Микра экз. Билет 1 Генетические и биохимические механизмы Лекарственной устойчивости. Путь преодоления лекарственной устойчивости бактерий

• Название: Билет 1 Генетические и биохимические механизмы Лекарственной устойчивости. Путь преодоления лекарственной устойчивости бактерий
• Анкор: Микра экз
• Дата: 25.01.2020
• Размер: 0.84 Mb.
• Имя файла: mikra_bilety1.docx
• Тип: Документы; #105758
• страница: 9 из 13

Метод Грама:

1. 
   Генцианфиолетовый 1-2мин
   
2. 
   Раствор Люголя 1мин (соединение йода)
   
3. 
   Спирт этиловый 96% 10 сек
   
4. 
   Промыть водой
   
5. 
   Докрасить фуксином 1-2 мин
   

Особенности клеточной стенки грамположительных бактерий.

Сначала белки, липиды, полисахариды, затем все далее перечисленное. Мощная, толстая, несложно организованная клеточная стенка, в составе которой преобладают пептидогликан и тейхоевые кислоты, нет липополисахаридов (ЛПС), часто нет диаминопимелиновой кислоты.

Окраска По ГРАМУ – в синий цвет

Особенности клеточной стенки грамотрицательных бактерий.

Клеточная стенка значительно тоньше,мало пептидогликана, чем у грамположительных бактерий, содержит выраженный ЛПС, липопротеины, фосфолипиды, диаминопимелиновую кислоту. Устроена более сложно- имеется внешняя мембрана, поэтому клеточная стенка трехслойная.

Окраска ПО ГРАМУ – в розовый цвет

2. 
   Патогенетические особенности вирусных инфекций. Инфекционные свойства вирусов, факторы патогенности вирусов. Острая и персистирующая вирусная инфекция
   

1. Продуктивный (автономный) тип: геном вируса автономен, завершается

образованием вирусного потомства

2. Абортивный тип: инфекционный процесс прерывается на одном из этапов, новые

вирусные частицы не образуются

3. Интегративный тип: вирусная ДНК встраивается в хромосому клетки-хозяина. Это

состояние называется вирогения. При этом вирусный геном реплицируется и

функционирует как составная часть клеточного генома. ДНК вируса, находящаяся в

составе хромосомы клетки, называется ДНК-провирусом. При делении клетки,

сохраняющей свои нормальные функции, ДНК-провирус переходит в геном дочерних

клеток, т.е. состояние вирогении наследуется. При этом пораженная клетка может

экспрессировать на своей поверхности вирусные белки, изменять свои антигенные

свойства: становиться мишенью для иммунной системы организма

Стадии продуктивной вирусной инфекции:

1. Адсорбция вируса на клетке: опосредуется рецепторами вируса и чувствительной клетки

2. Проникновение вируса в клетку

реализуется 2 механизмами:

а) слияние мембран клетки и вирусной оболочки, в результате чего оболочка вируса остается

снаружи, а геном (НК) проникает в клетку (тогда нет необходимости в «раздевании» вируса

внутри клетки)

б) виропексис (пиноцитоз): поглощение целой вирусной частицы, с формированием вакуоли,

стенками которой является мембрана клетки (рецепторный эндоцитоз)

3. «Раздевание» и высвобождение вирусного генома от оболочки (депротеинизация)

4. Синтез «ранних белков» вируса: как правило, это белки, которые регулируют дальнейшие

процессы размножения вируса (вирусная НК подавляет генетический аппарат клетки)

5. Репликация собственно генома вируса (увеличение копий НК)

6. Синтез «поздних белков» вируса: как правило, это белки капсида

7. Сборка вирионов: при этом могут оставаться «неупакованные» НК, фрагменты капсида

8. Выход новых вирусных частиц из клетки: лизис клетки или почкование вируса (этот механизм обычно присущ сложным вирусам – имеющим суперкапсид); возможен выход

вирусов через цитоплазматические каналы

Инфекционный процесс может быть:

по длительности- острый и хронический.

Острая циклическая инфекция заканчивается элиминацией (удалением) возбудителя или смертью больного.

При хронической инфекции возбудитель длительно сохраняется в организме (это состояние называется персистенция).

Для персистенции микроорганизмы имеют ряд механизмов- внутриклеточная локализация (укрываются в клетке), антигенная мимикрия, укрытие в локальных очагах и забарьерных органах (головной мозг). Для вирусов дополнительными факторами персистенции является интеграция генома вируса с хромосомой клетки- мишени, недоступность действию антител, наличие дефектных вирусных частиц и слабая индукция иммунного ответа и др. Персистенция в организме и периодическая смена хозяина- два основных механизма поддержания вирусной популяций.

3. 
   Тогавирусы, общая характеристика и классификация.Вирус краснухи, последствия заболевания у беременных женщин, лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.
   

Таксономия. Семейство Togaviridae. Род Rubivirus.

Морфология. Вирион вируса сферической форму. Геном вируса представлен однонитчатой плюс-нитевой РНК, окруженной капсидом с кубическим типом симметрии и внешней липидсодержащей оболочкой, на поверхности которой находятся шипы. В структуре вириона три белка: С, Е1 и Е2. Е1 и Е2— гликопротеины, или шипы, расположенные во внешней оболочке вириона.

Резистентность. Вирус чувствителен к эфиру. Малоустойчив к действию физических и химических факторов, неустойчив в окружающей среде. Разрушение происходит под действием органических растворителей, УФ-лучей, солнечного света.

Антигенная структура. Вирус представлен одним серотипом. Он имеет внутренний нуклеокапсидный антиген С, выявляемый в РСК, и внешние антигены: Е2, выявляемый в РН, и Е1, или гемагглютинин, выявляемый в РГА и РТГА. Е2 — это протективный антиген вируса.

Культивирование. В первичных культурах клеток вирус можно обнаружить по феномену интерференции, в качестве индуктора для суперинфекции используют вирус ECHO-11 и вирус везикулярного стоматита. Вирус краснухи вызывает развитие ЦПД и образование бляшек под агаровым покрытием лишь в некоторых перевиваемых культурах клеток: ВНК-21, Vero, RK-21, SIRC, а также в первичных культурах клеток из тканей человеческого плода. Наилучшей культурой для репродукции и выявления ЦПД являются клетки ВНК-21. Вирус размножается в цитоплазме клеток, вызывая очаговую деструкцию клеточного монослоя и образование цитоплазматических эозинофильных включений. Обладает нейраминидазной активностью.

Эпидемиология. Факультативный возбудитель медленных вирусных инфекций. Антропоноз. Источник - человек, опасный со 2 половины инкубационного периода и в течение 7 дней с момента появления сыпи. Выделение вируса из организма происходит с носоглоточным секретом, а также с мочой и испражнениями. Пути передачи:воздушно-капельный и трансплацентарный. Вирус, персистирующий в организме больного с врожденной краснухой, обладает повышенной вирулентностью.

Патогенез и проявления. Две формы болезни: приобретенная и врожденная.

Приобретѐнная краснуха. Входными воротами инфекции - слизистые оболочки верхних дыхательных путей → вирус в регионарные лимфатические узлы → размножается → поступает в кровь → разносится по органам → оседает в лимфатических узлах и эпителиальных клетках кожи → развивается иммунная воспалительная реакция, сопровождающаяся появлением пятнисто-папулезной сыпи. Инкубационный период — от 11 до 24 дней Проявления: незначительное повышение температуры и легкие катаральные симптомы → конъюнктивит → увеличение затылочных лимфатических узлов → пятнисто-папулезная сыпь, расположенная по всему телу. Вирус выделяется из организма больных с секретом слизистых оболочек верхних дыхательных путей, а также с мочой и фекалиями. Он исчезает из крови через твое суток после появления сыпи, но сохраняется в секрете слизистых оболочек верхних дыхательных путей в течение 2 недель.

Иммунитет. Стойкий, напряженный. В ходе заболевания развивается вторичный иммунодефицит клеточного типа.

Врожденная краснуха — это медленная вирусная инфекция, развивающаяся в результате внутриутробного трансплацентарного. Проявления развитие катаракты, глухоты и пороков сердца. Внутриутробные пороки. Особая опасность - заражение в 1 триместре беременности. Тератогенное действие обусловлено торможением митотической активности клеток, ишемией плода, цитопатогенным действием вируса на клетки плода.

Иммунитет менее стоек, так как формирование его происходит в условиях незрелой иммунной системы плода.

Прогрессирующий краснушный панэнцефалит — медленная вирусная инфекция, характеризующаяся комплексом прогрессирующих нарушений двигательной и умственной функции ЦНС, и завершающаяся летальным исходом.

Микробиологическая диагностика. Выделение вируса из смывов со слизистой оболочки носа и зева, крови, мочи, реже — испражнений, а также внутренних органов погибших детей и на обнаружении антител в парных сыворотках и цереброспинальной жидкости при врожденной краснухе и прогрессирующем краснушном панэнцефалите. Выделение вируса путем заражения чувствительных клеток. Индикацию вируса осуществляют на основании интерференции с цитопатогенными вирусами или по обнаружению ЦПД и в РГА. Идентификацию вируса осуществляют в РН, РТГА, РИФ и ИФА. (Серодиагностика) Для обнаружения антител применяют РН, РСК, РТГА, ИФА. Диагностическое значение имеет четырехкратное и более увеличение титров антител в динамике заболевания, а также определение специфических IgM. Обнаружение антител у беременных. Если через 10—12 дней после общения беременной с источником инфекции у женщины регистрируется нарастание титров антигемагглютининов в парных сыворотках, а после 20-го дня определяются IgM, то это подтверждает 94 первичное инфицирование и необходимость решения вопроса о прерывании беременности. Обнаружение у новорожденных специфических IgM свидетельствует о перенесенной внутриутробной инфекции. Специфическое лечение и профилактика. Лечение симптоматическое.

Специфического лечения нет. Профилактика: защита женщин детородного возраста от внутриутробного инфицирования плода, вакцинация против краснухи в возрасте 12 месяцев, ревакцинации детей в 6 лет и иммунизация девочек в 13 лет. Применяют живые и убитые вакцины. Живая вакцина, изготовленная на основе аттенуированныых штаммов вируса. Для проведения вакцинации используют как ассоциированные вакцины (паротитно-коревая-краснушная вакцина, паротитно-краснушная вакцина), так и моновакцины

БИЛЕТ 33

1. 
   Споры, капсулы, ворсинки, жгутики. Их строение, химический состав, функции, методы выявления
   

Споры – форма хранения наслед.информации в неблагоприятных условиях.

Процесс спорообразования:

1. 
   Спорогенная зона (уплотнение цитоплазмы и нуклеоида)
   
2. 
   Проспора(изолирование спорогенной зоны с помощью врастания ЦПМ)
   
3. 
   Образование кортекса (состоит из пептидогликана)
   
4. 
   Покрытие оболочкой из белков,липидов и др соединений
   
5. 
   Вегетативная часть клетки отмирает и спора сохраняется
   
6. 
   В благоприятных условиях спора прорастает в вегетативную клетку, набухает, разрушается оболочка и выходит ростковая трубка. Завершается синтез и сформировавшаяся клетка начинает делиться.
   

Дипиколиновая к-та обеспечивает термоустойчивость

Споры располагаются терминально(на конце палочки – возб столбняка), субтерминально (клостридии) и центрально(сибиреязвенная бацилла)

Выявление – По Ожеско – споры в красный, бактерии в синий. По Шефферу – Фунтону (малахитовая зелень и фуксин – споры окр в зеленый).По Грамму – споры белые, палочки розовые.

Капсула – слизистая структура, толщиной 0,2 мкм, прочно связанная с клеточной стенкой бактерий и имеющая четко очерченные внешние границы.

Капсула состоит из полисахаридов или полипептидов. Гидрофильна.

Выделяют микрокапсулу, выявляемую при электронной микроскопии в виде слоя микрофибрилл, и макрокапсулу, обнаруживаемую при световой микроскопии

Ф-и: 1. Адгезивная

2. Препятствует фагоцитозу

3. Токсическое действие на организм человека

4. Обладает антигенными св-ми (К-антиген)

Выявление - по Бури-Гинсу. (белковая капсула окрашивается, полисахаридная – нет)

Пили (фимбрии, ворсинки) – тонкие белковые нити(белок пилин, обладающий антигенной активностью) , намного тоньше жгутиков.

1тип пилей – обеспечивают адгезию к клеткам хозяина,

2 тип пилей – ответственные за питание, водно-солевой обмен

F- пили (фактор фертильности) - аппарат конъюгации бактерий, встречаются в небольшом количестве в виде тонких белковых ворсинок.
Жгутики – тонкие нити, состоящие из спиральнйо нити, крючка и базального тела(несколько дисков , вмонтированных в ЦПМ и КС). Основа – белок флагеллин, являющийся Н-антигеном.

Монотрих – 1 жгутик – у холер вибриона

Перитрих – жгутики по всей поверхности – у кишечной палочки

Лофотрих – пучок жгутиков

Амфитрих – жгутики расп с двух полюсов.

Выявление:

- По Лоффлеру

- По Морозову:

1.Протравливаем к-той, щелочью(делается всегда с целью денатурации белка)

2. Танин

3. Азотноксилое серебро в несколько слоев

2. Госпитальные инфекции. Причины распространения и возникновения госпитальных инфекций. Госпитальные штаммы, их характеристика. Пути и факторы передачи возбудителей. Характеристика эпидемического процесса в стационаре. Диагностика, профилактика, лечение внутрибольничных инфекций

Сепсис относится к проблемам клинической микробиологии. Эта патология связана связана с такими понятиями как “внутрибольничные инфекции”, “госпитальные штаммы

микроорганизмов”, “оппортунистические инфекции” и др. возбудители - оппортунисты, размножающихся и вызывающих патологию в условиях иммунодефицита организма.

Госпитальные (внутрибольничные) или нозокомиальные (возникающие при уходе за больным) инфекции возникают в условиях лечебных учреждений. Возбудителями этих инфекций могут быть патогенные или условно - патогенные (оппортунисты) микроорганизмы.

В настоящее время оппортунистические инфекции приобрели большое медицинское и социальное значение (проблема ВИЧ - инфекции и снижения популяционного иммунитета). Для возникновения таких инфекций также необходимо наличие нарушенной целостности кожных покровов, т.е. наличие раневой поверхности.

Особенности оппортунистических инфекций - полиэтиологичность, полиорганность, склонность к генерализации процесса, малая специфичность клинических проявлений. В их развитии играют роль как экзогенные возбудители (легионеллы, токсоплазмы, листерии, микоплазмы и др.), так и представители резидентной микрофлоры (эндогенные микроорганизмы), а также состояние иммунной системы организма.

Этиология внутрибольничных инфекций многообразна - бактерии, вирусы, грибы, простейшие. Большую роль имеют гр+ кокки - стафилококки (особенно S.aureus и S.epidermidis), стрептококки, пептококки и пептострептококки. Все большую роль играют гр- бактерии, в том числе кишечная палочка, протей, синегнойная палочка, клебсиеллы и др.

Причины возникновения госпитальных инфекций и пути передачи их возбудителей разнообразны.

1.Это и медицинские манипуляции (инвазивные методы исследования и лечения), 2.микробная контаминация (заражение) готовых лекарственных форм, дезинфектантов и антисептиков,

3.нарушения санитарно - эпидемиологического режима медицинских учреждений, занос различными путями патогенных возбудителей (гепатиты, сальмонеллезы, аденовирусные и энтеровирусные инфекции и мн.др.), пренебрежение правилами асептики, старые помещения, устаревшее оборудование.

4. формирование среди медицинского персонала носителей патогенных стафилококков и других микроорганизмов.

5. отсутствие достаточного надзора за циркуляцией различных возбудителей в условиях медицинских учреждений.

6. Создание крупных больничных комплексов, скученность в больничных помещениях, повышенная возможность контактов. Длительное пребывание в стационаре.

Опасные диагностические процедуры: взятие крови, зондирование, эндоскопия, пункции и венесекции и т.д.

Опасные лечебные процедуры: трансфузии, инъекции, ИВЛ, пересадка органов и тканей, катетеризация сосудов и мочевыводящих путей, гемодиализ.

Пути передачи: ятрогенный(через диагностические и лечебные манипуляции), воздушно-капельный, контактно-бытовой, фекально-оральный, вертикальный (от матери ребенку)

ДИАГНОСТИКА:

1.бактерифаготипирование,

2.бактериоцинотипирование,

3.антибиотикотипирование,

4.серотипирование,

5. анализ плазмид (генетическое типирование)

Госпитальный штамм – адаптированный к конкретным условиям стационара возбудитель, который может вызывать заболевания у больных, находящихся на лечении.

Однако важнейшими причинами является формирование в результате селекции госпитальных штаммов микроорганизмов, чему способствует пребывание ослабленных больных с тяжелыми

формами гнойно - септических и других инфекционных заболеваний, формирование и распространение лекарственно - устойчивых штаммов патогенных и условно - патогенных микроорганизмов в результате нерациональной антибиотико- и химиотерапии, широкого распространения R- плазмид.

Основными формами госпитальных (и оппортунистических) инфекций являются: гнойно - воспалительные процессы, бактеремия, сепсис, бактериальный эндотоксический шок, дисбактериозы (дисмикробиоценозы - дисбиозы). Большингству из них дано определение в предыдущих лекциях.

Отдельно следует остановиться на сепсисе (греч. sepsis - гниение) - тяжелом генерализованном лихорадочном заболевании, обусловленном наличием очагов гнойного воспаления с непрерывным или периодическим поступлением возбудителя в кровь. Для сепсиса характерны тяжелые общие расстройства и последовательное образование новых очагов в органах и тканях. Возбудители сепсиса обычно отличаются полиорганотропностью и получают возможность в условиях иммунодефицита и снижения бактерицидных свойств крови размножаться в кровеносной и лимфатической системах.

Формами сепсиса являются септицемия (размножение возбудителя в кровеносной и лимфатической системах без образования гнойных очагов в органах и тканях) и септикопиемия (размножение возбудителя как в кровеносной и лимфатической системах, так и метастатическое размножение в различных органах и тканях).

Чаще всего сепсис является следствием генерализации локальных гнойных очагов. Наиболее частые возбудители сепсиса - стафилококки, стрептококки, грамотрицательные бактерии из семейств Enterobacteriaceae и Pseudomonadaceae, многие возбудители - оппортунисты. В зависимости от входных ворот, локализации первичного очага и других пречин выделяют сепсис послеродовый, отогенный, одонтогенный, послеабортный, перитонеальный, раневой, ожоговый, уросепсис, сепсис новорожденных. Выделяют также криптогенный сепсис - когда первичный очаг обнаружить не удается.

Из возбудителей, приобретающих все большее значение как причины госпитальных инфекций, остановимся на синегнойной палочке, клебсиеллах и представителей рода Proteus.

Лечение внутрибольничных инфекций

Сложности лечения внутрибольничной инфекции обусловлены ее развитием в ослабленном организме, на фоне основной патологии, а также резистентностью госпитальных штаммов к традиционной фармакотерапии. Больные с диагностированными инфекционными процессами подлежат изоляции; в отделении проводится тщательная текущая и заключительная дезинфекция. Выбор противомикробного препарата основывается на особенностях антибиотикограммы: при внутрибольничной инфекции, вызванной грамположительной флорой наиболее эффективен ванкомицин; грамотрицательными микроорганизмами – карбапенемы, цефалоспорины IV поколения, аминогликозиды. Возможно дополнительное применение специфических бактериофагов, иммуностимуляторов, интерферона, лейкоцитарной массы, витаминотерапии.

При необходимости проводится чрескожное облучение крови (ВЛОК, УФОК), экстракорпоральная гемокоррекция (гемосорбция, лимфосорбция). Симптоматическая терапия осуществляется с учетом клинической формы внутрибольничной инфекции с участием специалистов соответствующего профиля: хирургов, травматологов, пульмонологов, урологов, гинекологов и др.

Профилактика внутрибольничных инфекций

Основные меры профилактики внутрибольничных инфекций сводятся к соблюдению санитарно-гигиенических и противоэпидемических требований. В первую очередь, это касается режима дезинфекции помещений и предметов ухода, применения современных высокоэффективных антисептиков, проведения качественной предстерилизационной обработки и стерилизации инструментария, безукоснительного следования правилам асептики и антисептики.

Медицинский персонал должен соблюдать меры индивидуальной защиты при проведении инвазивных процедур: работать в резиновых перчатках, защитных очках и маске; осторожно обращаться с медицинским инструментарием. Большое значение в профилактике внутрибольничных инфекций имеет вакцинация медработников от гепатита В, краснухи, гриппа, дифтерии, столбняка и других инфекций. Все сотрудники ЛПУ подлежат регулярному плановому диспансерному обследованию, направленному на выявление носительства патогенов. Предупредить возникновение и распространение внутрибольничных инфекций позволит сокращение сроков госпитализации пациентов, рациональная антибиотикотерапия, обоснованность проведения инвазивных диагностических и лечебных процедур, эпидемиологический контроль в ЛПУ.
3. Дрожжеподобные грибы, рода Кандида, свойства, виды грибов, роль в патологии человека. Условия, способствующие возникновению кандидозов. Лабораторная диагностика

Грибы рода Кандида явл-ся возб-ми кандидозов. В пат материале и культ образ овальные почкующ дрож кл и псевдомицелий. Хорошо растут на обычн пит ср.

Ag:гликопротеины КС опред видов принадл-ть.

Пат-ть:гемолизины, эндоплазмокоагулаза, липиды, полисахариды, гидролазы, эндотоксин.

Пат-з и им-т: грибы вызыв различн остр и хрон инф-ии, забол-я м.б. в виде перв и втор инф-ий Чаще всего кандидозы возник у лиц, длительно принемающ а/б широкого спектра.

При кандидозах накапл-ся IgG,M и A.

Эпид-я:C.albicans явл-ся норм предст микрофлоры челов, устойч к ф-м внеш ср.

Диагн-ка:

1) микроск-ют пат материал для обнаруж почкующ кл или элем псевдомицелия.На2-3 день образ колонии мелкие выпуклые.Идент-ю проводят на основании микроск-ии материала, культ призн, биохим акт-ти.

2) серодиагн-ку проводят с пом РА, РСК, преципитации, ИФА, иммуноэлектрофореза.

Проф-ка:убитые вакцины, а/б (полиены), произв имидазола.

К несовершенным грибам относятся грибы рода Candida, поражающие кожу, слизистые оболочки и внутренние органы (кандидоз). Они имеют овальную форму, диаметр 2—5 мкм; делятся почкованием (бластоспоры), образуют псевдомицелий (почкующиеся клетки из ростковой трубочки вытягиваются в нить), на концах которого находятся хламидоспоры. Эти грибы называют дрожжеподобными. Истинные дрожжи (аскомицеты) образуют аскоспоры, не имеют псевдомицелия и хламидоспор. Подавляющее большинство грибов, вызывающих заболевания у человека (микозы), относятся к несовершенным грибам

БИЛЕТ 34

6. 
   Споры
   

Споры – форма хранения наслед.информации в неблагоприятных условиях.

Процесс спорообразования:

7. 
   Спорогенная зона (уплотнение цитоплазмы и нуклеоида)
   
8. 
   Проспора(изолирование спорогенной зоны с помощью врастания ЦПМ)
   
9. 
   Образование кортекса (состоит из пептидогликана)
   
10. 
    Покрытие оболочкой из белков,липидов и др соединений
    
11. 
    Вегетативная часть клетки отмирает и спора сохраняется
    
12. 
    В благоприятных условиях спора прорастает в вегетативную клетку, набухает, разрушается оболочка и выходит ростковая трубка. Завершается синтез и сформировавшаяся клетка начинает делиться.
    

Дипиколиновая к-та обеспечивает термоустойчивость

Споры располагаются терминально(на конце палочки – возб столбняка), субтерминально (клостридии) и центрально(сибиреязвенная бацилла)

Выявление – По Ожеско – споры в красный, бактерии в синий. По Шефферу – Фунтону (малахитовая зелень и фуксин – споры окр в зеленый).По Грамму – споры белые, палочки розовые.

Капсула – слизистая структура, толщиной 0,2 мкм, прочно связанная с клеточной стенкой бактерий и имеющая четко очерченные внешние границы.

Капсула состоит из полисахаридов или полипептидов. Гидрофильна.

Выделяют микрокапсулу, выявляемую при электронной микроскопии в виде слоя микрофибрилл, и макрокапсулу, обнаруживаемую при световой микроскопии

Ф-и: 1. Адгезивная

2. Препятствует фагоцитозу

3. Токсическое действие на организм человека

4. Обладает антигенными св-ми (К-антиген)

Выявление - по Бури-Гинсу. (белковая капсула окрашивается, полисахаридная – нет)

Пили (фимбрии, ворсинки) – тонкие белковые нити(белок пилин, обладающий антигенной активностью) , намного тоньше жгутиков.

1тип пилей – обеспечивают адгезию к клеткам хозяина,

2 тип пилей – ответственные за питание, водно-солевой обмен

F- пили (фактор фертильности) - аппарат конъюгации бактерий, встречаются в небольшом количестве в виде тонких белковых ворсинок.
Жгутики – тонкие нити, состоящие из спиральнйо нити, крючка и базального тела(несколько дисков , вмонтированных в ЦПМ и КС). Основа – белок флагеллин, являющийся Н-антигеном.

Монотрих – 1 жгутик – у холер вибриона

Перитрих – жгутики по всей поверхности – у кишечной палочки

Лофотрих – пучок жгутиков

Амфитрих – жгутики расп с двух полюсов.

Выявление:

- По Лоффлеру

- По Морозову:

1.Протравливаем к-той, щелочью(делается всегда с целью денатурации белка)

2. Танин

3. Азотноксилое серебро в несколько слоев

7. 
   Динамика образования антител, первичный и вторичный иммунный ответ.
   

Способность к образованию ан­тител появляется во внутриутробном периоде у 20-недельного эмбриона; после рождения начинается собственная продукция иммуноглобулинов, которая увеличивается до наступления зре­лого возраста и несколько снижается к старости. Динамика об­разования антител имеет различный характер в зависимости от силы антигенного воздействия (дозы антигена), частоты воздействия антигена, состояния организма и его иммунной системы. При первичном и повторном введении антигена динамика антителообразования также различна и протекает в несколько ста­дий. Выделяют латентную, логарифмическую, стацио­нарную фазу и фазу снижения.

В латентной фазе происходят переработка и представление антигена иммунокомпетентным клеткам, размножение клона клеток, специализированного на выработку антител к данному антигену, начинается синтез ан­тител. В этот период антитела в крови не обнаруживаются.

Во время логарифмической фазы синтезированные антитела высво­бождаются из плазмоцитов и поступают в лимфу и кровь.

В ста­ционарной фазе количество антител достигает максимума и ста­билизируется, затем наступает фаза снижения уровня антител. При первичном введении антигена (первичный иммунный от­вет) латентная фаза составляет 3—5 сут, логарифмическая — 7— 15 сут, стационарная — 15—30 сут и фаза снижения — 1—6 мес и более. Особенностью первичного иммунного ответа является то, что первоначально синтезируется IgM, а затем IgG.

В отличие от первичного иммунного ответа при вторичном введении антигена (вторичный иммунный ответ) латентный период укорочен до нескольких часов или 1—2 сут, логарифми­ческая фаза характеризуется быстрым нарастанием и значитель­но более высоким уровнем антител, который в последующих фазах длительно удерживается и медленно, иногда в течение не­скольких лет, снижается. При вторичном иммунном ответе в отличие от первичного синтезируются главным образом IgG.

Такое различие динамики антителообразования при первич­ном и вторичном иммунном ответе объясняется тем, что после первичного введения антигена в иммунной системе формирует­ся клон лимфоцитов, несущих иммунологическую память о данном антигене. После повторной встречи с этим же антиге­ном клон лимфоцитов с иммунологической памятью быстро раз­множается и интенсивно включает процесс антителогенеза.

Очень быстрое и энергичное антителообразование при повтор­ной встрече с антигеном используется в практических целях при необходимости получения высоких титров антител при произ­водстве диагностических и лечебных сывороток от иммунизиро­ванных животных, а также для экстренного создания иммуни­тета при вакцинации

8. 
   Протеи, свойства, виды протеев. Этиологическая роль при гнойных и смешанных инфекциях. Роль при внутрибольничных инфекциях. Лабораторная диагностика, специфическая фаго- и иммунотерапия
   

ПРОТЕИ.–род Proteus (3 вида, часто встречаются Р. vulgaris и Р. mirabilis).

Морфология.Палочки (встречаются кокковидные и нитевидные формы), спор и капсул не образуют, имеют перитрихиально расположенные жгутики.

Протеи хорошо растут на простых питательных средах. На агаровой среде дают «ползучий» рост (роящиеся Н-формы). Штаммы, не способные к роению, образуют крупные с ровными краями колонии (О-форма). Некоторые штаммы вызывают гемолиз эритроцитов в кровяных средах.

Ферментируют многие углеводы с образованием кис­лоты, разжижают желатину, продуцируют H₂S. Виды различают по способности продуцировать индол, расщеплять мальтозу, давать реакцию Фогеса–Проскауэра и др. Имеют уреазу и способны

АГ.Имеют 49 О- и 19 Н-АГ, очень многие из них перекрестно реагируют с другими энтеробактериями.

Патогенез. . При попадании ↑ доз протея в ЖКТ возникает пищевая токсикоинфекция (проявляется в виде острого гастроэнтерита).Относятся к условно-пат Б!!. Токсические свойства связаны с ЛПС, которые освобождаются после разрушения мк

Р. mirabilis чаще, чем Р. vulgaris, вызывают гнойно-воспа­лительные заболевания (особенно МПТ), это м.б. следствием заражения, а порою раз­виваются как аутоинфекции при иммунодефицитных состояниях. Особенно опасны заражения новорожденных: попадание про­теев в пупочную ранку → бактериемия или менингит.

Экология и распространение.Обитателями в кишечнике чка и Ж!! В окружающей среде более устойчивы, чем эшерихии, способны сохранять жизнедеятельность в слабых растворах фенола и других дезин­фектантов. В природе распространены широко, участвуют гниении.

Лабораторная диагностика.Бактериологическим методом. Выделенные чистые культуры идентифицируют по культуральным и БХ свойствам. Этиологическая роль устанавливает­ся так же, как и всех других условно-патогенных микроорга­низмов.

Профилактика и лечение.Профилактика. Лечение используют АБ и бактериофаг (местно или в полость поражения) после проверки чувствительности к фагу выделенного возбудителя. В случаях смешанных инфекций, вызванных эшерихиями и протеем, приме­няют коли–протейный бактериофаг.

ЛЕЧЕНИЕ- специфическая отсутствует. ЛЕЧЕНИЕ ЦЕФАЛОСПАРИНЫ 2-3 ПОКОЛЕНИЯ.

Протейная вакцина. Химическая вакцина, представляет собой белково-липополисахаридный комплекс, содержит протективные антигены протея. Стимулирует выработку активного антибактериального иммунитета. Используется для лечения и профилактики гнойно-воспалительных заболеваний (ГВЗ) протейной этилогии.

Антипротейная плазма. Препарат содержит антипротейные антитела и получается от доноров, иммунизированных протейной вакциной. При введении препарата создается пассивный антибактериальный иммунитет. Используется для иммунотерапии ГВЗ протейной этиологии.

БИЛЕТ 35

1. 
   Клеточная капсула, химическое состав, строение, функции
   

апсула бактерии — слизистая структура толщиной более 0,2 мкм, прочно связанная с клеточной стенкой бактерий и имеющая чётко очерченные внешние границы. Капсула различима в мазках-отпечатках из патологического материала. В чистых культурах бактерий капсула образуется реже. Она выявляется при специальных методах окраски по Бурри-Гинсу, создающих негативное контрастирование веществ капсулы: тушь создаёт тёмный фон вокруг капсулы.Макрокапсула не является обязательным структурным элементом микробной клетки. Ее образование зависит от среды, в которой находятся бактерии, и от свойств микроба, сформировавшихся в процессе эволюционного развития микроорганизма. Благодаря тому, что капсула на 98% состоит из воды, она служит как бы защитным осмотическим барьером против притока большого количества жидкости и против высушивания. Капсула защищает бактерии от фагоцитоза, антител, бактериофагов, является фактором патогенности.Капсула может быть утрачена клеткой без потери ее жизнеспособности, хотя роль ее в защите бактерий очень существенна.Бактерии, образующие капсулу внутри макроорганизма, при выделении в окружающую среду, спустя два часа прекращают ее продуцировать.

Состав капсулы

Капсула состоит из полисахаридов (экзополисахаридов), иногда из полипептидов; например, у сибиреязвенной бациллы она состоит из полимеров D-глутаминовой кислоты. Капсула гидрофильна, включает большое (до 98 %) количество воды.По химическому составу капсулы чаще всего представляют собой полисахариды. Иногда они состоят изгликопротеидов (сложные комплексы сахаров и белков) и полипептидов (род Bacillus), в редких случаях — из клетчатки (род Acetobacter). Слизистые вещества, выделяемые в субстрат некоторыми бактериями, обусловливают, например, слизисто-тягучую консистенцию испорченного молока и пива.

Окраска по Романовскому-Гимзе. Фиксированный мазок кладут в чашку Петри мазком вниз на подставки из стеклянной соломки или спичек и наливают рабочий раствор краски Романовского-Гимза (15—20 капель на 10 мл воды). Через 15—20 мин препарат промывают водой и высушивают на воздухе. Бактерии окрашиваются в тёмно-синий цвет, капсулы — в розовый.

Окраска по Михину. На фиксированный мазок наливают метиленовую синь Леффлера (30 мл насыщенного спиртового раствора метиленовой сини растворяют в 100 мл воды, добавляют 1 мл 1 % раствора NaOH и выдерживают в термостате месяц) при лёгком нагревании выдерживают 3—5 мин, быстро промывают водой и высушивают. Бактерии окрашиваются в синий цвет, капсулы — в розовый.

Метод Бурри-Гинса используется для окраски капсульных бактерий и основан на том, что капсула не воспринимает красители. Капсулу выявляют негативным контрастированием фона по Бури. Для этого черную тушь смешивают в культурой и высушивают. После этого проводят фиксацию в пламени горелки, окрашивают тела микробных клеток по Гинсу - водным фуксином в течение 1 минуты и промывают водой 5-10 секунд. В результате на темном фоне хорошо видна бесцветная капсула и красные тела микробов.

Капсульные бактерии. К ним относятся клебсиеллы - это группа грамотрицательных неспорообразующих и неподвижных палочек, которые обладают обычными капсулами и на питательных средах образуют слизь.

Основными видами этого рода являются палочка склеромы (риносклеромы), палочка озены и диплобациллы Фридлендера, вызывающие пневмонию. Капсульные бактерии обнаруживаются в слизи носа и зева больных склеромой и озеной, в мокроте и в тканях легких больных фридлендеровской пневмонией, при инфекциях мочевых путей и в испражнениях человека, а также в объектах внешней среды.
2. Понятие об иммунитете. Классификация различных форм иммунитета

Иммунитет – это способ защиты организма от тел и веществ, несущих признаки генетической чужеродности (опр. Р. Петрова). Вещества и клетки, несущие на себе признаки генетически чужеродной информации, называются антигенами. У каждого живого организма свой собственный набор антигенов его тканей.

Иммунная система – это эволюционно сложившаяся система, ее функция – сохранение

постоянства антигенного гомеостаза организма на протяжении всей жизни.

Виды: 1. Врожденный иммунитет 2. Приобретенный иммунитет

Врожденный: Видовой(присущ всем особям данного вида)

Индивидуальный ( неспецифическая резистентность)

Видовой иммунитет обусловлен анатомо-физиологическими особенностями строения и функционирования клеток, органов и систем здорового организма. Механизм видового иммунитета – видовая ареактивность клеток и тканей.

Наследственный иммунитет(врожденный, видовой) обусловлен выработанной в процессе филогенеза генетически закрепленной невосприимчивостью вида к данному антигену или микроорганизму; он связан с биологическими особенностями макро и микроорганизма и характером взаимодействия. Видовой иммунитет неспицифичен и может быть как абсолютным (невосприимчивость животных к возбудителю ВИЧ-инфекции человека, к вирусам бактерий) и относительным (например, появление чувствительности к столбнячному токсину у нечувствительных к нему легушек при повышении температуры тела)

Приобретенный делится на естественный и искусственный, которые далее делятся на активный и пассивный.

Активный иммунитет - возникает в том случае, если в организм в том или ином виде, тем или иным путем попадают антигены и организм в ответ на попадание антигенов активно вырабатывает иммунитет.

Активный иммунитет напряженный и длительный, он сохраняется несколько лет, или даже на протяжении всей жизни.

Пассивный иммунитет – возникает при попадании в организм готовых факторов иммунитета (антител). Такой иммунитет непродолжительный, сохраняется в течение месяца, иногда нескольких месяцев.

Естественный активный иммунитет – постинфекционный, возникает в организме после перенесенного заболевания.

Естественный пассивный иммунитет – плацентарный, возникает в результате передачи готовых антител (Ig G) через плаценту от матери ребенку. Сохраняется в течение 3-4 месяцев, защищает ребенка в первые месяцы жизни, когда собственных антител еще нет.

Искусственный активный иммунитет – поствакцинальный, возникает после вакцинации. Вакцины – иммунобиологические препараты, всегда содержащие антигены в том или ином виде.

Искусственный пассивный иммунитет – постсывороточный, возникает при введении сывороточных препаратов с готовыми антителами.

Схраняется 4-6 недель.

Стерильный иммунитет – сохраняется в организме после исчезновения возбудителя. Пример – иммунитет после многих перенесенных бактериальных и вирусных инфекций: дифтерия, коклюш, натуральная оспа, ветряная оспа, корь и др.

Нестерильный иммунитет – сохраняется в организме только в присутствии возбудителя. Сам возбудитель поддерживает иммунитет, при исчезновении возбудителя иммунитет быстро угасает.

Нестерильный иммунитет характерен для клеточного иммунного ответа. Пример – иммунитет при туберкулезе, бруцеллезе.

Формы иммунитета(иммунного ответа).

Гуморальный иммунный ответ – выработка антител на возбудитель или его токсины. Выявляется в серологическом методе диагностики. Цель метода: обнаружение антител в сыворотке больного и доказательство их инфекционной природы. Инфекционную природу антител определяют:

1. В парных сыворотках больного – сыворотках, взятых с интервалом в 7-10 дней,

определяют титр антител; титр должен увеличиться не менее, чем 4 раза

2. Пользуются критерием «диагностический титр», уровень которого установлен в

соответствующих реакциях для различных заболеваний; у больного определяют титр антител в однократно взятой сыворотке

3. Выявляют IgM, так как они являются «острофазными нами», появляются в высоких титрах в разгар заболевания.

Обнаружение антител проводят с помощью реакций иммунитета и с применением

диагностических препаратов, содержащих антигены - это диагностикумы.

Клеточный иммунный ответ – накопление цитотоксических Т-лимфоцитов (Т-киллеров), Т- лимфоцитов гиперчувствительности замедленного типа (Т-гзт): уничтожение пораженной возбудителем клетки (Т-киллеры), привлечение фагоцитов в патологический очаг (Т-гзт).

Выявляется в аллергическом методе диагностики: туберкулиновая проба Манту (при диагностике туберкулеза). Диагностические препараты, используемые в аллергическом методе диагностики инфекционных заболеваний, называются аллергены, и представляют собой компоненты микробных клеток. Названия препаратов соответствуют методу диагностики и виду заболевания: дизентерин

(диагностика хронической дизентерии), бруцеллин (диагностика бруцеллеза), туберкулин (диагностика туберкулеза) и пр.

Иммунологическая память – форма иммунного ответа, которая «защищает» организм длительное время, а иногда и всю жизнь, после болезни или после вакцинации. Обусловлена появлением клеток иммунной памяти (В-лимфоцитов и Т-лимфоцитов) Именно на феномене иммунологической памяти основана иммунопрофилактика инфекционных болезней. В-лимфоциты иммунной памяти – долгоживущие клетки (до нескольких лет), которые постоянно в

небольших количествах синтезируют антитела (IgG); именно эти антитела первыми реагируют с возбудителем или его токсинами, при его повторном попадании в организм.

Иммунологическая толерантность (открыта Медоваром) – форма иммунного ответа, которая «защищает» организм, не реагируя на антиген. Приобретенная толерантность (терпимость антигена) всегда ограничена во времени. Связана с подавлением иммунных реакции под действием Т- супрессоров, истощением пула клеток, способных реагировать с данным антигеном.

Условия способствующие развитию толерантности : периоды эмбрионального развития и новорожденности (адаптивный период), хорошая растворимость антигена, большая и малая доза антигена, малая молекулярная масса, повреждение и удаление тимуса.

Точка Медовара – момент иммунологической зрелости , когда организм отличает «свое от чужого». Если Аг попадает до точки медовара, то в последующем иммунного ответа на него не возникает.

Естественная иммунологическая толерантность – отсутствие иммунитета на собственные ткани - Она предотвращает выработку антител и Т- лимфоцитов, способных разрушать собственные ткани. Ее повреждение – аутоиммунные заболевания

Во время эмбрионального развития уничтожаются клоны рецепторов несущие рецепторы к собственным тканям .

Врожденная тол-ть – то, что попадает до точки медовара.

Приобретенная тол-ть – специфична, возникает строго на определенный толераген (вещество с низкой мол. массой, мелкодисперсные, растворимые, не взаимодействующие с антигенпредставляющими клетками). Приобретенная тол-ть может возникнуть из-за активности Тсупрессоров, подавляющих иммунный ответ (ВИЧ –инфекция к примеру)

У взрослых возн при генетическом сродстве донора и реципиента по антигенам гистосовместимости.

Иммунолог толе-ть может возн при малой дозе антигена. И при сильно большой дозе - по-другому это называется иммунологический паралич, т.е сбольшая доза Аг сразу взаимодействует с рецепторами, блокируя их.

3. Стрептококки пневмонии ( пневмококки) . Биологические свойства, факторы патогенности, роль в патологии человека, методы микробиологической диагностики

семейство Streptococcaceae род Enterococcus S.pneumoniae (пневмококк) Streptococcus pneumoniae— грамположи-тельные диплококки, обычно ланцетовидные или располагающиеся в виде цепочек, имеющие полисахаридную капсулу, которая позволяет легко «типировать» их специфическими антисыворотками. Пневмококки неподвижны, спор не образуют; факультативные анаэробы. При культивировании на искусственных питательных средах теряют капсулу, переходят из S- в R-форму. Хорошо растут на кровяных и сывороточных средах. Высоковирулентны для белых мышей (сепсис). По капсульному антигену пневмококки делятся на 85 сероваров.

Роль в патологии человекаявляется естественным обитателем верхних дыхательных путей человека. Streptococcus pneumoniae может вызывать пневмонию, обычно лобарную, синусит и средний отит, менингит, который чаще всего является вторичным. Также может вызывать остеомиелит, септический артрит, эндокардит, перитонит, целлюлит и абсцессы мозга. Streptococcus pneumoniae является лидером среди инвазивных инфекций как среди молодых, так и у пожилых людей.

Антигены: 1. Поверхностный полисахаридный капсульный антиген(по нему выделяют 85 серотипов) 2. Полисахаридный антиген клеточной стенки и М-протеин

Факторы патогенности:

1. Адгезия (полисахариды капсулы и белок М)

2. Гемолизины

3. Ферменты: пептидазы – расщепляют секреторный IgA; гиалуронидаза –

обеспечивает распространение пневмококка в тканях

4. Агрессины (к ним же относится протеин М)– подавляющие фагоцитоз

Пневмококки вызывают:

1.Бронхиты, пневмонии , риниты, синуситы, отиты

2. Реже: менингиты

3. У пожилых людей и маленьких детей – генерализованные формы инфекции: менингиты, сепсис

Микробиологическая диагностикаБактериологическийПодходящим для проведения анализа считается образец мокроты, собранный до начала антибиотикотерапии, полученный при глубоком откашливании и удовлетворяющий следующим критериям, исследования мокроты должно быть выполнено не позднее 2 ч после ее получения.

Бактериоскопический-ммазок мокроты окраска по граму.

Главными факторами патогенности пневмококка считают капсулу и субстанцию С.

Капсула пневмококка — основной фактор вирулентности. Она защищает бактерии от микробицидного потенциала фагоцитов и действия опсонинов. Некапсулированные штаммы пневмококка практически авирулентны, их обнаруживают редко. Большую часть пула противопневмококковых AT составляют AT к Аг капсулы.

Лабораторная диагностика. В основном – бактериологическое исследование (наблюдают гемолиз), редко – биопроба (заражение белых мышек) для выделения чистой культуры с последующей ее идентификацией.

Профилактика и лечение.Существует поливалентная полисахаридная пневмококковая вакцина, которая может использоваться с целью вакцинопрофилактики групп риска (ослабленных детей, пожилых людей). Для лечнния применяют различные антибиотики (бета-лактамы, макролиды и др)

БИЛЕТ 36

1. 
   Морфология бактерий. Основные формы бактерий. Строение и химический состав различных структур бактериальной клетки: нуклеоид, мезосомы, рибосомы, цитоплазматические включения, их функции.
   

По форме выделяют следующие основные группы микроорганизмов.

1.Шаровидные или кокки ( с греч.- зерно).

2.Палочковидные.

3.Извитые.

4.Нитевидные.

Кокковидные бактерии (кокки) по характеру взаиморасположения после деления подразделяются на ряд вариантов.

1.Микрококки. Клетки расположены в одиночку. Входят в состав нормальной микрофлоры, находятся во внешней среде. Заболеваний у людей не вызывают.

2.Диплококки. Деление этих микроорганизмов происходит в одной плоскости, образуются пары клеток. Среди диплококков много патогенных микроорганизмов- гонококк, менингококк, пневмококк.

3.Стрептококки. Деление осуществляется в одной плоскости, размножающиеся клетки сохраняют связь (не расходятся), образуя цепочки. Много патогенных микроорганизмов- возбудители ангин, скарлатины, гнойных воспалительных процессов.

4.Тетракокки. Деление в двух взаимоперпендикулярных плоскостях с образованием тетрад (т.е. по четыре клетки). Медицинского значения не имеют.

5.Сарцины. Деление в трех взаимоперпендикулярных плоскостях, образуя тюки (пакеты) из 8, 16 и большего количества клеток. Часто обнаруживают в воздухе.

6.Стафилококки (от лат.- гроздь винограда). Делятся беспорядочно в различных плоскостях, образуя скопления, напоминающие грозди винограда. Вызывают многочисленные болезни, прежде всего гнойно- воспалительные.

Палочковидные формы микроорганизмов.

1.Бактерии- палочки, не образующие спор.

2.Бациллы- аэробные спорообразующие микробы. Диаметр споры обычно не превышает размера (“ширины”) клетки (эндоспоры).

3.Клостридии- анаэробные спорообразующие микробы. Диаметр споры больше поперечника (диаметра) вегетативной клетки, в связи с чем клетка напоминает веретено или теннисную ракетку.

Необходимо иметь в виду, что термин “бактерия” часто используют для обозначения всех микробов- прокариот. В более узком (морфологическом) значении бактерии- палочковидные формы прокариот, не имеющих спор.

Извитые формы микроорганизмов.

1.Вибрионы и кампилобактерии- имеют один изгиб, могут быть в форме запятой, короткого завитка.

2.Спириллы- имеют 2- 3 завитка.

3.Спирохеты- имеют различное число завитков, аксостиль- совокупность фибрилл
1.Нуклеоид – эквивалент ядра эукариот, отличающийся от него по структуре, хим.составу.

- лишен ядерной мембраны

- представлен одной хромосомой

- не делится митозом

- отсутствуют белки-гистоны

Содержит двухнитевую ДНК, замкнутую в кольцо, небольшое кол-во РНК и белки.

2.Плазмиды – кольцевые молекулы двухнитевой ДНК с меньшей молекулярной массой. Не являются жизненно необхожимой для бактериальной клетки.

3.Мезосомы – производные цитоплазматической мембраны (синтез АТФ)

Неодинаковые по строению, расположенные в разных частях клетки в виде: 1. Пузырьков, 2. Трубочек 3. Петли

Они связаны с нуклеоидом

Ф-и : синтез АТФ, участвуют в делении клетки, спорообразовании

4. Рибосомы – рибонуклепротеидные частицы(20нм), состоящие из 2-ъ субъединиц 30S и 50S=70 S

У бактерий рибосомы не объединены в ЭПС, поэтому являются мишенью для антибиотиков.

Ф-и: синтез белка

5.Включения – продукты метаболизма, использующиеся в качестве запасных питательных веществ. К ним относятся: гликоген, крахмал, зерна волютина(запасные вещества полифосфатной природы. У бактерий и актиномицетов располагаются в цитоплазме, у дрожжей и грибов – в вакуолях.)

2. 
   Интерфероны, как факторы противовирусного иммунитета. Типы интерферонов, интерфероногены, способы получения интерферонов
   

ИФ-альфа, продуцируется лейкоцитами, противовирусным, антипролиферативным, противоопухолевым действием. Нарушает репродукцию вирусов, активируя в клетки ингибиторов релекации вируса.

ИФ-бэта, продуцируется фибробластами, противоопухолевым и противовирусным действием.

ИФ-гамма, продукт Т – хелперов, противовирусное действия. Влияет на рост клеток, активирует макрофаги, повышает продукцию ИЛ-1.

Интерферон относится к важным защитным белкам иммунной системы. Открыт при изучении интерференции вирусов, т. е. явления, когда животные или культуры клеток, инфициро­ванные одним вирусом, становились нечувс­твительными к заражению другим вирусом. Оказалось, что интерференция обусловлена образующимся при этом белком, обладаю­щим защитным противовирусным свойством. Этот белок назвали интерфероном.

Интерферон представляет собой семейство белков-гликопротеидов, которые синтезируются клетками иммунной системы и соединитель­ной ткани. В зависимости от того, какими клетками синтезируется интерферон, выделя­ют три типа: α, β и γ-интерфероны.

Альфа-интерферон вырабатывается лейко­цитами и он получил название лейкоцитар­ного; бета-интерферонназывают фибробластным, поскольку он синтезируется фибробластами — клетками соединительной ткани, а гамма-интерферон — иммунным, так как он вырабатывается активированными Т-лимфоцитами, макрофагами, естественными киллерами, т. е. иммунными клетками.

Интерферон синтезируется в организме постоянно, и его концентрация в крови де­ржится на уровне примерно 2 МЕ/мл (1 меж­дународная единица — ME — это количество интерферона, защищающее культуру клеток от 1 ЦПД₅₀ вируса). Выработка интерферона резко возрастает при инфицировании виру­сами, а также при воздействии индукторов интерферона, например РНК, ДНК, сложных полимеров. Такие индукторы интерферона получили название интерфероногенов.

Помимо противовирусного действия интер­ферон обладает противоопухолевой защитой, так как задерживает пролиферацию (размноже­ние) опухолевых клеток, а также иммуномодулирующей активностью, стимулируя фагоцитоз, естественные киллеры, регулируя антителообразование В-клетками, активируя экспрессию главного комплекса гистосовместимости.

Механизм действия интерферона сложен. Интерферон непосредственно на вирус вне клетки не действует, а связывается со спе­циальными рецепторами клеток и оказыва­ет влияние на процесс репродукции вируса внутри клетки на стадии синтеза белков.

Применение интерферона. Действие интерферона тем эффективнее, чем раньше он начинает синтезироваться или пос­тупать в организм извне. Поэтому его использу­ют с профилактической целью при многих ви­русных инфекциях, например гриппе, а также с лечебной целью при хронических вирусных инфекциях, таких как парентеральные гепати­ты (В, С, D), герпес, рассеянный склероз и др. Интерферон дает положительные результаты при лечении злокачественных опухолей и забо­леваний, связанных с иммунодефицитами.

Интерфероны обладают видоспецифичностью, т. е. интерферон человека менее эффек­тивен для животных и наоборот. Однако эта видоспецифичность относительна.

Получение интерферона. Получают интерферон двумя способами: а) путем инфи­цирования лейкоцитов или лимфоцитов кро­ви человека безопасным вирусом, в результате чего инфицированные клетки синтезируют интерферон, который затем выделяют и конс­труируют из него препараты интерферона; б) генно-инженерным способом — путем выра­щивания в производственных условиях рекомбинантных штаммов бактерий, способных продуцировать интерферон. Обычно используют рекомбинантные штаммы псевдомонад, кишечной палочки со встроенными в их ДНК генами интерферона. Интерферон, получен­ный генно-инженерным способом, носит на­звание рекомбинантного. В нашей стране рекомбинантный интерферон получил офици­альное название «Реаферон». Производство этого препарата во многом эффективнее и дешевле, чем лейкоцитарного.

Рекомбинантный интерферон нашел ши­рокое применение в медицине как профилак­тическое и лечебное средство при вирусных инфекциях, новообразованиях и при иммунодефицитах.

3. 
   Энтеробактерии
   

Классификация энтеробактерий:

• 
  p. Escherichia, в. E. coli
  
• 
  p. Salmonella, в. S. typhi, S. paratyphi A, S. paratyphi B, S. enteritidis, S. typhimurium, S. anatum, S. infantis, S. Haifa, S.panama
  
• 
  p. Shigella, в. S. dysenteriae, S. sonnei, S. flexneri, S. boydii
  
• 
  p. Klebsiella, в. K. pneumoniae, K. rhinoscuromatis, K. ozaenae
  
• 
  p. Proteus, в. P. vulgaris, P. mirabilis
  
• 
  p. Yersinea, Y. pestis, Y. enterocolitica, Y. psevdotuberculosis
  

Условно-патогенные токсико-пищевые инфекции:

• 
  p. Citrobacter
  
• 
  p. Enterobacter
  
• 
  p. Hafnia
  

Общая характеристика энтеробактерий.

Бактерии этого семейства являются наиболее частыми возбудителями кишечных инфекций. Их объединяет ряд общих признаков. Это короткие, не образующие спор, гр- палочки с закругленными концами, подвижные (перитрихи) или неподвижные, некоторые имеют капсулы. Аэробы или факультативные анаэробы. хемоорганотрофы; Характерна отрицательная окраска по Граму.

Хорошо растут на обычных питательных средах с мясном экстрактом. На большинстве плотных сред энтеробактерии образуют круглые выпуклые блестящие S- (гладкие) колонии, а также часто обусловленные потерей капсулы плоские, неровные и зернистые R- (шероховатые) формы. Для них

характерна ферментация глюкозы (и других углеводов) с образованием кислоты и газа. По отношению к лактозе их делят на лактоза- ферментирующие и лактоза - неферментирующие. Каталаза - положительны, восстанавливают нитраты в нитриты.

Метаболизм дыхательный и бродильный (с образованием молочной, муравьиной и уксусной кислоты); оксидазоотрицательные, каталазоположительные.

Основной дифференцирующий признак – ферментация лактозы.

С целью выявления данного признака в бактериологическом методе диагностики применяют ряд дифференциально- диагностических сред: Эндо, Плоскирева, Левина, агар МакКонки

1. Главное место обитания – кишечник человека и животных. При определенных условиях могут покидать данный биотоп и вызывать другие заболевания.

2. Сохраняют жизнеспособность во внешней среде на протяжении определенного срока.

3. Гр-, ФАН, мезофиллы, оптимум роста 37°С. Хорошо растут на простых питательных средах. Формируют R- илиS-формы колоний.

4. Биохимические свойства вариабельны у разных родов и видов. Различия используются для классификации энтеробактерий. Чем менее выражены биохимические свойства, тем более патогенен.

5. АГ структура:

а) О-АГ – ЛПС КС, термостабилен, имеется у всех представителей семейства (эндотоксин)

б) Н-АГ – есть у подвижных видов, белковый, термолабильный, обладает высокой иммуногенностью, но не токсичен.

в) К-АГ – гетерополисахарид, АГ структура используется для систематики энтеробактерий для выделения родов, видов, сероваров, субсероваров.

6. Патогенность: 1) облигатно-патогенные – способны вызывать заболевания у здорового человека 2) условно-патогенные – вызывают заболевания при попадании в большом количестве в нехарактерный для них биотоп и у лиц со сниженным иммунитетом 3) непатогенные.

БИЛЕТ 37

1. 
   Прокариоты и эукариоты, их отличия по структуре, химическому составу, функции.
   

Прокариоты – одноклеточные организмы

1. 
   Нет ядра
   
2. 
   Нет ядерной мембраны
   
3. 
   Гаплоидный набор хромосом
   
4. 
   Отсутствие ЭПС, аппарата Гольджи, митохондрий, хлоропластов, лизосом.
   
5. 
   Есть рибосомы 70S и мезосомы (дыхание)
   
6. 
   Размножение – простое бинарное деление
   
7. 
   В составе клеточной стенки есть пептидогликан
   
8. 
   Неспособность к эндоцитозу (захвату частиц пищи).
   
9. 
   Клеточное деление не связано с циклическими изменениями строения клетки.
   
10. 
    Значительно меньшие размеры (как правило). Большая часть бактерий имеет размеры 0,5- 0,8 микрометров (мкм) х 2- 3 мкм, или до 5 мкм.
    

Эукариоты – многоклеточные организмы

1. 
   Есть ядро
   
2. 
   Есть ядерная мембрана
   
3. 
   Диплоидный набор хромосом
   
4. 
   Наличие развитой эндоплазматической сети, аппарата Гольджи, митохондрий, хлоропластов, лизосом
   
5. 
   Есть рибосомы 80S
   
6. 
   Размножение половым и бесполым путем
   
7. 
   Дыхание в митохондриях
   
8. 
   В составе клеточной стенки нет пептидогликана, в основе- целлюлоза, хитин
   
9. 
   Размеры до 40мкм
   

Прокариоты включают 4 категории: 1.Гр+бактерии, имеющие КС, 2. Гр- бактерии, имеющие КС,3.Эукбактерии, лишенные КС. 4.Архебактерии

Эукариоты включают : 1.Грибы 2.Простейшие – не имеют КС, сложная организация, передвигаются с помощью жгутиков, ресничек, псевдоподий. В неблагоприятных условиях образуют кисты

2. 
   Особенности противовирусного иммунитета( механизмы, действующие на внеклеточные формы вирусов-вирионы и против внутриклеточных форм вирусов).
   

Особенности иммунной защиты макроорганизма при вирусных инфекциях обусловлены двумя формами существования вируса: внеклеточной и внутриклеточной. Основными факторами, обеспечивающими противовирусный иммунитет, являются специфические антитела, Т-киллеры, естественные киллеры, интерферон и сывороточные ингибиторы вирусных частиц.

Специфические противовирусные антитела способны взаимодействовать только с внеклеточным вирусом, так как у них нет доступа внутрь живой клетки. Антитела нейтрализуют вирусные адгезины и нейраминидазы, препятствуя адсорбции вирусов на клетках-мишенях и их инфицированию. Они также связывают вирусные белки и нуклеиновые кислоты, образовавшиеся после разрушения зараженных вирусами клеток. Сформировавшиеся иммунные комплексы элиминируются путем иммунного фагоцитоза. Специфическое связывание антител с вирусными белками, экспрессированными на цитоплазматической мембране инфицированных клеток, индуцирует естественные киллеры к АЗКЦТ Антителозависимая клеточно-опосредованная цитотоксичность

АЗКЦТ реализуется благодаря экспрессии на мембране иммунокомпетентных клеток рецепторов к Fc-фрагменту молекулы иммуноглобулина (FcR). Эти рецепторы являются трансмембранными белковыми молекулами и специфичны к определенному изотипу тяжелой цепи молекулы Ig, связанной в иммунный комплекс. Поэтому распознавание чужеродных клеток происходит при помощи FcR по антителам, которые предварительно связались с поверхностными антигенами клеток-мишеней. АЗКЦТ могут осуществлять активированные макрофаги, естественные киллеры и эозинофилы.

Клетки, инфицированные вирусом и приступившие к его репликации, экспрессируют вирусные белки на цитоплазматической мембране в составе молекул антигенов гистосовместимости - MHC I класса. Измененная структура MHC I класса этих антигенов гистосовместимости является маркером для Т-киллеров, которые распознают зараженные вирусом клетки и уничтожают их.

Мощным противовирусным свойством обладает интерферон Он не действует непосредственно на внутриклеточный вирус, а связывается с рецептором на мембране клетки и подавляет в ней все биосинтетические процессы.

Сывороточные ингибиторы неспецифически связываются с вирусной частицей и нейтрализуют ее, препятствуя тем самым адсорбции вируса на клетках-мишенях.

Напряженность противовирусного иммунитета оценивают преимущественно в серологических тестах по нарастанию титра специфических антител в парных сыворотках в процессе болезни. Определяют также концентрацию интерферона в сыворотке крови.

Для усиления противовирусной защиты используют средства, повышающие продукцию собственного интерферона (интерфероногены). В качестве индукторов эндогенного интерферона применяют противовирусные вакцины, препараты РНК и ДНК.

Интерфероны (ИФ) были открыты как противовирусные агенты. Затем были обнаружены их иммунорегулирующие свойства. Существует три разновидности ИФ: α, β относимые к первому классу, и ИФ-γ, относимый к второму классу.

ИФ-α, продуцируемый лейкоцитами, обладает преимущественно противовирусным, антипролиферативным и противоопухолевым действием. Он вырабатывается во всех клетках под действием вируса. Под влиянием ИФ-α клетка начинает вырабатывать ферменты, которые расщепляют вирусную нукл.кислоту или нарушает трансляцию с вирусн.нукл. кислоты на рибосомы. Больше всего этого интерферона вырабатывается клетками мозга, меньше всего клетками скелетной мускулатуры и миокарда, котрые чаще всего и страдают при вирусных инфекциях.

ИФ-β, образуемый фибробластами, обладает преимущественно противоопухолевым, а также антивирусным действием.

ИФ-γ - продукт Т- хелперных (Тх0 и Txl), а также CD8+ Т-лимфоцитов - именуется лимфоцитарным и иммунным. Он обладает преимущественно иммуномодулирующим и слабым противовирусным эффектом. γ-ИНФ продуцируется Т-хелперами и почти всеми супрессорами. Является активатором мононуклеарных фагоцитов, стимулирует процесс переваривания поглощенных микробов и опухолевых клеток. Индуцирует экспрессию антигенов МНС, способствует распознаванию чужеродных антигенов, созреванию и дифференциации Т- и В-лимфоцитов, стимулирует процесс образования антител. Активирует нейтрофилы, нормальные киллеры, эндотелиальные клетки.

Продукцию интерферонов I класса индуцируют вирусы и препараты двунитчатой ДНК,

продукцию ИФ-γ - антигены и митогенные препараты.

Противовирусный эффект ИФ обусловлен способностью активировать в клетках синтез ингибиторов и ферментов, блокирующих репликацию вирусной ДНК и РНК, что приводит к подавлению репродукции вируса. Таков же механизм антипролиферативного противоопухолевого действия ИФ.

Различают следующие классы человеческого интерферона

− α-интерферон, продуцируется лейкоцитами, известно 14 субтипов;

− β-интерферон, продуцируется фибробластами, известно 5 субтипов;

− γ-интерферон, продуцируется лимфоцитами, ЕК, известен 1 субтип.__

ИФ-γ - полифункциональный иммуномодулирующий лимфокин, влияющий на рост и дифференцировку клеток разных типов. Он активирует макрофаги на этапе передачи антигенной информации лимфоциту, повышает их антимикробную и противоопухолевую активность, продукцию ИЛ-1. ИФ-γ воздействует на клетки-«мишени» иммунологических воздействий, активируя экспрессию антигенов главного комплекса тканевой совместимости, рецепторов лимфотоксина, обеспечивая повышение эффективности иммунологического воздействия. ИФ-γ активирует естественные киллеры, цитотоксические лимфоциты, подавляющие рост опухолей. Ряд эффектов ИФ-γ осуществляет совместно с другими цитокинами, в частности формирование миелоидных клеток из костномозговых предшественников, дифференцировку и активацию В-лимфоцитов, стимуляцию гуморального и клеточного иммунитета.

У здоровых людей ИФ в крови не обнаруживаются. Их уровень повышен при красной волчанке, ревматоидном артрите, склеродермии. Наличие интерферона в крови этих больных увеличивает резистентность к вирусным инфекциям и опухолям, но неблагоприятно сказывается на развитии аутоиммунных процессов, свойственных этим заболеваниям.

Препараты интерферонов используются для лечения лейкемий и некоторых других онкологических процессов.

3. 
   Кампилобактерии, история открытия, характеристика возбудителей, вызываемые заболевания. Патогенез. Эпидемиология, лабораторная диагностика, профилактика.
   

Заболевания – кампилобактериозы

• Активное изучение кампилобактерий начато с 1963 года. До 1963 года эти бактерии относили к роду Vibrio. В настоящее время некоторые авторы относят к семейству Spirillaceae, другие выделяют в отдельное семейство - Campylobacteriaceae

• Род Campylobacter

• Виды (термофилы, более вирулентные): C. jejuni C. coli C. laridis и др.

• Виды (мезофилы): C. fetus C. sputorum C. faecalis и др.

БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА КАМПИЛОБАКТЕРИЙ (от греч. сampilos – кривой, изогнутый)

• Грамотрицательные, S-образная форма клетки, в мазках располагаются попарно («крылья чайки»),

• 0,5 – 5 мкм

• Подвижные, два полярных жгутика, совершают винтообразное движение

• Спор, капсулы нет, есть микрокапсула

• Окрашиваются фуксином Циля

Хемоорганотрофы

• Микроаэрофилы (растут в атмосфере СО2 , при О2 от 3 до 15 %)

• Не ферментируют углеводы, энергию получают, расщепляя аминокислоты и промежуточные продукты цикла Кребса

• Специальные питательные среды: КА, ША

• Среды дифференциально-диагностические содержат соли желчных кислот

• Культуральные свойства: колонии мелкие 1-2 мм, напоминают капли конденсата

• Антигены недостаточно изучены

• По О-антигену деление на серовары

• Н-антиген общий у всех сероваров ФАКТОРЫ ПАТОГЕННОСТИ

• Адгезия

• Инвазия

• Подвижность

• Энтеротоксины двух типов ЭПИДЕМИОЛОГИЯ КАМПИЛОБАКТЕРИОЗОВ

• Антропозооноз

• Источник инфекции – больные люди и животные (коровы, куры, кошки, собаки и др.)

• Заражение от человека к человеку редко, чаще регистрируютсясемейные вспышки

• Пути передачи:

• Пищевой (мясо кур и другие мясопродукты в вакуумных упаковках);

• Водный;

• Контактно бытовой – при несоблюдении правил личной гигиены;

• Профессиональный – чаще болеют работники птицефабрик

• Сохраняют жизнеспособность в окружающей среде до 1 года КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ Вызывают различные заболевания у человека.

• Кишечный кампилобактериоз – диареи, энтероколиты.

• Внекишечные формы локальные или генерализованные.

• Перинатальные инфекции – заболевания плода и новорождённых.

• Заболевания ротовой полости – гингивиты, стоматиты, десневая борозда и др.

• Пищевые отравления.

• В большинстве случаев заболевание заканчивается спонтанным выздоровлением. Антибиотики назначают при угрозе осложнений

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА КАМПИЛОБАКТЕРИОЗОВ

Бактериологическая диагностика.

Микроскопия мазков из фекалий , окрашенных по Граму. Применяют также фазово-контрастную микроскопию суспензии фекалий в жидкой среде. Бактериологический метод- для выделения чистой культуры возбудителя из векалий, рвотных масс, промывных вод желудка.

Серологический метод- для выявления антител в реакциях РПГА, РСК, РА и ИФА. Экспресс – диагностика включает в себя постановку РИФ со специфическими люминисцентными сыворотками.

Специфическая профилактика отсутствует.

БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ HELICOBACTER PYLORI - ВОЗБУДИТЕЛЯ ЯЗВЫ ЖЕЛУДКА И 12-ПЕРСТНОЙ КИШКИ

• Ранее относили к кампилобактериям, в настоящее время выделены в отдельный род Helycobacter

• Поражают желудок и 12-перстную кишку

• Обладают повышенной адгезивной и инвазивной активностью к слизистой желудка и 12-перстной кишки

• Высокая уреазная активность – образование аммиака вызывает химическое поражение ткани с образованием язвы

• Белки клеточной стенки – ингибиторы секреции соляной кислоты

• Глюкозофосфатаза – разрушает защитный сульфомукополисахарид слизистой оболочки

• Протеаза и фосфолипаза – нарушает целостность эпителиального слоя, обеспечивает проникновение возбудителя в межклеточное пространство

• Каталаза и алкогольдегидрогиназа – образуют перекисные радикалы, повреждают эпителий и защищают микроб от фагоцитоза

• Цитотоксины – вакуолизируют и повреждают клетки желудка

• ЛПС – стимулируют миграцию нейтрофилов, развивается воспаление

Методы диагностики : Инвазивные: быстрый уреазный тест с биоптатом слизистой оболочки желудка, микроскопия мазка из биоптатов ; бактериологический метод; гистологический метод ;изучение состава нуклеиновых кислот с помощью гибридизации, ПЦР ; исследование желудочного . Неинвазивные : определение IgA, IgM, IgG- антител в сыворотке крови; дыхательные тесты; ПЦР (исследование слюны,фекалий)

БИЛЕТ 38

1. 
   Плазмиды бактерий, виды плазмид и их роль в детерминации патогенных признаков и лекарственной устойчивости.
   

Плазмиды.

а) фрагменты ДНК с молекулярной массой 106 – 108 Д

б) содержат 40 – 50 генов

Функции:

а) Регуляторные – компенсация метаболических дефектов

б) Кодирующие – вносят информацию о новых признаках

Классификация:

По отношению к хромосоме:

а) автономные (эписомы) – замкнуты в кольцо, свободно располагаются в цитоплазме;

б) интегрированные – входят в состав хромосомы

По способности самостоятельно переходить от клетки-донора к клетке-реципиенту:

а) Конъюгативные – содержат tra-оперон (от англ. transfer - перенос) , при конъюгации переходят в клетку-реципиент

б) Неконъюгативные – отсутствует tra-оперон, самостоятельно не переходят при конъюгации, могут переходить в составе другой конъюгативной плазмиды;

Виды плазмид.

1. 
   R-плазмиды:
   

отвечают за синтез ферментов, инактивирующих антибиотики, что обеспечивает

устойчивость бактерий к антибиотикам (бета-лактамазы и пр.);

2. 
   Плазмиды патогенности:
   

Tox – отвечают за синтез экзотоксинов

Hly – отвечают за синтез гемотоксинов (вызывают гемолиз);

Ent – отвечают за синтез энтеротоксинов и пр.

3. 
   Плазмиды бактериоциногении (Col-плазмида)
   

Отвечают за синтез веществ бактериоцинов. Бактериоцины – вещества, способные вызвать гибель бактерий того же вида или близких видов (низкомолекулярные белковые токсины). Они являются факторами микробного антагонизма.

Механизм губительного действия: нарушение функций цитоплазматической мембраны или нарушения процессов синтеза белка.

Известно около 200 разновидностей бактериоцинов. Их продуцируют практически все микроорганизмы. Называются бактериоцины в соответствии с микроорганизмами, которые их продуцируют: стафилоцины (у стафилококков), протеоцины (у протеев), пиоцины (у синегнойной палочки), пестицины (у возбудителя чумы Yersinia pestis), колицины (у кишечной палочки).

В популяции клетка-продуцент бактериоцинов присутствует с частотой 1:1000 бактерий (то есть 1 клетка из 1000 спонтанно продуцирует бактериоцины). Продукция бактериоцинов сопровождается гибелью клетки-продуцента. Остальные особи данной популяции устойчивы к действию собственного бактериоцина.

Первые бактериоцины изучены у кишечной палочки. Плазмида, отвечающая за синтез колицинов, получила название Col-плазмиды. Известно около 25 разновидностей колицинов, отличающихся друг от друга по антигенным свойствам, физико-химическим свойствам и способности адсорбироваться на соответствующих рецепторах поверхности бактериальной клетки.

Таким образом, чувствительность к бактериоцинам обусловлена наличием соответствующих рецепторов на поверхности клетки.

Бактериоцины обозначают латинскими буквами A,B,C,D,E1,E2,K,F и пр.

Явление бактериоциногении используется в эпидемиологических исследования для внутривидовой дифференцировки бактерий, позволяющей определить источник инфекции.

Используемая методика получила название - бактериоцинотипирование (колицинотипирование, пиоцинотипирование и пр.). Бактерии типируют о типам продуцируемых бактериоцинов, или по чувствительности к определенным типам бактриоцинов.

Кроме того, явление бактерициногении используется создании штаммов с выраженными антагонистическими свойствами, используемых для лечении и профилактики инфекций, дизбиозов (колибактерин, лактобактерин и пр.)

4. 
   Плазмиды биодеградации
   

Плазмиды, обеспечивающие деградацию неприродных соединений: камфоры, толуола и пр.

5. 
   F-плазмиды (F-фактор)
   

Плазмиды, отвечающие за синтез половых ворсинок (пилей). Эти плазмиды получили название «половой фактор». Половые ворсинки обеспечивают контакт между клетками в виде мостика (конъюгационный мостик), по которому в клетку-реципиент может переходить часть генома донорской клетки. Этот процесс получил название «конъюгация». F-плазмида располагается автономно и является конъюгативной; в связи с чем легко передается при конъюгации. Клетку, имеющую F-плазмиду обозначают F+ - она синтезирует половые ворсинки и является донорской клеткой, клетку, у которой отсутствует F-плазмида

обозначают F- - она является реципиентом. При конъюгации в случае автономности F-плазмиды передается сама плазмида и реципиент становиться F+ - то есть приобретает способность синтезировать половые ворсинки (F-пили).

F-плазмида может объединяться с хромосомой. Такие штаммы получили название Hfr- штаммы (от англ. high frequency of recombination – высокая частота рекомбинаций) В этом случае при конъюгации передается не сама F-плазмида, а фрагмент хромосомы. То есть в клетку-реципиент могут перейти различные гены, отвечающие за различные признаки. При этом клетка-реципиент не получает F-плазмиды и, соответственно, способности синтезировать F-пили.

2. 
   Что-то про комплемент
   

Система комплемента- комплекс белков и гликопротеидов сыворотки крови человека и позвоночных животных (их более 20). Отдельные компоненты опосредуют процессы воспаления, опсонизацию чужеродных фрагментов для последующего фагоцитоза, участвуют наряду с макрофагами в непосредственном уничтожении микроорганизмов и других чужеродных клеток (лизис бактерий и вирусов). В условиях физиологической нормы компоненты системы комплемента находятся в неактивной форме. Известны три пути активации системы комплемента- классический, альтернативный и с использованием С1- шунта.

Кл а с си че с к ий путь осуществляется с участием антител.

Пр и этом способе активации происходит присоединение к комплексу антиген — антитело (АГ + AT) вначале компонента С1 комплемента (его трех субъединиц C1q, C1r, C1s), затем к образовавшемуся комплексу АГ + AT + С1 присоединяются последовательно «ранние» компоненты комплемента С4, С2, СЗ. Эти «ранние» компоненты активируют с помощью ферментов компонент С5, причем реакция протекает уже без участия комплекса АГ + AT. Компонент С5 прикрепляется к мембране клетки, и на нем образуется литический комплекс из «поздних» компонентов комплемента С5b, С6, С7, С8, С9. Этот литический комплекс называется мембраноатакующим (МАК), так как он осуществляет лизис клетки.

Ал ьте рн атив ный путь активации комплемента происходит без участия антител

и осуществляется до выработки антител в организме. Альтернативный путь также

заканчивается активацией компонента С5 и образованием мембраноатакующего комплекса, но без участия компонентов С1, С2, С4. Весь процесс начинается с активации компонента СЗ, которая может происходить непосредственно в результате прямого действия антигена (например, полисахарида микробной клетки). Активированный компонент СЗ взаимодействует с факторами В и D (ферментами) системы комплемента и белком пропердином (Р). Образовавшийся комплекс включает компонент С5, на котором и формируется мембраноатакующий комплекс, как и при классическом пути активации комплемента.

Таким образом, все пути активации комплемента завершаются образованием

мембраноатакующего литического комплекса. Механизм действия этого комплекса на клетку до конца не выяснен. Однако известно, что этот комплекс внедряется в мембрану, образует как бы воронку с нарушением целостности мембраны. Это приводит к выходу из клетки низкомолекулярных компонентов цитоплазмы, а также белков, поступлению в клетку воды, что в конечном итоге приводит к гибели клетки .

Система комплемента обеспечивает:

- цитолитическое и цитотоксическое действие антител на клетки-мишени

(бактерии, вирусы, эритроциты и др.)

- благодаря образованию мембраноатакующего комплекса (компоненты С5-С9) активацию фагоцитоза: компоненты С3b, С4b являются опсонинами, повышают адгезию иммунных комплексов с мембранами макрофагов, нейтрофилов, эритроцитов и тем самым усиливают фагоцитоз

- развитие воспаления: образующиеся С3а, С4а, С5а компоненты являются анафилотоксинами, они связываются с рецепторами кровяных и тканевых базофилов, индуцируют их дегрануляцию – выброс гистамина, сероторина и других вазоактивных медиаторов (медиаторов воспалительного ответа).

Кроме того, С5а является хемотаатрактантом для фагоцитов, он привлекает эти клетки в очаг воспаления.

Следовательно, комплемент обладает многосторонней иммунологической

активностью, участвует в освобождении организма от микроорганизмов и других антигенов, в уничтожении опухолевых клеток, отторжении трансплантатов, аллергических повреждениях тканей, индукции иммунного ответа.

Антитела, основные классы иммуноглобулинов, их структурные и функциональные особенности. Защитная роль антител в приобретенном антиинфекционном иммунитете.

Антитела - специфические белки гамма- глобулиновой природы, образующиеся в организме в ответ на антигенную стимуляцию и способные специфически взаимодействовать с антигеном (in vivo, in vitro). В соответствии с международной классификацией совокупность сывороточных белков, обладающих свойствами антител, называют иммуноглобулинами.

Уникальность антител заключается в том, что они способны специфически взаимодействовать только с тем антигеном, который вызвал их образование.

Иммуноглобулины ( Ig ) разделены в зависимости от локализации на три группы:

- сывороточные (в крови);

- секреторные ( в секретах- содержимом желудочно- кишечного тракта, слезном секрете, слюне, особенно- в грудном молоке) обеспечивают местный иммунитет (иммунитет слизистых);

- поверхностные ( на поверхности иммунокомпетентных клеток, особенно В- лимфоцитов).

Любая молекула антител имеет сходное строение ( Y- образную форму) и состоит из двух тяжелых ( Н ) и двух легких ( L ) цепей, связанных дисульфидными мостиками. Каждая молекула антител имеет два одинаковых антигенсвязывающих фрагмента Fab ( fragment antigen binding ), определяющих антительную специфичность, и один Fc ( fragment constant ) фрагмент, который не связывает антиген, но обладает эффекторными биологическими функциями. Он взаимодействует со “своим” рецептором в мембране различных типов клеток ( макрофаг, тучная клетка, нейтрофил).

Концевые участки легких и тяжелых цепей молекулы иммуноглобулина вариабельны по составу ( аминокислотным последовательностям ) и обозначаются как VL и VH области. Антигенсвязывающий центр антител комплементарен эпитопу антигена по принципу “ключ - замок” и образован гипервариабельными областями L- и Н- цепей. Антитело свяжется антигеном (ключ попадет в замок) только в том случае, если детерминантная группа антигена полностью вместится в щель активного центра антител. Л-цепи имеют одинковую структуру, а Н-цепи – специфичны для каждого имунноглобулина.

Существуют легкие цепи двух типов- каппа и лямбда, они встречаются в различных пропорциях в составе различных (всех) классов иммуноглобулинов.

Выявлено пять классов тяжелых цепей- альфа ( с двумя подклассами), гамма ( с четырьмя подклассами), эксилон, мю и дельта. Соответственно обозначению тяжелой цепи обозначается и класс молекул иммуноглобулинов- А, G, E, M и D.

Известно пять классов иммуноглобулинов, отличающихся по строению тяжелых цепей, молекулярной массе, физико- химическим и биологическим характеристикам: IgG, IgM, IgA, IgE, IgD. В составе IgG выделяют 4 подкласса ( IgG1, IgG2, IgG3, IgG4 ), в составе IgA- два подкласса (IgA1, IgA2 ).

Структурной единицей антител является мономер, состоящий из двух легких и двух тяжелых цепей. Мономерами являются IgG, IgA ( сывороточный), IgD и IgE. IgM- пентамер (полимерный Ig). У полимерных иммуноглобулинов имеется дополнительная j ( joint) полипептидная цепь, которая объединяет ( полимеризует) отдельные субъединицы (в составе пентамера IgM, ди- и тримера секреторного IgA).

Основные биологические характеристики антител.

1. Специфичность - способность взаимодействия с определенным (своим) антигеном (соответствие эпитопа антигена и активного центра антител).

2. Валентность- количество способных реагировать с антигеном активных центров ( это связано с молекулярной организацией- моно- или полимер). Иммуноглобулины могут быть двухвалентными ( IgG ) или поливалентными (пентамер IgM имеет 10 активных центров). Двух- и более валентные антитела навывают полными антителами. Неполные антитела имеют только один участвующий во взаимодействии с антигеном активный центр ( блокирующий эффект на иммунологические реакции, например, на агглютинационные тесты). Их выявляют в антиглобулиновой пробе Кумбса, реакции угнетения связывания комплемента.

3. Афинность - прочность связи между эпитопом антигена и активным центром антител, зависит от их пространственного соответствия.

4. Авидность - интегральная характеристика силы связи между антигеном и антителами, с учетом взаимодействия всех активных центров антител с эпитопами. Поскольку антигены часто поливалентны, связь между отдельными молекулами антигена осуществляется с помощью нескольких антител.

5. Гетерогенность - обусловлена антигенными свойствами антител, наличием у них антигенных детерминант

Характеристика основных классов иммуноглобулинов.

Ig G. Мономеры, включают четыре субкласса. Концентрация в крови 12г/л

Это основной класс иммуноглобулинов, защищающих организм от бактерий, токсинов и вирусов.

Взаимодействуют с мелкодисперсными антигенами.

В наибольшем количестве IgG- антитела вырабатываются на стадии выздоровления после инфекционного заболевания (поздние или 7S антитела), при вторичном иммунном ответе. IgG1 и IgG4 специфически (через Fab- фрагменты) связывают возбудителей (опсонизация), благодаря Fc- фрагментам IgG взаимодействуют с Fc- рецепторам фагоцитов, способствуя фагоцитозу и лизису микроорганизмов. IgG способны нейтрализовать бактериальные экзотоксины, связывать комплемент.

Только IgG способны транспортироваться через плаценту от матери к плоду (проходить через плацентарный барьер) и обеспечивать защиту материнскими антителами плода и новорожденного. В отличие от IgM- антител, IgG- антитела относятся к категории поздних- появляются позже и более длительно выявляются в крови.

IgM. Концентрация IgM в крови ниже, чем IgG- 0,5- 2,0 г/л .Молекула этого иммуноглобулина представляет собой полимерный Ig из пяти субъединиц, соединенных дисульфидными связями и дополнительной J- цепью, имеет 10 антиген- связывающих центров. Филогенетически это наиболее древний иммуноглобулин. IgM- наиболее ранний класс антител, образующихся при первичном попадании антигена в организм. Наличие IgM- антител к соответствующему возбудителю свидетельствует о свежем инфицировании (текущем инфекционном процессе).

Взаимодействуют с карпускулярным антигеном.

IgM- основной класс иммуноглобулинов, синтезируемых у новорожденных и младенцев. IgM у новорожденных- это показатель внутриутробного заражения (краснуха, ЦМВ, токсоплазмоз и другие внутриутробные инфекции), поскольку материнские IgM через плаценту не проходят.

IgM способны агглютинировать бактерии, нейтрализовать вирусы, активировать комплемент, активизировать фагоцитоз, связывать эндотоксины грамотрицательных бактерий. IgM обладают большей, чем IgG авидностью (10 активных центров), аффинность (сродство к антигену) меньше, чем у IgG.

IgA. Выделяют сывороточные IgA (мономер) и секреторные IgA (IgAs). Сывороточные IgA составляют 1,4- 4,2 г/л. Секреторные IgAs находятся в слюне, пищеварительных соках, секрете слизистой носа, в молозиве. Они являются первой линией защиты слизистых, обеспечивая их местный иммунитет. Секреторный компонент вырабатывается эпителиальными клетками слизистых оболочек и присоединяется к молекуле IgA в момент прохождения последней через эпителиальные клетки.

Секреторный компонент повышает устойчивость молекул IgAs к действию протеолитических ферментов. Основная роль IgA- обеспечение местного иммунитета слизистых. Они препятствуют прикреплению бактерий к слизистым, обеспечивают транспорт полимерных иммунных комплексов с IgA, нейтрализуют энтеротоксин, активируют фагоцитоз и систему комплемента.

Содержащийся секреторный иммуноглобулин А в молоке является фактором защиты ребенка, находящегося на естественном вскармливании. Взаимодействует с крупными(корпускулярными) и мелкодисперсными антигенами.

IgE. Представляет мономер, в сыворотке крови находится в низких концентрациях. Основная роль- своими Fc- фрагментами прикрепляется к тучным клеткам (мастоцитам) и базофилам и опосредует реакции гиперчувствительности немедленного типа. К IgE относятся “антитела аллергии”- реагины. Уровень IgE повышается при аллергических состояниях, гельминтозах. Антигенсвязывающие Fab- фрагменты молекулы IgE специфически взаимодействует с антигеном (аллергеном), сформировавшийся иммунный комплекс взаимодействует с рецепторами Fc- фрагментов IgE, встроенных в клеточную мембрану базофила или тучной клетки. Это является сигналом для выделения гистамина, других биологически активных веществ и развертывания острой аллергической реакции.

IgD. Мономеры IgD обнаруживают на поверхности развивающихся В- лимфоцитов, в сыворотке находятся в крайне низких концентрациях. Их биологическая роль точно не установлена. Полагают, что IgD участвуют в дифференциации В-клеток, способствуют развитию антиидиотипического ответа, участвуют в аутоиммунных процессах.(т.е. они являются антителами к собственным тканям)

3. 
   Онкогенные ДНК-вирусы. Общая характеристика. Вирусогенетическая теория возникновения опухолей Зильбера Л.А. Современная теория канцерогенеза
   

Л.Зильбер (1958 год) – сформулировал вирусогенетическую теорию рака.

Теория подтвердилась открытием принципиально важных моментов:

1. Интеграция вируса в геном клетки (предсказана Л.Зильбером)

2. Открытие приблизительно 30 вирусных онкогенов и приблизительно 30 клеточных

онкогенов (протоонкогенов)

Основные звенья при онкогенезе:

1. Активация клеточных протоонкогенов влияние на

2. Онкоген его продукт (онкобелок) →фенотип клетки.

Вирусные онкогены:

Какие вирусы содержат онкогены?

* РНК–вирусы (ретровирусы): содержат онкогены, но не нуждаются в нем (т.е. продукты онкогена не участвуют в жизненном цикле вируса)

* ДНК – вирусы – у большинства из них онкоген необходим для регуляции репликации вируса (т.е. продукты онкогена участвуют в жизненном цикле вируса)

Откуда онкоген у вирусов?

Существуют 2 предположения:

1. Из клеток – протоонкоген может перейти в вирусный геном при активации

интегрированного вирусного генома (по аналогии с профагом)

2. Возможна рекомбинация с другим вирусом!

Механизмы онкогенеза:

I. Экспрессия вирусного онкогена

II. Изменение экспрессии клеточных генов (в т.ч. протоонкогенов):

а) амплификация (увеличение количества копий) протоокогенов

б) активация провирусом клеточных промоторов или вирусный промотор встраивается

рядом с протоонкогеном (эндогенные ретровирусы)в) перестройки в хромосоме (транслокации) – протоонкоген попадает в зону

функционирования вирусного промотора (эндогенные ретровирусы)

г) мутации в протоонкогене

III. Неизвестные механизмы

Какие вирусы являются онкогенными?

• Все вирусы с интегративным типом взаимодействия с клеткой являются

потенциально онкогенными, т.е. ретровирусы и ДНК-вирусы

• В состав некоторых семейств входят облигатные онковирусы (т.е. обязательно

вызывают опухолевую трансформацию клетки)

Облигатные онковирусы:

ДНК- вирусы: сем. Papovaviridae роды: Papillomavirus, Poliomavirus

сем. Poxviridae

РНК - вирусы: сем. Retroviridae подсемейство Oncovirinae роды Oncovirus A,B,C,D

Папилломавирусы (Papillomavirus)

Инфицированы до 20 – 60% населения

Вызывают

1) доброк

2) злокачественные опухолевые процессы: карциномы, рак шейки матки

По ДНК выделяют более 60 типов: высоко канцерогенны 16, 18 типы

Пути заражения: половой, перинатальный, контактный

Диагностика: генетический метод (ПЦР)

Полиомавирусы (Poliomavirus):

В состав рода входят:

1.Не патогенные для человека вирусы:

обезьяний вирус ОВ40 (SV40, вирус симиан 40) - вакуолизирующий вирус;

• вызывает «вакуолизирующие» нефриты у приматов

• входил в состав живой полиомиелитной вакцины, получаемой на культуре почек

макак-резус

2.Патогенные для человека, но не вызывающие опухолевых процессов у людей

(опухолевые процессы вызывают только в эксперименте):

• BK – выделен из мочи пациента с пересаженной почкой, получавшего

иммунодепрессанты; • JC – выделен из ткани мозга пациента, страдавшего прогрессирующей

лейкоэнцефалопатией

• Аденоассоциированный вирус (роль в патологии не ясна)

Поксвирусы (сем. Poxviridae):

Вирусы передаются контактным путём!

В состав семейства входят вирусы:

• Вирус натуральной оспы – вызывает оспу у людей

• Вирус узелков доярок – резервуаром является: крупный рогатый скот, вызывает

высыпания на руках доярок

• Вирус осповакцины – вызывает оспу у коров

• Обезьяний вирус Яаба – вызывает оспу у обезьян и оспоподобную сыпь у людей

• Доброкачественные опухолевые процессы у людей:

1.Вирус контагиозного моллюска – вызывают узелки, переходящие в жемчужно-

розовые капсулы

2.Вирус оспы Тана – вызывают единичный везикулярный очаг, сопровождающийся

лихорадко

БИЛЕТ 39

1. 
   Основные принципы систематики микроорганизмов. Таксономические категории: царство, отдел, семейство, род, вид. Понятие штамм, клон, популяции.
   

Систематика включает три части: классификацию, таксономию и идентифика­цию.

Таксономия- наука о методах и принципах распределения (классификации) организмов в соответствии с их иерархией.

В основу таксономии микроорганизмов поло­жены их морфологические, физиологические, биохимические и молекулярно-биологические свойства. Различают следующие таксономи­ческие категории: 1.царство(вирусы, прокариоты, эукариоты) ,2. Подцарство( у прокариотов – Eubacteria, у эукариотов Mucota - грибы Protozoa – простейшие)- , 3.отдел, 4.класс,5. порядок, 6.семейство,8. род, 9.вид, 10.штамм. В рамках той или иной таксономичес­кой категории выделяют таксоны — группы организмов, объединенные по определенным однородным свойствам.

Микроорганизмы представлены доклеточными формами (вирусы — царство Vira) и клеточными формами (бактерии, архебактерии, грибы и простейшие). Различают 3 доме­на (или «империи»): «Bacteria», «Archaea» и «Eukarya»:

□ домен «Bacteria» — прокариоты, пред­ставленные настоящими бактериями (эубактериями);

□ домен «Archaea» — прокариоты, пред­ставленные архебактериями;

□ домен «Eukarya» — эукариоты, клетки которых имеют ядро с ядерной оболочкой и ядрышком, а цитоплазма состоит из высоко­организованных органелл — митохондрий, аппарата Гольджи и др. Домен «Eukarya» вклю­чает: царство Fungi (грибы); царство животных Animalia(включает прстейшие – подцарство Protozoa); царство растений Plante. Домены включают царства, типы, классы, порядки, семейства, роды, виды.

Вид – это совокупность микроорганизмов, имеющих общее эволюционное происхождение, близкий генотип (высокую степень генетической гомологии, как правило более 60%) и максимально близкие фенотипические характеристики.