Честнова т. В., Смольянинова о. Л. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология
 Скачать 1.58 Mb.
|
|
Тема 21. Поксивирусы 21.1. Возбудитель натуральной оспы. Натуральная оспа – особо опасная высококонтагиозная инфекция, характеризующаяся тяжелым течением, лихорадкой и обильной пустулезно-папулезной сыпью на коже и слизистых оболочках. Вирус натуральной оспы относится к семейству поксивирусов, роду ортопоксивирусы. Вирион вируса имеет овоидную форму. Это один из самых крупных вирусов. Впервые был обнаружен в 1906г. Е.Пашеном. Поверхность вириона состоит из нитевидных, овоидных элементов. Геном вириона – двунитевая линейная ДНК. Ортопоксивирусы синтезируют невирионный геммаггютинин. Антигенная структура: 1) нуклеопротеиновый Источником инфекции является больной человек. Заражение оспой происходит воздушно-капельным и воздушно-пылевым путем при разговоре, кашле, чиханьи, через пылевые частицы и предметы (одежда, белье, посуда). Обладая выраженным тропизмом к тканям эктодермального происхождения (кожа, слизистые оболочки), вирус длительное время находится в них, размножаясь и вызывая очаги поражения в коже (экзантема) и в тканях слизистых оболочек рта, языка, зева, гортани, трахеи (энантема). Для натуральной оспы характерны лихорадка, высыпания, образование пустул и рубцов на коже. После продромального периода и падения температуры появляется истинная сыпь на лице, туловище и конечностях; вначале она имеет папулезный характер, затем превращается в везикулезную и пустулезную. Оспенные везикулы многокамерные, с прозрачным содержимым, придающим им вид жемчужины, с перламутровым блеском, окружены красным узким ободком. Оспенные пустулы имеют кратерообразные вдавления на вершине. В стадии нагноения присоединяется вторичная (стафилококковая и стрептококковая) инфекция. У большинства переболевших на месте глубоких пустул образуются рубцы. Летальность в зависимости от тяжести болезни колеблется в широких пределах от 0 до 100%, в среднем она равна 15-20%. Различают следующие клинические форомы натуральной оспы: 1) тяжелые (геморрагическая оспа): оспенная пурпура, черная оспа, сливная оспа; 2) средней тяжести (рассеянная оспа); 3) легкие (вариолоид, оспа без сыпи, оспа без температуры). Для оспенной пурпуры характерным является развитие множественных кровоизлияний в кожу и слизистые оболочки, важным симптомом является кровоизлияния в субконъюнктивальную слизистую оболочку. Возникают обильные кровотечения из носа, рта, дыхательных путей, желудка, почек и других внутренних органов. Смерть обычно наступает на 2-3 день болезни еще до развития оспенных высыпаний от резкого упадка сердечной деятельности. При черной оспе кровоизлияния в содержимое пустул придают им вначале темно-коричневый, а позже черный цвет. У больных появляется кровь в мокроте, моче, рвотных массах. Смерть наступает на 8-12 день болезни. Для сливной оспы характерно образование большого количества высыпных элементов и ускоренное образование пустул. В период нагноения отдельные пустулы сливаются и образуют сплошные пузыри, заполненные гноем, иногда величиной больше ладони. Летальность при сливной оспе достигает 30%. В случае выздоровления на кожных покровах и особенно на лице остаются глубокие обезображивающие рубцы. Лабораторная диагностика. В качестве материала для выявления возбудителя берут содержимое кожных поражений: везикулярную или пустулезную жидкость, корочки, соскоб макул, папул, основания везикул. При отсутствии поражений на коже для выделения вируса могут быть использованы отделяемое зева и кровь. Для серологического исследования берут кровь и получают из нее сыворотку. Для диагностики оспы применяют вирусоскопический, вирусологичесикй и серологический методы исследования. Вирусоскопия заключается заключается в обнаружении телец Пашена в мазках, приготовленных из содержимого везикул и пустул, окрашенных серебрением по Морозову. При рассмотрении препарата под микроскопом тельца Пашена выглядят в виде мелких округлых образований темно-коричневого или черного цвета, расположенных поодиночке, парами, короткими цепочками и в виде скоплений. Тельца Гуарниери выявляют в клетках роговицы кролика, зараженного исследуемым материалом. Препараты обрабатывают по Романовскому-Гимзе, люминесценными красителями. Вирусологические исследования производятся для выделения вируса на хорион-аллантоисной оболочке куриного эмбриона и в культурах тканей. Для серологической диагностики оспы применяют: 1) реакцию микропреципитации в агаре (экспресс-диагностика), которая позволяет в материале от больного быстро обнаружить антиген вируса оспы; 2) реакцию торможения гемагглютинации-используют для определения титра антигемагглютининов в сыворотке больных. Лечение. В первые дни болезни применяют противооспенный иммуноглобулин, полученный из крови людей, специально ревакцинированных против оспы. При развитии вторичной инфекции назначают антибиотики (пенициллин, левомицетин, стрептомицин). Профилактика. Неспецифическая – включает меры по предупреждению завоза оспы в страну, раннюю диагностику, госпитализацию больных оспой, дезинфекцию в очаге. Специфическая профилактика – введение противооспенной вакцины. Переворот в деле успешной борьбы с оспой был связан с открытием Э. Дженнера, заметившего, что у крестьян английских деревень, доивших коров больных коровьей оспой, образуются на руках оспенные пузырьки, которые через несколько дней нагнаиваются, подсыхают и рубцуются. Лица, перенесшие коровью оспу, не болели натуральной оспой или переносили ее в легкой форме. Дженнер взял содержимое пустулы на руке крестьянки, пораженной коровьей оспой и привил на руку мальчику. Мальчик не заболел. В 1980г. ВОЗ объявила о полной ликвидации этой болезни во всем мире, в связи с чем прививки против оспы были повсеместно, в том числе и в нашей стране, прекращены. Тема 22. Энтеровирусные инфекции. 22.1. Вирус полиомиелита. Полиомиелит – острое инфекционное заболевание с поражением передних рогов спинного мозга, которое характеризуется развитием параличей с мышечной атрофией. Вирус относится к семейству пикорнавирусов, роду энтеровирусов. Это семейство относится к безоболочечным вирусам, содержащим однонитевую плюс РНК. Диаметр вируса около 30нм, вирион состоит из икосаэдрического капсида, окружающего однонитевую плюс РНК с протеином VPg. Вирусы кислотоустойчивы и относительно стабильны при низких значениях рН, что позволяет им выживать в кислой среде желудка, а отсутствие оболочки делает их резистентными к действию желчных кислот. Антигенная структура полиовирусов стабильна, возможны лишь редкие серологические вариации. Возбудители высококонтагиозны, особенно при наличии большого скопления людей и нарушениях элементарных санитарных правил и гигиены. Основной механизм передачи – фекально-оральный. Лимфоидная ткань глоточного кольца является первым местом встречи с вирусом. Далее вирус распространяется по желудочно-кишечному тракту и локализуется в тонком кишечнике. Благодаря устойчивости к кислотам и щелочам вирус легко преодолевает желудочно-кишечный барьер и фиксируется в лимфатических образованиях слизистой тонкого кишечника. Затем процесс идет в двух направлениях. С одной стороны, вирус обильно накапливается в кишечнике. Размножение и выделение вируса обычно заканчивается через 3 недели. С другой стороны, вирус полиомиелита попадает в кровь и может вызвать форму заболевания с поражением центральной нервной системы. Лабораторная диагностика: 1) выделение возбудителя в первичных культурах или культурах клеток HeLa, Hep-2, СОЦ; 2) серологические исследования включают в себя определение антигенов в сыворотке и спинномозговой жидкости, выявление высоких титров Ig M указывает на наличие инфекции. Лечение: средства специфической противовирусной терапии отсутствуют, проводят симптоматическое лечение и предупреждают развитие вторичных бактериальных инфекций. Специфическая рофилактика: 1) живая аттенуированная вакцина; 2) убитая вирусная вакцина. 22.2. ЕСНО-вирусы. Вирусы Коксаки. Относятся к семейству пикорнавирусов, роду энтеровирусов. Строение вириона такое же, как у вируса полиомиелита. ЕСНО вирусы выделены в особую группу кишечных вирусов вследствие полного отсутствия патогенного действия на лабораторных животных. Выделяют 34 серовара, разделение которых основано на свойствах специфического антигена вирусного капсида, нейтрализовать типоспецифические антигены. 12 серотипов способны к гемагглютинации, некоторые серотипы спонтанно элюируют. Групповой специфический антиген отсутствует. Некоторые типоспецифические антигены обладают определенной перекрестной реактивностью. Заражение ЕСНО-вирусами происходит фекально-оральным путем, реже ингаляционно. ЕСНО-вирусы вызывают:
После перенесенного заболевания формируется гуморальный типоспецифический иммунитет, продолжительность которого колеблется в разных пределах. Лабораторная диагностика: 1) выделение возбудителя проводят заражением клеток почек обезьян материалом из спинномозговой жидкости и фекалий; 2) серодиагностика – обнаружение антигенов в парных сыворотках, забираемых в начале болезни и на 2-3 недели; для выявления используют реакции РН, РСК и РТГА. Лечение и профилактика: средства терапии и эффективной профилактики ЕСНО-вирусных инфекций отсутствуют; лечение поражений симптоматическое. Вирусы Коксаки по биологическим свойствам подразделяют на:
Каждая группа включает в себя серовары: группа А – 24, группа В – 6. Разделение основано на свойствах типоспецифического антигена. Серовары не содержат группоспецифического антигена. Некоторые вирусы Коксаки способны вызывать гемагглютинацию эритроцитов человека. Основные механизмы передачи – фекально-оральный и контактный (через отделяемое носоглотки). Инфекционный процесс, вызванный вирусами Коксаки, сопровождается синтезом типоспецифических антигенов, обнаруживаемых в сыворотке через неделю после начала заболевания. Лабораторная диагностика: 1) заражение культуры клеток и мышат-сосунков мазками из носоглотки, содержимым кишечника; 2) гемагглютинирующие варианты выявляют с помощью РТГА, характеризующейся типоспецифичностью; 3) принадлежность к сероварам определяют в РСК или РН с типоспецифическими антисыворотками. Специфической профилактики нет. Этиотропная терапия отсутствует. Тема 23. Ретровирусы. 23.1. Возбудитель ВИЧ-инфекции. ВИЧ-инфекция – длительно текущая инфекционная болезнь, развивающаяся в результате инфицирования вирусом иммунодефицита человека. При ВИЧ-инфекции прогрессирует поражение иммунной системы, приводящее к состоянию, известному под названием «синдром приобретенного иммунного дефицита» (СПИД), при котором у больного развиваются «оппортунистические заболевания»»: тяжелые формы инфекций, вызванных условно-патогенными возбудителями, и некоторые онкологические заболевания. Этиология возбудителя. Вирус иммунодефицита человека относится к РНК-содержащим вирусам и принадлежит к семейству ретровирусов, роду лентивирусов. Сем-во: Retroviridae, род Lentivirus Вирусная частица имеет сферическую форму, диаметр которой составляет 100 нм. Оболочка вируса состоит из двойного слоя липидов, пронизанного гликопротеинами (gp). Гликопротеиновая молекула gp 160 состоит из двух субъединиц: gp 120, находящейся на поверхности вириона и gp 41, пронизывающей его липидную оболочку. Сердцевина вируса имеет конусовидную форму и состоит из капсидных белков р24 и р25, матриксных белков р6, р7 и белков протеазы р10, р11. Геном образует две нити РНК, имеет обратную транскриптазу или ревертазу, состоит из 3 основных структурных генов (gag, pol, env) и 7 регуляторных и функциональных генов (tat, rev, nef, vif, vpr, vpu, vpx). Ген gag (group antigen)- групповой антиген кодирует матриксные, капсидные, нуклеокапсидные белки и белки протеазы. Ген pol (polymerase) – кодирует обратную транскриптазу, ген env (envelope - оболочка) – кодирует поверхностный белок gp 120 и трансмембранный gp 41. Функциональные гены выполняют регуляторные функции и обеспечивают осуществление процессов репродукции и участие вируса в инфекционном процессе. Выделяют два типа вируса, отличающихся, отличающиеся структурой генома и серологическими характеристиками: ВИЧ-1 и ВИЧ-2. В частности, геном ВИЧ-2 отличается от генома ВИЧ-1 структурой гена env и заменой гена vpu на vpx. Так, ВИЧ-2 вместо белков gp 120, gp 41, gp 160, gp 24 содержит белки gp 140, gp 105, gp 36. Это обусловливает различия в течении заболеваний, вызываемых инфекциями ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Факторы патогенности.
Эпидемиология. Источниками вируса являются больные и вирусоносители. Пути передачи вируса: 1) при половом контакте; 2) парентеральное заражение кровью при гемотрансфузиях, медицинских манипуляциях, операциях; 3) передача новорожденным через плаценту, в родовых путях, при грудном вскармливании. Возможно заражение в парикмахерских, при пользовании зубными щетками, нанесении татуировок. ВИЧ присутствует у больного человека во всех клетках, где есть СД-4 рецепторы – это Т-хелперы, тканевые макрофаги, в клетках кишечника, слизистых и т.д. У инфицированного человека вирус выделяется со всеми биологическими жидкостями: максимальное его количество находится в крови и в семенной жидкости. Среднее количество вируса – в лимфе, ликворе, отделяемом влагалища. Еще меньше вируса в молоке кормящей матери, слюне, слезах, поте. Содержание вируса в них таково, что этого недостаточно, чтобы вызвать инфекцию. Основные группы риска – наркоманы, пациенты с гемофилией, гомосексуалисты, проститутки. Клиника. Патогенез ВИЧ-инфекции включает в себя пять основных периодов:
Лабораторная диагностика. Материалом для исследования является сыворотка крови больного ВИЧ-инфекцией. Забор крови производится из локтевой вены в чистую сухую пробирку в количестве 3-5 мл. У новорожденных можно брать пуповинную кровь. Цельную кровь нельзя хранить более 12 часов при комнатной температуре и более суток в холодильнике, так как гемолиз эритроцитов может повлиять на результаты анализа. Сыворотка отделяется центрифугированием и переносится в чистую (лучше стерильную) пробирку и в таком виде она может храниться до 7 дней при температуре 4-80С. Антитела к ВИЧ появляются у 90-95% зараженных в течение 3 месяцев после заражения, у 5-9% - через 6 месяцев от момента заражения, и у 0,5-1% - в более поздние сроки. Наиболее ранний срок обнаружения антител – 2 недели от момента заражения. Обнаружение антител к ВИЧ включает два этапа. На первом этапе проводится выявление суммарного спектра антител против антигенов ВИЧ с помощью иммуноферментного анализа. На втором этапе методом иммунного блоттинга проводится определение антител к отдельным белкам вируса. Неспецифические лабораторные признаки ВИЧ-инфекции. При ВИЧ-инфекции могут наблюдаться такие нарушения, как снижение количества СД4-лимфоцитов, увеличение процентного содержания СД8-лимфоцитов, инверсия соотношения СД4/СД8 (если его значение меньше 1), повышение уровня бета-2-микроглобина, неоптерина, возрастание количества иммуноглобулинов и другие. К основным принципам терапии ВИЧ-инфекции можно отнести:
1. Информация о неизлечимости ВИЧ-инфекции и ее фатальном прогнозе вызывает у инфицированного ВИЧ тяжелые эмоциональные реакции, связанные с внезапным осознанием неизбежности смерти. Наиболее доступной формой психологической помощи является индивидуальная беседа, а также семейная психотерапия. В случаях, когда больной не соглашается в этих вопросах, применяется рациональная психотерапия. Существенной чертой этого метода является воздействие логическим убеждением. 2. Одной из особенностей ВИЧ-инфекции является полиэтиологичность развивающихся при ней вторичных заболеваний и полиорганность поражений. К основным направлениям химиотерапии больных ВИЧ-инфекцией можно отнести лечение противоретровирусными препаратами, химиопрофилактику и лечение вторичных заболеваний. Лабораторными показаниями к проведению противоретровирусной терапии является снижение уровня СД4-лимфоцитов менее 0,3х109/л или повышение концентрации РНК ВИЧ в крови, так называемая «вирусная нагрузка» более 60000 копий в мл. Применение отдельных схем противоретровирусной терапии: Монотерапия может проводиться по следующей схеме: тимазид (АЗТ), капсулы по 0,1г по 2 капсулы 3 раза в день (0,6г в сутки). Фосфазид (Ф-АЗТ), таблетки по 0,2г, по 2 таблетки 2 раза в день (0,8г в сутки) или по 1 таблетке (0,2г) 3 раза в день (суточной дозе 0,6г). Битерапия - применение одного из препаратов ингибиторов обратной транскриптазы производных тимидина (азидотимидин (АЗТ), фосфазид (Ф-АЗТ), ставудин (d4Т) и одного из препаратов производных аденина (диданозин (dd I), ламивудин (3ТС), зальцитабин (ddС), абакавир). Высокоинтенсивная противовирусная терапия – использование препаратов из группы ингибиторов протеазы и ингибиторов обратной транскриптазы: фосфазид по 0,4г 2 раза в сутки, диданозин по 0,2г 2 раза в сутки, невирапин по 0,2г 2 раза в сутки. Профилактика. Специфическая профилактика не разработана, но ведутся интенсивные работы по созданию профилактической вакцины. В настоящее время профилактика ВИЧ-инфекции сводится к социальным и противоэпидемическим мероприятиям, а именно: к механической защите от инфицирования с помощью презервативов, к пользованию одноразовыми шприцами, иглами, медицинскими инструментами, системами для переливания крови. Борьба с проституцией, наркоманией, гомосексуализмом, безнравственностью. |