Ход исследования Результаты I-ый день исследования. Задание: Стерильным тампоном взять мазок из носа, произвести посев на желточно-солевой агар. II-ой день исследования. Задание: 1- описать культуральные свойства выделенной культуры на ЖСА. 2 – приготовить мазок из полученных колоний, окрасить по Граму, микроскопировать. 3- произвести пересев выделенной культуры на скошенный агар с целью накопления. III-ий день исследования. Задание: 1 – описать культуральные свойства накопленной на скошенном агаре культуры. 2 – приготовить мазок из культуры со скошенного агара, окрасит по Граму, микроскопировать с целью подтверждения ее чистоты. 3 – произвести посев выделенной культуры на кровяной агар, в цитратную плазму, в пестрый ряд, содержащий глюкозу и маннит. 4- определить чувствительность выделенной культуры к антибиотикам диско-диффузионным методом. IY-ый день исследования. Задание: 1 - учет результатов биохимической и патогенетической идентификации возбудителя. 2 – учет результатов определения чувствительности возбудителя к антибиотикам. 3 – сделать вывод и написать з а к л ю ч е н и е. МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ГОНОРЕИ Блок информации. Гонорея – инфекционное венерическое заболевание с воспалительными проявлениями в мочеполовых путях и конъюнктиве глаза( у новорожденных). Возбудитель - Neisseria gonorrhoeae относится к семейству Neisseriaceae. Эпидемиология Источник инфекции – больной человек. Инфекция – антропонозная. Путь передачи – контактно-половой. Входные ворота – слизистая уретры,цервикального канала, глаз, прямой кишки. Во внешней среде неустойчив. Патогенез Основной фактор патогенности – пили, с помощью которых гонококк осуществляет адгезию и колонизацию цилиндрического эпителия слизистой мочеполового тракта. Возбудитель всегда остается на месте входных ворот.При его гибели высвобождается эндотоксин, Распространяется по протяжению. Редко, но может проникать в кровь и поражать суставы, вызывая гонорейный артрит. Поражение конъюнктивы глаз называют гонобленнореей. Клиника Инкубационный период от 3 до 4 дней до 3-4 недель. Типичным симптомом острой гонореи является воспаление уретры и шейки матки, сопровождающееся обильными гнойными выделениями. Различают гонорейную инфекцию нижних отделов мочеполового тракта(уретрит, цервицит) и верхних (эндометрит, эпидидимит, воспалительные заболевания тазовых органов). Перенесенное заболевание не оставляет иммунитета к повторному заражению. Лабораторная диагностика. Исследуемый материал – гнойное отделяемое из уретры, цервикального канала, прямой кишки, отделяемое конъюнктивы глаза, сыворотка крови. 1.микроскопический метод – ведущий при острой гонорее. Из исследуемого материала готовят 2 мазка. Один красят по методу Грама, другой – щелочной синькой. При простом способе окраски - диплококки бобовидной формы внутри лейкоцитов (незавершенный фагоцитоз), по Граму - грамотрицательные .При хронической гонорее микроскопический метод используют после провокации. Биологическая провокация – это стимуляция специфических и неспецифических факторов иммунного ответа в виде фагоцитоза и гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ), ее используют перед началом лечения хронической формы инфекции. Для этого больному внутримышечно по схеме вводят гоновакцину. Провокация может быть также механической (бужирование уретры) и алиментарной (прием острых продуктов). Иммунолюминесцентная микроскопия (прямая) - для сероидентификации возбудителя в исследуемом материале. 2.бактериологический метод – посев исследуемого материала на асцит-агар. Рост характеризуется абсолютно прозрачными колониями в виде капель росы. Биохимическая идентификация - разлагает только глюкозу до кислоты. 3. серологический метод – при хронической гонорее.В сыворотке крови определяют специфические антитела с помощью реакции связывания комплемента(РСК) ( по автору реакция Борде-Жангу) и реакция непрямой или пассивной гемагглютинации( РНГА). 4. биологический метод не применяется. 5.аллергический метод – при хронической гонорее. Ставится кожно-аллергическая проба. Аллергеном служит гоновакцина ( взвесь гонококков, убитых нагреванием) Метод молекулярной биологии -цепная полимеразная реакция( ПЦР). Лечение и специфическая профилактика. Специфическая профилактика не разработана. Для неспецифической профилактики гонобленнореи у новорожденных используют введение им в конъюнктивальный мешок сульфацила натрия или 2 капли 3% масляного раствора пенициллина. Этиотропная терапия острой и хронической гонореи проводится антибиотиками пенициллинового, тетрациклинового ряда. Блок контроля теоретических знаний. Вопросы для контроля 1. Дайте общую характеристику возбудителю гонорейной инфекции. 2. Назовите источники гонококковой инфекции, пути передачи, входные ворота. 3.Назовите основные клинические формы гонорейной инфекции 4. Назовите исследуемый материал и основные методы лабораторной диагностики острой гонореи. 5. Опишите морфологическую картину мазка из исследуемого материала при гонорейной инфекции. 6. Назовите исследуемый материал и методы лабораторной диагностики хронической гонореи. Каковы ее особенности? 7. Назовите средства специфической , этиотропной терапии гонореи. Тестовый контроль обязательного уровня знаний. Выберите один правильный ответ. 1.Назовите к какому роду относится возбудитель гонореи а) Staphуlococcus б)Streptococcus в)Esсherichia г)Neisseria д)Corynebacterium 2. Выберите методы лабораторной диагностики острой гонореи а).микроскопический б).бактериологический в).серологический г).аллергический д).биологический 3. Выберите методы лабораторной диагностики хронической гонореи а).микроскопический б).бактериологический в).серологический г).аллергический д).биологический 4.Укажите морфологические признаки возбудителя гонореи а).грамотрицательный б).грамположительный в).диплококк г).имеет бобовидную форму д). имеет кокковую форму е). имеет пили 5.Перечислите патогенетические факторы гонококка а).ферменты агрессии б).капсула в).пили г).эндотоксин д)экзотоксин |