Микра экз. Билет 1 Генетические и биохимические механизмы Лекарственной устойчивости. Путь преодоления лекарственной устойчивости бактерий

Название	Билет 1 Генетические и биохимические механизмы Лекарственной устойчивости. Путь преодоления лекарственной устойчивости бактерий
Анкор	Микра экз
Дата	25.01.2020
Размер	0.84 Mb.
Формат файла
Имя файла	mikra_bilety1.docx
Тип	Документы #105758
страница	12 из 13

1 ... 5 6 7 8 9 10 11 12 13

Микрофлора воды и почвы. Источники и пути попадания паразитических микробов в воду и почву. Санитарно-показательные микроорганизмы воды и почвы. Нормативы микробиологических показателей питьевой воды( ОМЧ, количества БГКП, эшерихий, колифагов).

Основные требования, предъявляемые к СПМ

СПМ должно постоянно обитать в естественных полостях человека и животных и постоянно выделятся в внешнюю среду.
СПМ не должно интенсивно размножатся во внешней среде ( включая пищевые продукты), или его репродукция должна нести кратковременный незначительный характер.
Длительность выживания и устойчивость СПМ во внешней среде не должно быть не меньше, а должно быть несколько больше чем у патогенных микроорганизмов.
У СПМ не должно быть во внешне среде «двойников» или аналогов. С которыми их можно перепутать.
СПМ должен быть достаточно типичным и не обладать высокой изменчивостью, с тем, чтобы их идентификация осуществлялась без особых трудностей.
СПМ должен легко обнаруживаться современными микробиологическими методами и поддаваться количественному определению.

Колиформные бактерии (БГКП)

Кишечная палочка и родственные ей бактерии, относят к санитарно-показательным бактериям группы кишечных палочек – БГКП.в нормативных документах по контролю за санитарно-бактериологическими показателями предусмотрен их количественный учет. Понятие БГКП – утилитарное, санитарно-бактериологическое и экологическое, но не таксономическое. КБГКП относят грамотрицательные, не образующие спор палочек, сбраживающие лактозу с образованием кислоты и газа при температуре 37. При этом обязательно учитывается цитратоотрицательные и цитратоположительные разновидности БГКП, включающие представителей рода Escherichia, Enterobacter, Klebsiella, Citrobacter Serratia.

Бактериофаки кишечных палочек (кофаги)

В качестве СПМ предлагают использовать бактериофаги кишечных палочек (эшерихий, шигелл, сальмонелл). Они постоянно обнаруживаются, где есть бактерии к которым они адаптированы.

Микрофлора почвы.

Почва является основным местом обитания микробов. Состав микрофлоры складывается из многих тысяч видов бактерий, грибов, простейших и вирусов. Количество микробов зависит от состава почв, климатических условий, влажности и т.д. Среди них сапрофиты (“гнилое растение”), т.е. микроорганизмы, живущие за счет мертных органических субстратов. В процессе самоочищения почвы и кругооборота веществ принимают участие также нитрифицирующие(нитрификаты, появление которых указывает на процессы самоочищения в почве, ведь они завершают цикл разложения азотсодержащих соединений) азотфиксирующие, денитрифицирующие и др.

Наиболее разнообразен микробный пейзаж в околокорневой зоне растений, где они образуют зону интенсивного размножения и повышенной активности(ризосферная зона). Она отличается специфичностью для каждого вида растений. Количество микробов в почве достигает нескольких миллиардов в 1г.Больше всего их в почве, подвергающейся обработке(пахоте и аэрации), меньше - в лесной и песчаной.

Микробы распространены в почве неравномерно, на поверхности(толщина 1-2мм) их меньше, потому что они подвергаются действию солнечных лучей и высушиванию, на глубине 10-20см – многообразна и многочисленна микрофлора , тут протекают основные биохим процессии превращения органических веществ под действием микробов, в более глубоких слоях почва становится скудной.

Группы почвенных микроорганизмов, патогенных для человека:

Микроорганизмы, для которых почва служит природным биотопом – возбудитель ботулизма, актиномицеты (возбудители актиномикозов)образующие микотоксины асперигиллы.
Микроорганизмы, попадающие в почву с выделениями человека, животных и сохраняющиеся там длительно время (годами и десятилетиями) – сибиреязвенная палочка, возбудители столбняка, ботулизма, газовой гангрены. При благоприятных условиях они могут размножаться и сохраняться в почве в виде спор.
Микроорганизмы, попадающие в почву с выделениями человека и животных , но сохраняющиеся в ней сравнительно недолго (недели, месяцы) – кишечная палочка(до8мес), сальмонеллы (до1 года при минусовой температуре), шигеллы (до100 дней), холерный вибрион (2мес). Основными факторами, обуславливающими быструю гибель этих микроорганизмов, являются неспособность к спорообразованию и антагонистические свойства микрофлоры почвы.

Возбудители сапронозов могут автономно обитать в почве и воде и быть связанными с почвенными и водными организмами, т.е. эта природная среда обитания для них- основной резервуар возбудителей. Почва и вода в случае сапронозов выступает в качестве источника заражения животных и людей.

К санитарно-показательны микробам(СПМ), указывающим на фекальное загрязнение почвы, относят: БГКП, Clostridium perfringens и термофильные бактерии

Всех дольше сохраняется кишечная палочка, поэтому по ней судят о наличии в почве других энтеробактерий.

На свежее фекальное загрязнение почвы указывают высокие титры БГКП при низких титрах нитрификатов, термофилов, а также относительно высокое содержание вегетативных форм Clostridium perfringens.

Обнаружение энтерококков всегда свидетельствует о свежем фекальном загрязнении.

Большое содержание всех СПМ говорит об окончании самоочищения почвы и ее освобождении от патогенных энтеробактерий и органических веществ.

Микрофлора воды.

Вода- древнейшее место обитания микроорганизмов. Пресноводные водоемы и реки отличаются богатой микрофлорой. Многие виды галофильных микробов(ГАЛОФИЛЫ организмы, обитающие только в условиях высокой солёности) обитает в морской воде, в том числе на глубинах в несколько тысяч метров. Численность микроорганизмов в воде в определенной степени связано с содержанием органических веществ. Серьезной экологической проблемой являются сточные воды, содержащие значительное количество микроорганизмов и органических веществ, не успевающих самоочищаться.

Санитарно- гигиеническое качество воды оценивается различными способами. Чаще определяют коли- титр и коли- индекс, а также общее количество микроорганизмов в мл. Коли- индекс- количество E.coli (кишечной палочки) в одном литре, коли- титр- наименьшее количество воды, в котором обнаруживается одна клетка кишечной палочки. Санитарно- эпидемиологическое значение определения в различных объектах микроорганизмов изучает санитарная микробиология. К числу ее основных принципов можно отнести индикацию (выявление) патогенов в объектах окружающей среды, к косвенным методам- выявление санитарно- показательных микроорганизмов, определение общей микробной обсемененности.

Вода имеет существенное значение в эпидемиологии кишечных инфекций. Их возбудители могут попадать с испражнениями во внешнюю среду (почву), со сточными водами- в водоемы и в некоторых случаях- в водопроводную сеть.

Реакция преципитации в диагностике инфекций. Механизмы и методы постановки, практическое применение.

Реакция преципитации (РП)

• Осаждение растворенного Аг под действием Ат

• Общая поверхность Аг (площадь) очень большая – необходима высокая концентрация Ат – сыворотки не титруют (не разводят)!

• Титр сыворотки в РП – максимальное разведение Аг, при котором ещё наблюдается преципитация

• Варианты РП:

* кольцепреципитация (термопреципитация)

* преципитация в агаре

* преципитация в геле (радиальная иммунодиффузия, иммуноэлектрофорез)

* реакция флоккуляции

1. Реакция кольцепреципитации

Образование кольца преципитации на разделе сред (диагностической сыворотки и раствора Аг) в преципитационной пробирке.

Сыворотка--- раствор Аг кольцо преципитации возникает в момент эквивалентного соотношения Аг и Ат

Термопреципитация (р-ция Асколи): исследуемый материал предварительно прогревают - получают раствор Аг

Область применения:

* видовая принадлежность белка (судебная медицина; подлинность пищевых продуктов и пр.)

* определение растворенного Аг возбудителя в патологическом материале

2. Преципитация в агаре

• Область применения: бактериологический метод диагностики – определение токсигенности бактерий

• Суть метода:

* на поверхность агара наносят фильтровальную бумагу, пропитанную диагностической сывороткой (антитоксической) Ат диффундируют в агар

* рядом сеют исследуемые микроорганизмы Аг (экзотоксин) диффундирует в агар

* в зоне образования комплексов Аг-Ат появляются полосы («усы») преципитации

3.Преципитация в геле

• Радиальная иммунодиффузия (Манчини,1965 г.):

Ат (диагностическую сыворотку) вносят в агарозный гель делают лунки и в них вносят исследуемый Аг (в разных количествах)

Аг диффундирует в гель, образуя кольца (преципитат) вокруг лунок сравнивают размеры колец с эталоном определяют количество Аг

• Область применения: определение белков биологических жидкостей; иммуноглобулинов; белков микроорганизмов

Иммуноэлектрофорез (Грабар, 1956г.):

Исследуемый материал (Аг) вносят в агарозный гель и «разгоняют» в электрическом поле

Делают «траншеи» и вносят в них диагностические Ат линии преципитации образуются вдоль «траншеи»

• Область применения: выявление белков биологических жидкостей; иммуноглобулинов; бактериальных белков

4. Реакция флоккуляции

• Образование помутнения и осадка в результате взаимодействия Аг - анатоксина (или токсина) с Ат - антитоксической сывороткой в течении нескольких десятков минут при их эквивалентном соотношении

• Не является диагностической!

• Область применения: титрование анатоксинов, токсинов и антитоксических сывороток

Все указанные реакции не идут в организме!

Стафилококки, классификация, факторы патогенности. Заболевания, вызываемые стафилококками, эпидемиология, микробиологическая диагностик, специфическая профилактика и терапия. Госпитальные штаммы.

Наиболее известны:

Стафилококк золотистый (Staphylococcus aureus), как наиболее патогенный для человека. Назван по способности образовывать золотистый пигмент. Может вызывать у человека гнойные воспалительные процессы почти во всех органах и тканях.
Стафилококк эпидермальный (Staphylococcus epidermidis) — часто встречается на коже и слизистых оболочках человека, может вызывать сепсис, эндокардит, конъюнктивит, гнойную инфекцию ран и гнойные инфекции мочевыводящих путей.
Стафилококк сапрофитный (Staphylococcus saprophyticus) — может вызывать острый цистит и уретрит.

Таксономия: относятся к отделуFirmicutes, семейству Мicrococcacae, родуStaphylococcus. К данному роду относятся 3 вида:S.aureus,S.epidermidisиS.saprophyticus.

Морфологические свойства:Все виды стафилококков представляют собой округлые клетки. В мазке располагаются несимметричными гроздьями. Клеточная стенка содержит большое количество пептидогликана, связанных с ним тейхоевых кислот, протеин А. Грамположительны. Спор не образуют, жгутиков не имеют. У некоторых штаммов можно обнаружить капсулу. Могут образовыватьL-формы.

Культуральные свойства: Стафилококки — факультативные анаэробы. Хорошо растут на простых средах. На плотных средах образуют гладкие, выпуклые колонии с различным пигментом, не имеющим таксономического значения. Могут расти на агаре с высоким содержаниемNaCl. Обладают сахаролитичес-

кими и протеолитическими ферментами. Стафилококки могут вырабатывать гемолизины, фибринолизин, фосфатазу, лактамазу, бактериоцины, энтеротоксины, коагулазу.

Стафилококки пластичны, быстро приобретают устойчивость к антибактериальным препаратам. Существенную роль в этом играют плазмиды, передающиеся с помощью трансдуцирующих фагов от одной клетки к другой. R-плазмиды детерминируют устойчивость к одному или нескольким антибиотикам, за счет продукции в-лактамазы.

Антигенная структура. Около 30 антигенов, представляющих собой белки, полисахариды и тейхоевые кислоты. В составе клеточной стенки стафилококка содержится протеин А, который может прочно связываться сFc-фрагментом молекулы иммуноглобулина, при этомFab-фрагмент остается свободным и может соединяться со специфическим антигеном. Чувствительность к бактериофагам (фаготип) обусловлена поверхностными рецепторами. Многие штаммы стафилококков являются лизогенными(образование некоторых токсинов происходит с участием профага).

Факторы патогенности: Условно – патогенные. Микрокапсула защищает от фагоцитоза, способствует адгезии микробов; компоненты клеточной стенки – стимулируют развитие воспалительных процессов. Ферменты агрессии: каталаза – защищает бактерии от действия фагоцитов, в-лактамаза – разрушает молекулы антибиотиков.

Резистентность.Устойчивость в окружающей среде и чувствительность к дезинфектантам обычная.

Патогенез.Источником инфекции стафилококков - человек и некоторые виды животных (больные или носители). Механизмы передачи — респираторный, контактно-бытовой, алиментарный.

Иммунитет: Постинфекционный – клеточно-гуморальный, нестойкий, ненажряженный.

Клиника.Около 120 клинических форм проявления, которые имеют местный, системный или генерализованный характер. К ним относятся гнойно-воспалительные болезни кожи и мягких тканей (фурункулы, абсцессы), поражения глаз, уха, носоглотки, урогенитального тракта, пищеварительной системы (интоксикации).

Микробиологическая диагностика.Материал для исследования – гной, кровь, моча, мокрота, испражнения.

Бактериоскопический метод:из исследуемого материала (кроме крови) готовят мазки, окрашивают по Граму. Наличие грам «+» гроздевидных кокков, располагающихся в виде скоплений.

Бактериологический метод: Материал засевают петлей на чашки с кровяным и желточно-солевым агаром для получения изолированных колоний. Посевы инкубируют при 37С в течении суток. На следующий день исследуют выросшие колонии на обеих средах. На кровяном агаре отмечают наличие или отсутствие гемолиза. На ЖСАS.aureusобразует золотистые круглые выпуклые непрозрачные колонии. Вокруг колоний стафилококков, обладающих лецитиназной активностью, образуются зоны помутнения с перламутровым оттенком. Для окончательного установления вида стафилококка 2—3 колонии пересевают в пробирки со скошенным питательным агаром для получения чистых культур с последующим определением их дифференциальных признаков.S.aureus– «+»: образование плазмокоагулазы, летициназы. Ферментация:глк, миннита, образование а-токсина.

Для установления источника госпитальной инфекции выделяют чистые культуры стафилококка от больных и бактерионосителей, после чего проводят их фаготипирование с помощью набора типовых стафилофагов. Фаги разводят до титра, указанного на этикетке. Каждую из исследуемых культур засевают на питательный агар в чашку Петри газоном, высушивают, а затем петлей каплю соответствующего фага наносят на квадраты (по числу фагов, входящих в набор), предварительно размеченные карандашом на дне чашки Петри. Посевы инкубируют при 37 °С. Результаты оценивают на следующий день по наличию лизиса культуры.

Серологический метод: в случаях хронической инфекции, определяют титр анти-а-токсина в сыворотке крови больных. Определяют титр АТ к риботейхоевой кислоте( компонент клеточной стенки).

Лечение и профилактика. Антибиотики широкого спектра действия (пенициллины, устойчивые к в-лактамазе). В случае тяжелых стафилококковых инфекций, не поддающихся лечению антибиотиками, может быть использована антитоксическая противостафилококковая плазма или иммуноглобулин, иммунизированный адсорбированным стафилококковым анатоксином. Выявление, лечение больных; проведение планового обследования медперсонала, вакцинация стафилококковым анатоксином.

Стафилококковый анатоксин: Анатоксины применяют для создания искусственного антитоксического иммунитета. Подобные вакцины используют для профилактики дифтерии, столбняка, газовой гангрены, стафилококковой инфекции и др

Стафилококковая вакцина:взвесь коагулазоположительных стафилококков, инактивированных нагреванием. Применяют для лечения длительно текущих заболеваний.

Иммуноглобулин человеческий противостафилококковый: гамма-глобулиновая фракция сыворотки крови, содержит стафилококковый анатоксин. Готовят из человеч. крови, с высоким содержанием антител. Применяется для специфического лечения.

БИЛЕТ 52

1. Особенности репродукции ДНК и РНК-содержащих вирусов.

Этапы вирусной репродукции при продуктивной вирусной инфекции.

• 1. адсорбция вирусов (опосредуется рецепторами вируса и чувствительной клетки)

• 2. проникновение вирусов в клетку (путем рецепторного эндоцитоза)

• 3. синтез ранних вирусных белков (ферменты репликации и синтеза структурных белков вируса) как правило, это белки, которые регулируют дальнейшие процессы размножения вируса (вирусная НК подавляет генетический аппарат клетки)

• 3. репликация вирусной НК и синтез поздних вирусных белков (как правило, это белки капсида)

• 4. сборка вирусов (при этом могут оставаться «неупакованные» НК, фрагменты капсида)

5. выход вирусов из клетки : лизис клетки или почкование вируса (этот механизм обычно присущ сложным вирусам – имеющим суперкапсид); возможен выход вирусов через цитоплазматические каналы

Формула переноса генетической информации у различных вирусов:

для ДНК-содержащих вирусов: ДНК вируса - > иРНК - > белок вируса

для РНК-содержащих «-»-нитевых вирусов: РНК вируса – >иРНК - > белок вируса

для РНК-содержащих «+»-нитевых вирусов: РНК вируса - > белок вируса

для РНК-содержащих ретровирусов: РНК вируса - >комплементарная ДНК - > иРНК - >белок вируса

! Плюс-нитевая РНК – работает, как информационная РНК!

! Минус-нитевая РНК – не может взаимодействовать с рибосомами клетки!

Факторы патогенности микроорганизмов: адгезины, факторы инвазии и агрессии. Тропизм микробов. Взаимосвязь структуры микробной клетки и факторов патогенности.

Возбудитель обладает тропизмом – способностью поражать определенные ткани, т.е. имеет рецепторы, для распознавания клеток-мишеней (биологическое узнавание)

Факторы патогенности:

Адгезины (ворсинки, адгезивные структуры оболочки)

Капсула (микрокапсула, макрокапсула)

ЛПС

Пептидогликан, тейхоевые кислоты

Ферменты (инвазии, агрессии)

Токсины (эндотоксины и экзотоксины)

Основные факторы патогенности микроорганизмов - адгезины, ферменты патогенности, подавляющие фагоцитоз вещества, микробные токсины, в определенных условиях- капсула, подвижность микробов.

Адгезины и факторы колонизации- чаще поверхностные структуры бактериальной клетки, с помощью которых бактерии распознают рецепторы на мембранах клеток, прикрепляются к ним и колонизируют ткани. Функцию адгезии выполняют пили, белки наружной мембраны, ЛПС, тейхоевые кислоты, гемагглютинины вирусов. Адгезия - пусковой механизм реализации патогенных свойств возбудителей.

Факторы инвазии, проникновения в клетки и ткани хозяина. Микроорганизмы могут размножаться вне клеток, на мембранах клеток, внутри клеток. Бактерии выделяют вещества, способствующие преодолению барьеров хозяина, их проникновению и размножению. У грамотрицательных бактерий это обычно белки наружной мембраны. К этим же факторам относятся ферменты патогенности.

Ферменты инвазии:

гиалуронидаза – расщепляет гиалуроновую кислоту, входящую в состав соединительной ткани, что приводит к повышению её проницаемости, а также к повышению проницаемости слизистых оболочек;

нейраминидаза (сиалидаза) – разрушает гликозидные связи в олигосахаридах,

гликоконъюгатах, тем самым увеличивая проницаемость тканей;

лецитиназа (лецитовителлаза) – разрушает лецитин, входящий в состав оболочек клеток, что ведет к их разрушению;

ДНК-аза, РНК-аза – ферменты расщепляющие нуклеиновые кислоты;

плазмокоагулаза (коагулаза) – обеспечивает свертывание плазмы, что формирует защитную оболочку вокруг бактерий в тканях, тем самым, защищая возбудитель от иммунных механизмов;

фибринолизин – фермент, обеспечивающий разрушение сгустка плазмы;

коллагеназа и пр. – ферменты, разрушающие коллагеновые волокна.

Ферменты патогенности - это факторы агрессии и защиты микроорганизмов. Способность к образованию экзоферментов во многом определяет инвазивность бактерий- возможность проникать через слизистые, соединительнотканные и другие барьеры. К ним относятся различные литические ферменты- гиалуронидаза, коллагеназа, лецитиназа, нейраминидаза, коагулаза, протеазы. Более подробно их характеристика дана в лекции по физиологии микроорганизмов.

Аденовирусы.Характеристика.Патогенез, онкогенные типы,. Лабораторная диагностика

Семейство Adenoviridae

Род Mastodenovirus

Аденовируся, впервые выделены в 1953 г. В отличие от других респираторных вирусов содержат ДНК. Известно белее 40 серотипов. Имеют сферическую форму диаметром 70-90 нм и просто организованную структуру. Устойчивы в окружающей среде, длительно сохраняются в воздухе, воде, лекарственных препаратах, употребляемых в глазной клинике. На предметах обихода. При размножение в культуре клеток аденовирусы вызывают цитопатический эффект и образуют внутриядерные включения. Непатогенны для животных. Некоторые серотипы аденовирусов обладают онкогенными свойствами (вызывают развитие злокачественных опухолей у лабораторных живтных) Помипо аэрогенного, возможен фекально-оральный механизм передачи возбудителя (через пищевые продукты, воду открытых водоемов и плавательных бассейнов). Характерно многообразие клинических проявлений. поскольку аденовирусы могут поражать

дыхательные пути, слизистую оболочку глаза, кишечник мочевой пузырь. Иммунитет типоспецифический.

Экспресс диагностика. Обнаружение вирусного антигена с помощью РИФ, ИФ. РИА. Выделяют аденовирусы на культурах клеток, идентифицируют с помощью РСК, РН, РТГА. Эти же реакции используют для серодиагностики заболевания. Разработаны живые и инактивированные вакцины, которые не получили широкого практического применения из-за онкогенных свойств аденовирусов. При поражении глаз применяют препараты интерферона, фермент дезоксирибонуклеазу, противовирусные глазные мази

Аденовирусы.

Аденовирусы человека относятся к семейству Adenoviridae, принадлежат к роду Mastadenovirus, и подразделяются на подроды А, В, С, D, Е и F. В настоящее время известно не менее 49 серотипов аденовирусов

человека. Биологические особенности аденовирусов. В семейство объединены вирусы с голым капсидом (отсутствует внешняя оболочка), кубическим типом симметрии. Размер вириона 60–90 нм. Геном

представлен линейной молекулой двухнитевой ДНК.

Зрелый вирус состоит из 252капсомеров, включающих в себя: 1) гексоны, содержащие типоспецифические антигенные детерминанты, действующие при высвобождении гексонов в составе вириона, ответственные за проявление токсического эффекта;

2) пентоны, содержащие малые антигены вируса и реактивный растворимый антиген семейства, обуславливающие гемагглютинирующие свойства вирусов.

Антигенная структура:

1) поверхностные антигены структурных белков (видо– и типоспецифичные);

2) антигены гексонов (группоспецифичные);

3) комплементсвязывающий антиген (идентичный для различных серотипов).

Основные пути передачи – воздушно-капельный и контактный.

Симптоматика поражений обусловлена репродукцией возбудителя в чувствительных тканях. По типу поражений чувствительных клеток выделяют три типа инфекций:

1) продуктивную (литическую) - cопровождается гибелью клетки после выхода дочерней популяции;

2) персистирующую - наблюдается при замедлении скорости репродукции, что дает возможность тканям восполнять потерю инфицированных клеток за счет нормального деления неинфицированных клеток;

3) трансформирующую - в культуре ткани происходит превращение клеток в опухолевые.

Основные клинические проявления аденовирусных инфекций

1. Наиболее часто – ОРВИ, протекающие по типу гриппоподобных поражений. Пик заболеваемости приходится на холодное время года. Вспышки возможны в течение всего года.

2. Фарингоконъюнктивиты (фарингоконъюнктивальная лихорадка). Пик заболеваемости приходится на летние месяцы; основной источник инфекции – вода бассейнов и природных водоемов.

3. Эпидемический кератоконъюнктивит. Поражения обусловлены инфицированием роговицы при травмах либо проведении медицинских манипуляций. Возможны эрозии роговицы вплоть до потери зрения.

4. Инфекции нижних отделов дыхательных путей.

Лабораторная диагностика аденовирусной инфекции

1. Иммунологические методы: обнаружение Аг вируса в эпителии слизистой носоглотки (ИФА. ИФ)

2. Вирусологический метод: выделение вируса из отделяемого носа, зева, фекалий и пр. на культурах эпителиальных клеток

Идентификация: РСК, РН цитопатического действия в культуре клеток; ИФ

3. Серологический метод: парные сыворотки в РСК

Иммунопрофилактика:

живые и инактивированные вакцины – не находят применения из-за потенциальной онкогенности аденовирусов.

Лечение: средства специфической лекарственной терапии отсутствуют.

Специфическая профилактика: живые вакцины, включающие в себя ослабленные вирусы доминирующих серотипов.

БИЛЕТ 53

Вирусы бактерий – бактериофаги. Морфология и строение бактериофагов, их химический состав. Фаги вирулентные и умеренные, стадии их взаимодействия с бактериальной клеткой. Явление лизогении, фаговая конверсия, значение этих явлений

Формы существования фагов

1. Вирион – вне клетки бактерий

2. Вегетативный фаг – внутри клетки и размножается

3. Профаг – в составе генома клетки бактерий

Бактериофаг не имеет клеточного строения

Размер фаговых частиц от 20 до 200 нм

Строение фагов

1. Головка, в которую заключена нуклеиновая кислота (ДНК или РНК).

Головка состоит из белков. Головка выполняет защитную функцию:

упаковка и хранение генетической информации фага.

2. Воротничок – отграничивает головку от хвостового отростка.

3. Хвостовой отросток - это полый цилиндр, через который проходит

нуклеиновая кислота. Хвостовой отросток покрыт чехлом, способным

сокращаться. Хвостовой отросток и чехол состоят из белков. Хвостовой отросток необходим для введения нуклеиновой кислоты фага в клетку бактерий.

4. Базальная пластинка, на которой расположены шипы и фибриллы. На шипах может быть фермент лизоцим. Шипы необходимы, чтобы механически прокалывать и с помощью лизоцима растворять клеточную стенку бактерий. Длинные нити фибриллы осуществляют адсорбцию фага на поверхности клеток бактерий.
Классификация фагов

Фаги недостаточно изучены, поэтому нет единой классификации.

Все существующие классификации базируются на строении фагов.

Различают следующие морфологические типы фагов:

1 тип – нитевидные фаги.

2 тип – имеют головку и зачаток хвостового отростка (мелкие РНК- содержащие фаги).

3 тип – имеют головку и короткий хвостовой отросток

4 тип имеют головку и длинный несокращающийся хвостовой отросток.

5 тип имеет головку и длинный сокращающийся хвостовой отросток.

Например, фаги кишечной палочки принято делить на Т-чётные и Т-нечётные, по количеству фибрилл на базальной пластинке.

Взаимодействие фагов с бактериальной клеткой характеризуется определённой специфичностью. По специфичности действия различают поливалентные фаги, способные взаимодействовать с родственными видами бактерий, моновалентные - взаимодействующие с бактериями определённого вида, и типовые фаги - взаимодействующие с отдельными вариантами (типами) данного вида бактерий.

По характеру взаимодействия с клеткой бактерий фаги делят на вирулентные и умеренные.

Вирулентные фаги

Взаимодействие вирулентного фага с бактериальной культурой заканчивается ее лизисом.

Формы существования вирулентного фага: вирион, вегетативный фаг.

Литический цикл развития вирулентных фагов:

1. Адсорбция – прикрепление фага на поверхности чувствительной клетки бактерий. На первых этапах адсорбции реализуется электростатическое притяжение фага к клетке, а затем рецепторное узнавание.

2. Проникновение нуклеиновой кислоты фага в цитоплазму клетки бактерий. Нуклеиновая кислота фага проникает в цитоплазму клетки по типу инъекции. Белки капсида, хвостовой отросток остаются снаружи клетки.

3. Репродукция фага внутри клетки: эклипс, синтез ранних фаговых белков (ферменты фага), репликация нуклеиновой кислоты фага, синтез поздних фаговых белков (структурные белки), сборка фаговых частиц – морфогенез.

4. Выход фага из клетки путем ее лизиса.

Умеренные фаги

Взаимодействие умеренного фага с бактериальной клеткой не всегда заканчивается ее лизисом.

Формы существования умеренного фага: вирион, профаг, вегетативный фаг.

Лизогенный цикл развития умеренного фага:

1. Адсорбция

2. Проникновение нуклеиновой кислоты фага в цитоплазму клетки

3. Встраивание нуклеиновой кислоты фага в геном клетки бактерий и существование в форме профага.

Все клетки бактерий, несущие в геноме копию профага, будут лизогенными. Это явление получило название лизогении.

Умеренные фаги могут вносить в геном бактерий новые свойства (устойчивость к антибиотикам, токсинообразование и т. д.) – это явление фаговой конверсии.

Индукция профага – при условиях, неблагоприятных для клетки (облучение культуры УФЛ, старение культуры, истощение питательной среды, содержание в питательной среде анитибиотиков и т. д.), профаг может выйти из состава бактериальной хромосомы и перейти на литический цикл развития, который заканчивается лизисом бактериальной культуры.

Умеренные фаги могут нанести вред микробиологическому производству. Так, если микроорганизмы, используемые в качестве продуцентов вакцин, антибиотиков и других биологических веществ, оказываются лизогенными, существует опасность перехода умеренного фага в вирулентную форму, что неминуемо приведёт к лизису производственного штамма

Антигены, определение, критерии антигенности. Антигенные детерминанты, их строение. Иммунохимическая специфичность антигенов: видовая, групповая, типовая, органная, гетероспецифическая. Полноценные антигены, гаптены, их свойства.

Антигены- вещества различного происхождения, несущие признаки генетической чужеродности и вызывающие развитие иммунных реакций (гуморальных, клеточных, иммунологической толерантности, иммунологической памяти и др.).

Свойства антигенов, наряду с чужеродностью, определяет их иммуногенность- способность вызывать иммунный ответ и антигенность- способность (антигена) избирательно взаимодействовать со специфическими антителами или антиген- распознающими рецепторами лимфоцитов.

Классификация антигенов

• Видовые антигены – присущи разным видам: используется в судебной медицине; для идентификации бактерий

• Внутривидовые (изоантигены) – разным особям внутри вида:

* внутривидовые антигены бактерий - серотипы

* группы крови (АВО), резус-фактор, антигены главного комплекса гистосовместимости (Major Histocompatibiliti Complex - MHC I и II типа); МНС I – все ядерные клетки организма МНС II –

иммунные клетки

• Органные – присущи органам, независимо от вида: почки, печень, нервная ткань

• Органоидные – присущи органоидам клетки: рибосомы, митохондрии

эндогенные (аутоантигены):

а) образующиеся в процессе жизнедеятельности - опухолевые, повреждённых тканей, мутировавших клеток, вирусные белки;

б) «забарьерные антигены»: хрусталик глаза, эндокринные железы, клетки ЦНС, рубцовая ткань

Антигенами могут быть белки, полисахариды и нуклеиновые кислоты в комбинации между собой или липидами. Антигенами являются любые структуры, несущие признаки генетической чужеродности и распознаваемые в этом качестве иммунной системой. Наибольшей иммуногенностью обладают белковые антигены, в том числе бактериальные экзотоксины, вирусная нейраминидаза.

Многообразие понятия “антиген”.

Антигены разделены на полные (иммуногенные), всегда проявляющие иммуногенные и антигенные свойства (чаще белки) , и неполные (гаптены), не способные самостоятельно вызывать иммунный ответ(липиды, полисахариды, нукл.кислоты). Полугаптены -простые вещ-ва, вступающие в химическое взаимодействие с белковыми молекулами, изменяя ее структуру и формируя антигенные детерминанты.(бром, йод, витамины)

Гаптены обладают антигенностью, что обусловливает их специфичность, способность избирательно взаимодействовать с антителами или рецепторами лимфоцитов, определяться иммунологическими реакциями. Гаптены могут стать иммуногенными при связывании с иммуногенным носителем (например, белком), т.е. становятся полными.

За специфичность антигена отвечает гаптенная часть, за иммуногенность- носитель (чаще белок).

Иммуногенность зависит от ряда причин (молекулярного веса, подвижности молекул антигена, формы, структуры, способности к изменению). Существенное значение имеет степень гетерогенности антигена, т.е. чужеродность для данного вида (макроорганизма), степени эволюционной дивергенции молекул, уникальности и необычности структуры. Чужеродность определяется также молекулярной массой, размерами и строением биополимера, его макромолекулярностью и жесткостью структуры. Белки и другие высокомолекулярные вещества с более высоким молекулярным весом наиболее иммуногенны. Большое значение имеет жесткость структуры, что связано с наличием ароматических колец в составе аминокислотных последовательностей. Последовательность аминокислот в полипептидных цепочках- генетически детерминированный признак.

Антигенность белков является проявлением их чужеродности, а ее специфичность зависит от аминокислотной последовательности белков, вторичной, третичной и четвертичной (т.е. от общей конформации белковой молекулы) структуры, от поверхностно расположенных детерминантных групп и концевых аминокислотных остатков. Коллоидное состояние и растворимость- обязательные свойства антигенов.

Специфичность антигенов зависит от особых участков молекул белков и полисахаридов, называемых эпитопами.

Эпитопы или антигенные детерминанты- фрагменты молекул антигена, вызывающие иммунный ответ и определяющие его специфичность. Антигенные детерминанты избирательно реагируют с антителами или антиген- распознающими рецепторами клетки.

Структура многих антигенных детерминант известна. У белков это обычно фрагменты из 8- 20 выступающих на поверхности аминокислотных остатков, у полисахаридов- выступающие О- боковые дезоксисахаридные цепи в составе ЛПС, у вируса гриппа- гемагглютинин, у вируса иммунодефицита человека- мембранный гликопептид.

Эпитопы качественно могут отличаться, к каждому могут образовываться “свои” антитела. Антигены, содержащие одну антигенную детерминанту, называют моновалентными, ряд эпитопов- поливалентными.

Полимерные антигены содержат в большом количестве идентичные эпитопы (флагеллины, ЛПС).

Основные типы антигенной специфичности (зависят от специфичности эпитопов).

1.Видовая- характерна для всех особей одного вида (общие эпитопы).

2.Групповая- внутри вида (изоантигены, которые характерны для отдельных групп). Пример- группы крови (АВО и др.).

3.Гетероспецифичность- наличие общих антигенных детерминант у организмов различных таксономических групп. Имеются перекрестно- реагирующие антигены у бактерий и тканей макроорганизма.

*антиген Форсмана – гликопротеид эритроцитов кошек, собак, барана и органов морской свинки

*антигены стрептококков и антигены эндокарда, нервных клеток, почечных клубочков

* антигены вирусов оспы и антигены эритроциты человека

****Практическое значение: персистенция возбудителя; аутоиммунные реакции

Подобная антигенная мимикрия обманывает иммунную систему, защищает от ее воздействия микроорганизмы. Наличие перекрестных антигенов способно блокировать системы, распознающие чужеродные структуры.

4.Патологическая. При различных патологических изменениях тканей происходят изменения химических соединений, что может изменять нормальную антигенную специфичность. Появляются “ожоговые”, “лучевые”, “раковые” антигены с измененной видовой специфичностью. Существует понятие аутоантигенов - веществ организма, к которым могут возникать иммунные реакции ( так называемые аутоиммунные реакции), направленные против определенных тканей организма. Чаще всего это относится к органам и тканям, в норме не подвергающихся воздействию иммунной системы в связи с наличием барьеров (мозг, хрусталик, паращитовидные железы и др.).

5.Стадиоспецифичность. Имеются антигены, характерные для определенных стадий развития, связанные с морфогенезом. Альфа- фетопротеин характерен для эмбрионального развития, синтез во взрослом состоянии резко увеличивается при раковых заболеваниях печени.

3. боррелии

Спирохеты рода Borreliaвызывают антропонозные (возвратный тиф), зоонозные (болезни Лайма) инфекционные болезни с трансмиссивным механизмом передачи возбудителей (клещи, вши).

Морфологические свойства: тонкие спирохеты с крупными завитками. Двигательный аппарат представлен фибриллами. Они хорошо воспринимают анилиновые красители, по Романовскому—Гимзе окрашиваются в сине-фиолетовый цвет. Боррелии обладают генетическим аппаратом, который состоит из небольших размеров линейной хромосомы и набора циркулярных и линейных плазмид.

Культуральные свойства: культивируются на сложных питательных средах, содержащих сыворотку, тканевые экстракты, а также в куриных эмбрионах. Чувствительны к высыханию и нагреванию. Устойчивы к низким t-рам.

Болезнь Лайма - возбудитель В. burgdorferi. Хроническая инфекция с поражением кожи, сердечной и нервной систем, суставов.

Морфология и культуральные свойства:типичные боррелии.

Антигенная структура: Сложная. Белковые антигены фибриллярного аппарата и цитоплазматического цилиндра, антитела к которым появляются на ранних этапах инфекции. Протективную активность имеют антигены, представленные липидмодифицированными интегральными белками наружной мембраны А, В, С, D, E, F.

Факторы патогенности.Липидмодифицированные белки наружной мембраны обеспечивают способность боррелий прикрепляться и проникать в клетки хозяина. В результате взаимодействия боррелий с макрофагами происходит выделение ИЛ1, который индуцирует воспалительный процесс.

Патогенез: На месте укуса клеща образуется красная папула. Возбудитель распространяется из места укуса через окружающую кожу с последующей диссеминацией с током крови к различным органам, особенно сердцу, ЦНС, суставам. Клиника подразделяется на 3 стадии: 1.Мигрирующая эритема, которая сопровождается развитием гриппоподобного симптомокомплекса. 2.Развитие доброкачественных поражений сердца и ЦНС 3.Развитие артритов крупных суставов

Иммунитет.Гуморальный, видоспецифический к антигенам клеточной стенки.

Микробиологическая диагностика.Используются бактериоскопический, серологический методы и ПЦР в зависимости от стадии заболевания. Материалом для исследования служат биоптаты кожи, синовиальная жидкость суставов, ликвор, сыворотка крови. На 1-й стадии заболевания проводится бактериологическое исследование биоптатов кожи из эритемы. Начиная со 2-й стадии заболевания осуществляется серологическое исследование определением IgM или нарастания титра IgG ИФА или РИФ. ПЦР используется для определения наличия боррелий в ликворе, суставной жидкости.

Лечение: антибиотики тетрациклинового ряда.

Профилактика.Неспецифическая.

Возвратные тифы — группа острых инфекционных заболеваний, вызываемых боррелиями, характеризующихся острым началом, приступообразной лихорадкой, общей интоксикацией. Различают эпидемический и эндемический возвратные тифы. Возбудителем эпидемического возвратного тифа является В. recurrentis.

Эпидемический возвратный тиф - антропоноз. Специфические переносчики - платяная, головная вши. Человек заражается возвратным тифом при втирании гемолимфы раздавленных вшей в кожу при расчесывания места укуса.

Эндемический возвратный тиф— зооноз. Возбудители - В. duttoniи В. persica. Резервуар - грызуны, клещи. Человек заражается через укусы клещей.

Патогенез:Попав во внутреннюю среду организма, боррелии внедряются в клетки лимфоидно-макрофагальной системы, где размножаются и поступают в кровь, вызывая лихорадку, головную боль, озноб. Взаимодействуя с АТ, боррелии образуют агрегаты, которые нагружаются тромбоцитами, вызывая закупорку капилляров, следствием чего является нарушение кровообращения в органах.

Иммунитет: к эпидемическому возвратному тифу гуморальный, непродолжительный.

Микробиологическая диагностика.Бактериоскопический метод — обнаружение возбудителя в крови, окрашенной по Романовскому—Гимзе. Биопробу ставят для дифференциации В. recurrentisот возбудителей эндемического возвратного тифа.В качестве вспомогательного используют серологический метод с постановкой РСК.

Лечение: антибиотики тетрациклинового ряда, левомицетин, ампициллин. Профилактика. Неспецифическая.

БИЛЕТ 54

Генотипические рекомбинации: трансформация, трансдукция, конъюгация. Их механизм.

Рекомбинации у бактерий.

Изменение генома в результате внесения (проникновения) части ДНК из другой клетки или перестройки генов внутри клетки – от хромосомы к плазмиде и наоборот (рекомбинация внутри генома).

I. Трансформация

II. Трансдукция

III. Конъюгация

I.Трансформация – непосредственная передача от клетки-донора к клетке-реципиенту фрагмента ДНК. Обычно при трансформации передается один ген, так как в клетку-реципиент может проникнуть очень малая часть хромосомы (около 1/100 длины хромосомы).

Условия для реализации механизма трансформации:

1. Свободная ДНК 2-х цепочечная, с молекулярной массой не менее 0,5-1х106 (при гибели бактерий и их разрушении ДНК попадает в окружающую среду и может быть воспринята другими клетками)

2. Донор и реципиент должны быть одного вида или близкородственными видами (гомологичная ДНК более устойчива к действию клеточных эндонуклеаз – то есть у неё «больше шансов» включиться в геном)

3. Наличие компетентных клеток (клетки реципиента, способные поглощать ДНК донора)

Стадии трансформации:

1. Адсорбция 2-х цепочечной ДНК

2. Проникновение (сопровождается разрушением одной цепи)

3. Интеграция (встраивание)

II.Трансдукция – передача генов посредством фагов.

Трансдуцирующий фаг – дефектный фаг, утративший часть собственного генома и компенсирует это прихватыванием клеточной донорской хромосомы.

Виды трансдукции:

Неспецифическая (общая) – при сборке дочерних фаговых частиц в головку фага может попасть часть плазмидной или хромосомной ДНК бактериальной клетки-хозяина (в этом случае часть генома фага утрачивается – фаг становиться дефектным); таких фагов до 0,3% от всей дочерней популяции; трансдуцирующие фаг из клетки-донора в клетки реципиента переносит разные гены!

2. Специфическая – происходит только в лизогенной бактерии, где фаг принял форму профага.

При этом «выщепление» профага сопровождается утратой части его генома и включением фрагмента хромосомной ДНК бактериальной клетки-хозяина (то есть трансдуцирующий фаг становиться дефектным). При проникновении в клетку-реципиента фаги встраиваются в бактериальную хромосому в участке, где имеется достаточно гомологии для интеграции. Таким образом, фаги при «выщеплении» и встраивании оказываются в одних и тех же участках бактериальной хромосомы – то есть «захватывают» и переносят одни и те же гены.

3. Абортивная – внесенная фагом ДНК донора не встраивается в хромосому реципиента, а остается в цитоплазме и там самостоятельно функционирует. Затем передается только одной из дочерних клеток и впоследствии теряется в потомстве.
III.Конъюгация – перенос генетического материала от клетки-донора к клетке-реципиенту при их контакте посредством конъюгационного мостика.

Реализация механизма конъюгации:

1. Клетка-донор должна иметь F-плазмиду (F+), отвечающую за синтез половых ворсинок, обеспечивающих формирование конюгационного мостика;

2. При автономном расположении F-плазмиды передается одна из цепей F-плазмиды и достраивается в клетке-реципиенте. Рекомбинант получает F-плазмиду и становиться донором, так как способен синтезировать половые ворсинки; Перенос F-плазмиды происходит с частотой близкой к 100%;

3. При интегрированном расположении F-плазмиды (Hfr) разрыв одной цепи ДНК

происходит в зоне расположения плазмиды, в определенной точке – точке «О» (от англ.origin - начало). F-плазмида при этом остается в конце разорванной нити. В данной ситуации в клетку-реципиент поступает хромосомная ДНК, а F-плазмида не передается!

Длина участка цепи ДНК, поступившего в клетку-реципиент, зависит от времени

существования мостика; за 2 часа возможен переход целой нити, но F-плазмида передается очень редко.

Основные клетки иммунной системы: Т и В-лимфоциты, макрофаги, субпопуляции Т- и В-клеток, их функции.

Антигенпредставляющие клетки (АПК).

- Макрофаги (А-клетки)

- Дендритные клетки

- В- лимфоциты

- Клетки эндотелия сосудов, гломерул почек, клетки Лангерганса (дендритные клетки в тканях) и др.

Все эти клетки несут на своей поверхности молекулы главного комплекса гистосовместимости МНС II и способны концентрировать на своей поверхности чужеродный антиген.

Лимфоциты.

Лимфоциты имеют общую морфологическую характеристику, однако их функции, поверхностные CD (от claster differenciation) маркеры, индивидуальное (клональное) происхождение, различны.

По наличию поверхностных CD маркеров лимфоциты разделяют на функционально различные популяции и субпопуляции, прежде всего на Т- (тимусзависимые, прошедшие первичную дифференцировку в тимусе) лимфоциты и В - (bursa- зависимые, прошедшие созревание в сумке Фабрициуса у птиц или его аналогах у млекопитающих) лимфоциты.

Т- лимфоциты.

Локализация.

Обычно локализуются в так называемых Т- зависимых зонах периферических лимфоидных органов (периартикулярно в белой пульпе селезенки и паракортикальных зонах лимфоузлов).

Функции.

Т- лимфоциты распознают процессированный и представленный на поверхности антиген- представляющих ( А ) клеток антиген. Они отвечают за клеточный иммунитет, иммунные реакции клеточного типа. Отдельные субпопуляции помогают В- лимфоцитам реагировать на Т- зависимые антигены выработкой антител.

Происхождение и созревание.

Родоначальницей всех клеток крови, в том числе лимфоцитов, является единая стволовая клетка костного мозга. Она генерирует два типа клеток- предшественников- лимфоидную стволовую клетку и предшественника клеток красной крови, от которой происходят и клетки- предшественники лейкоцитов и макрофагов.

Выделяют три основные группы Т- лимфоцитов- помощники (активаторы), эффекторы, регуляторы.

Первая группа- помощники (активаторы), в состав которых входят Т- хелперы1, Т- хелперы2, индукторы Т- хелперов, индукторы Т- супрессоров.

1. Т- хелперы1 несут рецепторы CD4 (как и Т- хелперы2) и CD44, отвечают за созревание Т- цитотоксических лимфоцитов (Т- киллеров), активируют Т- хелперы2 и цитотоксическую функцию макрофагов, секретируют ИЛ-2, ИЛ-3 и другие цитокины.

2. Т- хелперы2 имеют общий для хелперов CD4 и специфический CD28 рецепторы, обеспечивают пролиферацию и дифференцировку В- лимфоцитов в антителпродуцирующие (плазматические) клетки, синтез антител, тормозят функцию Т- хелперов1, секретируют ИЛ-4, ИЛ-5 и ИЛ-6.

3. Индукторы Т- хелперов несут CD29, отвечают за экспрессию антигенов HLA класса 2 на макрофагах и других А- клетках.

4. Индукторы Т- супрессоров несут CD45 специфический рецептор, отвечают за секрецию ИЛ-1 макрофагами, активацию дифференцировки предшественников Т- супрессоров.

Вторая группа- Т- эффекторы. В нее входит только одна субпопуляция.

5. Т- цитотоксические лимфоциты (Т- киллеры). Имеют специфический рецептор CD8, лизируют клетки- мишени, несущие чужеродные антигены или измененные аутоантигены (трансплантант, опухоль, вирус и др.). ЦТЛ распознают чужеродный эпитоп вирусного или опухолевого антигена в комплексе с молекулой класса 1 HLA в плазматической мембране клетки- мишени.

Третья группа- Т-клетки- регуляторы. Представлена двумя основными субпопуляциями.

6. Т- супрессоры имеют важное значение в регуляции иммунитета, обеспечивая подавление функций Т- хелперов 1 и 2, В- лимфоцитов. Имеют рецепторы CD11, CD8. Группа функционально

разнородна. Их активация происходит в результате непосредственной стимуляции антигеном без существенного участия главной системы гистосовместимости.

7. Т- контсупрессоры. Не имеют CD4, CD8, имеют рецептор к особому лейкину. Способствуют подавлению функций Т- супрессоров, вырабатывают резистентность Т- хелперов к эффекту Т- супрессоров.

В- лимфоциты.

Существует несколько подтипов В- лимфоцитов. Основная функция В- клеток- эффекторное участие в гуморальных иммунных реакциях, дифференциация в результате антигенной стимуляции в плазматические клетки, продуцирующие антитела.

Образование В- клеток у плода происходит в печени, в дальнейшем- в костном мозге. Процесс созревания В- клеток осуществляется в две стадии- антиген - независимую и антиген - зависимую.

Антиген -независимая фаза. В- лимфоцит в процессе созревания проходит стадию пре- В- лимфоцита- активно пролиферирующей клетки, имеющей цитоплазменные H- цепи типа C мю (т.е. IgM). Следующая стадия- незрелый В- лимфоцит характеризуется появлением мембранного (рецепторного) IgM на поверхности. Конечная стадия антигеннезависимой дифференцировки- образование зрелого В- лимфоцита, который может иметь два мембранных рецептора с одинаковой антигенной специфичностью (изотипа) - IgM и IgD. Зрелые В- лимфоциты покидают костный мозг и заселяют селезенку, лимфоузлы и другие скопления лимфоидной ткани, где их развитие задерживается до встречи со “своим” антигеном, т.е. до осуществления антиген- зависимой дифференцировки.

Антиген - зависимая дифференцировка включает активацию, пролиферацию и дифференцировку В- клеток в плазматические клетки и В- клетки памяти. Активация осуществляется различными путями, что зависит от свойств антигенов и участия других клеток ( макрофагов, Т- хелперов). Большинство антигенов, индуцирующих синтез антител, для индукции иммунного ответа требуют участия Т- клеток- тимус- зависимые пнтигены. Тимус- независимые антигены (ЛПС, высокомолекулярные синтетические полимеры) способны стимулировать синтез антител без помощи Т- лимфоцитов.

Риккетсии. Таксономия. Возбудители эпидемического сыпного тифа и болезни Брилля–Цинссера, эндемического сыпного тифа, клещевого сыпного тифа (северо-азиатского риккетсиоза), лихорадки цуцугамуши. Возбудитель Ку-лихорадки. Биологические свойства. Экология. Хозяева и переносчики. Резистентность. Культивирование. Внутриклеточный паразитизм. Антигенная структура. Факторы патогенности. Патогенность для человека и животных. Иммунитет. Лабораторная диагностика. Этиотропная терапия. Специфическая профилактика.

Риккетсиозы– это большая группа трансмиссивных острых лихорадочных инфекционных болезней, вызываемых риккетсиями, имеющих общность патогенеза и клинических проявлений болезни

Эпидемический сыпной тиф— острый антропоноз с трансмиссивным механизмом распространения платяными вшами. Клинически характеризуется лихорадкой, тяжелым течением в связи с поражением кровеносных капилляров с нарушением кровоснабжения жизненно важных органов (мозг, сердце, почки), появлением сыпи.

Таксономия и общая характеристика: Возбудитель — R. prowazekii, род Rickettsiaсемейство Rickettsiaceae; паразитирует только в цитоплазме чувствительных клеток. Хорошо культивируется в организме платяных вшей, желточных мешках, обладает гемолитическими свойствами, способен формировать негативные колонии («бляшки») в культуре клеток; при окраске по Здродовскому окрашивается в красный цвет. Устойчив к действию факторов внешней среды; длительно сохраняется в высохших фекалиях инфицированных вшей.

Эпидемиология и механизм заражения. Заражение реализуется либо втиранием фекалий инфицированных вшей через расчесы кожи, либо путем вдыхания пылевидного аэрозоля из высохших инфицированных риккетсиями фекалий.

Клиника, диагноз, лечение.Инкубационный период 10 дней. Начало заболевания острое, клинические проявления обусловлены генерализованным поражением системы эндотелиальных клеток кровеносных сосудов, что приводит к нарушению каскада тромбо-антитромбообразования. Морфологическую основу болезни составляет генерализованный васкулит с формированием сыпи на кожных покровах. Болезнь протекает с высокой температурой, симптомами поражения сердечно-сосудистой и нервной систем.

Иммунитет — непродолжительный, клеточно-гуморальный.

Диагностика: осуществляется по клинико-эпидемиологическим данным, подкрепляется лабораторным исследованием на специфические антитела (РСК, РНГА, ИФА и др.).

Лечение: Быстрое этиотропное лечение однократным приемом доксициклина, при его отсутствии — препаратами тетрациклинового ряда.

Профилактика.Изоляция завшивленных больных, дезинфекция препаратами, содержащими перметрин. Для специфической профилактики разработана живая вакцина из штамма Е, которая применяется в комбинации с растворимым антигеном риккетсии Провачека (живая комбинированная сыпнотифозная вакцина из штамма), а также инактивированная вакцина из растворимого антигена.

Болезнь Бриля – рецидив после ранее перенесенного эпидемического сыпного тифа. Возбудитель— R. prowazekii.

Клиническипротекает как эпидемический тиф легкой и средней тяжести. Патоморфологияинфекционного процесса та же, что и при эпидемической форме. Различие заключается в эпидемиологии (нет переносчика, отсутствует сезонность проявления, источник и реализация способа заражения) и патогенезе начальной стадии болезни. Она возникает вследствие активации латентно «дремлющих» риккетсий.

Микробиологическая диагностика. Затруднена неопределенностью симптоматики на первой неделе заболевания (до появления сыпи) и ее сходством с симптомами при инфекциях, чаще брюшнотифозной. Диагноз устанавливается на основании клинико-эпидемиологических данных с учетом анамнеза больного и подкрепляется серологическим исследованием со специфическим антигеном. При отсутствии переносчика в очаге лечение может осуществляться без изоляции больного, в зависимости от его состояния. Прогноз благоприятен даже в отсутствии лечения антибиотиками.

Профилактика. Меры профилактики те же, что и при эпидемической форме. Специфическая профилактика невозможна.

Лихорадка Ку.

Свое название инфекция получила от первых букв (Qu) английского слова querry (неясный, неопределенный), т.е. - лихорадка неяного генеза. Возбудитель - Coxiella burnetii- облигатный фаголизосомальный паразит эукариотических клеток, не размножающийся на питательных средах. C.burnetii культивируют в куриных эмбрионах, культурах клеток, в биопробах на различных лабораторных животных.

Лихорадка цуцугамуши.

Цуцугамуши- инфекцмонная природно-очаговая болезнь, вызываемая Rickettsia tsutsugamushi, характеризующаяся первичным очагом на коже, общим поражением лимфотических узлов, сыпью. Возбудитель Rickettsia tsutsugamushi – типичный представитель рода риккетсий. Источником инфекции являются мышевидные грызуны. Переносчики возбудителя – личинки краснотелковых клещей. Заболевание регистрируется период наибольшей активности личинок, т.е в июне – сентябре. Заболевание встречается на Дальнем Востоке.

БИЛЕТ 55

Микрофлора организма человека. Её роль в нормальных физиологических процессах и патологии. Микрофлора кишечника

Микрофлора человека и ее значение.

Нормальная (т.е. в условиях здорового организма) микрофлора в количественном и качественном отношении представлена на различных участках тела (экотопах) неодинаково. Причины- неодинаковые условия обитания.

Аутохтонная (т.е. присущая данной области) микрофлора может быть разделена на резидентную (постоянную) и транзиторную (непостоянную). На слизистых оболочках, особенно ЖКТ представители нормальной микрофлоры обитают в виде двух форм- часть из них располагается в просвете (просветная), другая заключена в мукозный пристеночный матрикс, образующий биопленку (пристеночная микрофлора).С ней связана колонизационная резистентность кишечника- естественный барьер защиты кишечника (и организма в целом) от инфекционных агентов.

Микрофлора желудочно- кишечного тракта.

Наиболее активно бактерии обживают желудочно- кишечный тракт. При этом колонизация осуществляется четко “по этажам”. В желудке с кислой реакцией среды и верхних отделов тонкой кишки количество микроорганизмов не превышает 1000 в мл, чаще обнаруживают лактобациллы, энтерококки, дрожжи, бифидобактерии, E.coli.

Микрофлора толстого кишечника наиболее стабильна и многообразна. Это поистинне резервуар бактерий всего организма- обнаружено более 250 видов, общая биомасса микробов может достигать 1,5 кг. Доминирующей группой в норме являются бесспоровые анаэробные бактерии (бифидобактерии и бактероиды)- до 99%. Выделяют мукозную (пристеночную) и просветную микрофлору. Пристеночная микрофлора обеспечивает колонизационную резистентность кишечника, играющую важную роль в предупреждении (в норме) и в развитии (при патологии) экзо- и эндогенных инфекционных заболеваний.

Нормальная микрофлора и особенно микрофлора толстого кишечника оказывает существенное влияние на организм. Основные ее функции:

- защитная (антагонизм к другим, в том числе патогенным микробам);

- иммуностимулирующая (антигены микроорганизмов стимулируют развитие лимфоидной ткани);

- пищеварительная (прежде всего обмен холестерина и желчных кислот);

- метаболическая (синтез витаминов группы В- В1,2,6,12, К, никотиновой, пантотеновой, фолиевой кислот).

Существуют различные методы изучения роли нормальной микрофлоры. Гнотобионты (безмикробные животные) используются для изучения роли микроорганизмов для функционирования физиологических систем. Гнотобиологические технологии используют для лечения иммунодефицитов, ожогов.

В результате разнообразных воздействий, снижающих естественную резистентность, при тяжелых инфекционных и соматических заболеваниях и особенно при нерациональном применении антибиотиков возникают дисбактериозы. Дисбактериоз- изменения количественного и качественного состава микрофлоры, главным образом кишечника. Чаще сопровождаются увеличением факультативно- анаэробной или остаточной микрофлоры (грамотрицательных палочек - кишечной палочки, протея, псевдомонад), стафилококков, грибов рода Candida. Эти микроорганизмы как правило устойчивы к антибиотикам и при подавлении нормофлоры антибиотиками и снижении естественной резистентности получают возможность беспрепятственно размножаться.

Наиболее тяжелые формы дисбактериозов- стафилококковые пневмонии, колиты и сепсис, кандидомикозы, псевдомембранозный колит, вызываемый Clostridium difficile.

Для лечения используют биопрепараты, восстанавливающие нормальную микрофлору- эубиотики- колибактерин (используют специальный штамм E.coli, антогонист шигелл), лактобактерин, бифидумбактерин, бификол, бактисубтил и другие, а также специальные бактериофаги.

Антигены, определение, критерии антигенности. Антигенные детерминанты, их строение. Иммунохимическая специфичность антигенов: видовая, групповая, типовая, органная, гетероспецифическая. Полноценные антигены, гаптены, их свойства.

Вибрионы, возбудители холеры, свойства, факторы патогенности. Патогенез и эпидемиология, иммунитет при холере. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика, терапия.

Возбудитель – Vibriocholerae, серогрупп О1 и О139, характеризуется токсическим поражением тонкого кишечника, нарушением водно-солевого баланса.

Морфологические и культуральные свойства.Вибрион имеет один полярно расположенный жгутик. Под действием пенициллина образуются L-формы. Грамотрицательны, спор не образуют. Факультативный анаэроб. Не требователен к питательным средам. Температурный оптимум 37C. На плотных средах вибрионы образуют мелкие круглые прозрачные S-колонии с ровными краями. На скошенном агаре образуется желтоватый налет. В непрозрачных R-колониях бактерии становятся устойчивыми к действию бактериофагов, антибиотиков и не агглютинируются О-сыворотками.

Биохимические свойства.Активны: сбраживают до кислоты глюкозу, мальтозу, сахарозу, маннит, лактозу, крахмал. Все вибрионы делятся на шесть групп по отношению к трем сахарам (манноза, сахароза, арабиноза). Первую группу, к которой относятся истинные возбудители холеры, составляют вибрионы, разлагающие маннозу и сахарозу и не разлагающие арабинозу: разлагают белки до аммиака и индола. H2S не образуют.

Антигенная структура. Термостабильный О-антиген и термолабильный Н-антиген. Н-АГ являются общими для большой группы вибрионов. Возбудители классической холеры и холеры Эль-Тор объединяются в серогруппу 01. Антигены серогруппы 01 включают в различных сочетаниях А-, В- и С-субъединицы. Сочетание субъединиц АВ называется сероваром Огава, сочетание АС — сероваром Инаба, сочетание ABC — Гикошима. R-формы колоний утрачивают О-АГ.

Резистентность.Вибрионы плохо переносят высушивание. Долго сохраняются в водоемах, пищевых продуктах.. Биовар Эль-Тор более устойчив в окружающей среде, чем классический вибрион. 62

Эпидемиология.Острая кишечная инфекция с фекально-оральным механизмом передачи. Путь передачи - водный, пищевой. Источник инфекции — больной человек или вибрионоситель.

Факторы патогенности.Пили адгезии; фермент муциназа, разжижающий слизь и обеспечивающий доступ к эпителию. Эпителиальные клетки выделяют щелочной секрет, который в сочетании с желчью является прекрасной питательной средой для размножения вибрионов. Токсинообразование вибрионов, которые вырабатывают эндо- и экзотоксины. Экзотоксин (энтеротоксин) холероген— термолабильный белок, чувствителен к протеолитическим ферментам. Холероген содержит 2 субъединицы: А и В. А активизирует внутриклеточную аденилатциклазу, происходит повышение выхода жидкости в просвет кишечника. Диарея, рвота. Фермент нейраминидазаусиливает связывание холерного экзотоксина с эпителием слизистой кишечника. Эндотоксин запускает каскад арахидоновой кислоты, которая запускает синтез простагландинов (Е, F). Они вызывают сокращение гладкой мускулатуры тонкого кишечника и подавляют иммунный ответ, чем обусловлены диарея.

Клинические проявления.Инкубационный период 2—3 дня. Боль в животе, рвота, диарея. Иммунитет.Гуморально-клеточный. При выздоровлении возникает напряженный непродолжительный иммунитет.

Микробиологическая диагностика.Выделение и идентификация возбудителя. Материал для исследования - выделения от больных (кал, рвота), вода. Для экспресс-диагностики используют РИФ, ПЦР. Бактериоскопический метод в настоящее время не используется.

Лечение: а)регидратация (восполнение потерь жидкости и электролитов введением изотонических, растворов, а также плазмозаменяющих жидкостей внутривенно;б) антибактериальная терапия (тетрациклины, фторхинолоны).

Профилактика.Санит.-гиг. мероприятия. Экстренная профилактика антибиотиками широкого спектра действия, а также вакцинопрофилактика. Современная вакцина представляет собой комплексный препарат, состоящий из холероген-анатоксина и химического О-антигена, обоих биоваров и сероваров Огава и Инаба. Прививка обеспечивает выработку вибриоцидных антител и антитоксинов в высоких титрах.

Вибриона чувствительны к свету, температуре, высушиванию, антибиотикам тетрациклинового ряда, кислой среде, но могут долго сохранятся в испражнениях , белье, почве, воде. Источником инфекции является больной человек и бактерионоситель. Это антропонозная инфекция. Пути передачи: 1. Фекально-оральный с инфицированной водой и продуктами 2.контактно-бытовой .Вибрионы проникают сквозь слой слизи к эпителию тонкого кишечника и колонизируют его. Токсины обусловливают всю клинику при холере. Иммунитет гуморальный связанный с антителами антибатериальными и антитоксическими, прочный.

БИЛЕТ 56

Микрофлора кожи, ротовой полости здорового человека. Микрофлора слизистых оболочек дыхательных путей, мочеполового тракта и глаза. Значение их в жизнедеятельности человека.

Основные функции кожи : Иммунная, Защитная, Секреторная, Рецепторная

1 ... 5 6 7 8 9 10 11 12 13