Гнойно-воспалительные, желудочно-кишечные, анаэробные инфекции. Тема занятия. Микробиологические аспекты лабораторной
 Скачать 444.63 Kb.
|
|
Лечение и профилактика дизентерии. Этиотропная терапия - Антибиотики левомицетинового ряда.Фторхинолоны,цефалоспорины 3 поколения. Специфическая терапия - применение поливалентного дизентерийного бактериофага. Специфическая профилактика дизентерии не разработана. Блок контроля теоретических знаний. Вопросы для контроля. 1. Дайте общую характеристику возбудителю дизентерии. 2. Назовите основные виды шигелл, являющихся возбудителями дизентерии. 3. Назовите источники дизентерийной инфекции, пути передачи, входные ворота. 4. Назовите клинические проявления дизентерии. 5. Назовите исследуемый материал и основные методы лабораторной диагностики дизентерии. 6. Назовите вспомогательные методы обнаружения шигелл в исследуемом материале. 7. Назовите средства этиотропной терапии дизентерии. 8. Какова специфическая профилактика дизентерии? Тестовый контроль обязательного уровня знаний Выберите один правильный ответ. 1.Назовите к какому роду относится возбудитель дизентерии а). Staphуlococcus б). Salmonella в).Esсherichia г).Shigella д).Corynebacterium 2. Выберите возбудителей дизентерии. а).кишечная палочка б).сальмонелла тифа в).шигелла Зонне г).шигелла Флекснера д).сальмонелла энтеритидис е).сальмонелла паратифа Б ж).шигелла дизентерии з).энтерококк е).шигелла Бойда 3. Выберите основные методы лабораторной диагностики дизентерии а).микроскопический б).бактериологический в).серологический г).аллергический д).биологический 4.Укажите морфологические признаки возбудителя дизентерии а).грамотрицательный б).грамположительный в).палочковидная форма г).имеет бобовидную форму д). имеет кокковую форму е). перитрих ж).неподвижен 5.Перечислите патогенетические факторы шигелл а).ферменты агрессии б).эндотоксин в).экзотоксин г).пили Ситуационные задачи Задача 1 В инфекционную клинику поступил больной с явлениями острого колита и общей интоксикации. Врач приемного покоя заподозрил дизентерию. 1.Каков патогенез данного заболевания? 2. Как уточнить диагноз (схема диагностики дизентерии)? 3. Назначьте этиотропную терапию. Блок контроля практических навыков. Изучить лабораторную диагностику дизентерии Протокол № 1 Определить видовую принадлежность шигелл Поставить реакцию агглютинации с диагностическими сыворотками для идентификации сальмонелл. Оформить протокол. Блок информации Сальмонеллез - острая кишечная инфекция, характеризующаяся преимущественным поражением слизистой желудочно- кишечного тракта. Возбудители сальмонеллеза относятся к семейству Enterobacteriaceae, роду Salmonella. Насчитывается более 2200 видов сальмонелл. Наиболее частые возбудители сальмонеллезов: S.typhimurium, S.enteritidis, S.choleraesuis, S.heidelberg, S.anatum, S.newsport, S.derby. Эпидемиология Источник инфекции – больные люди и животные (крупный рогатый скот, свиньи, овцы, лошади, водоплавающие птицы), бактерионосители. Путь передачи инфекции – алиментарный (пищевой и водный). Факторы передачи инфекции - пищевые продукты (мясо инфицированных животных или птиц, их яйца). Инфицирование мяса может происходить при жизни самого животного во время его болезни, при разделке туш животных - бактерионосителей (обсеменение мяса содержимым кишечника при его ранении), в процессе транспортировки, хранения, неправильной кулинарной обработки. При тесном общении с больным человеком или животными возможен контактно-бытовой путь передачи инфекции. Входные ворота – слизистая желудочно-кишечного тракта. Сальмонеллы относительно устойчивы к различным факторам внешней среды: к солению, копчению и действию кислот. Для разрушения бактерий требуется качественно проводимая термическая обработка. Так для полной инактивации сальмонелл, находящихся в куске мяса массой 400 г, необходимо варить его не менее 2,5 часов. Патогенез Инкубационный период в среднем 12-24 часа. За этот период сальмонеллы из ротовой полости проникают в ЖКТ, достигают тонкого кишечника. Преодолев эпителиальный барьер тонкой кишки, проникают в толщу тканей, захватываются макрофагами, где не только размножаются, но и частично погибают с освобождением эндотоксина. Эндотоксин поражает нервно-сосудистый аппарат кишечника и повышает проницаемость клеточных мембран, что способствует дальнейшему распространению сальмонелл по лимфатическим путям и занесению их в мезентериальные лимфатические узлы. Эндотоксин оказывает как местное действие, так и способствует развитию симптомов общей интоксикации организма. Инфекционный процесс на этой стадии заболевания может завершиться (локализованная форма). При тяжелом течении возможна кратковременная бактериемия. Генерализованная форма сальмонеллеза возникает при глубоком нарушении барьерной функции лимфатического аппарата кишечника и сопровождается длительной бактериемией, в результате чего сальмонеллы заносятся в различные внутренние органы, вызывают в них формирование вторичных гнойных очагов (септикопиемия). Повышение секреции жидкости в кишечнике связано с активацией аденилатциклазы и гуанилатциклазы энтероцитов сальмонеллезным энтеротоксином и последующим нарастанием внутриклеточной концентрации биологически активных веществ (цАМФ, цГМФ и др.). Это ведет за собой поступление в просвет кишечника большого количества жидкости, калия, натрия и хлоридов. Клиника У больных развивается рвота и понос, интоксикация организма. Появившиеся симптомы больные четко связывают с приемом недоброкачественной пищи.Часто появляются симптомы обезвоживания организма.Постинфекционный иммунитетпри сальмонеллезе малонапряженный и кратковременный. Лабораторная диагностика. Исследуемый материал – рвотные массы, промывные воды желудка, испражнения, желчь, кровь. 1.Микроскопический метод – имеет ориентировочное значение. Морфологически сальмонеллы представляют собой грамотрицательные палочки с закругленными концами, подвижны. перитрихи, спор и капсул не образуют. 2. Бактериологический метод: Первый день – посев исследуемого материала (рвотные массы, промывные воды желудка, испражнения, желчь) на плотные дифференциальные питательные среды Левина, Плоскирева, висмут-сульфит агар. Если исследуемым материалом является кровь, то посев производят на жидкие питательные среды: 10% желчный бульон или среду Раппорт. Посевы выдерживают в термостате при 37 C а течение суток. Забор исследуемого материала следует производить до начала лечения. Второй день. На среде Левина и Плоскирева, отмечают бесцветные колонии сальмонелл, не разлагающие лактозы. Бактерии из бесцветных колоний и из жидких питательных сред исследуют в окрашенных по Граму мазках на чистоту и в «висячей капле» на подвижность, пересевают на скошенный агар и среду Ресселя. Посевы ставят в термостат при 37 C на 24 часа. Третий день. Проверяют чистоту культуры со скошенного агара в мазках по Граму. Отмечают характер роста на среде Ресселя: сальмонеллы, разлагающие только глюкозу, дают двухцветное изменение столбика среды. Идентификация возбудителя проводится в реакции агглютинации на стекле со смесью монорецепторных групповых сальмонеллезных 0 -сывороток с целью определения серогруппы выделенной сальмонеллы. При положительном результате по таблице Кауфмана_- Уайта определяют, какие виды сальмонелл относятся к данной группе. Затем ставят реакцию агглютинации на стекле с видовыми монорецепторными сальмонелллезными Н-сыворотками, относящимися к данной группе (см. таблицу в учебнике). 3. Серологический метод – реакция непрямо гемагглютинации( РНГА) дает положительные результаты на 5 день болезни. Специфические антитела определяются в диагностическом титре 1:200.Реакцию агглютинации( РА) ставится на 7-8 день заболевания и считается положительной, если специфические антитела определяются при разведении сыворотки больного не менее 1:200 (диагностический титр). 4. Биологический метод не применяется. 5.Аллергический метод – не применяется. Сальмонеллезы (пищевые токсикоинфекции) необходимо дифференцировать с пищевыми интоксикациями, причиной которых является экзотоксин, выделяемый такими микроорганизмами, как стафилококк, палочка ботулизма, палочка перфрингенс тип F (см таблицу). Таблица дифференциальной диагностики пищевых токсикоинфекций и пищевых интоксикаций Дифференциальный признак Пишевые токсикоинфекции Пищевые интоксикации 1 2 3 1.Возбудитель 2.Условия развития заболевания 3.Виды пищевых продуктов 4.Патогенез 5.Клиника. 6.Методы лабора- торной диагности- ки. 7.Исследуемый материал. 8.Питательные среды. 9.Специфическая Обладает слабой патогенностью (имеет слабый эндотоксин). Это нормальные обитатели кишечника человека и жи- вотных: кишечная палочка, протей, энтерококк, сальмонеллы . Возбудитель предварительно размножа- ется в пищевом продукте. Мясо здоровых и больных животных при разделке туш и ранении кишечника обсеменяется его содержимым (кишеч- ная палочка, энтерококк, сальмонеллы). Овощи и фрукты длительнохранившиеся (часто инфицированы протеем). Возбудитель в большом количестве с пищевым продуктом поступает в желудок, где разрушается с выделением эндотоксина, который раздражает сли- зистую желудка и кишечниеа, нарушая ее проницаемость, проникает в кровь, вызывая бактериемию. Инкубационный период 6-8 час. Это время требуется для накопления эндо- токсина. Характерные клинические при- знаки: лихорадка – не менее 38 0 С, рвота, жидкий стул. Микроскопический – ориентировочный. Бактериологический – ведущий. Серологический – не применяется. Аллергический – не применяется. Биологический – не применяется. Пищевые продукты, рвотные массы, промывные воды желудка, кровь. Среда Плоскирева, Висмут-сульфит-агар для выделения сальмонелл. Среда Эндо, Левина для выделения кишечной палочки. ЖСА для выделения стафилококка. Посев по Шукевичу для выделения протея. Нет. Возбудитель выделяет экзотоксин, не разрушающийся пищеварительными фер- ментами. Это: палочка ботулизма, стафи- лококк, палочка перфрингенс тип F. Возбудитель предварительно размножает- ся в пищевом продукте с выделением и накоплением экзотоксина. 1.Консервы домашнего приготовления: мясные для палочек перфрингенс типа F, рыбные (особенно осетровые), овощные (чаще грибные) для палочки ботулизма. 2.Продукты, содержащие сахар, масло, молоко для стафилококка (крем, торты, мороженое, молоко, кефир и т.д.). Экзотоксин (энтеротоксин стафилококка и палочки перфрингенс типа F; энтеротоксин и нейротоксин палочки ботулизма) в большом количестве с пище- вым продуктом поступает в желудок, раздражая слизистую желудка и кишечника. Нейротоксин палочки ботулизма поражает ядра черепномозговых нервов. Инкубационный период 1-2 часа для ста- филококка и палочки перфрингенс типа F; 2-4 дня для палочки ботулизма. Характерные клинические признаки: температура тела нормальная или субфебрильная (не более 38 0 С), рвота, жидкий стул. Для ботулизма характерна еще клиника поражения черепно-моз- говых нервов: шум в ушах, двоение в глазах, нарушение глотания, речи и т.д. Микроскопический Бактериологический Серологический – не применяется Аллергический – не применяетя Биологический – биопробы на животных с целью обнаружения и идентификации экзототоксина. Пищевые продукты, рвотные массы, промывные воды желудка. ЖСА для выделения стафилококка. Среда Китта -Тароцци для выделения палочки ботулизма перфрингенс типа F. Антитоксические сыворотки. терапия. Лечение и профилактика сальмонеллеза. Этиотропная терапия –антибиотики левомицетинового ряда, бета-лактамы ( ампициллин),аминогликозиды ( канамицин, гентамицин), цефалоспорины ( цепорин). Специфическая терапия заключается в применении поливалентного сальмонеллезного бактериофага. Специфическая профилактика сальмонеллеза не разработана. Блок контроля теоретических знаний. Вопросы для контроля. 1. Дайте общую характеристику возбудителю сальмонеллезной инфекции. 2. Назовите основные виды сальмонелл, являющихся возбудителями сальмонеллеза. 3. Назовите источники сальмонеллезной инфекции, пути передачи, входные ворота. 4.Назовите основные клинические формы сальмонеллезной инфекции. 5. Назовите исследуемый материал и основные методы лабораторной диагностики сальмонеллеза. 6. Опишите морфологическую картину мазка из исследуемого материала при сальмонеллезной инфекции. 7. Назовите средства этиотропной терапии сальмонеллеза и пищевых интоксикаций. 8. Какова специфическая профилактика сальмонеллеза? 9.Назовите основные отличительные признаки пищевых токсикоинфекций и пищевых интоксикаций. Тестовый контроль обязательного уровня знаний. Выберите один правильный ответ. 1.Назовите к какому роду относится возбудитель сальмонеллеза а) Staphуlococcus б) Salmonella в)Esсherichia г)Shigella д)Corynebacterium 2. Выберите возбудителей пищевых интоксикаций. а).кишечная палочка б).сальмонелла паратифа А в)палочка перфрингенс тип А г)палочка ботулизма д)сальмонелла энтеритидис е)протей ж).стафилококк з)энтерококк 3. Выберите основные методы лабораторной. диагностики сальмонеллеза а).микроскопический б).бактериологический в).серологический г).аллергический д).биологический 4.Укажите морфологические признаки возбудителя сальмонеллеза а).грамотрицательный б).грамположительный в).палочковидная форма г).имеет бобовидную форму д). имеет кокковую форму е). перитрих ж).неподвижен 5.Перечислите патогенетические факторы сальмонелл а).ферменты агрессии б).эндотоксин в).экзотоксин г).пили Ситуационные задачи Задача 1. У студента 3 курса мединститута после посещения столовой через 5 часов возникла тошнота,рвота, плохое самочувствие.Данное состояние ( со слов пострадавшего) возникло после приема в пищу котлет. 1. Может ли данное состояние иметь инфекционную природу. 2.Как правильно поставить диагноз и какой исследуемый материл следует взять у больного? 3.Какие возбудители могли вызвать данную патологию? 4.Существуют ли средства специфической профилактики и терапии данной патологии? Блок контроля практических навыков. Изучить лабораторную диагностику сальмонеллезной инфекции. Протокол № 1 Определить видовую принадлежность сальмонелл, выделенных от больного пищевой токсикоинфекцией. Поставить реакции агглютинации с адсорбированными видовыми,а затем типовыми сальмонеллезными сыворотками, для идентификации сальмонелл. Оформить протоколы. Микробиологические аспекты лабораторной диагностики анаэробных бактериальных инфекций. Блок информации В основе систематики бактерий этой группы лежит их метаболическая активность.Облигатные анаэробы для своего дыхания не используют молекулярный кислород. Их выращивают в анаэробных условиях с использованием специальных питательных сред или методов культивирования.Включают патогенные и условно-патогенные бактерии, относящиеся к разным родам , видам и вызывающие различные заболевания. Классификация палочковидных форм бактерий с анаэробным типом дыхания. Принципы классификации Окраска по Граму Гр+ Гр – Спорообразование спора + спора - спора - Семейство Bacillaceae Lactobacillaceae Actinomycetaceae Bacteroidaceae Род Clostridium Lactobacillus Actinomycetes Bifidobacterium Bacteroides Prevotella Fusobacterium Эпидемиология Микроорганизмы, относящиеся к роду клостридий ( вызывают клостридиозы) насчитывают около 90 видов. Подразделяются на раневые (столбняк и газовая гангрена) и энтеральные (ботулизм и пищевая интоксикация, вызванная Cl. рerfringens) Газовая гангрена. Раневая инфекция, вызываемая Сl.perfringens, Cl novyi, Cl histolyticum, Cl septicum, характеризуется быстро наступающим и распространяющимся некрозом мышечной ткани,отеком, газообразованием в тканях, тяжелой интоксикацией.Возбудители обитают в кишечнике животных, выделяя их во внешнюю среду, где они образуют споры.Механизм передачи инфекции- контактный ( раневой). Патогенез заболевания и клиника Все клостридии выделяют очень сильный экзотоксин и относятся к токсигенным микроорганизмам.Являясь облигатными анаэробами, они выделяют летучие жирные кислоты ,каждый представитель которых имеет свой набор.По этому свойству можно определить вид микроба ,не выделяя чистую культуру.Экзотоксины Cl perfringens оказывают летальное,гемолитическое,кардиотоксическое,некротизирующее действие .Крепитация тканей из-за пузырьков газа возникает в результате ферментативного действия токсина, что обусловливает и выраженный плотный отек тканей. Cl histolyticum вызывает расплавление тканей благодаря большому количеству протеолитических ферментов.Вызывает газовую гангрену в ассоциации с другими анаэробами. Экзотоксины Cl. histoliticum и Cl. septicum оказывают некротическое, летальное, гемолитическое действие. Ферменты агрессии всех клостридий газовой гангрены вызывают деструкцию и разрушение тканей. Со стороны макроорганизма интересна защитная реакция- в гистологических препаратах из пораженных тканей отсутствуют фагоциты. Лабораторная диагностика Исследуемый материал: биоптаты пораженных тканей, перевязочный и шовный материал, секционный материал. 1 микроскопический метод. В материале из внешней среды и кишечника все возбудители образуют споры. Крупные,овальные, они могут распологаться центрально и субтерминально, при этом спора превышает поперечник клетки. Дифференциальная окраска спор по методу Ожешке.Вегетативные формы –короткие крупные палочки с обрубленными концами, окраска по Граму +. Отличие Cl.perfringens от остальных:имеет капсулу и неподвижная.Дифференциальная окраска капсул по Бурри-Гинсу. 2 микробиологический метод. Посев материала в большом количестве на среду Китта-Тароцци, затем накопление культуры на среде Цейслера. Идентификация – по антигенным свойствам продуцируемых токсинов ( существует 6 сероваров отА до F) в реакции нейтрализации (РН) на животных со специфическими антитоксическими сыворотками. Биохимическая идентификация –бактерии ферментируют углеводы, разжижают желатин,сбраживают молоко, образуют лецитиназу. 3 серологический метод не применяется 4 аллергический методы не применяется 5 биологический метод заражение лабораторных животных для выявления дермотонекротического,гемолитического и летального действия экзотоксина микроба. |