вирусология. болезни. 44. Парвовирусы животных. Характеристика вируса Алеутской болезни норок (плазмоцитоза). Методы лабораторной диагностики
 Скачать 190.84 Kb.
|
|
Группа А – относят высоковирулентные эпизоотические шт, вызывающие остропротекаю щую болезнь, родственные вакц. шт К. Группа В – умеренновирулентные для поросят, при циркуляции в стаде - атипичную или хроническую чуму. Родственные вакцинному шт АСВ. Группа С – американский слабовирулентный шт. Источник инфекции - больные животные, выделяющие вирус во внешнюю среду с мочой, фекалиями и секретами слизистых, а также реконвалесценты. Заражение происходит горизонтальным путём (от одного к другому) алиментарно, аэрогенно и возможны др. пути, вертикальным (ч/з плаценту). После экспериментального заражения вирус появляется в крови, моче, истечениях, фекалиях ч/з 1-2 дня. Инкубационный период 3-9 дн. и до 12 дн. Течение:сверхострое - при t 41-42°С у молодых животных приводит к гибели ч/з 1-2 дня (наблюдается редко);острое - возникает в начале эпизоотии, при t 40,5 - 41°С, животные неохотно передвигаются, больше лежат. Наблюдают угнетение, слабость, отказ от корма. Развивается гнойный конъюнктивит, появляется рвота, запор, а затем понос (фекалии иногда с примесью крови). Мочеиспускание затруднено. Гибель через 7-10 дн; нервная форма (манежные движения) относится к острому, параличи задних конечностей, гибель 1-2 дня; подострое - наблюдается после острого до 3-х недель; хроническое – неск. недель и даже месяц. При хроническом течении характ измен - очаговый дифтеритический налет (бутоны), коричневая экзема, фибринозный плеврит и перикардит, некроз миндалин. Хронич форма бол. часто протекает на фоне др. инфекций. Диагноз может быть поставлен только лабор методами. СВИНОМАТКИ АБОРТИРУЮТСЯ. а 15-25 % поросят рождаются клинически здоровыми, но инфицированными. поросята приобретают иммунологическую толерантность(после вакцинации иммунитета не будет) и выделяют вирус в больших количествах до 6 мес. Диагностика чумы свиней трудоёмкая, её проводят комплексно с лаборатор. подтверждением: Если в очаге штамм вируса вирулентный, поголовье свиней не иммунное, то болезнь характеризуется высокой контагиозностью, большей смертностью, гипертермией, геморрагическими поражениями кожного покрова, признаками поражения органов ЖКТ и ЦНС. Обращают внимание выраженный геморрагический диатез в различных органах, мраморность лимфоузлов, инфаркты селезенки, кровоизлияния в почках на фоне их анемии, катарально-геморрагический гастроэнтерит, лимфоцитарный энцефаломиелит. Однако частая вакцинация свиней против чумы создает иммунный фон, влияющий на симптомы болезни и характер патоморфологических изменений Патматериал: кровь, кусочки селезён ки, миндалин, лимфоузлов, лёгких, костн мозг в первые 2 ч после убоя или гибели. Материал посыл с нарочным. Вирусологический метод исслед: 1.Обнаружение вируса - ЛМ с МФА, непрямой твердофазный ИФА, ПЦР. 2. Выделение вируса лаб. животные нечувствительны: а) КК из тканей свиней без ЦПД - подтверждать МФА; б) биопроба на поросятах - дорого и небезопасно, проводят на поросятах из благополучных хозяйств 2-3 х мес возраста (20 - 30 кг). 3. Идентификация вируса и обнаружение Ат – сер. реакции: РН; РИД; РНГА; МФА; ИФА. Для постановки РИД в качестве Аг берут ткань поджелудочной железы, лимф. узлы (готовят из них суспензию). Иммунитет при КЧС: после переболевания стойкий и длительный иммунитет-в крови появляются преципитирующие, вируснейтрализующие Ат. Иммунитет сопровождается вирусоносительством до 6 мес, т.е. он нестерильный. Лечение: больных и подозрительных свиней не лечат, а подвергают убою непосред. в хоз-вах ( не увозят на убойные пункты, чтобы не допускать распространения инфекции, а мясо - в переработку на тушёнки и т.д.). Остальных свиней иммунизируют. Тем, которые были в контакте привив. сыворотку, т.е. создают пассивный иммунитет на 10-12 дней, затем вакцинация. В соседних хозяйствах – вакцинация в короткие сроки. Биологические препараты: 1. Диагностические биопрепараты - Аг, сыворотки; 2. Лечебные - иммунные сыворотки полученные на биофабриках гипериммунизацией свиней; 3. Профилактические в основном вакцины. Дифференциальная диагностика КЧС отличать от африканской чумы, рожи, БА, пастереллеза, сальмонеллеза, парагриппа и гриппа Препараты для специфической профилактики КЧС Авирулентная сухая вакцина - АСВ из лапинизированного шт «К» (сухая вирус-кровь кролика). Культуральная вакцина их шт «К» ВГНКИ - на первично-трипсинизированной КК почек Э свиней. Культуральная вакцина из шт «ЛК-К» ВНИИВВирусологии и Микробиологии - в гетерологичной системе, т.е. на субкультуре тестикул ягнят. 52. Африканская чума свиней. Характеристика вируса и лабораторная диагностика. Африканская чума свиней или Монтгомери болезнь.. Вызывает 100 % гибель. Забивают всех подозреваемых в очаге и в окружающих хозяйствах.АЧС высококонтагиозная болезнь домашних и диких свиней, сопровождается лихорадкой, острыми токсикозами, некротическим поражением лимфоидной ткани, эндотелия сосудов, появлением в органах тромбозов, кровоизлияний, и почти всегда заканчивающаяся смертельно. Вирус ДНК – содержащий. Геном линейная двунитчатая (двухспиральная) ДНК. Вирус семейства АСФАВИРУС Asfarviridae, имеет икосаэдрический капсид, размер 175-215 нм, монопатогенен. Из организма животных вирус выделяется с кровью, носовыми экскретами, фекалиями, мочой, слюной, с выдыхаемым воздухом. Основной путь передачи в пределах эпизоотического очага – алиментарный, респираторный. У выживших животных вирусоносительство отмечается пожизненно, пантропный. При отсутствии виремии вирус может сохраняться в селезёнке и лимфоузлах до 480 дней. Необычным для ДНК вирусов является его поведение истинного арбовируса, т.е. способность размножаться и в позвоночных, и в беспозвоночных хозяевах. Содержит ферменты в т.ч. ДНК - зависимую РНК – полимеразу, кислую фосфатазу, протеинкиназу. Исключительно устойчив в широком диапазоне температур и рН среды. Устойчивость: 4 мес в охлажденном мясе; 15 лет в замороженных тушах; от 140 до 400 дн в сырой ветчине различного приготовления; 150 дней в костной муке при 4°С. В трупах до 2,5 мес; в почве до 190 дн.; в фекалиях до 160 сут; при t -30-60°C - 6-10 лет; в свинарниках при ком t до 2- 4 мес; в мясе и копчёных окороках 6 мес; костный мозг-6-7 мес; моче-60 дней; при 56 °С - 1 час неполная инактивация; при t 60°С-инактивация в течение 20 мин. Стабильны при рН 3-10. Высокая устойчивость к щелочам, креалину, лизолу. Для дезинфекции - хлорсодержащие препараты (5% р-р хлорамина, гипохлориты кальция и натрия с 1-2% активного хлора, хлорная известь) - экспозиция 4 часа. У вируса АЧС сложная Аг структура. Вирус плюрален - разнообразные Аг (одно из основных его свойств). Переболевшие одним серотипом не имеют устойчивости против другого. Он содержит групповые – комплементсвязывающий и преципитирующий Аг и типовой гемадсорбирующий Аг Нет Аг на которые вырабатываются вируснеитрализующие Ат. Изученные изоляты разделены на 7 серотипов. Различают сверхострое, острое, подострое, хроническое и латентное течение болезни. Чаще наблюдают сверхострое и острое течение. При сверхостром гибель наступает через 24-72 часа. Острое течение - наиболее характерное. Повышение температуры до 40,5-42°С, парез задних конечностей, цианнозные красно-фиолетовые пятна на коже ушей, рыла, брюха, промежности и нижней части шеи. Болезнь по клиническим признакам и паталогоанатомическим изменениям сходна с классической чумой свиней. Диагностика трудоёмкая. Высоковирулентную форму АЧС легко диагностировать, потому что гибель свиней может достигать 100 %. АЧС, вызванную менее вирулентными штаммами, диагностировать будет более трудно, но она должна быть заподозрена, когда у свиньи отмечается лихорадка, и данные вскрытия включают:селезенка сильно увеличена от темно-красного до черного цвета; сильно увеличенные геморрагические почечные лимфатические узлы. Лабораторная диагностика: 1.Обнаружение антигена в крови (в антикоагулянте), миндалинах, селезенке, почках или лимфатических узлах ПЦР, ИФА с цельной кровью, РГАд, МФА на гистосрезах свежих тканей; 2. Выделение вируса в КК лейкоцитов и макрофагов костного мозга свиней. Гемадсорбция м.б. ч/з 18-24 ч, ЦПД ч/з 48-72 ч. В заражённых клетках образуются цитоплазматические Т-В с последующим вытеканием цитоплазмы и появлением многоядерных гигантских клеток («клеток-теней»). Основными изменениями в заражённых клетках являются распад хроматина ядра клетки и наличие цитоплазматических телец-включений. Биопробу на свиньях (с разрешения Главного управления ветеринарии), 3.Идентификация аг и обнаружение антител в сыворотке. РЗГАд специфична и является основным тестом в диагностике болезни.Заражённые клетки содержащие вирус способны адсорбировать Эр свиней в виде ягоды (малины), если обработать заражённые клетки специфической сывороткой и внести Эр будет задержка гемадсорбции. Природно-очаговая инфекция, у клещей орнитодоросов (род Ornithodorus) - сохраняются до 3-х лет, передаются потомству. 53. Дифференциальная диагностика вируса африканской чумы свиней от классической чумы.
Берут 7 поросят - 2 гол иммунные к чуме свиней заражают для диффер-и от АЧС и 3 гол не иммунные, 2 гол не заражают, содержат отдельно-контроль Наблюдают 21 д и ежедневно измеряют t. Диагноз считают установленным если 2 из 3-х не иммунных заболевают с характерными клин. Призн.. При отсутствии реакции у восприимчивых жив. или в случае ее недостаточной выраженности, нельзя исключить присутствие вируса в исследуемом мат. Отрицательный результат заражения м. б. следствием либо слишком малого кол-ва в нем вируса, либо слабой вирулентности. Поэтому спустя 3-6 нед после первичного заражения, проводят повторное, заражение (реинфекция) подопытных свиней на этот раз вирусом с заведомо известной вирулентностью (патогенным). Отсутствие у животных реакции на это заражение свидетельствует о приобретении ими иммунитета в результате первой инокуляции (бессимптомного переболевания) и указывает на присутствие вируса в исследуемом мат. Одновременно заражают 2-х поросят (контроль) патогенным вирусом. 54. Взятие патологического материала и проведение лабораторной диагностики ящура. Методы идентификации и типизации вирусов ящура. ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА Подозрение на ящур вызывает любое заболевание восприимчивых животных, характеризующееся появлением везикулярной сыпи в ротовой полости, на конечностях и вымени, повышенной саливацией, чмоканьем, затрудненным приемом и пережевыванием корма, а при осмотре ротовой полости—обнаружением афт и эрозий. Кроме того, обращают внимание на продолжительную хромоту, афты на венчике и в межкопытной щели, иногда спадение рогового башмака, афты на сосках и болезненность последних при доении. У крупного рогатого скота инкубационный период продолжается 1—3 дня, но может быть до 7—10 дней. Вначале отмечают ухудшение аппетита, вялую жвачку, повышенную саливацию. Затем температура тела повышается до 40,5—41,5° С, наступает угнетение, животное отказывается от корма, жвачка прекращается. На 2-3 день болезни на внутренней поверхности верхней и нижней губ, на беззубом крае нижней челюсти, на языке и слизистой оболочке щек появляются афты. У некоторых животных афты образуются в области межкопытной щели и на вымени. Иногда поражаются все четыре конечности. Через 12-24 часа стенки афт разрываются и образуются свежие эрозии. В это время температура тела понижается до нормальной, наступает обильное слюнотечение. В результате чмокающих движений в углах рта появляется пенистая масса. Через 2-3 недели эрозии заживают. При поражении конечностей животные хромают и часто ложатся, при афтах на вымени отмечают болезненность при доении, иногда возникает мастит. У крупного рогатого скота и свиней в естественных условиях болезнь протекает остро и, как правило (у взрослых животных), доброкачественно. У телят ящур чаще протекает в безафтозной форме с явлениями острого гастроэнтерита. При злокачественной форме ящур вначале протекает тиично, но в стадии выздоровления, на 7-10-й день, внезапно наступает резкое ухудшение состояния животного, учащение пульса до 120—140 ударов в 1 мин и 20—50% животных погибают от паралича сердца. Патологоанатомические изменения. При вскрытии обнаруживают изменения (афты и эрозии) в ротовой полости, иногда на слизистой оболочке пищевода и преджелудков жвачных. У телят, ягнят, поросят отмечают геморрагическое воспаление кишечника и дегенеративные измененения в мышце сердца («тигровое сердце»). При злокачественном ящуре поражения находят в сердечной мышце. Она бледная и дряблая, на разрезе выступают серовато-красноватые пятна и казеозно перерожденные фокусы серо-белого цвета различной величины. Под эпикардом и эндокардом кровоизлияния. Подобные изменения находят также в скелетных мышцах. Л а б о р а т о р н а я д и а г н о с т а к а Обнаружение вируса в исследуемом материале. Вирусный антиген выявляют с помощью серологических реакций и ПЦР. Для определения типа и вариантной принадлежности эпизоотического вируса ящура из доставленного в лабораторию патматериала чаще всего (РСК) (РДСК). Однако, когда доставленное количество вирусного материала недостаточно для исследования или РСК дает отрицательный результат или неспецифическую задержку гемолиза, ставят биопробу на КРС (не менее 2 голов) в возрасте 10—18 месяцев. Чаще всего для постановки биопробы используют мышат-сосунков 4—6-дневного возраста, морских свинок массой не менее 500 г и первичную культуру клеток почек телят, поросят, ягнят, щитовидной железы крупного рогатого скота и перевиваемые ВНК-21, УВ-RS2. Биопроба на мышатах удобна и экономична Морские свинки легко заражаются при интрадермальном введении вируссодержащего материала в плантарную поверхность задних лапок методом туннелирования в дозе 0,2 - 0,5 мл. Заражают не менее 5 гол. Первичные поражения обычно появляются через 24—48 ч после инокуляции. Созревшие афты собирают на 2—5-й день (по мере созревания) и сразу же замораживают или помещают в консервирующую жидкость до исследования в РСК. При заражении морских свинок следует иметь в виду, что часто для адаптации полевых штаммов вируса приходится проводить несколько пассажей, прежде чем появляются хорошо развитые афты и генерализованный процесс. Выделение вируса из исследуемого материала. Выделение вируса на естественно-восприимчивых и лабораторных животных (см. выше — биопроба). Выделение вируса на куриных эмбрионах не проводят. Для выделения вируса с помошью культуры клеток чаще используют однослойную культуру первично трипсинизированных клеток почек свиней или телят. Специфическая дегенерация клеток при подтверждении ее специфичности в РСК свидетельствует о наличии вируса ящура в испытуемом материале. Идентификация вируса с помощью серологических реакций. Чаще всего для этого используют РСК, а также РДП, РН, РНГА и иммуноферментный метод (ELISA).. 5). Дифференциальная диагностика. При дифференциальной диагностике ящура необходимо исключить другие болезни животных с везикулярным синдромом, такие, как везикулярный стоматит, везикулярную болезнь свиней, везикулярную экзантему свиней, катаральную лихорадку овец. Специфическая профилактика. В нашей стране для специфической профилактики животных применяют инактивированные вакцины: 1. Лапинизированную гидроокисьалюминиевую вакцину, приготовленную из вируса, репродуцированного в организме новорожденных крольчат. 2. Гидроокисьалюминиевую вакцину из вируса, культивируемого в переживающей ткани слизистой оболочки языка не иммунного к ящуру КРС (метод Френкеля), 3. Вакцину из вируса, полученного в суспензионной культуре клеток ВНК-21/13 |