Гнойно-воспалительные, желудочно-кишечные, анаэробные инфекции. Тема занятия. Микробиологические аспекты лабораторной
 Скачать 444.63 Kb.
|
|
Ситуационные задачи Задача 1. У больного с диагнозом: «Хроническая гонорея» при микроскопии исследуемого материала возбудитель в мазке обнаружен не был. 1.Что необходимо в данном случае предпринять, чтобы снять или подтвердить диагноз? 2.Составьте алгоритм лабораторной диагностики данного клинического случая. 3.Антибиотики каких групп необходимо использовать для лечения в данном случае? Задача 2. У новорожденного ребенка был поставлен диагноз: « Гнойный конъюнктивит «. Мать ребенка на учете в кожно- венерологическом диспансере не состоит и заболевание гонореей у себя отрицает. 1. Ваш алгоритм действия в сложившейся ситуации. 2. Можно ли в данном случае подозревать мать ребенка как источник инфекции ? 3.Какие еще возбудители могли вызвать данную патологию у новорожденного? Задача 3. В лабораторной диагностике острой гонореи ведущим методом является микроскопический. 1.Опишите характерное расположение возбудителя в мазке. 2. Какие методы окраски возбудителя используются при микроскопии? 3.При хронической гонорее микроба в мазке может не наблюдаться. Является ли это доказательством отсутствия гонореи? Обоснуйте ответ. Блок контроля практических навыков Овладеть методом микроскопической диагностики гонореи. Протокол 1. Изучить микроскопическую картину мазка из уретрального гноя, окрашенного щелочной синькой. Сделать заключение. Зарисовать. Протокол 2. Изучить серологическую реакцию связывания комплемента ( РСК), используемую для диагностики гонореи. Описать, как выглядит положительный и отрицательный результаты. Оформить протоколы МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ МЕНИНГИТА Блок информации. Менингит – инфекционное респираторное заболевание с гнойно-воспалительными проявлениями мозговых оболочек спинного и головного мозга. Возбудитель - Neisseria meningitidis относится к семейству Neisseriaceae. Эпидемиология Источник инфекции – больной человек либо бактерионоситель. Инфекция – антропонозная. Путь передачи инфекции – воздушно-капельный. Входные ворота – слизистая носоглотки. Во внешней среде неустойчив. Патогенез С помощью пилей и белков наружной мембраны возбудитель осуществляет адгезию и колонизацию эпителия носоглотки, где происходит его первичное размножение. Из носоглотки возбудитель проникает в лимфатические сосуды и в кровь, а затем в центральную нервную систему, где оседает на мягких мозговых оболочках и, интенсивно размножаясь, вызывает их воспаление. При гибели возбудителя выделяется эндотоксин, обладающий пирогенным, некротическим и летальным действием. Главный фактор патогенности – капсула, защищающая менингококк от фагоцитоза. Клиника Инкубационный период 2-4 дня. Менингококки могут вызывать следующие клинические формы болезни: назофарингит (наиболее легкая форма); менингококцемия (менингококковый сепсис); эпидемический цереброспинальный менингит. Клинические проявления – головная боль, сыпь ,симптомы интоксикации. После перенесенного заболевания формируется прочный длительный антимикробный иммунитет. Лабораторная диагностика. Исследуемый материал – ликвор, кровь. Ликвор перед исследованием центрифугируют. 1. микроскопический метод – ведущий. Из осадка спинномозговой жидкости готовят 2 мазка. Один красят по методу Грама, другой – щелочной синькой. При окраске по методу Грама в мазке – грамотрицательные диплококки бобовидной формы. При простом методе окраски – диплококки внутри лейкоцитов (незавершенный фагоцитоз). Для определения серотипа менингококка ставится реакция преципитации надосадочной жидкости с преципитирующей антименингококковой сывороткой. По О – антигену у возбудителя различают 13 серотипов. Основные - А, В,Д,W-135, Y. 2. бактериологический метод. Посев исследуемого материала (осадок спинномозговой жидкости) осуществляют на кровяной агар, где возбудитель дает дает нежные, прозрачные колонии, размером 2-3 мм. Полученные колонии микроскопируют по методу Грама (в мазках из колоний грамотрицательные диплококки). Серотип менингококка определяют в реакции агглютинации чистой культуры с агглютинирующей антименингококковой сывороткой. Биохимическая идентификация - разлагает глюкозу и мальтозу до кислоты. Иммунолюминесцентная микроскопия (прямой метод) - для экспресс - индикации антигена менингококка в исследуемом материале. Метод встречного иммуноэлектрофореза используют для экспресс – индикации возбудителя в исследуемом материале 3.серологический метод на 5-6 день заболевания: реакция непрямой или пассивной гемагглютинации (РНГА), иммуноферментная реакция (ИФА) с парными сыворотками. 4.аллергический метод не применяется. 5. биологический метод не применяется. Особенности лабораторной диагностики менингококкового носительства Исследуемый материал – слизь из носоглотки. К числу нормальных обитателей носоглотки относятся следующие нейссерии: Moraxella catarrhalis, Neisseria flavescens, Neisseria sicca, Branchamella. В связи с этим возникает необходимость их дифференциации. Neisseria meningitidis: в отличие от остальных разлагает глюкозу и мальтозу до кислоты, растет только на белковых средах (кровяной агар). Сероидентификация возбудителя - в реакции агглютинации (РА) со специфической сывороткой, соответствующих серотипов. Лечение и специфическая профилактика. Для специфической профилактики – вакцина менингококковая типа А. Для специфической терапии и экстренной профилактики применяют нормальный человеческий иммуноглобулин. Для этиотропной терапии - сульфаниламидные препараты и антибиотики (пенициллин, рифампицин). Блок контроля теоретических знаний. Вопросы для контроля 1. Дайте общую характеристику возбудителю менингококковой инфекции. 2. Назовите источники менингококковой инфекции, пути передачи, входные ворота. 3.Назовите основные клинические формы менингококковой инфекции 4. Перечислите факторы патогенности менингококка 5. Назовите исследуемый материал и основные методы лабораторной диагностики менингита. 6. Опишите морфологическую картину мазка из исследуемого материала при менингококковой инфекции. 7. Назовите особенности лабораторной диагностики менингококкового носительства. 8. Назовите средства специфической и этиотропной терапии менингита. 9. Какова специфическая профилактика менингита? Тестовый контроль обязательного уровня знаний Выберите правильный ответ. 1.Назовите к какому роду относится возбудитель менингита. а) Staphуlococcus б)Streptococcus в)Esсherichia г)Neisseria д)Corynebacterium 2.Выберите методы лаб. диагностики менингита а).микроскопический б).бактериологический в).серологический г).аллергический д).биологический 3. Выберите методы лаб. диагностики менигококкового носительства а).микроскопический б).бактериологический в).серологический г).аллергический д).биологический 4.Укажите морфологические признаки возбудителя менингита а).грамотрицательный б).грамположительный в).диплококк г).имеет бобовидную форму д). имеет кокковую форму 5.Перечислите патогенетические факторы менингококка а).ферменты агрессии б).капсула в).пили г).эндотоксин д) имеет пили Ситуационные задачи Задача 1 У больного с клинической картиной менингита взят материал для исследования: слизь из носоглотки и ликвор. В мазке, приготовленном из материала носоглотки, обнаружен грамотрицательный диплококк, а в мазке из ликвора он не обнаружен. 1.Можно ли утверждать, что у больного эпидемический менингококковый менингит? 2.Что может означать наличие грамотрицательного диплококка в носоглотке? Задача 2. У больного ребенка врач «скорой помощи» по ряду клинических симптомов заподозрил генерализованную менингококковую инфекцию. 1. Каким антибиотиком лучше оказать неотложую помощь ребенку: левомицетином или пенициллином если учесть,что бактерицидный эффект действия антибиотика может спровоцировать бактериальный шок.Обоснуйте ответ. 2. Нужно ли проводить противоэпидемические мероприятия в очаге инфекции? В чем они будут заключаться? Блок контроля практических навыков Овладеть методом микроскопического изучения менингококковой инфекции. Протокол 1.Описать готовые мазки из спинномозговой жидкости. Сделать заключение. Протокол 2 Составить схему бактериологической диагностики менингококковой инфекции. Оформить протоколы МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ПНЕВМОКОККОВОЙ ИНФЕКЦИИ Блок информации. Пневмония – острое или хроническое гнойно - воспалительное заболевание легких, одним из возбудителей которой является Streptococcus pneumoniaе, относящийся к семейству Streptococcaceae. Эпидемиология Источник инфекции – больной человек, бактерионоситель. Инфекция – антропонозная. Путь передачи инфекции – контактный, воздушно-капельный. Входные ворота – слизистая дыхательных путей. Во внешней среде неустойчив. Патогенез Через верхние дыхательные пути Streptococcus pneumoniaе проникает в нижние отделы дыхательных путей, где способствует формированию воспалительных инфильтратов, сопровождающихся нарушением гомеостаза легочной ткани Основной фактор вирулентности – капсула, обладающая антифагоцитарным свойством. Из легких возбудитель может проникать в плевральную полость и перикард, либо гематогенно диссеминировать и вызывать эндокардиты, менингиты, сепсис, поражать суставы. Большую часть пневмококковых антител составляют антитела к антигенам капсулы.Существует более 23 серотипов возбудителя. Клиника Основные клинические проявления пневмонии – внезапное начало, высокая температура, кашель, боли в груди. Пневмококк также может поражать роговицу глаза (ползучая язва роговицы) и вызывать нагноительные процессы лор- органов, серозных оболочек и т.д.Постинфекционный иммунитетнестойкий,типоспецифический, формируются антитела к типовому капсульному полисахариду. Лабораторная диагностика. Исследуемый материал – мокрота, гной, спинномозговая жидкость, кровь. 1. микроскопический метод – ведущий. Из исследуемого материала готовят два мазка, один из которых окрашивают по Граму, а другой по Бурри – Гинсу для обнаружения капсулы. В мазках по Граму – грамположительные диплококки ланцетовидной формы, по Бурри-Гинсу – диплококки с выраженной капсулой. Для определения серотипа пневмококка используют реакцию микроагглютинации на стекле с типовыми пневмококковыми сыворотками и феномен набухания капсулы. В присутствии гомологичной сыворотки наблюдается склеивание пневмококка и резкое набухание капсулы пневмококка. Реакция микроагглютинации ставится с исследуемым материалом (мокрота, гной, осадок спинномозговой жидкости). 2. бактериологический метод. Выделяют чистую культуру пневмококка путем посева исследуемого материала (мокрота , гной, осадок спинномозговой жидкости) на кровяной агар, где возбудитель дает мелкие, округлой формы колонии, окруженные зеленой зоной. Кровь засевают на 1% сахарный бульон – для пневмококка характерен придонно- пристеночный рост. Для дифференцировки пневмококка от зеленящего стрептококка используется проба с инулином (пневмококк ферментирует инулин до кислоты), проба с оптохином (оптохин угнетает рост пневмококка), а также чувствительность к желчи (пневмококк лизируется желчью). 3.серологический метод: иммуноферментная реакция(ИФА), непрямой иммунофлюоресцентный метод (ИЛ), реакция латекс-агглютинации на стекле. 4.аллергический метод не применяется. 5. биологический метод не применяется. Лечение и специфическая профилактика. Для специфической профилактики – поливалентная вакцина, приготовленная из высокоочищенных капсульных антигенов. Этиотропная терапия проводится антибиотиками после определения чувствительности к ним пневмококка (цефалоспорины 2-го и 3-го поколения, фторхинолоны, полусинтетические β-лактамные антибиотики). Блок контроля теоретических знаний Вопросы для контроля 1.Дайте общую характеристику возбудителю пневмококковой инфекции. 2. Назовите источники пневмококковой инфекции, пути передачи, входные ворота. 3.Назовите основные клинические формы пневмококковой инфекции 4. Назовите факторы патогенности пневмококка. 5. Назовите исследуемый материал и основные методы лабораторной диагностики пневмонии. 6. Опишите морфологическую картину мазка из исследуемого материала при пневмококковой инфекции. 7.Назовите основные тесты для дифференцировки пневмококка от зеленящего стрептококка. 8. Какие тесты используются для серотипирования пневмококка. 9. Назовите средства этиотропной терапии пневмонии. 10. Какова специфическая профилактика пневмококковой пневмонии? Тестовый контроль обязательного уровня знаний Выберите один правильный ответ. 1.Назовите к какому роду относится возбудитель пневмококковой пневмонии. а) Staphуlococcus б)Streptococcus в)Esсherichia г)Neisseria д)Corynebacterium 2.Выберите методы лабораторной диагностики пневмококковой пневмонии. а).микроскопический б).бактериологический в).серологический г).аллергический д).биологический 3.Укажите морфологические признаки возбудителя пневмококковой пневмонии а).грамотрицательный б).грамположительный в).диплококк г).бобовидная форма д). имеет кокковую форму е). ланцетовидную форму д). имеет капсулу 4.Перечислите патогенетические факторы пневмококка а).ферменты агрессии б).капсула в).пили г).эндотоксин д)экзотоксин Ситуационные задачи Задача 1 В мокроте больного обнаружены грамположительные диплококки вытянутой формы, окруженные капсулой. На кровяном агаре рост с зеленящим эффектом. 1. Определите род и вид обнаруженного в мокроте возбудителя. 2.С каким возбудителем необходимо дифференцировать пневмококк? Блок контроля практических навыков. Овладеть методом лабораторной диагностик пневмококковой инфекции Протокол № 1 Составить схему лабораторной диагностики пневмококковой инфекции. Оформить протокол. МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ желудочно-кишечных инфекций Блок информации. Наибольший интерес из кишечно-тифозной группы бактерий представляют три основных рода: Esherichia, Salmonella, Shigella, которые являются возбудителями кишечных инфекции (коли-инфекция, брюшной тиф, паратифы, сальмонеллезы, дизентерия). Все бактерии этой группы имеют одинаковые морфологические и культуральные свойства: это грамотрицательные палочки, спор и капсул не образуют, сальмонеллы и эшерихии подвижные, шигеллы неподвижные, в МПБ дают равномерное помутнение, на пластинчатом МПА – бесцветные, полупрозрачные, округлые колонии с фестончатыми (сальмонеллы и эшерихии) и ровными (шигеллы) краями. Первичное распознавание бактерий кишечно- тифозной группы осуществляют на дифференциально-диагностических средах с содержанием лактозы – это среды Эндо, Левина, Плоскирева, Ресселя. Эшерихии разлагают лактозу до кислоты и газа, сальмонеллы и шигеллы не действуют на этот углевод. Среда Эндо содержит лактозу, фуксин (индикатор), который в щелочной среде приобретает розовый цвет, а в кислой – красный. Эшерихии на среде Эндо дают малинового цвета колонии, сальмонеллы и шигеллы – бесцветные. Среда Левина содержит лактозу и индикатор – эозинметиленовую синь, который в щелочной среде приобретает сиреневый цвет, а в кислой – темно-синий. Эшерихии на среде Левина дают темно-синие колонии, сальмонеллы и шигеллы – бесцветные.Среды Эндо и Левина используют для выделения чистой культуры эшерихий. Среда Плоскирева (бактоагар Ж) содержит лактозу с индикатором – нейтральный красный( краситель) и дополнительные компоненты: соли желчных кислот, подавляющие рост эшерихий и бриллиантовый зеленый, подавляющий рост грамположительной микрофлоры. Среда Плоскирева используется для выделения чистой культуры сальмонелл и шигелл, которые дают на этой среде бесцветные колонии. Эшерихии на среде Плоскирева дают красного цвета колонии. Среда Ресселя содержит 1% лактозы, 0,1% глюкозы, индикатор Андреде. Среду готовят в виде скошенного агара, нижняя часть ее в виде столбика, а верхняя – в виде скошенной поверхности. Посев чистой культуры бактерий производят на скошенную поверхность и уколом в столбик среды. Эшерихии, ферментирующие оба углевода (глюкоза и лактоза), изменяют цвет всей среды. Сальмонеллы и шигеллы, ферментирующие один углевод (глюкоза), изменяют цвет столбика и скошенная поверхность среды Ресселя. Разрывы столбика среды свидетельствуют о газообразовании. Коли-инфекция (эшерихиоз) Блок информации Острая кишечная инфекция, вызываемая патогенными вариантами кишечной палочки (E.coli), протекающая с синдромом гастроэнтерита и гастроколита. E.coli имеет три антигена: соматический О-антиген (термостабильный), капсульный К-антиген (термолабильный), жгутиковый Н-антиген (термолабильный). Капсульный К-антиген неоднороден, имеет три фракции –A,B,L. По О-антигену эшерихии делятся на О-группы. Внутри каждой О-группы бактерии различаются по Н- и К-антигену. Патогенные варианты кишечной палочки содержат ОК(В)-антиген. Принято подразделять патогенные для человека кишечные палочки на четыре группы: энтеропатогенные (ЭПКП), энтероинвазивные (ЭИКП), энтеротоксигенные (ЭТКП) и энтерогеморрагические (ЭГКП) кишечные палочки. Эпидемиология Источник инфекции – больные, бактерионосители. Пути передачи инфекции – алиментарный (фекально-оральный), иногда контактно-бытовой. Факторы передачи – молочные продукты, вода. Входные ворота – слизистая жкт. Патогенез Инкубационный период не более трех дней. В этот период возбудитель проникает с пищей в жкт, где разрушается с выделением и накоплением эндотоксина. ЭПКП и ЭТКП вызывают интоксикацию, лихорадку, слабость, тошноту, рвота и т.д. ЭИКП вызывает дизентериеподобную коли-инфекцию, размножается внутри эпителиальных клеток с продукцией эндотоксина, с последующим разрушением и отторжением эпителиальных клеток, формированием поверхностных микроязв.ЭГКП вызывают геморрагический колит с тяжелыми осложнениями в виде тромбоцитопенической пурпуры. Клиника Клинически – слизисто-кровянистый стул. ЭПКП (возбудитель коли-энтеритов), ЭТКП (возбудитель холероподобных заболеваний) размножаются на поверхности эпителиальных клеток. Патологический процесс при коли-энтеритах (ЭПКП) связан с действием эндотоксина, а ЭТКП (холероподобные заболевания) образует еще и энтеротоксин. Постинфекционный иммунитет группоспецифический, слабонапряженный. |