Биофизика клетки. Тест Биофизика мембран. Механизмы транспорта веществ. 1 Верно Баллов 1,00 из 1,00 Отметить вопрос Текст вопроса Латеральная диффузия обусловлена Выберите один ответ a концентрационным градиентом на разных сторонах
 Скачать 0.72 Mb.
|
|
Физические свойства мембран. Жидкокристаллическая структура мембраны чрезвычайно чувствительна к действию физических факторов среды. При снижении температуры происходит фазовый переход в твердокристаллическое состояние (гель), при этом меняются характеристические свойства мембраны.  Увеличивается плотность гексагональной упаковки фосфолипидов (для лецитина от 0,6-0,8 нм2 до 0,46-0,48 нм2) и толщина мембраны (от 3,9 нм до 4,7 нм). В физиологических условиях текучесть мембраны уменьшается при повышении содержания в ней холестерина, ионов кальция, магния. Фазовые переходы подчиняются закону "все или ничего" – при плавном изменении действующего фактора физико-химические свойства мембраны изменяются скачкообразно. Отдельная жирнокислотная цепь в жидкокристаллической мембране может принимать множество различных конфигураций за счет вращения одинарных С–С связей. В твердом бислое молекулы принимают полностью транс-конформацию и возможны лишь небольшие колебательные движения. В жидком бислое возможны тепловые движения, сопровождающиеся транс-гош-переходами. Расположенные рядом гош-конформации могут образовывать в бислое полости – кинки (от англ. kink – петля), в которые могут попасть молекулы из внемембранного пространства. Последующее изменение конформации цепей приводит к движению кинка и перемещению вещества в продольной или поперечной плоскости мембраны Для биологической мембраны характерен трансмембранный биопотенциал – разность потенциалов на внутренней и наружной сторонах. Его величина составляет ≈ – 60-90 мВ. Вследствие малой толщины мембраны напряженность электрического поля достигает 6-9×106 В/м. Емкостные свойства мембраны как конденсатора составляют 0,5-1,3 мкФ×см–2. Видео "Плазматическая мембрана" Биофизика мембран. Механизмы транспорта веществ Транспорт веществ через мембрану Одна из основных функций биологической мембраны – селективный транспорт веществ. Принято различать · пассивный транспорт – происходящий в направлении действия электрохимического градиента (концентрационного, электрического и т.д.); · активный транспорт – процессы переноса веществ против существующих градиентов и требующие затрат энергии. Пассивный транспорт объединяет ряд механизмов переноса веществ. Диффузия – самопроизвольное перемещение вещества из области большей концентрации в область меньшей концентрации вследствие хаотического теплового движения молекул. Уравнение диффузии (уравнение Фика) имеет вид:   Коэффициент диффузии [м2/с]:  Таким образом, скорость диффузии будет зависеть от температуры, вязкости растворителя и размера частиц. Для расчета диффузии через биологическую мембрану часто используют формулу: Коэффициент распределения тем выше, чем легче вещество растворяется в липидной фазе. Следовательно, переход гидрофильных соединений непосредственно через липидный бислой будет крайне затруднен (так, молекулы пропиленгликоля диффундируют через мембрану примерно в 20 раз быстрее, чем молекулы мочевины). Если происходит перенос заряженных частиц (ионов), то помимо концентрационного градиента необходимо учитывать величину разности потенциалов биологической мембраны. Уравнение диффузии для таких частиц называется уравнением Нернста-Планка и имеет вид: где um – подвижность диффундирующих частиц выраженная для моля (u = um×NA); Z – заряд иона; F – постоянная Фарадея; с – молярная концентрация ионов; – градиент мембранного потенциала. Кроме диффузии через липидный бислой мембраны транспорт веществ может происходить через липидные поры и белковые каналы. Мембранный канал представляет собой интегральный белок (белковый комплекс, гликопротеид), пронизывающий липидныйкаркас мембраны и обеспечивающий перенос веществ через мембрану в сторону более низкого электрохимического потенциала. Вторичная структура белкового комплекса имеет b-складчатый характер с цилиндрической полостью внутри, заполненной водой. Коэффициент проницаемости ионных каналов для гидрофильных веществ составляет 10–8-10–9 м/с, что на 5-6 порядков меньше скорости переноса ионов в водной среде, но значительно превышает скорость их диффузии через липидную фазу. Ионный канал содержит два основных компонента: селективный фильтр и воротный механизм. Первый имеет жесткую структуру, т.е. в этой части белковый комплекс не может изменять размеры поры и регулировать проницаемость мембраны. Функция селективного фильтра – пропускать через канал определенное вещество или группу сходных с ним веществ, т.е. избирательная проницаемость. Регулирование мембранной проницаемости обеспечивается воротными процессами. Они осуществляются "воротами канала", которые представляют собой части белкового комплекса, способные "раскручиваться" и "скручиваться" в ходе их механохимических реакций и благодаря этому создавать просвет внутри белкового комплекса или перекрывать его (сжимать или восстанавливать пору). Проницаемость мембраны для данного вещества определяется только числом открытых в данный момент каналов. Поэтому мембранную проницаемость (Р) при переносе веществ по каналам рассчитывают по формуле: Переход канала из закрытого состояния в открытое и обратно осуществляется под действием определенных стимулов (сдвиг мембранного потенциала, химические, механические, световые модальности). Облегченная диффузия происходит с участием специальных переносчиков. Например, антибиотик валиномицин осуществляет перенос ионов калия через мембрану. Его структура напоминает браслет образованный изнутри полярными группами (обеспечивают связывание калия), а снаружи – неполярными (обуславливают гидрофобность молекулы). Ион калия встраивается в центральную область антибиотика на наружной поверхности мембраны, заряженный комплекс под действием электрического поля диффундирует через мембрану и на ее внутренней стороне распадается. Калий поступает в цитоплазму, а свободная молекула валиномицина возвращается обратно. По современным представлениям, аналогично происходит перенос аминокислот, сахаров и ряда других веществ. Примером фиксированного переносчика является антибиотик грамицидин. Две его молекулы встраиваются в мембрану и формируют полый цилиндр, в котором полярные группы расположены внутри. Скорость переноса ионов может составлять 1010 с–1, что примерно в 105 раз превышает производительность подвижных переносчиков. Характерные черты облегченной диффузии: · для ее реализации обязательно должен существовать концентрационный градиент переносимого вещества; · при увеличении градиента концентрации скорость облегченной диффузии повышается до определенного предела ("насыщение" определяется концентрацией переносчика); · скорость облегченной диффузии значительно превышает скорость простой, поскольку переносчик приводит к значительному повышению мембранной проницаемости для данного вещества; · возможна конкуренция близких по структуре веществ за связывание с молекулой переносчика. Осмос – движение растворителя через полупроницаемую мембрану (непроницаемую для растворенного вещества) в сторону более концентрированного раствора. По своей сути осмос – это простая диффузия молекул воды. Осмотическое давление измеряется в атмосферах (в СИ – паскали) и определяется по формуле: Сила, противодействующая осмосу – упругое сопротивление мембраны или дополнительная величина гидростатического давления. В тот момент, когда величина осмотического давления уравновешивается противодействующей силой, система переходит в состояние равновесия. Росм большинства клеток организма человека составляет около 780 кПа (7,5-8,1 атм). В местах воспаления (опухоли) возможно увеличение до 15-20 атм. Явление осмоса играет ключевую роль в жизнедеятельности организма, обеспечивая поступление воды через мембраны и тургор или упругость клеток (формообразование, эластические свойства тканей). По сравнению с осмотическим давлением клеток, внешние растворы могут быть: · Изотоническими – имеют ту же величину осмотического давления, не вызывают изменения клеточных структур (0,9% водный раствор NaCl называют физиологическим раствором). Для инъекций лекарственных препаратов используются преимущественно изотонические растворы. · Гипертоническими – растворы с большим осмотическим давлением, приводят к плазмолизу клеток ("сморщиванию") вследствие выхода из них воды. · Гипотоническими – растворы с меньшим осмотическим давлением приводят к разбуханию и разрыву клеточной оболочки – лизису, поскольку вода начинает поступать внутрь клетки. Повязки с гипертоническим раствором (10% NaCl) применяют в медицине при лечении гнойных ран (за счет осмоса происходит ток жидкости из раны и она очищается от микроорганизмов, продуктов распада). Горькую соль (MgSO4×7H2O) и глауберову соль (Na2SO4×10H2O) используют как слабительные средства. Они плохо всасываются в желудочно-кишечном тракте, и при применении гипертонических растворов этих солей в просвет кишечника переходит значительное количество воды из слизистой оболочки. Фильтрация – движение раствора через поры в мембране под действием градиента давления. В общем виде, скорость переноса при фильтрации подчиняется закону Пуазейля. Фильтрация играет огромную роль в капиллярном транспорте, поскольку обеспечивает перенос воды и растворенных в ней веществ из плазмы крови в тканевую жидкость. Направление и скорость движения воды определяется по формуле: Q = f((Ргк – Ргт) – (Рок – Рот)), где Q – объемная скорость движения воды через капиллярную стенку; f – коэффициент фильтрации (определяется вязкостью раствора, количеством пор и т.д.); Ргк – гидростатическое давление в капилляре; Ргт – гидростатическое давление в тканевой жидкости; Рок – онкотическое давление крови; Рот – онкотическое давление тканевой жидкости. Онкотическое давление – часть осмотического, создаваемое за счет белковых макромолекул (более мелкие молекулы свободно проходят через капиллярную стенку и не участвуют в формировании осмотического давления). Под действием Ргк и Рот жидкость стремится выйти из капилляра в ткань (фильтрация), а под действием Ргт и Рок – возвратиться обратно в капилляр (реабсорбция). Градиент гидростатического давления в капиллярном русле приводит к тому, что в артериальной части артериол происходит фильтрация, а в венозной части – реабсорбция, причем между объемами отфильтрованной и реабсорбированной жидкости в норме существует динамическое равновесие (≈ 10% объема жидкости возвращается из интерстициального пространства в кровяное русло с помощью лимфатической системы). Активный транспорт идет против существующих электрохимических градиентов и сопровождается ростом энергии Гиббса. Следовательно, он всегда происходит с затратой энергии запасенной в макроэргических связях АТФ. Впервые существование активного транспорта было показано в опытах Уссинга (1949 г). Камера Уссинга заполнена раствором Рингера и разделена на две половины кожей лягушки. Наблюдались потоки ионов Na+, при этом внутренняя сторона кожи приобретала положительный заряд по отношению к наружной. С помощью блока компенсации напряжения разность потенциала кожи приводили нулю и поддерживали одинаковую концентрацию ионов по обе стороны мембраны. Если бы транспорт ионов осуществлялся только пассивными механизмами, то потоки ионов через мембрану в обе стороны были бы равны, а ток в цепи отсутствовал. Однако электрический ток продолжал протекать через мембрану, следовательно, происходит однонаправленный перенос заряженных частиц. Метод радиоактивных изотопов показал, что поток ионов Na+ внутрь клетки превышает поток из клетки. Дальнейшие опыты показали, что истощение запасов АТФ в коже лягушки приводит к остановке однонаправленного потока ионов Na+. В биологические мембраны встроены сложные белковые комплексы фермента АТФ-азы (ионные насосы), работающие за счет свободной энергии гидролиза АТФ. У человека примерно 30-40% всей энергии, образующейся при метаболических процессах, расходуется на активный транспорт. Активный транспорт обеспечивает формирование в живой системе градиентов концентраций, электрических потенциалов, давления и т.д., то есть поддерживает организм в неравновесном состоянии, что лежит в основе существования жизни. В настоящее время известны три типа электрогенных ионных насосов: Транспорт ряда веществ через мембрану не связан непосредственно с процессами гидролиза АТФ, но обусловлен наличием на мембране электрохимических градиентов. Такие механизмы получили название вторичного активного транспорта. Так, перенос сахаров, аминокислот из полости кишечника происходит за счет электрохимического градиента ионов Na+, который, в свою очередь создается работой Na+-K+-АТФ-азы. |