Микра экз. Билет 1 Генетические и биохимические механизмы Лекарственной устойчивости. Путь преодоления лекарственной устойчивости бактерий
 Скачать 0.84 Mb.
|
|
Определение антибиотика в крови, моче и других жидкостях организма человека. В штатив устанавливают два ряда пробирок. В одном из них готовят разведения эталонного антибиотика, в другом — исследуемой жидкости. Затем в каждую пробирку вносят взвесь тест-бактерий, приготовленную в среде Гисса с глюкозой. При определении в исследуемой жидкости пенициллина, тетрациклинов, эритромицина в качестве тест-бактерий используют стандартный штамм S. aureus, а при определении стрептомицина — Е. coli. После инкубирования посевов при 37 °С в течение 18—20 ч отмечают результаты опыта по помутнению среды и ее окрашиванию индикатором вследствие расщепления глюкозы тест-бактериями. Концентрация антибиотика определяется умножением наибольшего разведения исследуемой жидкости, задерживающей рост тест-бактерий, на минимальную концентрацию эталонного антибиотика, задерживающего рост тех же тест-бактерий. Например, если максимальное разведение исследуемой жидкости, задерживающее рост тест-бактерий, равно 1 :1024, а минимальная концентрация эталонного антибиотика, задерживающего рост тех же тест-бактерий, 0,313 мкг/мл, то произведение 1024- 0,313=320 мкг/мл составляет концентрацию антибиотика в 1 мл. Реакция иммунного лизиса как один из механизмов уничтожения микробов. Компоненты реакции. Практическое использование. Реакция иммунного лизиса – растворение (разрушение) цельноклеточного антигена, соединенного с антителами, в присутствии комплемента. Одним из важнейших защитных свойств иммунной сыворотки (сыворотки, содержащей специфические антитела) при инфекции является ее способность растворять (лизировать) микроорганизмы или другие клеточные элементы, поступившие в организм. Специфические антитела, обусловливающие лизис (растворение) клеток, носят название лизинов. В зависимости от антигена они точнее называются бактериолизинами, спирохетолизинами, цитолизинами и т. д. Лизины способны проявить свое лизирующее действие на антиген только в присутствии дополнительного фактора — к о м п л е м е н т а (от лат. complementum — дополнение). При хранении или подогревании сыворотки комплемент разрушается. Таким образом, реакция лизиса происходит при участии двух компонентов: одного специфического, содержащегося в иммунной сыворотке (антитело), и другого неспецифического, присущего любой сыворотке, как иммунной, так и нормальной (комплемент). Свежеизвлеченная из организма иммунная сыворотка способна к лизису, так как содержит и антитело и комплемент. Если же пользуются иммунной сывороткой, стоявшей или подвергнутой прогреванию и вследствие этого утратившей комплемент, то лизис произойдет только при условии добавления комплемента, т. е. свежей сыворотки. Для обеспечения постоянства результатов иммунную сыворотку заранее и н а к т и в и р у ю т нагреванием при 56°С в течение 30 минут (для разрушения имеющегося в ней комплемента) и прибавляют к ней строго определенное количество комплемента. В качестве комплемента принято пользоваться свежей сывороткой нормальной морской свинки. В микробиологической практике наиболее широко применяются реакция б а к т е р и о л и з а — разрушения бактерий и гемолиза - разрушения эритроцитов Бактериолиз. Реакция бактериолиза состоит в том, что при соединении иммунной сыворотки с соответствующими живыми бактериями в присутствии комплемента происходит лизис микробов. Р-я бактериолиза наблюдается как в организме иммунного животного, так и в пробирке. Под воздействием антител — бактериолизинов микробы теряют подвижность, меняют форму (набухают), затем распадаются как бы на отдельные зернышки и, наконец, совсем растворяются. Весь этот процесс происходит в течение 15—20 минут. Большинство микроорганизмов, за исключением холерного вибриона и трепонем, малочувствительны к литическому действию комплемента. Поэтому реакция лизиса не нашла широкого применения в лабораторной практике. В практике реакцией бактериолиза пользуются для: 1) определения вида неизвестного микроба при помощи специфической сыворотки; 2) определения в исследуемой сыворотке наличия бактериолизинов к заранее известному микробу. Реакция бактериолиза воспроизводится в пробирке (in vitro) и в организме животного (in vivo). Реакция бактериолиза in vitro. В стерильной пробирке делают смеси из взвеси культуры, инактивированной иммунной сыворотки и комплемента. В контрольную пробирку вместо иммунной сыворотки добавляют такой же объем нормальной сыворотки. Пробирки помещают на 2 часа в термостат при температуре 37°С, после чего делают посев 0,1 мл на чашки с агаром и ставят посевы на сутки в термостат. На следующий день в посеве из контрольной пробирки обнаруживается обильный рост культуры. В посеве же из пробирки, содержавшей иммунную сыворотку, количество выросших колоний значительно меньше; возможно и полное отсутствие роста. Иммунный гемолиз. Является разновидностью реакции иммунного лизиса. В качестве антигена в этой реакции применяют эритроциты, которые разрушаются гемолизинами (антителами против эритроцитов) в присутствии комплемента. Гемолизины появляются в организме при искусственной иммунизации чужеродными эритроцитами. Иммунная сыворотка, содержащая гемолизины, носит название гемолитической сыворотки. Реакция гемолиза состоит в том, что при воздействии гемолитической сыворотки на соответствующие эритроциты в присутствии комплемента происходит их разрушение (гемолиз) - взвесь эритроцитов превращается в ярко-красную прозрачную жидкость — так называемую «лаковую кровь». Действие иммунной гемолитической сыворотки строго специфично — она вызывает гемолиз только тех эритроцитов, которые были взяты для иммунизации. Реакция гемолиза благодаря своей демонстративности получила широкое применение в лабораторной практике: ею пользуются в качестве показателя адсорбции комплемента при диагностических реакциях, например реакция Вассермана для диагностики сифилиса и аналогичных ей диагностических реакциях при других заболеваниях. Обычно для реакции гемолиза принято пользоваться в качестве антигена бараньими эритроцитами и, следовательно, гемолитической сывороткой, полученной при иммунизации животного (кролика) теми же эритроцитами. Постановка реакции. Для постановки реакции гемолиза необходимо иметь: 1) антиген: отмытые эритроциты барана в виде 5% взвеси в растворе ИХН (ИХН – изотонический хлорид натрия); 2) иммунную гемолитическую сыворотку, содержащую гемолизины к бараньим эритроцитам; 3) комплемент — свежую сыворотку морской свинки в разведении 1:10; 4) физиологический раствор (ИХН) Взвесь эритроцитов получают из крови барана путем дефибринирования (удаления фибрина) во флаконе с бусами и встряхивания в течение 10-15 мин. После отмывания в 0,85% изотоническом растворе хлорида натрия в центрифуге готовят 3% взвесь эритроцитов. Гемолитическую сыворотку готовят в производственных институтах. Для этой цели кроликам парентерально 3 — 4 раза вводят 2 — 5 мл 50 % взвеси эритроцитов барана. В организме кролика вырабатываются антитела на эритроциты – гемолизины. У кроликов забирают кровь, получают сыворотку и обязательно её титруют. Титром гемолитической сыворотки называют ее максимальное разведение, которое в присутствии комплемента при температуре 37° С вызывает полный гемолиз эритроцитов барана на протяжении 1 ч. Комплемент. Источником комплемента служит сыворотка крови морской свинки, полученная в день опыта. Применяется также сухой комплемент, полученный из этой сыворотки. Реакцию учитывают через 1 ч после инкубации пробирок в термостате при температуре 37 °С. Реакциюиммунного гемолиза используют для определения 1. количества комплемента в сыворотке крови людей, 2. в качестве индикатора связывания комплемента в реакции связывания комплемента (РСК). Трепонема сифилиса, свойства, экология, патогенез сифилиса, иммунитет, лабораторная диагностика. Treponemapalladium ; T. entericum Морфология: типичные трепонемы. имеющие 8-12 завитков, двигательный аппарат – 3 периплазматических жгутика у каждого полюса клетки. Окраску по Граму не воспринимают, по Романовскому-Гимзе – слабо розового цвета, выявляется импрегнацией серебром. Культуральные свойства: вирулентный штамм на пит. средах не растѐт, накопление культуры происходит путѐм заражения кролика в яичко. Вирулентные штаммы культивируют на средах с мозговой и почечной тканью. Биохимические свойства: микроаэрофил Антигенная структура: солжная, обладает специфическим белковым и липоидным антигенами, последний по своему составу идентичен кардиолипину, , экстрагированному из бычьего сердца ( дифосфадилглицерин ) Факторы патогенности: в процессе прикрепления участвуют адгезины, липопротеины учавствуют в развитии иммунопатологических процессов. Резистентность: чувствителен к высыханию, солнечным лучам, на предметах сохраняется до высыхания. При неблагоприятных условиях переходит в L-формы и образует цисты. Патогенез: Вызывают сифилис. Из места входных ворот трепонемы попадают в регионарные лимфатические узлы, где размножаются. Далее Т. проникает в кровяное русло, где прикрепляется к эндотелиоцитам, вызывая эндартерииты, приводящие к васкулитам и тканевому нектрозу. С кровью Т. разносится по всему организму, обсеменяя органы: печень, почки, костную, сердечно-сосудистую, нервную системы. Иммунитет: защитный иммунитет не вырабатывается. В ответ на антигены возбудителя развивается ГЗТ и аутоиммунные процессы. Гуморальный иммунитет вырабатывается на липоидный антиген Т. и представляет собой титр IgA и IgM. Микроскопическое исследование.Проводят при первичном сифилисе во время появления твердого шанкра. Материал для исследования: отделяемое шанкра, содержимое регионарных лимфатических узлов, из которых готовят препарат «раздавленная» капля и исследуют в темном поле. При положительном результате видны тонкие извитые нити длиной 6—14 мкм, имеющие 10—12 равномерных мелких завитков правильной, формы. Для бледной трепонемы характерны маятникообразные и поступательно-сгибательные движения. При развитии поражений на слизистой оболочке рта при вторичном сифилисе, а также при локализации твердого шанкра в полости рта приходится дифференцировать бледную трепонему от сапрофитных трепонем, являющихся представителями нормальной микрофлоры. В этом случае решающее диагностическое значение имеет обнаружение типичных трепонем в пунктате регионарных лимфатических узлов. Серодиагностика. Реакцию Вассермана ставят одновременно с 2 антигенами: 1) специфическим, содержащим антиген возбудителя— разрушенные ультразвуком трепонемы; 2) неспецифическим — кардиолипиновым. Исследуемую сыворотку разводят в соотношении 1:5 и ставят РСК по общепринятой методике. При положительной реакции наблюдается задержка гемолиза, при отрицательной—происходит гемолиз эритроцитов; интенсивность реакции оценивается соответственно от ( + + + + ) До ( —). Первый период сифилиса является серонегативным и характеризуется отрицательной реакцией Вассермана. У 50 % больных реакция становится положительной не ранее чем через 2—3 нед после появления твердого шанкра. Во втором и третьем периодах сифилиса частота положительных реакций достигает 75— 90 %. После проведенного курса лечения реакция Вассермана становится отрицательной. Параллельно реакции Вассермана ставится реакция микропреципитации с неспецифическим кардиолипиновым антигеном и исследуемой инактивированной сывороткой крови или плазмой. В лунку на пластине из плексигласа (или на обычное стекло) наносят 3 капли сыворотки и добавляют 1 каплю кардиолипинового антигена. Смесь тщательно перемешивают и учитывают результаты. Положительная реакция е сывороткой крови больного сифилисом характеризуется образованием и выпадением хлопьев разной величины; при отрицательном результате наблюдается равномерная легкая опалесценция. РИФ — реакция непрямой иммунофлюоресценции — является специфической при диагностике сифилиса. В качестве антигена используют взвесь тканевых трепонем. Используется реакция РИФ_200. Сыворотку больного инактивируют так же, как для реакции Вассермана, и разводят в соотношении 1:200. На предметные стекла наносят капли антигена, высушивают и фиксируют 5 мин в ацетоне. Затем на препарат наносят сыворотку больного, через 30 мин промывают и высушивают. Следующим этапом является обработка препарата флюоресци- 80 рующей сывороткой против глобулинов человека. Изучают препарат с помощью люминесцентного микроскопа, отмечая степень свечения трепонем. РИТ—реакция иммобилизации трепонем — также является специфической. Живую культуру трепонем получают при культивировании в яичке кролика. Яичко измельчают в специальной среде, в которой трепонемы сохраняют подвижность. Ставят реакцию следующим образом: взвесь тканевых (подвижных) трепонем соединяют в пробирке с исследуемой сывороткой и добавляют свежий комплемент. В одну контрольную пробирку вместо исследуемой сыворотки добавляют сыворотку здорового человека, в другую — вместо свежего комплемента добавляют инактивированный — неактивный. После выдерживания при 35 °С в анаэробных условиях (анаэростат) из всех пробирок готовят препарат «раздавленная» капля и в темном поле определяют количество подвижных и неподвижных трепонем. Лечение: Пенициллины, тетрациклины, висмутсодержащие препараты. БИЛЕТ 5 Механизм влияния антибиотиков на микробную клетку. Бактерицидное и бактериостатическое действие антибиотиков Бактериостатические АБ в концентрациях, которые можно создать в организме, задерживают рост микробов, но не убивают их, тогда как воздействие бактерицидных антибиотиков в аналогичных концентрациях приводит к гибели клетки. Однако в более высоких концентрациях бактериостатические антибиотики могут оказывать также и бактерицидное действие. К бактериостатическим антибиотикам относятся макролиды, тетрациклины, левомицетин и другие, а к бактерицидным –пенициллины, цефалоспорины, ристоцетин, аминогликозиды и другие. По спектру действия антибиотики разделяют на: - действующие преимущественно на грамм+ микрофлору- пенициллин, эритромицин; - действующие преимущественно на грамотриц. микрофлору- полимиксин; - широкого спектра действия ( на грам-плюс и грам-минус флору)- стрептомицин, - противогрибковые- нистатин, амфотеррицин, леварин, низорал; - противотуберкулезные- стрептомицин, канамицин; - противоопухолевые- рифампицин; - противовирусные- интерферон, зовиракс, ацикловир. Антибиотики разделяют по механизму действия: - ингибиторы синтеза пептикогликана клеточной стенки (пенициллин, цефалоспорин, ванкомицин, ристомицин). Действуют на имеющих клеточную стенку растущие бактерии, не действуют на L- формы, покоящиеся формы бактерий; - ингибиторы синтеза белка (стрептомицин, левомицетин, тетрациклин); - ингибиторы синтеза НК, пуринов и аминокислот (налидиксовая кислота, рифампицин); - ингибиторы синтеза мембраны и цитоплазматической мембраны грибов (нистатин, полимиксин). - ингибиторы репликации и транскрипции (фторхинолоны) - ингибиторы синтеза ДНК – противоопухолевые препараты , фторхинолоны, ципро- и левофлоксацин В зависимости от механизма действия различают пять групп антибиотиков: 1. антибиотики, нарушающие синтез клеточной стенки. К этой группе относятся, например, β-лактамы. Препараты этой группы характеризуются самой высокой избирательностью действия: они убивают бактерии и не оказывают влияния на клетки микроорганизма, так как последние не имеют главного компонента клеточной стенки бактерий — пептидогликана. В связи с этим β -лактамные антибиотики являются наименее токсичными для макроорганизма; 2. антибиотики, нарушающие молекулярную организацию и синтез клеточных мембран. Примерами подобных препаратов являются полимиксины, полиены; 3. антибиотики, нарушающие синтез белка; это наиболее многочисленная группа препаратов. Представителями этой группы являются аминогликозиды, тетрациклины, макроли-ды, левомицетин, вызывающие нарушение синтеза белка на разных уровнях; 4. антибиотики — ингибиторы синтеза нуклеиновых кислот. Например, хинолоны нарушают синтез ДНК, рифампицин — синтез РНК; 5. антибиотики, подавляющие синтез пуринов и аминокислот. К этой группе относятся, например, сульфаниламиды. Клеточная кооперация между т и в лимфоцитами при гуморальном иммунном ответе Кооперация клеток в иммунном ответе. В формировании иммунного ответа включаются все звенья иммунной системы - системы макрофагов, Т- и В- лимфоцитов, комплемента, интерферонов и главная система гистосовместимости. В кратком виде можно выделить следующие этапы. 1. Поглощение и процессинг антигена макрофагом. 2. Представление процессированного антигена макрофагом с помощью белка главной системы гистосовместимости класса 2 Т- хелперам. 3. Узнавание антигена Т- хелперами и их активация. 4. Узнавание антигена и активация В- лимфоцитов. 5. Дифференциация В- лимфоцитов в плазматические клетки, синтез антител. 6. Взаимодействие антител с антигеном, активация систем комплемента и макрофагов, интерферонов. 7. Представление при участии белков МНС класса 1 чужеродных антигенов Т- киллерам, разрушение инфицированных чужеродными антигенами клеток Т- киллерами. 8. Индукция Т- и В- клеток иммунной памяти, способных специфически распознавать антиген и участвовать во вторичном иммунном ответе ( антигенстимулированные лимфоциты). При гуморальном иммунном ответе: Макрофаг --- через ИЛ1 активирует Тхелпер---затем тот через ИЛ2 активирует Влимфоциты , затем два пути: 1.синтез плазматических клеток из Влимфоцитов, которые превращаются в иммуноглобулины антитела,а те в свою очередь могут активировать систему комплемента) 2. Образуется Вклетки иммунной памяти, которые сохраняют информацию о контакте с Аг. При клеточном иммунном ответе: Макрофаг ---через ИЛ1 активируется Тхелпер, затем два пути :1. Через ИЛ2 активируются Т лимфоциты(ГЗТ) начинается продукция цитокинов, которые активируют фагоцитоз 2. Тхелпер активирует Т киллер, которые разрушает пораженную клетку (за счет ферментов перфоринов) , образуют в ней поры, нарушается осмотический баланс и короче клетке потом хана, она лизируется. Гонококки, свойства, роль при уретритах, факторы патогенности, патогенез семейство Neisseriaceae (названы в честь ученого Нейсера, который их открыл и изучал). Есть 4 вида: Neisseria (патогенные Вид Neisseria: N. meningitidis (менингококк) - NM, N. gonorrhoeae (гонококк)-NG. Вызывают у человека гнойно-воспалительные заболевания мочеполовых путей - гонорею, которая может быть острой и хронической. Возможна генерализация процесса и переход в гонококковый сепсис. При этом гонококки поражают кроме мочеполовых путей другие органы и попадают в кровь. У новорожденных заражение может произойти во время родов, тогда у них возникает воспаление коньюктивы - бленорея. Возбудитель гонореи - Neisseria gonorhorea. Гонококк (Г) был выделен у больных Нейсером в 1879 году. Биологические свойства видов гонококков:морфология - неправильную форму зерен кофе, парами - диплококки. Спор и жгутиков нет. Бывает микрокапсула. Очень полиморфны. Образуют L-формы. Для адгезии- фибрин. Грам-.культуральные свейства - очень требовательны к питательным средам, культивируется только в присутствии в среде сыворотки крови человека. Факультативные анаэробы, растут при добавлении CО2. Колонии - очень мелкие, круглые, гладкие, S-формы,без пигмента. ферментативная активность - самая низкая среди всех гноеродных кокков. Фермент только глюкозу, АГ - у гонококков общий протеиновый АГ и типоспецифический полисахаридный АГ, по которому гонококки разделяют на 16 сероваров. При культивировании АГ строение изменяется. Факторы патогенностн - главный фактор - эндотоксин, он образуется при разрушении гонококков. Это происходит под действием физико-химических факторов, нсспецифических факторов защиты (НФЗ), антибиотиков. Патогенез гонококков. Источник инфекции - больной, бактерионоситель. Механизм заражения контактный: половой, очень редко возможен бытовой контакт с бельем. Гонококки имеют трапизм к клеткам цилиндрического эпителия мочеполовых путей, они прикрепляются к ним при помощи фимбры, проникают внутрь. Гонококки могут быть внутриклеточными паразитами. При разрушении гонококки выделяют эндотоксины, оказывают токсическое действие. Гонококк фагоцитируется лейкоцитами, в результате образуется гной. Фагоцитоз незавершенный. Иммунитет - мало изучен. Большая роль принадлежит НФЗ, образуется AT,но при повторном зараж заболевание. Лечение - антибиотики (пенициллины, тетрациклин, канамицин). Специфическая профилактика- вакцины для предупреждения заболевания нет, так как: 1) иммунитет ненапряжснный; 2) не имеет смысла массовая иммунизация. Получена гоновакцина (инактивированная) для стимуляции иммунитета и перевода заболевания из хронической формы в острую. Это применяют для диагностики гонореи. Микробиологическая диагностика. 1) микроскопический метод - материал - гнойное выделение из урерты и вагины. Препараты готовят и окрашивают по Граму или метиленовым синим. В поле зрения аблюдают лейкоциты, внутри и вне лейкоцитов - Грам- диплококки. На этом основании ставят диагноз острой гонореи. 2) бактериологический метод - основан на выделении чистой культуры и ее идентификации по морфологическим, тинкториальным, ферментативным и АГ свойствам. Доказательства, что выделенная из гноя чистая культура является N. gonorhorea: форма зерен кофе; агглютинируются видовой и типоспецифической сывороткой к N гонококкам. Бактериологический метод используют при острой гонорее, при хронической гонорее для получения материала проводят стимуляцию гоновакциной. 3) серологическая диагностика - определяют AT в РСК, РНГА у бактерионоситслей, при хронической гонорее, у переболевших. Нейсcерии – грамотрицательные аэробные кокки, относящиеся к роду Neisseria, включающему 8 видов: Neisseriameningitides, Niesseriagonorrhoeae, N. flava, N. subflava, N. perflava, N. sicca. Морфология: неподвижные неспорогенные грамотрицательные диплококки, образующие капсулу, полиморфны – встречаются в виде мелких или крупных форм а так же в виде полочек, хорошо окрашиваются анилиновыми красителями (метиленовым 65 синим, бриллиантовым зелѐным и т. д.), под действием пенициллина образуют L-формы, могут менять свойства и превратиться в грамположительную форму. Культуральные свойства: аэробы, хемоорганотрофы; для роста требуют свежеприготовленные влажные среды с добавлением нативных белков крови, сыворотки или асцитической жидкости . Не вызывают гемолиза на средах, содержащих кровь; на средах с добавлением молока, желатина и картофеля не растут. На плотных питательных средах через 24ч, при содержании протеина II образуют слегка мутные бесцветные колонии, не содержащие его образуют круглые прозрачные колонии в виде капель росы, на жидких питательных средах растут диффузно и образуют плѐнку, через несколько часов оседающую на дно. Биохимическая активность: крайне низкая – разлагают только глюкозу, продуцируют каталазу и цитохромоксидазу, протеолитическая активность отсутствует, H2S, аммиака, индола не образует. Антигенная структура: Содержит А и К антигены, ЛПС обладают сильной иммуногенностью, основную антигенную нагрузку несут пили и белки мембраны. Наружная мембрана содержит протеины I, II, III классов, проявляющих сильные иммуногеннные свойства Факторы патогенности: капсула, пили, эндотоксин, белки мембраны Капсула обладает антифагоцитарным действием. Пили обеспечивают адгезию к эпителию. Клеточная стенка содержит эндотоксин. Поверхностный белок I класса – обеспечивает устойчивость к бактерицидным факторам слизистых оболочек. Класса II – (протеины мутности, ОРА-протеины) обуславливают прикрепление к эпителию, препятствуют фагоцитозу. N. синтезируют IgA протеазу, расщепляющую Ig. Резистентность: очень неустойчивы в окружающей среде, чувствительны к действию антисептиков, высокочувствительны к пенициллинам, тетрациклину, стрептомицину. Способны к утилизации пенициллинов при приобретении бета-лактамаз. Патогенез: Входные ворота – цилиндрический эпителий мочеполовых путей. Гонококки прикрепляются к эпителию посредством поверхностных белков, вызывают гибель и слущивание клеток, захватываются клетками, где размножаются, попадают на БМ, после чего попадают на соед. ткань и вызывают воспаление или попадают в кровь с возможным дессиминированием. Иммунитет – почти отсутствует. Микробиологическая диагностика: Бактериоскопическое исследование: Материалом для исследования служит гнойное отделяемое из уретры, влагалища, примой кишки, глотки, сыворотки крови. Готовят мазки, окраска по Граму, При «+» результате – обнаруживают гонококки – грам+ диплококки бобовидной формы., находятся внутри лейкоцитов. Положительный диагноз ставится при острой форме гонореи до применения антибиотиков. Бактериологическое исследование.Материал засевают на чашки Петри со специальными питательными средами — КДС, сывороточным агаром. Среда КДС содержит питательный агар с добавлением в определенной концентрации казеина, дрожжевого экстракта и сыворотки крови. Посевы инкубируют при 37°С в течение 24—72 ч. Гонококки образуют круглые прозрачные колонии, напоминающие капли росы, в отличие от более мутных колоний стрептококков или пигментированных колоний стафилококков, которые также могут расти на этих средах. Подозрительные колонии пересевают в пробирки на соответствующие среды для получения чистых культур, которые идентифицируют по сахаролитическим свойствам на средах «пестрого» ряда (полужидкий агар с сывороткой и углеводом). Гонококк ферментирует только глюкозу с образованием кислоты.. Серодиагностика. В некоторых случаях ставят РСК Борде — Жангу. В качестве антигена используют взвесь убитых гонококков. Реакция Борде—Жангу имеет вспомогательное значение при диагностике гонореи. Она положительна при хронической и осложненной гонорее. Лечение: антибиотикотерапия (пенициллин, тетрациклин, канамицин), иммунотерапия - Гонококковая вакцина - взвесь гонококков, убитых нагреванием, используется для вакцинотерапии хронической гонореи. БИЛЕТ 6 Методы культивирования фагов, их титрование. Применение бактериофагов в микробиологии и медицине. Культивирование фагов Фаги культивируют на чувствительных культурах бактерий. На жидких питательных средах получают фаголизаты. На плотных средах можно получить негативные колонии, или бляшки. Из изолированной бляшки можно получить чистую культуру бактериофага. |