Микра экз. Билет 1 Генетические и биохимические механизмы Лекарственной устойчивости. Путь преодоления лекарственной устойчивости бактерий

• Название: Билет 1 Генетические и биохимические механизмы Лекарственной устойчивости. Путь преодоления лекарственной устойчивости бактерий
• Анкор: Микра экз
• Дата: 25.01.2020
• Размер: 0.84 Mb.
• Имя файла: mikra_bilety1.docx
• Тип: Документы; #105758
• страница: 7 из 13

Факторы вирулентности. Шигеллы имеют факторы адгезии и колонизации:пили,белкинаружной мембраны,липополисахаридклеточной стенки. Адгезии и колонизации способствуют ферменты, разрушающие слизь, -нейраминидаза, гиалуронидаза, муциназа.  Все виды шигелл обладают способностью к инвазии в клетки эпителия слизистой оболочки толстой кишки, межклеточному распространению и размножению в клетках. Эта способность определяетсяплазмидой инвазии, которая имеется у всех четырех видов шигелл. Шигеллы продуцируюттоксин Шига и шигаподобные токсины. Токсин Шига продуцируетSh. dysenteriae1серовара,остальные – шигаподобные токсины. Это белковые токсины, состоящие из субъединиц А и В. Субъединица А, проникнув в клетку, взаимодействует с 60S-субъединицей рибосом, что приводит к нарушению синтеза белка. Токсин Шига обладает свойствами энтеротоксина, нейротоксина и сильного цитотоксина.Эндотоксиншигелл  подавляет активность клеток иммунной памяти.

Устойчивость. Шигеллы во влажной почве сохраняют жизнеспособность до трех   месяцев, в воде – в течение 92 дней, в молоке – до скисания, в масле – в течение 8 – 10 дней.Sh. sonneiв молоке и молочных продуктах способны размножаться. Шигеллы хорошо переносят высушивание, низкие температуры (во льду сохраняются до 96 дней), но быстро погибают при действии прямого солнечного света, нагревании (при 60°С в течение 30 мин, при 100°С – моментально). Чувствительны к обычно используемым дезинфицирующим веществам.

Патогенез. Шигеллы поражают дистальные отделы толстого кишечника – сигмовидную и прямую кишку, вызывая дизентерию. Дизентерия (dysenteria) – острое инфекционное заболевание, которое клинически проявляется частым болезненным стулом с кроваво-слизистыми испражнениями и интоксикацией. Шигеллы прикрепляются к М-клеткам, которые покрывают региональные лимфатические образования подслизистой кишечника. Через М-клетки шигеллы проникают в подслизистую оболочку, где поглощаются макрофагами. Взаимодействие шигелл с макрофагами приводит к гибели последних, следствием чего является выделение ИЛ-1 и ИЛ-18, которые вызывают острое воспаление в подслизистой с привлечением большого количества нейтрофилов. Гибель фагоцитов позволяет шигеллам сохранить жизнеспособность и проникать в эпителиальные клетки слизистой оболочки через базальную мембрану. Внутри энтероцитов шигеллы размножаются, проникают в соседние клетки, что приводит к появлению эрозий. В результате гибели шигелл происходит выделение токсина Шига, шигаподобных токсинов и эндотоксина, что приводит к появлению крови в испражнениях. Инкубационный период дизентерии колеблется от нескольких часов до трех – пяти дней. Постепенно или сразу развиваются явления острого колита. Характерны резкие, коликообразные боли в животе и частые, ложные, мучительные позывы к дефекации – тенезмы (до 20 – 30 раз в сутки). Испражнения становятся слизисто-водянистыми, с примесью слизи и гноя, а при более тяжелом течении дизентерии – крови, гноя и частиц слизистой кишечника. Заболевание продолжается 1 – 3 недели. Могут встречаться атипичные, стертые формы. Заболевания, вызванныеSh. sonnei,могут начинаться по типу пищевых токсикоинфекций. Примерно в 3% случаев заболевание переходит в хроническую форму, в 2% - формируется длительное бактерионосительство.

Иммунитет. После перенесенного заболевания формируется антимикробный и антитоксический иммунитет. Иммунитет вариантоспецифический, поэтому при заражении другими сероварами шигелл возможны повторные заболевания. Основную защитную роль играет местный иммунитет, в частности, большое значение имеет уровень секреторных IgA.

Лабораторная диагностика. Основным методом диагностики является бактериологический. Исследуемым материалом служат испражнения, которые засевают на дифференциально-диагностические питательные среды с лактозой (Плоскирева, Эндо, Левина). Для выделения чистой культуры отбирают лактозонегативные (бесцветные) колонии, которые пересевают на трехсахарный агар (среда Олькеницкого). В качестве вспомогательного используют серологический метод (РНГА).

Эпидемиология. Источником инфекции является только человек, больной острой или хронической дизентерией, либо являющийся бактерионосителем. Механизм передачи – фекально-оральный, пути: 1) алиментарный (преобладающий путь для шигелл Зоне); 2) водный (преобладающий для шигелл Флекснера); 3) контактно-бытовой (является ведущим дляSh. dysenteriaе).

Особенностью эпидемиологии дизентерии является смена видового состава возбудителей. До конца 30-х годов ХХ века на долю Sh. dysenteriaeприходилось до 30 – 40% всех случаев заболеваний дизентерией, затем этот серовар стал встречаться все реже и почти исчез. Однако в 60 – 80-е годыSh. dysenteriae1 серовара вновь появилась и вызвала серию эпидемий, которые привели к формированию трех гиперэндемических очагов ее – в Центральной Америке, Центральной Африке и Южной Азии. Причины смены видового состава возбудителей дизентерии, по-видимому, связаны с изменением коллективного иммунитета и с изменением свойств дизентерийных бактерий. В частности, возвращениеSh. dysenteriaeI серовара и ее широкое распространение связывают с приобретением ею плазмид, обусловивших множественную лекарственную устойчивость и повышенную вирулентность. В настоящее время преобладают заболевания, вызванныеSh. sonneiиSh. flexneri.Естественная восприимчивость людей к дизентерии высокая. Дизентерия распространена повсеместно. Обычно заболевания возникают в виде вспышек алиментарного или водного характера. Чаще  болеют дети до 10-летнего возраста. Характерна летне-осенняя сезонность.

Лечение и профилактика. Антибиотики применяют  после определения антибиотикограммы. Наиболее эффективными в настоящее время являются фторхинолоны. Целесообразность назначения антибактериальных химиопрепаратов определяется тяжестью заболевания. Для лечения может применяться дизентерийный бактериофаг. Фаг может использоваться и для экстренной профилактики. В случае возникновения дисбактериоза показано применение препаратов для коррекции микрофлоры. Профилактика неспецифическая. Включает комплекс санитарно-гигиенических и противоэпидемических мероприятий.

БИЛЕТ 20

1. 
   Основные методы исследования морфологии бактерий: световая микроскопия с иммерсионным объективом
   

При микроскопии иммерсионным объективом х90 обязательным ус­ловием является его погружение в кедровое, персиковое или в вазелиновое масло, показатели преломления света у которых близки предметному стеклу, на котором делают препараты. В этом случае падающий на препарат пучок света не рассеивается и, не меняя направления, попадает в иммерсионный объектив. Разре­шающая способность иммерсионного микроскопа находится в пределах 0,2 мкм, а максимальное увеличение объекта достигает 1350.

При использовании иммерсионного объектива вначале центрируют оптическую часть микроскопа. Затем поднимают конденсор до уровня предметного столика, открывают диафрагму, устанавливают объектив малого увеличения и при помощи плоского зеркала освеща­ют поле зрения. На предметное стекло с окрашенным препаратом наносят кап­лю масла, в которую под контролем гла­за осторожно погружают объектив, за­тем, поднимая тубус, смотрят в окуляр и вначале макро–, а потом микровинтом устанавливают четкое изображение объ­екта. По окончании работы удаляют салфеткой масло с фронтальной линзы объектива.

2. 
   Формы инфекции: экзо- и эндогенная, очаговая, генерализованная, моно- и микст-инфекция. Вторичная, реинфекция, суперинфекция, рецидив, хроническая, персистирующая инфекция. Микробоносительство. Их определение, условия возникновения, факторы, влияющие на развитие инфекции.
   

Формы инфекции:

По природе возбудителя: вирусные, бактериальные, грибковые,вызванные простейшими

По происхождению: экзогенная – когда возбудитель проникает из внешней среды,

эндогенная – причиной заболевания является собственная микрофлора – условно –патогенные микробы, которые дейтвуют при снижении иммунетета чяеловека ит.д.

аутоинфекция – когда возбудитель переносится в другой биотоп (например: кишечная палочка через руки переносится на раневую поверхность и пр.)

По локализации процесса: очаговая (ангина), генерализованная (сепсис)

По количеству возбудителей: моноинфекция – вызвана одним возбудителем, смешанная – вызвана несколькими возбудителями

По повторным проявлениям:

вторичная – присоединение другого микроорганизма к существующему заболеванию (на фоне вирусной респираторной инфекции может развиться бактериальная инфекция), реинфекция – заражение тем же возбудителем после выздоровления, суперинфекция – заражение тем же возбудителем на фоне существующего заболевания, рецидив – возврат клинических проявлений без повторного заражения, за счет оставшегося в организме возбудителя

По характеру течения:

острая – выраженные клинические проявления, протекающие в относительно короткие сроки,

хроническая – длительное (от нескольких месяцев до нескольких лет) течение, обычно с рецидивами,

латентная – скрытая, без четких клинических проявлений, с длительным течением; носительство – человек здоров, клинические проявления отсутствуют, но возбудитель выделяется во внешнюю среду.

Носительство может возникнуть после перенесенного заболевания, если не сформировался напряженный иммунитет, или у здоровых лиц, контактировавших с больными или носителями.

Длительное пребывание микроба в организме называют персистенцией.

По выраженности клиники:

бессимптомная, - не выражены клинические проявления

манифестная – выражены клинические проявления.

По источнику инфекции:

антропоноз – источник инфекции человек, зооноз - животное, антропозооноз - человек и животное, сапроноз - внешняя среда.

3. 
   Бруцеллы, виды бруцелл, свойства. Экология, факторы патогенности, патогенез, иммунитет при бруцеллезе. Лабораторная диагностика, специфическая профилактика.
   

Таксономия: Возбудители бруцеллеза B.melitensis, B.abortus, B.suis, B.canis, B.ovis относятся к отделу Gracilicutes, роду Brucella.

Морфологические и тинкториальные свойства: Мелкие, грамотрицательные палочки овоидной формы. Не имеют спор, жгутиков, иногда образуют микрокапсулу.

Культуральные свойства: облигатные аэробы. B.abortus для своего роста нуждается в присутствии 5—10 % углекислого газа. Оптимальными для роста являются температура 37С. Требовательны к питательным средам и растут на специальных средах (печеночных, кровяной агар). Их особенностью является медленный (в течение 2 нед) рост. В жидких средах – равномерное помутнение с небольшим осадком. На плотных – мелкие, круглые гладкие голубые колонии. Диссоциация от S- к R-формам колоний.

Биохимическая активность: очень низкая; содержат каталазу и оксидазу, нитраты редуцируют в нитриты, цитраты не утилизируют, продуцируют Н2S.

Антигенная структура. O-антиген – соматический, и капсульный антигены. Две разновидности О-антигена — А(абортус) и М(мелитензис).Иногда обнаруживают К-антиген.

Факторы патогенности: Образуют эндотоксин, обладающий высокой инвазивной активностью. Продуцируют один из ферментов агрессии — гиалу-ронидазу. Их адгезивные свойства связаны с белками наружной мембраны.

Резистентность. Быстро погибают при кипячении, при действии дезинфицирующих веществ, устойчивы к низкой температуре: в замороженном мясе они сохраняются до 5 мес, в молочных продуктах — до 1,5 мес.

Эпидемиология. Зоонозная инфекция. Источник - крупный и мелкий рогатый скот, свиньи, овцы, выделяющие B.melitensis. Люди более восприимчивы к этому виду возбудителя. Реже заражение происходит от коров (B.abortus) и свиней (B.suis). Больные люди не являются источником заболевания.

Патогенез. Проникают в организм через слизистые оболочки или поврежденную кожу, попадают сначала в регионарные лимфатические узлы, затем в кровь, разносятся по всему организму и внедряются в органы ретикулоэндотелиальной системы (печень, селезенку, костный мозг). Там они могут длительное время сохраняться и вновь попадать в кровь. При гибели освобождается эндотоксин, вызывающий интоксикацию.

Клиника: Инкубационный период составляет обычно 1—3 нед. Длительная лихорадка, озноб, потливость, боли в суставах, радикулиты.

Иммунитет: После перенесенного заболевания формируется непрочный иммунитет. Клеточно-гуморальный, нестерильный, относительный.

Микробиологическая диагностика: Микробиологическая диагностика обычно проводится путем серологических исследований (реакция Райта и Хеддлсона).

Бактериологическое исследование. Для получения гемокультуры кровь засевают в два флакона печеночного бульона. Один из них (для выделения культуры В. melitensis) инкубируют в обычных аэробных условиях, другой (для выделения первичной культуры В. abortus) —с СО2. В первых генерациях бруцеллы растут очень медленно. На агаре бруцеллы образуют бесцветные колонии, в бульоне — помутнение и слизистый осадок. В мазках, окрашенных по Граму, обнаруживаются мелкие грамотрицательные формы. Они неподвижны, спор не образуют, в определенных условиях появляется видимая капсула. Для быстрой идентификации бруцелл ставят реакцию агглютинации со специфическими агглютинирующими сыворотками на стекле и определяют чувствительность к специфическому фагу. Все виды бруцелл не ферментируют углеводы. Их дифференцируют по образованию H2S, чувствительности к СО2, действию анилиновых красителей (основной фуксин).

Серодиагностика. Реакция агглютинации Райта с бруцеллезным диагностикумом. Положительные результаты отмечаются спустя 1 нед. после начала заболевания и сохраняются у переболевших многие годы. Диагностический титр реакции 1:200. Для ускоренной серодиагностики применяется реакция агглютинации Хеддлсона, которая ставится с неразведенной сывороткой больного и концентрированным антигеном — диагностикумом, окрашенным метиленовым синим. При положительной реакции появляются хлопья синего цвета. Реакция положительна при наличии агглютинации на «++». Для серодиагностики используют РПГА, РИФ, РСК, метод определения неполных антител. В поздние периоды заболевания процент положительных серологических реакций (агглютинации, РПГА и РСК) начинает снижаться и большее диагностическое значение приобретают кожно-аллергическая проба и реакция Кумбса.

Биопроба. Применяется для выделения чистой культуры из материала, загрязненного посторонней микрофлорой. Исследуемый материал вводят морским свинкам подкожно в паховую область. Кусочки органов и лимфатических узлов засевают на питательные среды для получения чистой культуры и ее идентификации.

Кожно-аллергическая проба (реакция Бюрне).На предплечье внутрикожно вводят 0,1 мл бруцеллина. При наличии аллергии уже через 6 ч. могут появиться гиперемия кожи и болезненная отечность. Учет реакции производят через 24 ч. Реакция обладает высокой чувствительностью.

Лечение: Антибиотики широкого спектра действия. Специфическая иммунотерапия убитой лечебной бруцеллезной вакциной или бруцеллина (фильтрат бульонных культур В. melitensis, B.abortus, В.suis, убитых нагреванием . При острых формах – бруцеллезный иммуноглобулин.

Профилактика:Живая бруцеллезная вакцина получена штамма ВА-19А, полученную из В. abortus, создает перекрестный иммунитет против других видов бруцелл.

Бруцеллезный единый диагностикум. Взвесь убитых бруцелл, окрашенных метиленовым синим, применяется при серологической диагностике бруцеллеза постановкой реакции агглютинации Райта и Хеддлсона.

Накожная сухая живая бруцеллезная профилактическая вакцина. Взвесь вакцинного штамма. В. abortus применяется для профилактики бруцеллеза.

БРУЦЕЛЛЁЗ

Бруцеллёз - инфекционная болезнь, характеризующаяся длительным течением, поражением нервной и сердечнососудистой систем, а также костно-суставного аппарата. Возбудители бруцеллёза у человека: Brucella melitensis (3 биовара) Brucella abortus (9 биоваров) Brucella suis (4 биовара) Бруцеллы относят к группе аэробных грамотрицательных палочек и коккобактерий. Род с неясным систематическим положением. Бруцеллы – это мелкие грамотрицательные неподвижные палочки, спор и капсул не образуют, по типу дыхания микроаэрофиллы

Источником инфекции для человека являются больные животные.

Основные пути передачи возбудителя – контактный (при уходе за больными животными), пищевой (при употреблении заражённых продуктов). З

аболевание носит профессиональный характер – чаще болеют работники сельского хозяйства. Бруцеллы обладают выраженной инвазивной активностью и способны к внутриклеточному паразитированию, что обуславливает патогенез заболевания. В развитии инфекционного процесса участвуют гиалуронидаза, белок наружной мембраны и эндотоксин. Бруцеллы способны выживать и размножаться в фагоцитах за счёт ингибирования слияния фагосомы с лизосомами. Это способствует диссеминации бактерий и длительной их персистенции в организме. Заболевание характеризуется хроническим течением со сменой обострений и ремиссий, развитием гранулём в опорно-двигательной системе, нервной и половой системах, сенсибилизацией организма с развитием ГЗТ.

Микробиологические методы диагностики

• Серологический (основной): - реакция агглютинации Хеддельсона (качественный метод); - развёрнутая реакция агглютинации Райта (диагностический титр 1:100); - РНГА (диагностический титр (1:100); - Реакция Кумбса (для выявления неполных антител при хроническом бруцеллёзе); - ИФА (для выявления IgM – при остром бруцеллёзе и IgG – при хронической форме заболевания). Эти реакции могут быть положительными у лиц вакцинированных. Поэтому при постановке диагноза учитывают динамику нарастания титра антител, данные клиники и эпидемиологии.

• Бактериологический – бруцеллы, выделенные от больных людей, растут очень медленно, посевы культивируют при 37 °С в атмосфере углекислого газа до 30 суток;

• Аллергический – проба Бюрне с бруцеллином (фильтрат бульонной культуры бруцелл);

• Биологический – заражение белых мышей (выделение чистой культуры, РИФ);

• Генетический метод – ПЦР–диагностика, обнаружение генома бруцелл;

• Собственно-иммунный – ИФА и РНГА с моноклональными антителами для поиска бруцеллёзных антигенов в крови. Специфическая профилактика и лечение. Бруцеллёзная живая вакцина, бруцеллёзная лечебная вакцина; с лечебной целью назначают антибиотики.

БИЛЕТ 21

Основные методы исследования морфологии бактерий: световая микроскопия с иммерсионным объективом, темнопольная, фазово-контрастная, люминесцентная, электронная. Микроскопический метод диагностики, его достоинства и недостатки.

Иммерсионная – используют масла(кедровое, терпеновое или синтетичсекое иммерсионное). Масляная система выравнивает показатели преломления цвета. Изучаются окрашенные объекты размером больше 0,2 мкм.

Люминесцентная (или флюоресцентная) микроскопия. Осно­вана на явлении фотолюминесценции.

Люминесценция — свечение веществ, возникающее после воз­действия на них каких-либо источников энергии: световых, элек­тронных лучей, ионизирующего излучения.

Первичная люминисценция - возникает без предварительного окрашивания объекта

Вторичная люминисценция – после окраски препаратов флюорохромами.

Преимущества: можно исследовать живых микроорганизмов и обнаружение их в исследуемом материале в небольших кол-вах вследствие высокой контрастности.

Темнопольная микроскопия.

В основе лежит принцип рассеивания цвета взвешенными частичами в темном поле при боковом освещении.(Эффект Тенделя)

Эффект достигается с помощью параболоид- или кардиоидконденсора, которые заменяют обычный конденсор в био­логическом микроскопе .

Изучаются неокрашенные подвижные микроорганизмы, видимые при боковом освещении в темном поле.

Фазово-контрастная микроскопия. Фазово-контрастное приспособление дает возможность увидеть в микроскоп прозрачные объекты. Они приобретают высокую контрастность изображения, которая может быть позитивной или негативной. Позитивным фазовым контрастом называют темное изображение объекта в светлом поле зрения, негативным — светлое изображение объек­та на темном фоне.

Для фазово-контрастной микроскопии используют обычный микроскоп и дополнительное фазово-контрастное устройство, а также специальные осветители.

Электронная микроскопия. Позволяет наблюдать объекты, размеры которых лежат за пределами разрешающей способно­сти светового микроскопа (менее 0,2 мкм). Электронный микроскоп применяется для изучения вирусов, тонкого строения различных микроорганизмов, макромолекулярных структур и других субмик­роскопических объектов.

Бактериоскопический (микроскопический) метод - совокупность способов обнаружения и изучения морфологических и тинкториальных свойств бактерий (микробов) в лабораторной культуре, патологическом материале или пробах из внешней среды с помощью микроскопии. Применяют для установления диагноза инфекционного заболевания или иного вызванного микробами процесса, а также при идентификации выделенной чистойкультуры. Метод бактериоскопического исследования приобретает особое значение, если микроб имеет морфологические и тинкториальные особенности или особую локализацию в тканях, клетках организма. Только при некоторых инфекциях для постановки диагноза достаточно морфологического исследования.

Для диагностики большинства инфекций микроскопия, как первый этап микробиологического исследования, имеет лишь вспомогательное, ориентировочное значение.

Ценность бактериоскопического метода состоит в простоте, доступности методик и быстроте получения результатов (30-60 минут и менее). Однако специфичность его в связи с близостью морфологии разных видов мала, а чувствительность ограничена -разрешающая способность метода составляет в среднем 100 000 клеток в мл.

Микроскопические методы заключаются в приготовлении микроскопических препаратов для микроскопирования (нативных или окрашенных простыми и сложными способами) из исследуемого материала и их микроскопирование с применениемразличных видов микроскопической техники (световая, темнопольная, фазово-контрастная, люминесцентная. электронная). В большинстве случаев результатымикроскопических исследований носят ориентировочный характер. Тем не менее, микроскопией материала можно определить некоторые морфологические признаки возбудителей (наличие ядер, жгутиков, внутриклеточных включений и т.д.), а также установить факт наличия или отсутствия микроорганизмов в присланных образцах

4. 
   .Понятие о раневых, респираторных, кишечных, урогенитальных и кровяных инфекциях. Антропонозы и зоонозы. Механизмы передачи инфекции.
   

Респираторные бактериальные инфекции

Респираторные инфекции:

входные ворота – дыхательные пути

механизмы и пути заражения: аэрогенный (воздушно-капельный, воздушно-пылевой)

Возбудители:

-Род Streptococcus Виды: Str. Pyogenes Str.pneumoniae (Скарлатина, Пневмония, бронхиты)

-Род Neisseria Вид N.meningitidis (Менингококковая инфекция: назофарингит, менингит, менингококцемия)

-Род Corynebacterium Вид C.diphteriae (Дифтерия)

-Род Bordetella Виды: B.pertussis B.parapertussis (Коклюш, Паракоклюш)

-Род Mycobacterium Виды: M.tuberculosis, M.bovis, M.africanum (Туберкулёз)

-Род Chlamidia Виды: Chl.psitacci, Chl.pneumoniae (Орнитоз (пневмония), Пневмония)

-Род Mycoplasma Вид M.pneumoniae (Пневмония)

-Род Legionella Вид L.pneumophilia (Пневмония)

Возбудители вирусных инфекций дыхательных путей

- Вирус гриппа Семейство Orthomyxoviridae, род Influenzairus, Influenza

- Вирус парагриппа Семейство Paramyxoviridae, род Paramyxovirus

- Респираторно-синцитиальный вирус (РС-вирус) Семейство Paramyxovirus, род Pneumoris

- Риновирусы Семейство Picornaviridae. род Rhinovirus

- Коронавирусы Семейство Coronaviridae, род Coronavirus

- Реовирусы Семейство Reoviridae, род Reovirus

- Аденовирусы Семейство Adenoviridae, род Mastedenovirus

- Bирус натуральной оспы Семейство Poxiridae, род Orthopoxvirus

- Вирус оспы обезьян

- Вирус кори Семейство Paramyxoviridae, род Morbillivirus

- Вирус эпидемического паротита Семейство Paramyxoviridae, род Paramyxovirus

- Вирус краснухи Семейство Togovirus, род Rubivirus

-Вирус ветряной оспы о опоясывающего герпеса Семейство Herpesviridae, Род Varicellarus

Урогенитальные инфекции – воспалительные заболевания мочеполовой системы. Причинами

данной группы заболеваний являются представители как патогенных (гонококки, хламидии,

трепанемы и пр.) бактерий, так и условно-патогенной микрофлоры организма человека (см. темы:

стафило- и стрептококки; грамотрицательные УПБ). Кроме бактерий, возбудителями являются

грибы (Candida), простейшие (трихомонады), вирусы (герпетические вирусы, вирусы папиломы).

Основной путь инфицирования – контактно-половой;

Входные ворота – слизистая половых путей. Но с секретами половых путей (влагалищной слизи, спермой) могут передаваться возбудители заболеваний, поражающих не мочеполовую сферу, а другие органы и системы: вирусы гепатита В, гепатита С, СПИД и пр. Таким образом, наиболее корректно говорить не об урогенитальных инфекциях, а о заболеваниях, передающихся половым путем (ЗППП).

Инфекционные патология урогенитальной сферы приводит к весьма тяжелым последствиям: бесплодию и внутриутробным поражениям плода – инфекционным заболеваниям, уродствам, гибели плода.

Кишечные инфекции

Механизм передачи: фекально-оральный

Пути передачи: пищевой, водный, контактно-бытовой, через лекарственные препараты

Входные ворота: слизистая желудочно-кишечного тракта

Область преимущественного поражения: желудочно-кишечный тракт

Условно данные инфекции (с учетом возбудителя, путей передачи и патогенеза) можно

разделить на 2 группы:

I. Кишечные инфекции, вызываемые специфическими возбудителями: дизентерия,

холера, брюшной тиф, паратифы А и В, эшерихиозы

II. Пищевые бактериальные отравления, представляющие собой:

токсикоинфекции – в организм должен попасть возбудитель (как правило, условно-

патогенный микроорганизм); в патогенезе имеют значение как сам микроб, так и его

токсины (эндо- и экзотоксины); при этом можно выделить возбудитель от больного;

токсикозы – в организм может попасть только экзотоксин, накопившийся в продукте

(бутулизм, стафилококковый токсикоз); при этом выделить возбудитель от больного

не всегда возможно; Отличительная черта пищевых бактериальных отравлений – очень

короткий инкубационный период: 2 – 6 часов

Основными возбудителями кишечных инфекций являются представители

семейства Enterobacteriaceae.

Энтеробактерии (электронная микроскопия)

Обитают в кишечнике человека, животных, птиц и, как следствие, широко

распространены во внешней среде (почва, вода, растения).

Семейство энтеробактерий включает более 20 родовых групп:

* род Escherichia – банальная и диареегенная E.coli (эшерихиозы)

* род Shigella – возбудители дизентерии и пищевой токсикоинфекции

* род Salmonella – возбудители брюшного тифа, паратифов А и В; сальмонеллёзов

* род Yersinia – возбудители чумы; псевдотуберкулёза и кишечного иерсинеоза

Антропонозы [от греч. anthropos + nosos - человек и болезнь] - группа инфекционных болезней, при которых единственным биологическим хозяином (резервуаром) возбудителя и источником инфекции выступает только зараженный человек. Главный признак этих болезней - узкая видовая специализация как возбудителя, так и хозяина (человека), сформировавшаяся в ходе длительной сопряженной эволюции.

При антропонозах различают следующие механизмы передачи инфекции:

- фекально-оральный;

- аэрозольный;

- трансмиссивный;

- контактный.

Зоонозы - это инфекции, общие для человека и животных в естественных условиях. В отечественной медицинской литературе зоонозами принято считать большую группу инфекционных и инвазивных болезней человека (более 190 нозологических форм), при которых резервуаром и источником инфекции служат различные виды домашних, синантропных и диких млекопитающих и птиц.

Именно они обеспечивают существование возбудителя как биологического вида. Организм человека служит для возбудителей зоонозов неспецифическим хозяином, заражение его происходит эпизодически и, как правило, человек становится для них биологическим тупиком. Иногда человек становится источником инфекции, но никогда не служит резервуаром возбудителей зоонозов. Серия инфекционных заболеваний людей заканчивается гибелью возбудителя при самопроизвольном затухании эпидемического процесса.

По этиологии зоонозы разделяют на следующие инфекции:

- бактериальные (бруцеллез, чума, туляремия, кампилобактериоз, лептоспироз, сальмонеллез, сибирская язва, риккетсиозы, хламидиозы, боррелиозы);

- вирусные (геморрагические лихорадки, бешенство);

- прионные (скрепи, губчатая энцефалопатия).

Заражение человека происходит разными путями:

- через укусы и травмы;

- пищевые продукты;

- объекты внешней среды, загрязненные выделениями животных;

- кровососущих переносчиков либо аэрозольно.

5. 
   Пищевые бактериальные интоксикации (стафилококковые, ботулизм). Возбудители, их характеристика, патогенез, клиника, лабораторная диагностика, профилактика.
   

  Пищ.интоксикации. (стаф. токсикоз) возник. при приеме пищи, заражен. токсинами. Вызыв.золотист.стаф, выделяет энтеротоксин, что приводит к пищ. интокс-ии и диф. поносу. Стаф. энтеротоксин попад. в ЖКТ, затем в кровь, дей-ет насерд.мышцу и вызыв. гипотензию. Ист. инф-ии люди-носители. Путь передачи с пищ. прод.

Диагн-ка: б/л иссл-е закл-ся в идент-ии бакт из 2 источников(пищ.прод. и орг-м челов.)Материал(испражнения, рвотн.массы) сеют на пит .ср. Наличие экзотоксина в иссл. материале и его тип устан-ют в РНГА. С/л и аллерг. не проводят. Инкуб пер короткий 1-2часа.забол-е начин остро

Диагн-ка: : б/л- рвота и подозр пищ прод, степень обсемененности пищ прод- опред спос-ть прод-ть этеротоксин,токсигенность в р-ции прецип в агаре.

ПИЩЕВЫЕ ТОКСИКОЗЫ

бактериальные, болезни человека, возникающие при употреблении пищи, содержащей токсины нек-рых патогенных бактерий, при отсутствии образующих токсины возбудителей. К токсинообразующим бактериям относятся в основном стафилококки, обладающие энтеротоксич. свойствами, и палочка ботулизма.

П. т. стафилококковой этиологии. Среди стафилококков, вызывающих различные болезни человека, а также животных (маститы, ангины, гнойничковые болезни кожи и др.), встречаются штаммы, образующие энтеротоксин. Часовое кипячение не разрушает энтеротоксин полностью. П. т. возникают обычно при наличии в инкриминируемом продукте (пище) не менее 50 000 патогенных стафилококков в 1 г. Осн. источники заражения пищевых продуктов патогенными стафилококками — человек (гл. обр. работники пищевых предприятий) и особенно — молочный скот, болеющий маститами, в т. ч. скрытыми. Серьёзный эпидемиологич. фактор — носительство стафилококков у больных и здоровых людей. Особенно опасны люди, больные ринитами, ангинами, стоматитами, гнойными дерматитами. Пищевые отравления стафилококковой этиологии связаны с разнообразными продуктами — мясными, молочными, рыбными, овощными, изделиями из крема. Особую опасность представляют молоко и молочные продукты, в т. ч. молоко-самоквас и изделия из него (творог, сметана).

Для развития заболевания требуется ряд способствующих факторов:

1) достаточная доза возбудителя;

2) соответствующие вирулентность и токсигенность;

3) сниженная сопротивляемость макроорганизма;

4) наличие сопутствующих заболеваний и др.

Стафилококки Представители данного рода — неподвижные грамположительные кокки, диаметр клетки которых составляет от 0,6 до1,2 мкм. Для представителей рода характерно расположение микробных клеток «виноградными гроздьями» в чистой культуре. Стафилококки — факультативные анаэробы, при этом они не образуют спор или капсул.

Clostridium botulinum  (лат.) (ботулина) — анаэробная грамположительная бактерия рода клостридий [1], возбудительботулизма — тяжёлой пищевой интоксикации, вызываемой ботулиническим токсином и характеризуемой поражениемнервной системы. C. botulinum обитает в почве. Заболеваемость ботулизмом повсеместна. Наиболее распространены бактерии типа A и B. В природных условиях бактерии колонизируют ил на дне водоёмов, инфицируют рыб. При пересыхании водоёмов рост C. botulinum стимулируется. Таким образом, естественный резервуар для этих бактерий — почва и различные животные. Тёплый климат создаёт условия для длительного сохранения спор в почве, а также для прорастания и размножения вегетативных форм. Вид C. botulinum образует экзотоксины, различающиеся по антигенным свойствам и по этому признаку подразделяются на серотипы. Ботулотоксины всех типов обладают сходной биологической активностью, являясь вариантами одного нейротоксина. Кроме нейротоксического действия, ботулотоксин обладает лейкотоксической, гемолитической и лецитиназной активностью.

Стафилококки  

1) бактериологическое исследование выделений больных, пищевых продуктов;

2) серодиагностика.

Ботулизм

1) заражение лабораторных мышей; материал – рвотные массы, промывные воды желудка, испражнения, кровь;

2) обнаружение токсина в реакции токсинонейтрализации;

3) серодиагностика.

Лечение: антитоксическая противоботулиническая сыворотка.

Профилакстика — Санитарный надзор над производством(недопускание бактерионосителей к пищевому производству)

БИЛЕТ 22

1. 
   Тинкториальные свойства бактерий, их диагностическая значимость. Простые и сложные методы окраски бактерий( Методы Грамма, Циля- Нильсена, Бурри-Гинса, Нейссера, Ожешко и др.). Механизм взаимодействия красителей с отдельными структурами бактериальной клетки.
   

Тинкториальные св-ва – это способность к окрашиванию.

Простой метод окраски – один краситель , окрашивание в один этап

Можно изучить морфологические и тинкториальные св-ва

Сложный метод окраски – несколько красителей и окрашиванеи в несколько этапов

Можно изучить – морфологические, тинкториальные и структурные св-ва

Метод Грама:

1. 
   Генцианфиолетовый 1-2мин
   
2. 
   Раствор Люголя 1мин (соединение йода)
   
3. 
   Спирт этиловый 96% 10 сек
   
4. 
   Промыть водой
   
5. 
   Докрасить фуксином 1-2 мин
   

Метод Циля-Нильсена – выявление кислотоустойчивых бактерий

1.Фуксин Циля(карболовая кислота)

2. Подогреваем 5 раз

3. Серная кислота

4.Смыть водой

5. Докрашиваем метиленовым синим

Итог: кислотоустойчивые в красный(т.е. они не обесцвечиваются серной к-той из-за наличия в КС миколовой к-ты), остальные - в синий

Метод Ожешко – выявление спор

Все как и по Цилю –Нельсу, преварительно обработав 0,5% НСl

Итог: Споры в красный, бактерии в синий

Метод Бури –Гинса – выявление капсулы

1.Тушь + взвесь бактерий

2. Фиксация подсушивание

3. Окраска фуксином 1-2 мин

4.Смыть водой, высушить. Микроскопировать

Итог: Неокрашенная капсула и красные цвета бактерий в темном поле

Метод Нейссера – выявление зерен волютина

1. 
   Ацетат синьки Нейссера2-3мин
   
2. 
   Раствор Люголя 10-30сек
   
3. 
   Смыть водой
   
4. 
   Докрашиваем раствором везувина или хризоидина в течение полминуты
   

Итог: Зерна волютина имеют щелочную р-ю,поэтому избирательно воспринимают ацетат синьки,окраш в темно-синий, а цитоплазма имеет кислую реакцию, вопсринимает щелочной краситель и окрашивается в желтый цвет.

Метод Романовского –Гимзе – окраска смеси клин материала и простейших

1. 
   Фиксация смеси Никифорова(этил.спирт и эфир)
   
2. 
   Азур+эозин+ метиленовый синий
   
3. 
   Смыть водой,высушить,микро-ть
   

Итог: ядра эукариотов – в фиолетово-красный, цитоплазма в голубовато-синий

2. 
   Внутриутробные инфекции. Этиология. Пути передачи инфекции к плоду. Лабораторная диагностика, профилактика
   

Внутриутробные инфекции – это заболевания плода и новорожденного, возникающие внутриутробно, вследствие передачи вируса от инфицированной матери к плоду.

2% инфицируются внутриутробно, 10% во время родов или сразу после родов.

Поражение обусловлено влиянием возбудителей и их токсинов, а также нарушенным в результате инфекции обмена веществ матери .

Причины возникновения:

1. Острые инфекции во время беременности

2. Хронические инфекции во время беременности и вне ее

3. Затяжные, осложненные роды

4. Преждевременное излитие вод, длительный безводный период

Пути инфицирования: 1. Трансплацентарный 2.Восходящий и нисходящие пути инфицирования 3. Контактный во время родов.

Этиология : микоплазма(восходящий и нисходящий путь инфицирования, вызывают инфекцию мочеполовой системы), хламидии (облигатные внутриклеточные паразиты), а также герпесвирусы, токсоплазмы, цитомегаловирусы, кандида (восходящий путь инфи-я), вирусы гепатитов, краснухи, респираторные вирусы и т.д.

Клиническая картина: пневмония, бронхиты, поражение ЦНС, гепатиты и энтериты, сепсис, пороки развития разных органов и т.д.

Классификация ВУИ: Плод наиболее восприимчив в первые триместра беременности

Период имплантации оплодотворенной яйцеклетки – 7-12 дней

Период развития плаценты - 4-6 нед

Период органогенеза – до 12 недель

1) период прогенеза соответствует созреванию гамет (яйцеклеток и сперматозоидов) до оплодотворения (в этот период возможно возникновение патологии гамет – гаметопатии);

2) период киматогенеза (от греч. kyema - зародыш) соответствует периоду от оплодотворения до родов. С периодом киматогенеза совпадает период киматопатии. В нем различают три периода:

* бластогенез - период от оплодотворения до 15 дня беременности. В этот период идет дробление яйца, заканчивается образованием эмбриобласта и трофобласта (в этот период возможно возникновение бластопатии

* эмбриогенез - период с 16 дня до 75 дня беременности, идет основной органогенез и образуется амнион и хорион (в этот период возможно возникновение эмбриоопатии);

* фетогенез - период с 76 дня по 280 день беременности, происходит дифференцировка и созревание тканей плода, образование плаценты, а также рождение плода (в этот период возможно возникновение фетопатии). Фетогенез в свою очередь делится на

* ранний фетальный период (76-180 день беременности) - возможно возникновение ранних фетопатий

* поздний фетальный период (181-280 день беременности) - возможно возникновение поздних фетопатий

Диагностика:

1.Серологический метод – выявление иммуноглобулинов М

2. Бактериологический или вирусологический методы в период новорожденности (исследуют сыворотку, плаценту, пуповину, околоплодные воды, амниотическую жидкость, отделяемое зева, уха)

3. Собственно-иммунный метод (поиск антигенов)

4. ПЦР

рофилактика внутриутробных инфекций заключается в проведении предгравидарной подготовки, лечении ЗППП до наступления беременности, исключении контактов беременной с инфекционными больными, коррекции программы ведения беременности у женщин групп риска. Женщины, ранее не болевшие краснухой и не получавшие прививки против краснухи, должны быть вакцинированы не позднее, чем за 3 месяца до предполагаемой беременности. В ряде случаев внутриутробные инфекции могут являться основанием для искусственного прерывания беременности.

3. 
   Клебсиеллы - свойства, этиологическая роль при пневмонии и других гнойно-воспалительных инфекциях. Роль при внутрибольничных инфекциях, лабораторная диагностика.
   

КЛЕБСИЕЛЛЫ.Род Klebsiella вклю­чает 4 вида, первый из которых К. pneumoniae состоит из трех подвидов: К. subsp. pneumoniae, К. ozaenae и К. rhinoscleromatis.

Морфология.Короткие тол­стые палочки, в препаратах распола­гаются поодиночке, парами и короткими цепочками. Неподвиж­ны, спор не образуют. Характерным признаком клебсиелл явля­ется наличие выраженной капсулы. Не требовательны к пит средам. На плотных средах – блестящие куполообразные слизистые колонии, в жидких средах – интенсивное по­мутнение.

АГ.О-АГ (ЛПС) и 82 К-АГ (ПС), на их основе проводится серотипирование. Некоторые О- и К-АГ клебсиелл являются общими с эшерихиями и сальмонеллами.

Патогенностьклебсиелл обусловлена капсулой, защищающей микроорганизмы от фагоцитоза, и действием эндотоксина. Клебсиеллы пневмонии продуцируют термостабильный энтеротоксин, действие которого проявляется в усилении выпота жидкости в просвет тонкой кишки.

Экология и распространение.Обитают у чка и Ж! в кишечнике, на коже и слизистых. Широко распростра­нены. Благодаря капсуле устойчивы к факторам окр среды, длительно сохраняются в почве, в воде, на предметах. Чувствительны к растворам обычных дезинфектантов.

Патогенез.Являются возбудителями ЗОД (риносклерома, озена, пневмония), могут поражать слизистые век, мочеполовых органов, мозговой оболочки, суставов, способны вызывать сепсис, острые кишечные инфекции, гнойные послеродовые осложнения. У новорожденных → тяжелые пневмонии, кишечные инфекции, токсико-септические состояния. Вызывают внутрибольничные инфекции, часто микст–инфекции.

Клебсиеллы ОЗЕНЫ вызывают хронические ЗОД. Воспаление сопровождается выделением вязкого секрета, со зловонным запахом.

Клебсиеллы РИНОСКЛЕРОМЫвызывают хронические вос­палительные процессы слизистых ВДП с образованием инфильтратов, которые затем рубцуются. Возбудители располагаются в гранулемах внутри и вне клеток.

Иммунитет.АТ к клебсиеллам вырабатываются, но они не обладают выраженными протективными свойствами, основная роль принадлежит фаго­цитозу, который активируется специфическими опсонинами. Воз­никновению хронических форм клебсиеллезов способствует вну­триклеточная локализация возбудителя и развитие ГЗТ.

Лабораторная диагностика– выделение чистой культуры, дифференциация (от других энтеробактерий) и идентификации вида, определении серовара. Серодиагностика проводится в РСК с А-АГ клебсиелл.

Профилактика и лечение.Вакцинопрофилактика не разработана. Для лечения применяют АБ. За послед­ние годы отмечается широкое распространение антибиотикорезистентных штаммов клебсиелл.

ЛЕЧЕНИЕ- специфическая отсутствует. ЛЕЧЕНИЕ ЦЕФАЛОСПАРИНЫ 2-3 ПОКОЛЕНИЯ.

омплексные вакцины.

1.1.3.1. Вакцина поликомпонентная из антигенов условнопатоген-ных микробов (ВП-4). Содержит антигенные комплексы стафилококка, протея, клебсиеллы пневмонии и кишечной палочки, выделенные путем экстракции гидроксиламином или водной экстракцией. Вакцина вызывает у привитых выработку антител к клебсиелле пневмонии, стафилококку, протею, кишечной палочке. Стимулирует неспецифическую ре-зистентность организма по отношению к перечисленным микробам, а также к другим условнопатогенным микроорганизмам. Препарат предназначен для иммунотерапии больных с хроническими воспалительными и обструктивными заболеваниями органов дыхания, а также для иммунотерапии хронических и затяжных форм ГВЗ, вызванных указанными микроорганизмами.

Для лечения гнойных заболеваний используются следующие препараты бактериофагов: пиобактериофаг поливалентный, бактериофаг клебсиелл пневмонии, бактериофаг коли жидкий, бактериофаг протейный, бактериофаг псевдомонас аэругиноза, бактериофаг стафилококковый, бактериофаг стрептококковый. Все указанные препараты содержат стерильные фильтраты фаголизатов гноеродных микроорганизмов.

Иммуноглобулин, обогащенный IgM, человеческий для перорального применения сухой – представляет собой белковую фракцию сыворотки или плазмы крови человека, содержащую иммуноглобулины классов M,G,A. Применяют для лечения диареи, энтероколитов, дисбактериоза, вызванных патогенными и условно-патогенными бактериями. Препарат обладает широким спектром антибактериального действия, особенно в отношении грамотрицательных бактерий (шигелл, сальмонелл, патогенных кишечных палочек, синегнойной палочки, клебсиелл и др.)

БИЛЕТ 23

1. 
   Морфология и структура вирусов. Понятие о вирионе. Типы симметрии нуклеокапсида. Химический состав вирусов. Методы культивирования вирусов. Типы взаимодействия вирусов с клеткой. Основные стадии взаимодействия вирусов с клеткой хозяев при продуктивном типе инфекции. Особенности репродукции ДНК и РНК-содержащих вирусов.
   

Морфология и структура вирусов, роль отдельных компонентов

вириона. Структурная единица вируса – вирион. Вирусы устроены примитивно просто. В состав любого вируса входит нуклеиновая кислота (НК) и белковая оболочка. В состав вируса входит только один тип НК – либо ДНК, либо РНК. НК – это геном вируса.

1.ДНК: размеры от 1х106 до 250х106; может быть: 2-х цепочечная линейная

незамкнутая, 2-х цепочечная замкнутая; 1-цепочечная линейная

2.РНК (до 80% вирусов): размеры от 1х106 до 7,5х106; может быть: 1-цепочечная

линейная, 1-цепочечная кольцевая фрагментированная, 2-х цепочечная линейная

фрагментированная.

Нуклеиновая кислота может скрученная, суперспирализованная

Белковая оболочка вируса называется капсид. Капсид образуют отдельные белковые молекулы – капсомеры. У просто устроенных вирусов больше ничего нет. Сложные вирусы имеют суперкапсид – наружную оболочку. Суперкапсид по химической структуре состоит их липопротеидов, липидов, полисахаридов. Суперкапсид чаще всего имеет клеточное происхождение. В состав вириона могут также входить ферменты – ДНК-полимераза, обратная транскриптаза. Функции НК вируса. 1. Сохранение и передача наследственной информации. 2.Инфекционные свойства вируса обусловлены также НК, именно НК проникает в клетку и заставляет клетку синтезировать новые вирусные частицы, клетка в конечном итоге погибает.

Функции оболочки.

1.Определяет форму вируса. Форма вируса зависит от типа симметрии . Существует три типа симметрии вирусов: кубический, спиральный, смешанный. Тип симметрии определяется расположением капсомеров в капсиде. При кубическомтипе симметрии капсомеры располагаются так, что образуют геометрическую фигуру – многогранник (напр.икосаэдр), в этом случае в вирусной частице есть полость, в которой располагается НК. Такие вирусы под электронным микроскопом обычно имеют шаровидную форму. При спиральном типе симметрии капсомеры располагаются по спирали, повторяя ход спирали НК. В этом случае полости внутри вируса нет, капсомеры плотно прилегают к НК. Такие вирусы имеют обычно палочковидную, цилиндрическую, нитевидную

форму. При смешанном типе смметрии в составе вируса есть части и со спиральным, и с кубическим типом симметрии, напр., бактериофаги. 2.Адресная функция оболочки. На поверхности оболочки вируса есть рецепторы, соответствующие рецепторы есть на поверхности клетки, взаимодействие этих рецепторов приводит к адсорбции вируса на клетке. Адсорбция – это всегда процесс специфического взаимодействия рецепторов. Поэтому вирус может проникнуть не в любую клетку, а только в ту, к которой у него есть рецепторы. Свойство вирусов специфически взаимодействовать только с определенными клетками наз. тропизмом вирусов. Все вирусы обладают тропизмом к определенным клеткам и тканям. 3. Антигенные свойства. Оболочки вируса являются носителями антигенных свойств вируса. 4. Защитная функция. Оболочки вируса защищают вирион внутри организма от действия нуклеаз. 5.Первичная токсичность вируса.

Суперкапсид: ему свойственны функции капсида; включает компоненты оболочек клетки-мишени, что позволяет вирусу персистировать в организме и индуцировать аутоиммунные процессы

Типы взаимодействия вирусов с клеткой.

• Автономный тип взаимодействия

• 1.Продуктивная инфекция

• 2. Абортивное инфекция

• Интегративный тип взаимодействия

Продуктивная инф. - заканчивается гибелью клеток и образованием популяции новых вирусных частиц. На фоне продуктивного взаимодействия вируса с клеткой возникает обычно острая вирусная инфекция.

Абортивная инф. - не приводит к появлению вирусной популяции и гибели клеток хозяина

Интегративное взаимодействие - нуклеиновая кислота вируса встраивается в геном клетки и сосуществует с клеткой длительное время.

Такой вирус называется провирус, явление перехода вируса в форму провируса наз. вирогенией, а клетка, содержащая вирус в форме провируса - вирогенная клетка. На фоне интегративного взаимодействия вируса с клеткой возникает персистентная вирусная инфекция. Она может проявляться тремя типами инфекций: латентная вирусная инфекция, хроническая вирусная инфекция, медленная вирусная инфекция.

Этапы вирусной репродукции при продуктивной вирусной инфекции.

• 1. адсорбция вирусов (опосредуется рецепторами вируса и чувствительной клетки)

• 2. проникновение вирусов в клетку (путем рецепторного эндоцитоза)

• 3. синтез ранних вирусных белков (ферменты репликации и синтеза структурных белков вируса) как правило, это белки, которые регулируют дальнейшие процессы размножения вируса (вирусная НК подавляет генетический аппарат клетки)

• 3. репликация вирусной НК и синтез поздних вирусных белков (как правило, это белки капсида)

• 4. сборка вирусов (при этом могут оставаться «неупакованные» НК, фрагменты капсида)

5. выход вирусов из клетки : лизис клетки или почкование вируса (этот механизм обычно присущ сложным вирусам – имеющим суперкапсид); возможен выход вирусов через цитоплазматические каналы

Методы культивирования

Вирусы – облигатные внутриклеточные паразиты, поэтому они не

растут на питательных средах. Для их культивирования нужна живая

клетка. Существует три модели для культивирования вирусов: куриный эмбрион, организм чувствительного лабораторного животного, культура клеток. Культура клеток – это клетки многоклеточного организма, выращенные в пробирке. Разновидности культур клеток: 1. первично- трипсинизированные 2.полуперевиваемые 3.Перевиваемые.

первично-трипсинизированные (переживающие) - способные размножаться только в первых генерациях, т.е. в нескольких пассажах после выделения из тканей; получают путем обработки ткани трипсином (клетки отделяются друг от друга и представляют собой взвесь в питательной среде)

перевиваемые – способные размножаться в лабораторных условиях неопределенно длительный срок (десятилетия): например, клетки HeLa – клетки злокачественной опухоли матки, полученные от женщины, погибшей в 50-е годы от данного заболевания;

полуперевиваемые – имеют ограниченную продолжительность жизни (50-100

пассажей)

Формула переноса генетической информации у различных вирусов:

для ДНК-содержащих вирусов: ДНК вируса - > иРНК - > белок вируса

для РНК-содержащих «-»-нитевых вирусов: РНК вируса – >иРНК - > белок вируса

для РНК-содержащих «+»-нитевых вирусов: РНК вируса - > белок вируса

для РНК-содержащих ретровирусов: РНК вируса - >комплементарная ДНК - > иРНК - >белок вируса

! Плюс-нитевая РНК – работает, как информационная РНК!

! Минус-нитевая РНК – не может взаимодействовать с рибосомами клетки!

2. 
   Система комплемента, классический и альтернативный пути активации комплемента. Методы определения комплемента.
   

Система комплемента- комплекс белков и гликопротеидов сыворотки крови человека и позвоночных животных (их более 20). Отдельные компоненты опосредуют процессы воспаления, опсонизацию чужеродных фрагментов для последующего фагоцитоза, участвуют наряду с макрофагами в непосредственном уничтожении микроорганизмов и других чужеродных клеток (лизис бактерий и вирусов). В условиях физиологической нормы компоненты системы комплемента находятся в неактивной форме. Известны три пути активации системы комплемента- классический, альтернативный и с использованием С1- шунта.

Кл а с си че с к ий путь осуществляется с участием антител.

Пр и этом способе активации происходит присоединение к комплексу антиген — антитело (АГ + AT) вначале компонента С1 комплемента (его трех субъединиц C1q, C1r, C1s), затем к образовавшемуся комплексу АГ + AT + С1 присоединяются последовательно «ранние» компоненты комплемента С4, С2, СЗ. Эти «ранние» компоненты активируют с помощью ферментов компонент С5, причем реакция протекает уже без участия комплекса АГ + AT. Компонент С5 прикрепляется к мембране клетки, и на нем образуется литический комплекс из «поздних» компонентов комплемента С5b, С6, С7, С8, С9. Этот литический комплекс называется мембраноатакующим (МАК), так как он осуществляет лизис клетки.

Альтернативный путь активации комплемента происходит без участия антител

и осуществляется до выработки антител в организме. Альтернативный путь также

заканчивается активацией компонента С5 и образованием мембраноатакующего комплекса, но без участия компонентов С1, С2, С4. Весь процесс начинается с активации компонента СЗ, которая может происходить непосредственно в результате прямого действия антигена (например, полисахарида микробной клетки). Активированный компонент СЗ взаимодействует с факторами В и D (ферментами) системы комплемента и белком пропердином (Р). Образовавшийся комплекс включает компонент С5, на котором и формируется мембраноатакующий комплекс, как и при классическом пути активации комплемента.

Таким образом, все пути активации комплемента завершаются образованием

мембраноатакующего литического комплекса. Механизм действия этого комплекса на клетку до конца не выяснен. Однако известно, что этот комплекс внедряется в мембрану, образует как бы воронку с нарушением целостности мембраны. Это приводит к выходу из клетки низкомолекулярных компонентов цитоплазмы, а также белков, поступлению в клетку воды, что в конечном итоге приводит к гибели клетки .

Система комплемента обеспечивает:

- цитолитическое и цитотоксическое действие антител на клетки-мишени

(бактерии, вирусы, эритроциты и др.)

- благодаря образованию мембраноатакующего комплекса (компоненты С5-С9) активацию фагоцитоза: компоненты С3b, С4b являются опсонинами, повышают адгезию иммунных комплексов с мембранами макрофагов, нейтрофилов, эритроцитов и тем самым усиливают фагоцитоз

- развитие воспаления: образующиеся С3а, С4а, С5а компоненты являются анафилотоксинами, они связываются с рецепторами кровяных и тканевых базофилов, индуцируют их дегрануляцию –

выброс гистамина, сероторина и других вазоактивных медиаторов (медиаторов воспалительного ответа).

Кроме того, С5а является хемотаатрактантом для фагоцитов, он привлекает эти клетки в очаг воспаления.

Следовательно, комплемент обладает многосторонней иммунологической

активностью, участвует в освобождении организма от микроорганизмов и других антигенов, в уничтожении опухолевых клеток, отторжении трансплантатов, аллергических повреждениях тканей, индукции иммунного ответа.

3. 
   Пикорнавирусы: Классификация, характеристика вирусов полиомиелита, патогенез, иммунитет. Лабораторная диагностика, специфическая профилактика полиомиелита
   

Семейство Picornaviridae объединяет четыре рода - Enterovirus, Cardiovirus, Rhinovirus, Aphtovirus. Это мелкие “голые” вирусы с икосаэдральной (кубической) симметрией. Геном образован несегментированной позитивной РНК. Репликация РНК и сборка вируса осуществляется в цитоплазме, выход вируса сопровождается лизисом клетки. Репликация вРНК осуществляется по схеме: вРНК-> кРНК-> вРНК. Название семейства происходит от pico (лат. - маленький) и RNA (РНК), т.е. маленькие РНК- вирусы. Из рода афтовирусов наибольшее значение имеет вирус ящура. Представители рода риновирусов (более 100 серотипов) - возбудители острых респираторных инфекций.

Род энтеровирусов.

Род объединяет несколько групп вирусов: полиовирусы (1 - 3 типов), вирусы Коксаки А (24 серовара), вирусы Коксаки В (6 сероваров) и ECHO (34 серовара), а также неклассифицированные вирусы (вирусы 68 - 72). Энтеровирус 72 - возбудитель гепатита А.

Все энтеровирусы кислотоустойчивы (могут выживать в кислой среде желудка), отсутствие оболочки обусловливает их устойчивость к действию жировых растворителей и желчных кислот (особенно устойчивы полиовирусы). Патогенные виды поражают желудочно - кишечный тракт. Для них характерны : фекально - оральный механизм заражения, летне - осенняя сезонность, выделение вирусов из кишечника, носоглотки, ликвора и крови, обнаружение в сточных водах, широкое носительство, преимущественное поражение детского населения.

Полиовирусы.

Полиовирусы вызывают полиомиелит - острую инфекцию с поражением нейронов продолговатого мозга и передних рогов спинного мозга. Важнейшее биологическое свойство полиовирусов - тропизм к двигательным клеткам серого вещества спинного мозга (polios - серый, myelitis - воспаление спинного мозга).

Капсид вириона образован четырьмя белками, образующими внешнюю (VP1, VP2, VP3) и внутреннюю (VP4) поверхности капсида. Белки оболочки имеют значение в распознавании и прикреплению к клеточным рецепторам, высвобождении вирионной РНК внутри клетки, развитии параличей.

По антигенным свойствам полиовирусы подразделяют на три типа, наибольшей вирулентностью и эпидемической активностью обладают полиовирусы 1 типа.

Патогенез поражений. Входными воротами для полиовирусов являются слизистые глотки, желудка, тонкого кишечника. После размножения в эпителиальных клетках вирус проникает в регионарные лимфатические узлы, затем - в кровь (первичная вирусемия). Эти первые стадии характеризуют “малую болезнь”, которая может протекать практически бессимптомно (легкое недомогание, кратковременное повышение температуры) и заканчиваться формированием постинфекционного иммунитета и выздоровлением, что и происходит в большинстве случаев.

Если полиовирус преодолевает гематоэнцефалитический барьер и поражает нейроны передних рогов спинного мозга, продолговатого мозга и варолиевого моста, несущие рецепторы к полиовирусам, развивается “большая болезнь” - паралитические формы (спинальный полиомиелит обычно с ассиметричными поражениями нижних конечностей, бульбарный полиомиелит в ряде случаев с поражениями центров, контролирующих дыхательные мышцы, а также сочетанные спинально - бульбарные поражения.

Лабораторная диагностика имеет особое значение, особенно при стертых формах, поскольку многие энтеро - и герпетовирусы способны вызывать схожие поражения. Поэтому исследования необходимо проводить одновременно на все эти группы вирусов.

1.Вирусологическая диагностика включает выделение вируса на различных культурах клеток или (в некоторых случаях - Коксаки А) на новорожденных белых мышах, с последующей идентификацией по цитопатическому эффекту, в РН, РТГА, РСК с эталонными сыворотками.

2. Серологическая диагностика осуществляется в различных реакциях (в настоящее время - ИФА), необходимо исследование в парных сыворотках, выявление специфических IgM - антител.

Иммунитет и специфическая профилактика

Иммунитет прочный, пожизненный, типоспецифический.

Иммунитет к полиовирусам прочный, обусловленный вируснейтрализующими антителами и клетками иммунной памяти. Для специфической профилактики используют убитые (вакцина Солка) и живые (вакцина Сэбина) ослабленные вакцины (содержат аттенуированные штаммы полиовирусов 1, 2 и 3 типов). Существуют программы массовой иммунизации против полиомиелита и программы полной ликвидации этой инфекции.

На фоне резкого снижения и ликвидации полиомиелита наблюдаются полиомиелитоподобные заболевания, вызываемые преимущественно вирусами Коксаки и ECHO.

Профилактика. Основной мерой профилактики полиомиелита является иммунизация. Первая инактивированная вакцина для профилактики – создавала общий гуморальный иммунитет, не формировала местной резистентности слизистых оболочек ЖКТ, не обеспечивала надежную защиту. Пероральная живая культуральная вакцина из трех серотипов штаммов. Используют для массовой иммунизации детей, она создает стойкийобщий и местный иммунитет. Неспецифическая профилактика сводится к санитарно-гигиеническим мероприятиям

БИЛЕТ 24

1. 
   Микрофлора кожи, ротовой полости здорового человека. Микрофлора слизистых оболочек дыхательных путей, мочеполового тракта и глаза. Значение их в жизнедеятельности человека.
   

Основные функции кожи : Иммунная, Защитная, Секреторная, Рецепторная

Кожа –иммунный орган

• Кератиноциты продуцируют ряд неспецифических медиаторов, БАВ, участвующих в воспалительных процессах кожи( метаболиты жирных кислот, активатор и ингибитор плазминогена). Кератиноциты способствуют созреванию Т- лимфацитов, способны стимулировать экспрессию тимопоэтина, способствующего созреванию и дифференцировке Т-лимфоцитов. Кератиноциты схожи с клетками вилочковой железы т.к. в них обнаружены общие гетероантигены, расположенные также в базальных клетках тимуса. В процессе культивирования эпителия тимуса было обнаружено, что клетки тимуса превращаются в кератоциты эпидермиса при культивировании в среде. В рецепторах телец вилочковой железы (тельца Гассаля) обнаружен антиген, характерный для клеток базального слоя эпидермиса.

Т-лимфоциты составляют 90%всех лимфоцитов кожи и расположены в эпидермисе и верхних слоях дермы. В-лимфоциты расположены в средних и глубоких слоях дермы. Практически одинаковое количество хелперов и супрессоров находится в периваскулярной зонах.

Кожа человека не стерильна. Она содержит нормальную микрофлору, которая является антагонистически активной относительно патогенной флоры. Многочисленные бактерии кожи включают: стафилококки (S.epidermidis, S.hominis, S.haemoliticus, S.saprophiticus,). Стафилококк – кокки, способные накапливаться в волосяных фоликулах, не способен образовывать плазмокоагулазу. S. hominis cамые распространенные коагулазоотрицательные комменсалы, Иногда эти микроорганизмы вызывают госпитальные инфекции у больных с протезированными сердечными клапанами и внутривенными катеторами . Микрококки (M.luteus, M.varianns,) • Коринебактерии (C.minutissimum, C.xerosis,). Коринебактерии –липофильные и не липофильные. Липофильные способны колонизировать области , богатые кожным салом (липидами) такие как подмышечные впадины, токсинов не образуют.

Микрофлора дыхательных путей.

Слизистые оболочки гортани, трахеи, бронхов и альвеолы здорового человека не содержат микроорганизмов. Основная масса микрофлоры рото- и носоглотки приходится на зеленящего стрептококка, реже выявляются нейссерии, дифтероиды и стафилококки.

Носовые ходы - Часто присутствует коагулазопозитивный стафилококк, не вызывающий патологию данного пациента и является транзиторной микрофлорой (особенно у медицинского персонала – до 60%), дифтерийная палочка (у нас нет антибактериального иммунитета), пневмококки, Микрофлора носовых ходов прямо корелирует с микрофлорой воздуха помещений, где живет и работает пациент.

Носоглотка • Микрофлора, указанная в носовых ходах дополняется анаэробной флорой, • т.к. данный отдел вентилируется меньше. Здесь присутствуют бактеройды, спириллы и вибрионы. • А также - не гемолитический стрептоккок в значительных количествах.

Ротоглотка • Смешанный район – дыхательный и пищеварительный. Из анаэробов встречаются бактеройды, спириллы, вибрионы. Для носоглотки – клебсиеллы – случайные микроорганизмы, для ротоглотки – это резидентная микрофлора. • Рот – основной источник контаминации пищи. В слюне аэробы составляют 10х7-8 КОЕ в мл слюны. • Могут обнаруживаться стрептококки, грибы, простейшие. • На уровне гортани резко обрывается к-во микрофлоры. В норме легкие и бронхи – стерильны

Большинство пожилых людей носит зубные протезы. Механическое воздействие протезов приводит слущиванию эпителия слизистой оболочки, снижению местной защиты и способствует развитию воспалительного процесса. При полном съемном протезировании появляются в большом количестве грибы рода Candida, сарцины, актиномицеты, снижается количество лактобацилл, спирохет, определяются нетипичные представители – кишечная палочка, клебсиелла, энтерококки.

Факторы неспецифической резистентности полости рта.

1. Слизистая оболочка обладает барьерными свойствами, покрыта толстым многослойным эпителием (слизистая кожного типа). Муцин ингибирует адгезию микроорганизмов. 2. Подслизистый слой – лимфоидная ткань, фагоцитоз. 3. Слюна –она механически смывает с поверхности слизистой все микробные клетки и чужеродные частицы. Содержит гуморальные факторы – лизоцим, Ig A. Лизоцим – фермент муромидаза, разрушает связи в молекуле пептидогликана, активен против гра+ микроорганизмов, усиливает литическое действие IgA, снижение концентрации его в слюне ведет к активизации кариеса.

Нормальная микрофлора способствует активации факторов местной защиты – комплемента, фагоцитоза, повышает концентрацию лизоцима в слюне, активирует NK-клетки, увеличивает продукцию цитокинов и т.д.

Факторы специфической защиты полости рта. 1. Секреторный иммуноглобулин – SIgA . Обладает устойчивостью к действию протеолитических ферментов слюны.

Микрофлора мочеполового тракта.

Микробный биоценоз скуден, верхние отделы обычно стерильны. Во влагалище здоровой женщины преобладают молочнокислые палочки Додерлейна (лактобактерии), создающие кислую рН, угнетающую рост грамотрицательных бактерий и стафилококков, и дифтероиды. Существует баланс между лактобактериями с одной стороны и гарднереллами и анаэробами с другой.

Коньюнктива глаза - немногочисленна в норме и представлена непатогенными аэробными коринебактериями и кокковой группой, близкой к коже.Грамотрицательная группа микроорганизмов отсутствует

2. 
   Вакцины живые, убитые, химические, анатоксины, синтетические, современные рекомбинантные вакцины. Принципы получения, механизмы создаваемого иммунитета. Адъюванты в вакцинах.
   

I. Живые вакцины.

Живые вакцины содержат жизнеспособные штаммы патогенных микробов, ослабленные до степени, исключающей возникновение заболевания, но полностью сохранившие антигенные и иммуногенные свойства. Это аттенуированные в естественных или искусственных условиях штаммы микроорганизмов. Аттенуированные штаммы вирусов и бактерий получают путем инактивации генов, ответственных за образование факторов вирулентности, или за счет мутаций в генах, неспецифически снижающих эту вирулентность. Вакцинные штаммы микроорганизмов, сохраняя способность размножаться, вызывают развитие бессимптомной вакцинальной инфекции. Реакцию организма на введение живой вакцины расценивают не как болезнь, а как вакцинальный процесс. Вакцинальный процесс продолжается несколько недель и приводит к формированию

иммунитета к патогенным штаммам микроорганизмов.

Живые вакцины имеют ряд преимуществ перед убитыми и химическими вакцинами. Живые вакцины создают прочный и длительный иммунитет, по напряженности приближающийся к постинфекционному. Для создания прочного иммунитета во многих случаях достаточно одного введения вакцины, причем, такие вакцины могут вводиться в организм достаточно простым методом – например, скарификационным или пероральным.

Живые вакцины используют для профилактики таких заболеваний, как полиомиелит, корь, паротит, грипп, чума, туберкулез, бруцеллез, сибирская язва и др. (см. табл.).

2) Создание вакцинных штаммов микроорганизмов с помощью методов генной инженерии путем рекомбинации геномов вирулентного и невирулентного штаммов.

Недостатки живых вакцин:

- остаточная вирулентность

- высокая реактогенность

- генетическая нестабильность – ревертирование к дикому типу, т.е. восстановление вирулентных свойств

- способность вызывать тяжелые осложнения, в том числе эецефалиты и генерализацию вакцинного процесса.

1.2. Убитые вакцины.

Убитые (корпускулярные) вакцины содержат взвесь цельных микробных клеток, инактивированных физическими и химическими методами. Для инактивации используют нагревание, ультрафиолетовое облучение, формалин, фенол, спирт, ацетон, мертиолят и др. Убитые вакцины обладают более низкой эффективностью по сравнению с живыми вакцинами, но при повторном введении создают достаточно стойкий иммунитет. Вводятся парентерально. Корпускулярные вакцины применяют для профилактики таких заболеваний, как брюшной тиф, холера, коклюш и др.

1.3. Химические вакцины.

Химические (субъединичные) вакцины содержат специфические антигены, извлеченные из микробной клетки с помощью химических веществ. Из микробных клеток извлекают протективные антигены, представляющие собой иммунологически активные вещества, способные при введении в организм обеспечивать формирование специфического иммунитета. Протективные антигены находятся либо на поверхности микробных клеток, либо в клеточной стенке, либо на клеточной мембране. По химической структуре они представляют собой либо гликопротеиды, либо белково-полисахаридно-липидные комплексы. Извлечение антигенов из микробных клеток осуществляется различными способами: экстрагированием кислотой, гидроксиламином, осаждением антигенов спиртом, сернокислым аммонием, фракционированием. Полученная таким путем вакцина содержит специфические антигены в высокой концентрации и не содержит балластных и токсических субстанций. Химические вакцины обладают низкой иммуногенностью, поэтому вводятся с адъювантами. Адъюванты - это вещества, которые сами по себе не обладают антигенными свойствами, но при введениии с каким-либо антигеном усиливают иммунный ответ на данный антиген. Такие вакцины используются для профилактики менингококковой инфекции, холеры и др.

1.4. Расщепленные (сплит) вакцины.

Расщепленные вакцины готовятся обычно из вирусов и содержат отдельные антигены вирусной частицы. Они, также, как и химические, обладают низкой иммуногенностью, поэтому вводятся с адьювантом. Примером подобной вакцины является вакцина против гриппа.

1.3.Анатоксины.

Анатоксины получают из бактериальных экзотоксинов путем обработки их формалином и теплом. При такой обработке токсины утрачивают токсичность, но сохраняют антигенные и иммуногенные свойства. Анатоксины адсорбируют на гидроокиси аллюминия и в таком виде ис-пользуют. Гидроокись аллюминия является примером адъюванта. Анатоксины применяют для создания искусственного антитоксического иммунитета. Подобные вакцины используют для профилактики дифтерии, столбняка, газовой гангрены, стафилококковой инфекции и др.

1.4.Искусственные вакцины.

1.4.1. Коньюгированные вакцины.

В качестве специфического антигенного компонента такая вакцина содержит полисахарид, выделенный из возбудителя инфекции. Полисахарид обладает слабой иммуногенностью.

Иммуногенные свойства полисахарида усиливаются, если его коньюгировать с белковым носителем. В качестве белкового носителя используется дифтерийный или столбнячный анатоксин. Концентрация носителя в вакцине низкая и не вызывает сильной иммунной реакции на себя. Подобные вакцины используются для профилактики гемофильной инфекции типа b, менингококковой инфекции, пневмококковой инфекции. Разрабатывается коньюгированная брюшнотифозная вакцина (Vi-антиген + столбнячный анатоксин) и коньюгированная дизентерийная вакцина.

1.4.2. Вакцины с искусственными адьювантами.

Принцип создания таких вакцин заключается в использовании естественных антигенов в сочетании с искусственными адьювантами (полиэлектролитами). Одним из примеров такой вакцины является гриппозная вакцина, состоящая из белков вируса гриппа (гемагглютинина и нейраминидазы) и искусственного стимулятора полиоксидония, обладающего выраженными адьювантными совйствами.

1.5.Рекомбинантные вакцины.

Рекомбинантные вакцины - это вакцины, разработанные на основе генно-инженерных методов. Принцип создания генно-инженерных вакцин включает выделение природных генов антигенов или их активных фрагментов, встройку этих генов в геном простых биологических объектов (бактерии, например, кишечная палочка, дрожжи, крупные вирусы). Необходимые для приготовления вакцины антигены получают при культивировании биологического объекта, который является продуцентом антигена. Подобная вакцина используется для профилактики гепатита В.

1.6. Комбинированные вакцины. Комбинированные вакцины (синоним – ассоциированные или комплексные вакцины) применяются во многих странах, в том числе и с России. Комплексная вакцина может содержать живые аттенуированные штаммы микроорганизмов, либо может быть убитая, либо может содержать анатоксины. Антигены в ассоциированных вакцинах часто оказывают стимулирующее действие друг на друга. Недостатком комплексных вакцин является их высокая реактогенность. Примером комплексных вакцин, применяемых в нашей стране, является вакцина АКДС, живая дивакцина для профилактики кори и паротита, живая комплексная вакцина для профилактики кори, паротита и краснухи, живая трехвалентная полиомиелитная вакцина и др.

Кроме профилактических вакцин в практике используются лечебные вакцины (гонококковая, бруцеллезная, стафилококковая). Это убитые вакцины. Также используются аутовакцины.

3. 
   Пищевые бактериальные токсикоинфекции, вызванные эшерихиями и анаэробами. Характеристика возбудителей, эпидемиология, патогенез, лабораторная диагностика, профилактика.
   

Эшерихии — наиболее распространенные аэробные бактерии кишечника, способные при определенным условиях вызывать обширную группу заболеваний человека, как кишечной (диарея), так и внекишечной (бактеремия, инфекции мочевыводящих путей и др.) локализации. Основной вид — E.coli (кишечная палочка) — самый распространенный возбудитель инфекционных заболеваний, вызываемых энтеробактериями. Этот возбудитель является показателем фекального загрязнения, особенно воды. Коли — титр и коли — индекс часто использовали как санитарные показатели. Эшерихии входят в состав микрофлоры толстого кишечника млекопитающих, птиц, пресмыкающихся и рыб.

Энтеротоксигенные E.coli имеют высокомолекулярный термолабильный токсин, схожий по действию с холерным, вызывают холероподобную диарею (гастроэнтериты у детей младшего возраста, диарею путешественников и др.).

Энтероинвазивные кишечные палочки способны проникать и размножаться в клетках эпителия кишечника. Вызывают профузную диарею с примесью крови и большим количеством лейкоцитов (показатель инвазивного процесса) в испражнениях. Клинически напоминает дизентерию. Штаммы имеют некоторое сходство с шигеллами (неподвижные, не ферментируют лактозу, обладают высокими энтероинвазивными свойствами).

Энтеропатогенные E.coli - основные возбудители диареи у детей. В основе поражений — адгезия бактерий к эпителию кишечника с повреждением микроворсинок. Характерна водянистая диарея и выраженное обезвоживание.

Энтерогеморрагические кишечные палочки вызывают диарею с примесью крови (геморрагический колит), гемолитико — уремический синдром (гемолитическая анемия в сочетании с почечной недостаточностью). Наиболее частый серотип энтерогеморрагических кишечных палочек — О157: Н7.

Энтероадгезивные E.coli не образуют цитотоксины, слабо изучены.

 . Основным подходом является выделение чистой культуры на дифференциально — диагностических средах и ее идентификация по антигенным свойствам. Ставят РА с набором поливалентных ОК (к О- и К- антигенам) сывороток, затем — адсорбированных О- сывороток и прогретыми при 100 градусах Цельсия (для разрушения К- антигенов) культурами.

Биохимическая дифференциация имеет дополнительное значение. Идентификация диареегенных типов возможна при выявлении специфических маркеров (энтерогеморрагические кишечные палочки не ферментируют сорбит, а серовар О157: Н7 не проявляет бета — глюкуронидазной активности).

Биологические свойства эшерихий. Антигенное строение, классификация.

Культуральные свойства. На жидких средах E.coli дает диффузное помутнение, на плотных средах образует S- и R- формы колоний. На основной для эшерихий среде Эндо лактозоферментирующие кишечные палочки образуют интенсивно красные колонии с металлическим блеском, не ферментирующие — бледно- розовые или бесцветные колонии с более темным центром, на среде Плоскирева — красные с желтоватым оттенком, на среде Левина — темно- синие с металлическим блеском.

Биохимические свойства. Кишечная палочка в большинстве случаев ферментирует углеводы (глюкозу, лактозу, маннит, арабинозу, галактозу и др.) с образованием кислоты и газа, образует индол, но не образует сероводород, не разжижает желатин.

Антигенная структура. Какие — либо существенные морфологические различия между патогенными и непатогенными кишечными палочками не обнаружены. Их дифференциация основана на изучении антигенных свойств. Среди поверхностных антигенов выделяют полисахаридные О- антигены, жгутиковые Н- антигены и капсульные полисахаридные К- антигены. Известно более 170 вариантов О- антигенов (это соответствует принадлежности возбудителя к определенной серогруппе) и 57 -  Н- антигенов (принадлежность к серовару). В состав диареегенных (вызывающих диарею) кишечных палочек входят 43 О- группы и 57 ОН- вариантов.

БИЛЕТ 25

1. 
   Типы взаимодействия вирусов с клеткой.
   

• Автономный тип взаимодействия

• 1.Продуктивная инфекция

• 2. Абортивное инфекция

• Интегративный тип взаимодействия

Продуктивная инф. - заканчивается гибелью клеток и образованием популяции новых вирусных частиц. На фоне продуктивного взаимодействия вируса с клеткой возникает обычно острая вирусная инфекция.

Абортивная инф. - не приводит к появлению вирусной популяции и гибели клеток хозяина

Интегративное взаимодействие - нуклеиновая кислота вируса встраивается в геном клетки и сосуществует с клеткой длительное время.

1. 
   Такой вирус называется провирус, явление перехода вируса в форму провируса наз. вирогенией, а клетка, содержащая вирус в форме провируса - вирогенная клетка. На фоне интегративного взаимодействия вируса с клеткой возникает персистентная вирусная инфекция. Она может проявляться тремя типами инфекций: латентная вирусная инфекция, хроническая вирусная инфекция, медленная вирусная инфекция
   

1. Продуктивный (автономный) тип: геном вируса автономен, завершается образованием вирусного потомства

2. Абортивный тип: инфекционный процесс прерывается на одном из этапов, новые вирусные частицы не образуются

3. Интегративный тип: вирусная ДНК встраивается в хромосому клетки-хозяина. Это состояние называется вирогения. При этом вирусный геном реплицируется и функционирует как составная часть клеточного генома. ДНК вируса, находящаяся в составе хромосомы клетки, называется ДНК-провирусом. При делении клетки, сохраняющей свои нормальные функции, ДНК-провирус переходит в геном дочерних клеток, т.е. состояние вирогении наследуется. При этом пораженная клетка может экспрессировать на своей поверхности вирусные белки, изменять свои антигенные свойства: становиться мишенью для иммунной системы организма

Стадии продуктивной вирусной инфекции:

1. Адсорбция вируса на клетке: опосредуется рецепторами вируса и чувствительной клетки

2. Проникновение вируса в клетку реализуется 2 механизмами:

а) слияние мембран клетки и вирусной оболочки, в результате чего оболочка вируса остается снаружи, а геном (НК) проникает в клетку (тогда нет необходимости в «раздевании» вируса внутри клетки)

б) виропексис (пиноцитоз): поглощение целой вирусной частицы, с формированием вакуоли, стенками которой является мембрана клетки (рецепторный эндоцитоз)

3. «Раздевание» и высвобождение вирусного генома от оболочки (депротеинизация)

4. Синтез «ранних белков» вируса: как правило, это белки, которые регулируют дальнейшие процессы размножения вируса (вирусная НК подавляет генетический аппарат клетки)

5. Репликация собственно генома вируса (увеличение копий НК)

6. Синтез «поздних белков» вируса: как правило, это белки капсида

7. Сборка вирионов: при этом могут оставаться «неупакованные» НК, фрагменты капсида

8. Выход новых вирусных частиц из клетки: лизис клетки или почкование вируса (этот механизм обычно присущ сложным вирусам – имеющим суперкапсид); возможен выход вирусов через цитоплазматические каналы

Формула переноса генетической информации у различных вирусов:

для ДНК-содержащих вирусов: ДНК вируса - > иРНК - > белок вируса

для РНК-содержащих «-»-нитевых вирусов: РНК вируса – >иРНК - > белок вируса

для РНК-содержащих «+»-нитевых вирусов: РНК вируса - > белок вируса

для РНК-содержащих ретровирусов: РНК вируса - >комплементарная ДНК - > иРНК - >белок вируса

! Плюс-нитевая РНК – работает, как информационная РНК!

! Минус-нитевая РНК – не может взаимодействовать с рибосомами клетки!

2. 
   Реакция нейтрализации токсина антитоксином (антитоксической сывороткой).
   

Реакция нейтрализации токсина происходит в организме. Для диагностических целей необходимо использовать лабораторных животных (как правило – белых мышей).

Например, для идентификации ботулинического токсина, смешивают определенное количество исследуемого материала (содержащего токсин) – экстракта пищевого продукта – с диагностической антитоксической сывороткой. Смесь выдерживают в термостате определенное время, обычно при температуре 370С. Затем смесь вводят чувствительным лабораторным животным. Обязательно используют одно или несколько животных в качестве контрольных: им вводят экстракт пищевого продукта – эти животные должны погибнуть, что будет

свидетельствовать о наличии токсина в продукте. Животные, в организме которых произошла нейтрализация токсина, не погибают. Таким образом, судят о соответствии токсина диагностической сыворотке, то есть определяют тип (вид) токсина.

Данная реакция может использоваться для титрования микробных экзотоксинов, с целью определения их активности. В этом случае готовят последовательные разведения антитоксической сыворотки и с каждым из них смешивают определенную дозу исследуемого токсина. После инкубации в термостате, смеси вводят чувствительным животным. При соответствии количества антитоксической сыворотке токсину, происходит его нейтрализация, и животное не погибает. Исходя из конкретных количественных соотношений токсина и сыворотки, определяют активность токсина.

Таким же образом данная реакция может использоваться для титрования антитоксических сывороток, с целью определения их активности, выражаемой в антитоксических единицах (АЕ) или международных единицах (МЕ): 1 АЕ (МЕ) должна нейтрализовать не мене 100 DLM (минимальных летальных доз) токсина для конкретного животного. Например: 1МЕ противодифтерийной сыворотки должна нейтрализовать 100 DLM дифтерийного токсина для морской свинки весом 250 г.

3. 
   Сальмонеллы - возбудители токсикоинфекций. Наиболее встречающиеся представители, биологические свойства возбудителей, патогенез. Лабораторная диагностика, профилактика.
   

Сальмонеллы- возбудители внутрибольничных инфекций. особенности возбудителей, эпидемиология, лабораторная диагностика, профилактика.

Сальмонеллез — острая кишечная инфекция, характеризующаяся преимущественным поражением желудочно-кишечного тракта, возбудителями которой являются многочисленные бактерии из рода Salmonella(кромеS.typhi,S.paratyphiA,S.schottmuelleri). Род Salmonella содержит более 2000 видов, большая часть которых может стать причиной сальмонеллезов. Чаще других обнаруживаются Salmonella typhimurium,S.enteritidis,S.heidelberg,S.newport.

Таксономия.Возбудители брюшного тифа и паратифов А и В относятся к отделу Gracilicutes, семейству Enterobacteriaceae, роду Salmonella, включающему более 2000 видов.

Эпидемиология.Основной источник заболевания — животные, преимущественно домашние (крупный и мелкий рогатый скот, свиньи и др.) и птицы (куры, утки, гуси и др.). Носителями сальмонелл могут быть и другие представители фауны: мыши, голуби, черепахи, устрицы, тараканы и др. Реже источниками заболевания являются люди — больные и носители. Механизм заражения — фекально-оральный. Основной путь передачи инфекции — пищевой. Факторами передачи могут быть не только мясо животных и птиц, инфицированное при жизни животного либо при его обработке, но и яйца. Наиболее восприимчивы к заболеванию люди со сниженным иммунным статусом (в том числе грудные дети) и больные, получающие антибиотики. Заболевание широко распространено на всех континентах. Подъем заболеваемости наблюдается летом.

Патогенез. Сальмонеллы проникают в организм через рот, достигают тонкого кишечника, где и развертывается патологический процесс. Бактерии благодаря факторам адгезии прикрепляются к слизистой оболочке, проникают в ее глубокие слои, где захватываются макрофагами. Сальмонеллы размножаются и погибают с освобождением эндотоксина, который, помимо общей интоксикации, вызывает диарею и нарушение водно-солевого обмена. Находящаяся в нормальном состоянии микрофлора кишечника в значительной мере препятствует накоплению сальмонелл. В некоторых случаях (при снижении иммунного статуса и высокой вирулентности возбудителя) возможно развитие бактериемии и поражение костей, суставов, мозговых оболочек и других органов.

Клиника. Инкубационный период равен в среднем 12—24 ч. Заболевание характеризуется повышением температуры, тошнотой, рвотой, поносом, болью в животе. Как правило, продолжительность болезни составляет 7 дней. Но в некоторых случаях наблюдается молниеносная токсическая форма, приводящая к смерти больного.

Иммунитетпосле перенесенного заболевания сохраняется менее года.

Микробиологическая диагностика. В качестве основного материала для исследования используют рвотные массы, испражнения, промывные воды желудка. Применяют бактериологический и серологический (РА, РПГА) методы диагностики.

Лечение сальмонеллеза заключается в промывании желудка, диете, введении жидкостей для нормализации водно-солевого обмена. Антибиотики при формах средней тяжести и легких не назначают, так как их применение приводит к дисбактериозу и в результате более длительному течению болезни; кроме того, очень велико число антибиотикорезистентных сальмонелл.

Профилактиканеспецифическая — санитарно-гигиенические мероприятия, заключающиеся, в частности, в правильной кулинарной обработке мяса и яиц.

Сальмонеллы- возбудители внутрибольничных инфекций. особенности возбудителей, эпидемиология, лабораторная диагностика, профилактика.

1. Классификация: надцарствоProcaryota, царствоBacteria, разделScotobacteria, классBacterias, порядокEubacteriales, семействоEnterobacteriaceae, р.Salmonella, в.S.typhi,S.parathyphiA,S.parathyphiB,S.typhimurium,S.enteritis,S.haifa,S.panama,S.anatuma

2. Морфология: Гр-, палочка, мелкая, есть микрокапсула, перитрихии, споронеобразующая, подвижна

3. Тип питания: хемоорганотроф

4. Биологические свойства:

а) лактозоотрицательные (диагностический признак)

б) ферментируют сахара до кислоты и газа (кроме S.thyphi)

в) протеолитические свойства слабо выражены

5. АГ структура: О- (ЛПС), Н- (в двух фазах – специфической и не специфической), иногдаVi-AГ (особый К-АГ).

6. Факторы патогенности и патогенез:

а) капсула, пили

б) третья секреторная система – препятствует слиянию фагосом и лизосом в макрофагах

в) эндотоксин (ЛПС) – индукция лихорадки, нарушение микроциркуляции

г) холероподобный энтеротоксин – активация аденилатциклазы, водянистая диарея

бактериемия (возможно интенсивное разрушение бактерий с высвобождением энтеротоксина и эндотоксина).размножениепроникают в макрофагиАдгезия на энтероцитах и их колонизация

. Клинические особенности: короткий инкубационный период, тяжелое состояние, бурное внезапное начало, короткое течение, доброкачественный исход.

8. Иммунитет: ИО в виде местного (кишечного) иммунитета (IgA), КИО слабовыражен.

9. Особенности эпидемиологии:

а) вспышки в детских послеродовых учреждениях, носят постепенный характер

б) источник – человек, инфекция контагиозна

в) ОПЗ – контактно-бытовой, воздушно-пылевой

г) у детей протекает как септическая инфекция

10. Профилактика: специфическая: поливалентный сальмонеллезный фаг

БИЛЕТ 26

1. 
   Действие на микроорганизмы химических факторов. Асептика, антисептика и дезинфекция. Механизмы действия различных групп антисептиков и дезинфектантов.
   

АСЕПТИКА - комплекс мероприятий в медицине, клинической микробиологии,

фармации, направленных на предупреждение заноса в рабочую зону посторонних

микроорганизмов с тела человека, из воздуха, других объектов внешней среды и развития нежелательных процессов (инфицирование человека, контаминация лекарственных форм, питательных сред, чистых культур бактерий, посуды, биологических препаратов и т.д.)

АНТИСЕПТИКА - совокупность способов подавления роста и размножения

потенциально опасных для организма человека (патогенных и условно-патогенных) микроорганизмов на интактных и (или) поврежденных кожных покровах и слизистых оболочках организма человека.

ДЕЗИНФЕКЦИЯ (обеззараживание) - мероприятия, направленные на полное

уничтожение вегетативных и покоящихся форм патогенных и условно-патогенных

микроорганизмов на объектах внешней среды (в том числе на изделиях медицинского назначения) с целью предупреждение передачи возбудителя от зараженного организма к здоровому организму (разрыв эпидемической цепи).

Осуществляется с помощью:

*физических методов - кипячение, обработка горячим воздухом, паром под

давлением, обработка ультразвуком;

*химических методов - использование химических веществ с целью обработки

патологического материала, посуды, инструментов, оборудования.

Различают: текущую, заключительную и профилактическую дезинфекцию.

ДЕЗИНФЕКЦИЯ.

Физические методы дезинфекции.

В медицине используют паро-фармалиновые камеры для дезинфекции больничного белья и пр.; ультразвук – для предстерилизационной обработки медицинских инструментов, трубок и шлангов наркозных аппаратов и пр.

В аптеках используют следующие методы:

1.Кипячение (добавляя натрия гидрокарбонат) – для шпателей, ножниц, резиновых

трубок, щеток для мытья рук и пр.

2.Пар под давлением (0,5 атм, Т1100С) – для изделий из термостойких полимеров и

стекла.

3.Сухой горячий воздух (Т1200С – без упаковки) – для изделий из стекла, металла и пр. термостойких материалов.

Химические методы дезинфекции.

Использование химических веществ – дезинфектантов.

Дезинфектанты - химические вещества, обладающие бактерицидным действием в отношении микроорганизмов, но являющиеся токсичными для организма человека.

Применяются для уничтожения микроорганизмов во внешней среде .

Для обработки помещения, предметов обстановки, оборудования аптеки используют следующие дезинфектанты: раствор хлорамина Б 1%, раствор гипохлорита натрия 1%, смесь раствора хлорамина Б 0,75% с 0,5% моющего средства, смесь раствора перекиси водорода 3% с 0,5% моющего средства; для обработки посуды, поступающей в аптеку от населения, из инфекционных и пр. отделений стационаров - раствор активированного хлорамина 1% (активаторы: хлористый, серно-кислый или азотно-кислый аммоний), смесь раствора перекиси водорода 3% с 0,5% моющего средства, раствор хлорцина 1%(раствор солей дихлоризоциануровой кислоты), раствор «ДП-2» 0,2% (на основе трихлоризоциануровой кислоты), содержащий до 40% активного хлора._

Антисептики - химические вещества, обладающие бактерицидным или

бактериостатическим действием на микроорганизмы, и не являющиеся токсичными для организма человека в концентрациях, обеспечивающих этот эффект. Применяются наружно при лечении местных гнойно-воспалительных очагов и для обработки рук персонала (провизоров, фармацевтов, хирургов, медицинских сестёр и пр.): этиловый спирт 70%, раствор хлоргексидина биглюконата 0,5% в этиловом спирте 70%, йодопирон (йодонат, йодовидон) 1%, раствор хлорамина Б 0,5%;

Консерванты - химические вещества, обладающие бактерицидным или

бактериостатическим действием в отношении широкого спектра микроорганизмов;

вносятся в лекарственные препараты с целью торможения размножения микроорганизмов.

К веществам, используемым в качестве консервантов, предъявляются следующие

требования:

1. Растворимость (для достижения эффективной концентрации в препарате);

2. Сохранение активности и стабильности в широком диапазоне значений рН и

температуры среды в течение срока годности лекарственного препарата;

3. Активность в низких концентрациях;

4. Не должен способствовать формированию резистентных форм микроорганизмов;

5. Не должен оказывать токсическое и аллергическое действие.

В качестве консервантов используются следующие вещества:

1. бензалкония хлорид (0,005 - 0,01%)

2. хлорбутанол (0,5%)

3. фенилэтиловый спирт (0,5%)

4. хлоркрезол (0,05 %)

5. мертиолят, фенил ртути нитрат, ацетат или борат (0,001 - 0,004%)

6. хлоргексидина биглюконат или диацетат (0,005 - 0,01%) и др.

2. 
   Иммуноглобулин А, строение, функции
   

IgA. Выделяют сывороточные IgA (мономер) и секреторные IgA (IgAs). Сывороточные IgA составляют 1,4- 4,2 г/л. Секреторные IgAs находятся в слюне, пищеварительных соках, секрете слизистой носа, в молозиве. Они являются первой линией защиты слизистых, обеспечивая их местный иммунитет. Секреторный компонент вырабатывается эпителиальными клетками слизистых оболочек и присоединяется к молекуле IgA в момент прохождения последней через эпителиальные клетки.

Секреторный компонент повышает устойчивость молекул IgAs к действию протеолитических ферментов. Основная роль IgA- обеспечение местного иммунитета слизистых. Они препятствуют прикреплению бактерий к слизистым, обеспечивают транспорт полимерных иммунных комплексов с IgA, нейтрализуют энтеротоксин, активируют фагоцитоз и систему комплемента.

Содержащийся секреторный иммуноглобулин А в молоке является фактором защиты ребенка, находящегося на естественном вскармливании. Взаимодействует с крупными(корпускулярными) и мелкодисперсными антигенами.

3. 
   Коринебактерии, возбудитель дифтерии, свойства, факторы патогенности, патогенез дифтерии, иммунитет, методы его выявления. Носительство. Лабораторная диагностика, специфическая профилактика и терапия.
   

Дифтерия — острая инфекционная болезнь, характеризующаяся фибринозным воспалением в зеве, гортани, реже в других органах и явлениями интоксикации. Возбудителем ее является Corynebacteriumdiphtheriae.

Таксономия.Corynebacterium относится к отделу Firmicutes, роду Corynebacterium.

Морфологические и тинкториальные свойства. Возбудитель дифтерии характеризуется полиморфизмом: тонкие, слегка изогнутые палочки (наиб. распространенные) встречаются кокковидные и ветвящиеся формы. Бактерии нередко располагаются под углом друг к другу. Они не образуют спор, не имеют жгутиков, у многих штаммов выявляют микрокапсулу. Характерная особенность - наличие на концах палочки зерен волютина (обусловливает булавовидную форму). Возбудитель дифтерии по Граму окрашивается положительно.

Культуральные свойства. Факультативный анаэроб, оптим. температура. Микроб растет на специальных питательных средах, например на среде Клауберга (кровяно-теллуритовый агар), на которой дифтерийная палочка даѐт колонии 3 типов: а) крупные, серые, с неровными краями, радиальной исчерченностью, напоминающие маргаритки; б) мелкие, черные, выпуклые, с ровными краями; в) похожие на первые и вторые. В зависимости от культуральных и ферментативных свойств различают 3 биологических варианта C.diphtheriae: gravis, mitis и промежуточный intermedius.

Ферментативная активность. Высокая. Ферментируют глк и мальтозу в образованием кислоты, не разлагают сахарозу, лактозу и маннит. Не продуцируют уреазу и не образуют индол. Продуцирует фермент цистиназу, рпсщепляющую цистеин до H2S. Образует каталазу, сукцинатдегидрогеназу.

Антигенные свойства. О-антигены – термостабильные полисахаридные, расположены в глубине клеточной стенки. К-антигены – поверхностные, термолабильные, сероватоспецифические. С помошью сывороток к К-антигену С.diph. разделяют на серовары(58).

Факторы патогенности. Экзотоксин, нарушающий синтез белка и поражающий в связи с этим клетки миокарда, надпочечников, почек, нервных ганглиев. Способность вырабатывать экзотоксин обусловлена наличием в клетке профага, несущего tох-ген, 73 ответственный за образование токсина. Ферменты агрессии — гиалуронидазу, нейраминидазу. К факторам патогенности относится также микрокапсула.

Резистентность. Устойчив к высушиванию, действию низких температур, поэтому в течение нескольких дней может сохраняться на предметах, в воде.

Эпидемиология. Источник дифтерии — больные люди Заражение происходит чаще через дыхательные пути. Основной путь передачи воздушно-капельный, возможен и контактный путь — через белье, посуду.

Патогенез. Входные ворота инфекции — слизистые оболочки зева, носа, дыхательных путей, глаз, половых органов, раневая поверхность. На месте входных ворот наблюдается фибринозное воспаление, образуется характерная пленка, которая с трудом отделяется от подлежащих тканей. Бактерии выделяют экзотоксин, попадающий в кровь, — развивается токсинемия. Токсин поражает миокард, почки, надпочечники, нервную систему.

Клиника. Существуют различные по локализации формы дифтерии: дифтерия зева, которая наблюдается в 85—90 % случаев, дифтерия носа, гортани, глаз, наружных половых органов, кожи, ран. Инкубационный период составляет от 2 до 10 дней. Заболевание начинается с повышения температуры тела, боли при глотании, появления пленки на миндалинах, увеличения лимфатических узлов. Отека гортани, развивается дифтерийный круп, который может привести к асфиксии и смерти. Другими тяжелыми осложнениями, которые также могут явиться причиной смерти, являются токсический миокардит, паралич дыхательных мышц.

Иммунитет. После заболевания - стойкий, напряженный антитоксичный иммунитет. Особое значение – образование АТ к фрагменту В. Они нейтрализуют дифтерийный гистотоксин, предупреждая прикрепление последнего к клетке. Антибактериальный иммунитет – ненажняженный, сероватоспецифичен

Микробиологическая диагностика. С помощью тампона у больного берут пленку и слизь из зева и носа. Для постановки предварительного диагноза возможно применение бактериоскопического метода. Основной метод диагностики — бактериологический: посев на среду Клаубера II (кровяно-теллуритовый агар), на плотную сывороточную среду для выявления продукции цистиназы, на среды Гисса, на среду для определения токсигенности возбудителя. Внутривидовая идентификация заключается в определении био- и серовара. Для ускоренного обнаружения дифтерийного токсина применяют: РНГА(реакция непрямой геммаглютинации) с антительным эритроцитарным диагностикумом , реакцию нейтрализации антител (о наличии токсина судят по эффекту предотвращения гемаггютинации); РИА (радиоиммунный) и ИФА(имунноферментный анализ).

Лечение. Основной метод терапии — немедленное введение специфической антитоксической противодифтерийной лошадиной жидкой сыворотки. Иммуноглобулин человека противодифтерийный для в/в введения. Ассоциированные вакцины: АКДС (абсорбированная коклюшно – столбнячная вакцина), АДС(абсорбированный дифтерийно - столбнячный анатоксин).

ДИФТЕРИЯ – острая инфекционная болезнь, вызывается токсигенными штаммами коринебактерий дифтерии. Передаётся воздушно-капельно и контактно. Характеризуется местным фибринозным воспаление чаще слизистых рото- и носоглотки. Явлениями общей интоксикации и поражением ССС, НС и выделительной системы. Повреждающее действие оказывает экзотоксин возбудителя (дифтерийный гистотоксин).

1883 г. Клебс – обнаружил коринебактерии дифтерии в срезах дифтерийных пленок от больных людей.

1884 г. Лёффлер - выделил чистую культуру возбудителя. Впервые предположил, что возбудитель выделяет токсическую субстанцию, которая вызывает летальный исход.

1888 г. Ру и Йерсен подтвердили это предположение.

КЛАССИФИКАЦИЯ

Группа коринеформных бактерий

Род Corinebacterium Вид C. diphtheriae (Corina – булавовидные)

Условно-патогенные коринебактерии. К роду коринебактерий, помимо возбудителя дифтерии, относятся другие виды, способные при определённых условиях вызывать гнойно-воспалительные заболевания – C. pseudodiphtheriticum, C. hoffmanii, C. xerosis и т.д.

Эти бактерии обитают там же, где возбудители дифтерии, - в зеве. На конъюнктиве, коже.

МОРФОЛОГИЯ и ТИНКТОРИАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА

Гр+ полиморфные палочки, размер 1 – 6 мкм, располагаются под углом в виде V, L. Образуют скопления за счёт поверхностных липидов. Имеют зерна волютина (метахроматические гранулы). Метахромазия – неравномерное окрашивание клеток за счет зерен волютина. Зёрна волютина обнаруживают при окраске по методу Лёффлера (темно-синие гранулы) и методу Нейссера (чёрно-коричневые гранулы). Спор, капсулу не образуют, неподвижные. Полиморфизм, расположение клеток под углом, наличие зёрен волютина, явление метахромазии – признаки дифференциально-диагностические. Хемоорганотрофы. Факультативные анаэробы.

КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА На простых питательных средах не растут, требуют среды, богатые белком. Среда Ру (свёрнутая сыворотка) – элективная среда, высокая скорость роста, колонии формируются через 10 – 12 часов. Среда Клауберга (кровяной теллуритовый агар - КТА) - дифференциально- диагностическая среда, колонии дифтерийной палочки восстанавливают металлический теллурий и окрашиваются в серый или чёрный цвет. Характерный «шагреневый» рост. Кровяной ага (КА) – дают гемолиз.

БИОХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА

При бактериологической диагностике дифтерийную палочку необходимо отдифференцировать от дифтероидов.

Дифтероиды – условно-патогенные коринебактерии (C. cserosis, C. pseudodiphtheriae, C. ulcerans и др.)

	Токсигенность (реакция преципитации в агаре)	Проба на цистиназу (Проба Пизу)	Ферментация сахарозы	Уреазная активность
C. diphtheriae	+/-	+	-	-
Дифтероиды	-	-	+/-	+

Под действием антибиотиков дифтерийная палочка образует L-формы.

• Бактериоцины дифтерийной палочки - корицины

БИОЛОГИЧЕСКИЕ ВАРИАНТЫ C. diphtheriae, ИХ ХАРАКТЕРИСТИКА:

• gravis – короткие палочки, зерен волютина мало, на КТА чёрные колонии, R- форма колоний (колонии с радиальной исчерченностью - “цветки маргаритки”), проба на цистиназу положительная, дают гемолиз на КА, ферментируют крахмал. Выделяются от больных с тяжёлыми формами дифтерии.

• mitis - длинные палочки, зерен волютина много, S-форма колоний, чёрные или серые колонии, проба на цистиназу положительная, крахмал не ферментируют, гемолиз на КА не дают. Выделяются от больных с более лёгким течением болезни.

• intermedius – длинные палочки, мало волютина, S- и R- форма колоний, проба на цистиназу положительная, крахмал не ферментируют, гемолиз на КА не дают . Этот биовар выделяется редко.

• Внутри каждого биовара встречаются токсигенные и нетоксигенные штаммы. Токсигенные штаммы всех биоваров продуцируют идентичный экзотоксин.

АНТИГЕНЫ

Полисахариды клеточной стенки – дают перекрёсные реакции с микобактериями туберкулёза. Белковая микрокапсула (К-антиген) – определяют серовар, их более 10. Классификация по антигенной структуре недостаточно разработана, на практике не используется.

ФАКТОРЫ ПАТОГЕННОСТИ

• Дифтерийный гистотоксин – основной поражающий фактор, блокирует синтез белка, вызывает некроз тканей, общую интоксикацию. DLM на 1 кг массы тела человека составляет 100 нг (10-9 г). 0,001 мкг дифтерийного токсина вызывает видимую некротическую реакцию. Дифтерийный гистотоксин один из самых сильных ядов на Земле, по своей силе уступает лишь ботулиническому и столбнячному экзотоксинам. Дифтерийный гистотоксин обладает тропизмом к клеткам миокарда, нервным ганглиям, поражает ССС, кору надпочечников и почки. Токсигенные культуры дифтерийной палочки лизогенные (явление фаговой конверсии). Дифтерию вызывают только токсигенные культуры дифтерийной палочки.

• Белки микрокапсулы - адгезия во входных воротах инфекции: зев, гортань, трахея, реже нос, ухо, конъюнктива глаза, половые органы у девочек.

• Липиды клеточной стенки и корд-фактор (димиколат трегалозы) – разрушают митохондрии, подавляют фагоцитоз.

• Ферменты агрессии (нейраминидаза, гиалуронидаза, фибринолизин и др.)- колонизация и инвазия возбудителя во входных воротах инфекции.

• Некроз тканей – ведёт к образованию биогенных аминов и общей интоксикации организма.

ЭПИДЕМИОЛОГИЯ И УСТОЙЧИВОСТЬ В ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЕ

Источник инфекции – больной человек или носитель токсигенной культуры дифтерийной палочки. Выделяется в окружающую среду со слюной, плёнками.

• Пути передачи - воздушно-капельный (основной), контактный (через предметы, игрушки), реже алиметарный (через инфицированные продукты, например, молоко). • Дифтерийная палочка в окружающей среде устойчива. Устойчива к высушиванию, на предметах окружающей среды сохраняет жизнеспособность до 5 месяцев. К дезинфектантам чувствительна.

• Для дифтерии характерна сезонность заболевания – осенне-зимний период. Пики заболевания регистрируются каждые 7 – 9 лет. Цикличность характеризуется для всех инфекционных заболеваний.

ПАТОГЕНЕЗ

Заболевание развивается у лиц, не имеющих антитоксического иммунитета. Входные ворота инфекции – слизистые оболочки зева, носа, дыхательных путей и т.д. На месте входных ворот наблюдается фибринозное воспаление, образуется характерная дифтерическая плёнка, которая с трудом отделяется от подлежащих тканей. Экзотоксин, выделяемый бактериями, попадает в кровь, в результате чего развивается токсинемия. Токсин поражает миокард, почки, надпочечники, нервную систему.

КЛИНИЧЕСКАЯ КАРТИНА

Существуют разнообразные по локализации формы дифтерии: дифтерия зева, носа, гортани, глаз, половых органов, кожи, ран и др. В 85 -90% случаев наблюдается дифтерия зева. Инкубационный период от 2 до 10 дней. Заболевание начинается с повышения температуры тела, появления боли при глотании, плёнки на миндалинах, увеличение лимфатических узлов. У взрослых дифтерия может протекать как лакунарная ангина. У детей раннего возраста нередко одновременно с зевом и носом в патологический процесс вовлекается гортань, и в результате отёка гортани развивается дифтерийный круп, который может привести к асфиксии и смерти. Другие тяжёлые осложнения, которые могут явиться причиной смерти, - токсический миокардит, острая недостаточность гипофизарно-надпочечниковой системы, паралич дыхательных мышц.

ИММУНИТЕТ

• Наиболее восприимчивы к дифтерии дети от 1 до 4 лет.

• После перенесения дифтерии формируется антитоксический иммунитет, возможны повторные заболевания в 6 – 7% случаев.

• Невосприимчивость к дифтерии зависит от содержания антитоксических антител в крови. Достаточно продолжительным является поствакцинальный иммунитет (до 3 – 5 лет).

• Низкие уровни антимикробных антител (опсонины, преципитины, комплементсвязывающие), возможно, являются причиной формирования носительства.

• В связи с массовой вакцинацией детского населения циркуляция токсигенных штаммов снижается, но наблюдается рост числа носителей нетоксигенных культур дифтерийной палочки.

• Уровни антитоксических антител определяют в РНГА с эритроцитарным диагностикумом, нагруженным дифтерийным анатоксином. Титры антител 1:20 являются защитными. Ранее применяли реакцию Шика.

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА

• Микроскопический – дает предварительный результат. В окрашенных микроскопических препаратах обнаруживают палочки, имеющие типичную морфологию.

• Бактериологический – основной.

Принадлежность к роду коринебактерий определяют по морфологическим и культуральным свойствам, вид – по биохимическим свойствам (проба на цистиназу, неспособность расщеплять мочевину). Токсигенность определяют в реакции преципитации на питательном агаре.

• Серологический – определяют наличие антитоксического иммунитета, ставят РПГА с сывороткой крови пациента и дифтерийным эритроцитарным диагностикумом.

ПРОФИЛАКТИКА И ЛЕЧЕНИЕ

Основное значение в профилактике имеет активная иммунизация населения. В нашей стране трёхкратная иммунизация детей с 3-месячного возраста (до этого возраста у детей сохраняется плацентарный иммунитет) вакцинами АКДС (адсорбированная коклюшно-дифтерийно-столбнячная вакцина) или АДС (адсорбированный дифтерийно-столбнячный анатоксин). Ревакцинацию проводят с помощью АДС-анатоксина не только в детском возрасте, но и взрослым людям каждые 10 лет. При контакте с больным человеком людям, не имеющим напряжённого антитоксического иммунитета, вводят дифтерийный анатоксин (АД). Помимо данных препаратов, выпускают АКДС-М , АД-М – анатоксины, содержащие малое количество антигена и используют для иммунизации людей м предрасположенностью к аллергии, однако эти препараты являются менее иммуногенными.

• Выявление и санация носителей антибиотиками.

• Лечение дифтерии должно быть начато как можно раньше – не дожидаясь результатов микробиологического диагноза. Вводят антитоксическую противодифтерийную сыворотку (пассивный иммунитет). Серотерапия эффективна в ранние сроки, пока экзотоксин не связался с клетками-мишенями и ткани существенно не повреждены. Антибактериальная терапия антибиотиками (пенициллин, тетрациклины, эритромицин, сульфаниламидные препараты)

БИЛЕТ 27

1. 
   Гепатит А
   

Вирус гепатита А.

Таксономия, морфология, антигенная структура.

Семейство Picornoviridae

Род Hepatovirus

По структурной организации и химическому составу сходен с дркгими энтеросвирусами. Имеет один вирусоспецифический антиген.

Вирусные гепатиты представляют большую разнородную по этиологии, но схожую по клиническим проявлениям группу тяжелых (по последствиям) заболеваний, широко распространенных в мире. Вирус гепатита А - энтеровирус 72, В - гепадновирус, С и G - тогавирусы рода Flavivirus, D - неклассифицированный вирус, Е - калицивирус. Из них вирусы гепатитов А и Е характеризуются преимущественно фекально - оральным механизмом передачи, В, С и G - парентеральным (гемоконтактным), D (дельта)- является дефектным вирусом - сателлитом вируса гепатита В, передаваемым парентерально и вертикально (от матери плоду).

Вирус гепатита А имеет “голый” капсид с кубическим типом симметрии - икосаэдр. Геном образует однонитевая молекула позитивной РНК. Белковая оболочка (капсид) содержит 4 структурных белка - VP1, VP2, VP3, VP4. HAV является одним из наиболее устойчивых во внешней среде вирусов.

Антигенная структура.

Вирус имеет один антигенный тип и содержит главный антиген (НА Аг), развитие иммунного ответа к которому обеспечивает прочный пожизненный иммунитет.

Культивирование. ВГА культивируется на культуре клеток, но в отличие от других энтеровирусов цикл репродукции ВГА более длинный, а цитопатический эффект не выражен.

Резистентность. ВГА в отличие от других энтеровирусов более устойчив к нагреванию, но инактивируются при кипячении в течении 5 минут. Вирус выживает в окружающей чреде (вода, выделение больных).

Патогенез поражений.

ВГА распространен повсеместно, но особенно в регионах с плохой системой водоснабжения и канализации, низким уровнем гигиены населения.

По массовости второй после гриппа вирусной инфекцией. Болеют преимущественно дети 4 – 15 лет. Подъем заболевания в летние и осенние периоды. Вирус проникает в организм в результате реализации фекально - орального механизма заражения, реплицируется в эпителии слизистой тонкой кишки и регионарных лимфатических узлах, затем проникает в кровь (наибольшие титры вируса в крови - в конце инкубационного и в преджелтушный период), выделяется с фекалиями. Затем возбудитель проникает в печень и вызывает острый диффузный гепатит, связанный с поражением гепатоцитов (основной мишени для размножения и цитопатогенного действия вируса) и ретикуло - эндотелиальных элементов печени. Это сопровождается снижением барьерной и дезинтоксикационной функций печени, нарушениями белкового, углеводного и пигментного обмена, возрастанием уровня в сыворотке крови альдолазы и печеночных (разрушение гепатоцитов) аминотрансфераз (аланин - и аспартат - аминотрансфераз), билирубина.

Клинические особенности.

Наиболее типична острая желтушная циклическая форма, однако преобладают легкие безжелтушные (у детей) и бессимптомные формы. Для этой инфекции характерно относительно легкое течение, практическое отсутствие вирусоносительства и хронических форм болезни.

Иммунитет. Стойкий, связанный с иммуноглобулинами класса G и секреторными IgA, которые сохраняются в организме в течение 4 – 6 мес и имеют диагностическое значение. У детей первого года жизни имеются антитела, полученные от матери через плаценту.

Лабораторная диагностика

1. Определение желчных пигментов и аминотрансфераз в сыворотке крови.

2. ИФА для выявления антигенов вируса и IgM- антител к нему. Антигены HAV в фекалиях можно выявить только в конце инкубации до появления клинических проявлений. Наиболее надежный метод диагностики - обнаружение ранних антиHAV - IgM антител. Они выявляются практически у всех больных независимо от формы заболевания и свидетельствуют о наличии текущей или недавней инфекции.

Специфическая профилактика.

Для профилактики ВГА используют иммуноглобулин, вводят детям в преэпидемический период, а также лицам имевшим контакт с больным. Используют инактивированные вакцины против вируса гепатита А производства. Трехкратная (при рождении , в 1 и 6 месяцев) вакцинация формирует защитный иммунитет у 99% детей.