Учебник ВСЭ Сенченко. В. П. Фролов Заведующий кафедрой эпизоотологии и микробиологии Ставропольской сельскохозяйственной академии, доктор биологических наук, профессор, заслуженный деятель науки рф, членкорреспондент Академии Аграрн

• Название: В. П. Фролов Заведующий кафедрой эпизоотологии и микробиологии Ставропольской сельскохозяйственной академии, доктор биологических наук, профессор, заслуженный деятель науки рф, членкорреспондент Академии Аграрн
• Анкор: Учебник ВСЭ Сенченко.doc
• Дата: 28.01.2017
• Размер: 6.49 Mb.
• Имя файла: Учебник ВСЭ Сенченко.doc
• Тип: Документы; #280
• страница: 53 из 76

ВЕТСАНЭКСПЕРТИЗА РАКОВ

Доброкачественные, клинически здоровые живые раки подвиж­ные, с твердым, гладким, без нарушения целостности панцирем тем­но-коричневого или зеленоватого цвета, согнутыми в суставах клеш­нями и подогнутым брюшком (шейкой). Доброкачественные варе­ные раки имеют равномерную красную окраску панциря, подогну­тое брюшко (шейку), специфический ароматный запах.

У недоброкачественных раков (мертвые, больные) в сыром виде размягченный или изъязвленный (чума) панцирь тусклого цвета. Клешни и брюшко вытянутые и не сгибаются. Вареные раки име­ют неравномерную окраску панциря, брюшко вытянутое, неприят­ный (слабый или резкий) запах.

К продаже допускаются только доброкачественные живые пре­сноводные раки.

Раки недоброкачественные, мертвые и больные, а также вареные с вытянутой хвостовой частью в пищу не допускаются, их утилизи­руют или уничтожают.

У раков, сваренных в живом состоянии, хвостовая часть (шей­ка) свернутая, а у сваренных в мертвом состоянии хвост (шейка) вытянут. г

ЛАБОРАТОРНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ РЫБЫ

При сомнении в доброкачественности свежей и консервирован­ной рыбы всех видов обработки и для уточнения результатов орга-нолептических показателей проводят лабораторные исследования.

Лабораторные исследования осуществляют по методикам, изло­женным в действующих стандартах, инструкциях, методических рекомендациях.

Для лабораторных исследований отбирают из разных мест (не менее чем 5% партии выловленной рыбы или упаковок с консер­вированной рыбой: ящиков, бочек, мешков и т. п.) несколько эк­земпляров, наиболее характеризующих всю партию или упаковку рыбы в количестве: при массе одной рыбы до 100 г - пять-семь штук из каждой партии или упаковки; до 1 кг - две пробы по 100 г от двух рыб из каждой партии или упаковки; до 3 кг - две пробы по 150 г от одной-двух рыб из каждой партии или упаковки.

Оставшуюся часть проб после проведения исследований владель­цу не возвращают, а утилизируют или уничтожают.

Бактериологическому исследованию подвергают пробы, отобран­ные для лабораторного анализа во всех случаях массовой гибели

487

рыбы независимо от причин: при экспертизе рыбы, больной зараз­ными и незаразными болезнями, с сомнительными органолептичес-кими показателями; при осмотре свежей снулой рыбы, хранившейся более 6 ч при температуре 18-20°С, и рыбы, выловленной из загряз­ненных водоемов, а также травмированной, мятой, с нарушениями целостности кожи; при наличии сомнений в отношении доброкаче­ственности консервированной рыбы и невозможности определения пригодности ее в пищу путем ветеринарно-санитарного осмотра.

При бактериологическом исследовании устанавливают числен­ность микробов в поле зрения микроскопа методом бактериоско­пии и общее количество микрофлоры в 1 г мяса. В необходимых случаях определяют видовую принадлежность микроорганизмов.

Санитарно-бактериологические исследования с подсчетом коли­чества микробов в 1 г мяса рыб осуществляют по ГОСТу 2874-73.

Общее число бактерий и количество микроорганизмов - пока­зателей фекального загрязнения (группа кишечной палочки) - оп­ределяют по ГОСТу 5216-50. Видовую принадлежность микроор­ганизмов устанавливают по существующим методикам бактерио­логического исследования, клостридиум ботулинум и клостридий перфрингенс идентифицируют с помощью люминесцентно-сероло-гического метода и клостридий перфрингенс - реакции гемолиза. При подозрении на зараженность рыб личинками описторхоза, клонорхоза, метагонимоза, дифиллоботриоза, диоктофимоза, гетеро-фиоза, нанофиетоза, в лабораторию направляют 15 экз. каждого вида рыб из данного водоема, партии или упаковки.

Паразитологическое исследование проводят согласно существу­ющим методикам исследования рыб при инвазионных заболева­ниях. При подозрении на зараженность рыб возбудителями гель-минтозоонозов (антропозоонозов) исследование осуществляют со­гласно действующим методике и инструкции по санитарно-гель-минтологической оценке рыбы, зараженной личинками дифилло-ботриид (возбудителями дифиллоботриозов) и личинками опистор-хиса (возбудителем описторхоза) и ее технологической обработке. Физико-химические исследования доброкачественности рыбы проводят в соответствии с методами, изложенными ниже.

В необходимых случаях для полной и всесторонней характери­стики пищевых достоинств дополнительно определяют биологичес­кую ценность рыбы и содержание влаги в мясе исследуемой партии, согласно методикам, изложенным ниже.

Рыбу с признаками или подозрением на отравление подвергают
химико-токсикологическому исследованию. Качественное опреде­
ление безвредности или токсичности мяса рыб проводят на живых
—488

организмах, используя экспрессный метод токсико-биологической оценки рыбы и других гидробионтов при помощи инфузорий тет-рахимена пирифрмис (штамм WH₁₄).

Форма акта Лаборатория ветеринарно-санитарной экспертизы

на рынке_

Города

200 г.

Акт№

Составлен настоящий акт

(кем)

в присутствии представителя администрации рынка господина
и владельца (поставщика)

(фамилия, имя, отчество, название хозяйства)

(организация, адрес)

в том, что при ветеринарно-санитарной экспертизе

200 г. за №

(вид продукта, число нест и масса)

зарегистрированной в журнале_
обнаружено

Заключение

Согласно «Правилам ветеринарно-санитарной экспертизы пресно­
водной рыбы и раков» указанный продукт в количестве

признан и подлежит

(указать, куда должен бцть направлен)

экз.

(подпись) _ (подпись)

Акт составлен в
Ветврач

Представитель дирекции рынка
Один экз. акта получил

(подпись владельца продукта)

489

Форма этикетки

Бумажная этикетка для рыбы и рыбопродуктов, разрешенных к продаже, должна иметь размеры 11x8 см. Наименование рыбы и рыбопродуктов обозначают жирным шрифтом и размером букв, равным 6x8 мм.

В зависимости от вида продукта на этикетке может быть следу­ющее: рыба свежая, рыба мороженая, рыба соленая, рыба копченая, рыба вяленая, раки живые, раки вареные.

На этикетке для свежей рыбы обязательно указывают срок ее реализации.

Лаборатория ветеринарно-санитарной экспертизы

На

рынке

кг

MGCT у

Рыба свежая
Число

Экспертиза №

Выпущено в продажу

Срок реализации_

Подпись (эксперта).

МИКРОМЕТОД ТОКСИКО-БИОЛОГИЧЕСКОЙ ОЦЕНКИ РЫБЫ И ДРУГИХ ГИДРОБИОНТОВ

Для предварительной экспрессной санитарно-биологической оценки гидробионтов и определения их безвредности в качестве тест-организ­ма используют инфузорию тетрахимена пириформис (штамм WH_M).

Метод не требует дефицитных дорогостоящих реактивов и обору­дования, дает сопоставимые результаты с исследованиями на выс­ших животных, а также позволяет оценить ветеринарно-санитарное качество и дать биологическую оценку рыбы и других гидробионтов в тех случаях, когда их невозможно изучить на высших животных.

Продолжительность исследования составляет 24-72 ч.

Принцип метода. Метод основан на посеве лабораторной куль­туры тетрахимена пириформис во флаконы с исследуемыми проба­ми мяса рыб и др. водных организмов.

Средой разбавления исследуемого материала служит 0,56% ра­створ аптечной морской соли.

490

Оценку качества рыбы, других гидробионтов или продуктов из них проводят по выращенной культуре инфузорий. Число простейших орга­низмов подсчитывают под малым увеличением микроскопа в камере Фукс-Розенталя. Качество инфузорий определяют по характеру дви­жения, наличию измененных форм и мертвых клеток в культуре.

Маточную культуру тетрахимена пириформис выращивают на стандартной среде: пептона бактериологического - 2 г, глюкозы -0,5, дрожжевого экстракта - 0,1, аптечной морской соли - 0,1 г на 100 мл дистиллированной воды, рН 7,0-7,5.

Приготовленную среду слоем жидкости не выше 1,5 см разли­вают в колбы Эрленмейера вместимостью 50 мл и стерилизуют в автоклаве при 0,5 атм 30 мин. Соблюдая правила асептики, вносят 0,1 мл культуры в колбы и выращивают в термостате при 25°С или в темном шкафу при комнатной температуре. Посев на свежую среду осуществляют через 4-7 сут.

Культуру тетрахимена пириформис можно хранить при ком­натной температуре до 2 мес. путем консервирования в 1% раство­ре глюкозы (10 мл раствора глюкозы + 0,5 мл культуры).

Четырехдневная культура инфузорий с добавлением 5-7 мг ли-поцеребрина аптечного без пересева сохраняется 3-4 мес. в холо­дильнике при температуре 4-5° С.

При посеве на 0,56% раствор аптечной морской соли или угле­водно-солевую дрожжевую среду (УСД) тетрахимена пириформис сохраняет жизнеспособность 1-1,5 мес.

Среда разбавления исследуемого материала. Для разбавления применяют 0,56% раствор аптечной морской соли, рН 7-7,5. При­готовленный раствор разливают в колбы на 150-200 мл и стерили­зуют в автоклаве при 0,5 атм 30 мин. В среде разбавления инфузо­рии не размножаются, но сохраняют жизнеспособность 30-45 сут. Приборы, посуда, материалы и реактивы. Приборы: термо­стат, автоклав, аппарат Шуттеля, микроскоп световой МБС, потенци­ометр, весы аналитические, сушильный шкаф, центрифуга, водяная баня, мясорубка, гомогенизатор, камеры Фукс-Розенталя, штативы. Посуда: фарфоровые ступки, колбы Кьельдаля, конические кол­бы Эрленмейера на 50 мл, пастеровские пипетки, стеклянные палоч­ки, мерные пипетки на 0,1-2,0 мл, предметные и покровные стекла, флаконы из-под антибиотиков с резиновыми пробками, у которых в центре вставлены стеклянные трубки с ватными пробками с целью

аэрации среды, воронки.

Материалы: вата, марля, индикаторная и фильтровальная бумага.

Реактивы: пептон бактериологический, дрожжевой экстракт, глюкоза в порошке, аптечная морская соль, хлористый натрий, 5%

491

спиртовый раствор йода, 10% раствор едкого натрия, стандартный казеин, порошок сублимированного куриного яйца.

Подготовка проб для исследования.

От 10 экземпляров исследуемой партии рыб в области спины берут по 15-20 г мяса без кожи (всего 150-200 г), три-четыре раза пропускают через мясорубку, тщательно перемешивают и гомоге­низируют. Затем отвешивают 5-10 г гомогената, помещают в фар­форовые ступки и тщательно растирают. Срок хранения в холо­дильнике при температуре минус 10-15°С до 2 мес. (пробы хранят в стаканчиках с притертыми крышками).

Подготовку проб от других гидробионтов проводят аналогич­ным образом, только от каждой исследуемой партии отбирают 30 экз. раков, мидий и 50 моллюсков.

Контроль роста инфузорий. Ежедневно контролируют рост инфузорий и его интенсивность. Предварительно просматрива­ют пробы в пробирках или флаконах под микроскопом МБС. Затем пастеровской пипеткой или стеклянной палочкой берут каплю культуры, помещают на предметное стекло и под малым увеличением микроскопа (7x8) просматривают объем капли, все ее слои. При этом определяют чистоту культуры, густоту роста, форму, подвижность и наличие погибших инфузорий. Подсчет выросших особей проводят под микроскопом в счетной камере Фукс-Розенталя. На подсчет 40 проб требуется 6-7 ч времени.

Предварительно инфузории фиксируют, вносят во флаконы по 1 капле 5% спиртового раствора йода.

При густом росте (100 и более клеток в одном поле зрения микроскопа) культуру инфузорий разбавляют в 5-10 раз стериль­ным 0,56% раствором аптечной морской соли. Среднее число ин­фузорий в одном квадрате умножают на разведение.

Число инфузорий записывают по следующей форме:

Форма записи при подсчете инфузорий

№. про­бы	Повтор-ность	Число клеток в квадратах										Среднее число клеток в квадрате
		1	2	3	4	5	6	7	8	9	10
1	1	32	32	31	3	25	39	35	37	37	33	33,1
	2	31	28	35	27	26	28	41	39	37	40	31,3
	3	24	32	31	27	26	25	42	39	37	24	30,7
Среднее число клеток в пробе из трех повторностей												32,7

492

Число выросших инфузорий учитывают в 1 мл культуры. Для этого среднее число клеток в пробе делят на два и умножают на 10⁴.

Примечание: инфузории каждой пробы подсчитывают в 3 по-втор-ностях и за конечный результат принимают среднее число клеток.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ТОКСИЧНОСТИ РЫБЫ И ДРУГИХ ГИДРОБИНТОВ

Токсикологическим исследованиям подвергают рыбу и другие гидробионты, подозреваемые в отравлении и выловленные из заг­рязненных водоемов, а также рыбу, содержащую в определенное время года биологические токсины.

Из приготовленной пробы (см. подготовка проб для исследова­ния) берут навески 50,100, 200 мг, помещают во флаконы, добавляют в каждый 2 мл 0,56% раствора аптечной морской соли и 0,04 мл трехсуточной культуры инфузорий, выращенных на пептонной сре­де. Каждый образец исследуют в трех повторностях.

Контролем при анализе служат флаконы, содержащие 0,56% раствор аптечной морской соли, заведомо нетоксичные пробы мяса гидробионтов, стандартный казеин или сублимированное куриное яйцо. Флаконы тщательно встряхивают и помещают в термостат при температуре 25°С или оставляют при комнатной температуре на 24 ч. В течение суток флаконы 3-4 раза встряхивают с целью аэрации среды и поднятия осевших частиц исследуемого материа­ла. Далее через 1, 4, 6, 24 ч посевы из каждого флакона просматри­вают под микроскопом.

Оценка токсичности рыбы и других гидробионтов. Токсичность исследуемых образцов определяют по наличию погибших инфузо­рий, измененных форм, характеру движения и угнетенного роста тет-рахимены пириформис. Наличие мертвых или деформированных клеток, замедление или изменение движения, угнетение роста и раз­множения инфузорий свидетельствуют о токсичности исследуемого материала, и наоборот. Одновременно определяют токсичность воды.

Определение токсичности воды. Аппаратура, материалы и ре­активы такие же, как и при определении токсичности рыбы. Пробы воды (2-3 л) берут непосредственно на месте гибели рыбы и других гидробионтов. Брать пробы надо так, чтобы образец соответствовал составу всей массы исследуемой воды: из поверхностных (30-50 см от поверхности) и глубинных слоев, на быстринах, перепадах, водо­сбросах и водоспусках. При этом необходимо исключить временную взмученность, случайное загрязнение и др. Пробы воды упаковыва­ют и направляют в ветеринарную лабораторию для исследования.