|
Учебно-методическое пособие. Учебнометодическое пособие для самоподготовки и самостоятельной работы студентов лечебного факультета по микробиологии, вирусологии
ЗАНЯТИЕ 15 АНТИТЕЛА. РЕАКЦИИ ИММУНИТЕТА: РЕАКЦИЯ
НЕЙТРАЛИЗАЦИИ ТОКСИНОВ АНТИТОКСИНАМИ,
РЕАКЦИЯ ПРЕЦИПИТАЦИИ, РЕАКЦИЯ АГГЛЮТИНАЦИИ
Раздел «Иммунитет» - важнейший в нашем курсе. Успешное освоение этого раздела возможно только при систематическом и последовательном изучении всех его тем. Понятие об антигенах и антителах, о структурных основах специфичности приобретённого иммунитета, процессе иммуногенеза необходимо для понимания следующих разделов: реакции иммунитета, их использование для диагностики и для специфической профилактики и терапии.
Цель самоподготовки
После самостоятельного изучения темы студент должен знать:
- антитела, их свойства, строение, структурные основы специфичности; процесс антителогенеза;
- реакции иммунитета, механизм, ингредиенты, методы постановки, практическое применение.
Исходный уровень знаний
Для усвоения материала темы необходимо знать структуру простых и сложных белков, структуру иммуноглобулинов (биохимия), клетки крови и органов иммунной системы (гистология); резус–фактор и антитела к нему (физиология).
Цель занятия
1. Изучить строение и функционирование иммунной системы.
2. Изучить специфические формы иммунного ответа: клеточный и гуморальный ответы, иммунологическая память, иммунологическая толерантность.
3. Выработать чёткое преставление об антителах, их строении, классах иммуноглобулинов, их роли.
4. Изучить механизмы взаимодействия антиген-антитело: принципы и методы постановки реакций агглютинации и преципитации.
5. Научиться интерпретировать результаты серологических исследований.
План изучения темы
1. Иммунная система организма. Иммуногенез.
2. Антитела, их свойства, строение. Получение иммунных сывороток.
3. Реакции иммунитета.
Рекомендуется изучить тему по учебнику, затем по конспекту лекций и по «Руководству к лабораторным занятиям». Разобрать схему «Иммунная система». Прочитать план предстоящего занятия, ответить на контрольные вопросы, решить задачи.
После изучения темы студент должен уметь
Поставить ориентировочную реакцию агглютинации на стекле, реакцию кольцепреципитации в пробирках.
Учесть готовый результат развёрнутой реакции агглютинации в пробирках; учесть и оценить реакцию преципитации в агаре.
Контрольные вопросы
Какая ткань составляет иммунную систему организма? Укажите центральные и периферические органы иммуногенеза у человека и их функции. Опишите процесс формирования гуморального и клеточного иммунного ответа. Назовите классы лимфоцитов, от которых зависит механизм иммунитета: гуморальный и клеточный. Укажите: клетки, которые в процессе антителогенеза осуществляют захват, переваривание и презентацию антигена; клетки, взаимодействующие при формировании гуморального иммунитета, клеточного иммунитета; клетки, которые трансформируются и превращаются в плазмоциты, продуцирующие антитела; клетки, стимулирующие этот процесс; клетки, которые угнетают иммунный ответ; клетки, которые убивают опухолевые и заражённые вирусом клетки. Цитоки-
ны – определение понятия, виды. Антигены главного комплекса гистосовместимости (MHC), их роль в формировании иммунного ответа, в реакции отторжения трансплантата. Классы MHC, их характеристика. Антитела – определение понятия, основные свойства. Как получить иммунную сыворотку? Как получить сыворотку, которая нейтрализовала бы столбнячный токсин? Против каких антигенов образуются антитоксины, агглютинины, преципитины, бактериолизины, гемолизины, антилимфоцитарные антитела? Какие антитела образуются при введении в организм дифтерийного анатоксина? Дифтерийных бактерий? Где содержатся антитела в организме? Что такое титр антител? Химическая природа антител. Структура иммуноглобулина (начертить схему). Что такое активный центр иммуноглобулина? Перечислите классы иммуноглобулинов, значение в организме. Укажите класс иммуноглобулинов, способных проникать через плаценту. С какими структурами иммуноглобулинов связана способность соединяться с антигеном, эффекторные функции? Динамика накопления антител. Вторичный иммунный ответ, его особенности. Что такое реакции иммунитета? Условия протекания реакций иммунитета. Перечислите группы реакций иммунитета. Что такое чувствительность и специфичность иммунологических реакций? Какие реакции иммунитета происходят между токсином и антитоксинами? Как определяется и в каких единицах выражается биологическая активность антитоксических сывороток? Обнаружение токсигенности бактерий методом преципитации в агаре: как ставится реакция, что является антигеном? Антителами? Что происходит между ними? Что появляется при положительной реакции?
ЗАДАЧА. Подставьте вместо пропущенных слов «анатоксин» или «антитоксин»: … является антигеном; ... является антителом; … создаёт при введении в организм активный иммунитет; … создаёт при введении в организм пассивный иммунитет, … получают путём иммунизации животных; … получают из токсина при воздействии формалина и тепла; … нейтрализует токсин; … вызывает в организме образование антител.
Реакция агглютинации: что такое агглютинация, что является антигеном, что – антителами; две фазы реакции; методы постановки; какие контроли ставят и для чего? Реакция агглютинации на стекле: необходимые ингредиенты, метод постановки; как выглядит положительная реакция; в чём преимущество реакции по сравнению с развёрнутой реакцией агглютинации и в чём её недостаток; в каком случае реакция агглютинации на стекле является ориентировочной, а в каком случае она даёт окончательный результат? Развёрнутая реакция агглютинации: необходимые ингредиенты, порядок постановки, необходимые контроли, учёт результатов. Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации: что служит антигеном в этой реакции, как его получают, механизм реакции. Реакция обратной непрямой гемагглютинации: что служит антигеном в этой реакции, как его получают, механизм реакции. Что такое эритроцитарный диагностикум? Что такое антительный эритроцитарный диагностикум? Методика постановки реакций. Реакция коагглютинации. Агглютинирующие сыворотки: что они содержат; как их получают, для чего применяются; что такое титр агглютинирующей сыворотки? В чём различия между поливалентными и моновалентными (монорецепторными) агглютинирующими сыворотками; почему при иммунизации кролика микробами одного вида получается сыворотка, содержащая антитела к нескольким антигенам? Какими способами можно получить монорецепторную сыворотку; что означает термин «адсорбированная агглютинирующая сыворотка»?
ЗАДАЧА. Получена агглютинирующая сыворотка путём иммунизации кролика бактериями с антигенной структурой 1, 3, 4. Как из этой сыворотки получить монорецепторную сыворотку против антигена 3? Что для этого требуются?
Моноколональные антитела и гибридомы: что это такое? Опишите последовательность действий для получения моноколональных антител, какие клетки соединяют для получения гибридом. Преимущество моноколональных антител; практическое применение. Реакция обнаружения неполных антител (реакция Кумбса): чем отличаются неполные антитела от полных; какое свойство антител используется для их обнаружения; какая диагностическая сыворотка для этого применяется? Реакция преципитации: что такое преципитация? Что служит антигеном? Как получить преципитирующую сыворотку? Что такое титр преципитирующей сыворотки? Две фазы реакции, какими по физическому состоянию должны быть ингредиенты реакции? Варианты постановки реакции: в жидкой среде, в геле, с использованием электрофореза. Реакция флоккуляции. Практическое применение реакций преципитации.
ЗАДАЧА. На одежде человека, подозреваемого в убийстве, обнаружено пятно крови. С помощью какой реакции можно определить, человеческая ли это кровь; что здесь будет антигеном и что – антителами; какой диагностический препарат нужно иметь в лаборатории для этой реакции; как он приготовлен?
ЗАДАЧА. Как при помощи реакции преципитации определить является ли доставленный для анализа образец мясом крупного рогатого скота или мясом лошади; какие необходимы для этого диагностические препараты?
Для чего практически применяются реакции иммунитета, какая основная особенность реакций иммунитета используется при этом, в каких двух направлениях применяются реакции иммунитета, какие диагностические препараты необходимо иметь при этом; что они содержат?
Задания для выполнения в процессе самоподготовки.
Заполните таблицу «Реакции иммунитета» в отношении реакций, разбираемых в рамках данной темы.
Реакции иммунитета
Реакция
иммунитета
|
Антиген
|
Антитело
|
Способ постановки
|
Применение
|
|
|
|
|
|
Работу начать сразу с постановки развёрнутой реакции агглютинации, но в тетрадь записать позже (см. ниже).
1. Учёт посева предыдущего занятия. Посмотрите посев антигена, отметьте результат, сделайте вывод о стерильности приготовленного антигена.
2. Реакция агглютинации:
а) реакция агглютинации на стекле.
Цель опыта: определить, являются ли антитела иммунной сыворотки и антигены бактерий специфичными в отношении друг друга.
Материал: иммунная сыворотка, культура бактерий на скошенном агаре.
Ход опыта: описать.
Результат: нарисовать.
Вывод: сформулировать;
б) развёрнутая реакция агглютинации.
Цель опыта: определить титр агглютинирующей сыворотки.
Материал: агглютинирующая сыворотка, взвесь бактерий.
Ход опыта: начертить схему постановки реакции.
Результат: в конце занятия отметить, в каких пробирках произошла агглютинация.
Вывод: сформулировать.
в) реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации. Разобрать по таблице РНГА. Учесть демонстрационную реакцию, отметить титр сыворотки;
г) реакция Кумбса (определение неполных антител). Разобрать по таблице. Начертить схему реакции в тетради;
3. Реакция преципитации:
а) реакция преципитации с сывороточным антигеном.
Цель: определить видовую принадлежность сывороточного белка.
Материал: перечислить ингредиенты.
Ход опыта: начертить схему.
Результат: отметить, в какой пробирке произошла преципитация.
Вывод: сформулировать;
б) Определение токсигенности коринебактерий дифтерии в реакции преципитации в агаре (учёт демонстрационного посева).
Цель: определить, какие из исследуемых культур являются токсигенными.
Результат: изобразить в виде схематического рисунка. Отметить стрелками токсигенные культуры.
4. Диагностические препараты. Посмотреть диагностикумы и диагностические сыворотки. Провести разбор препаратов по схеме: что содержит препарат (антиген, антитела), как приготовлен, для чего применяется, что можно выявить с помощью этого препарата, как дозируется (титр)?
|
|
|
Скачать 1.36 Mb.