итожик микр. Энтеробактерии возбудители кишечных инфекций

• Название: Энтеробактерии возбудители кишечных инфекций
• Дата: 16.04.2021
• Размер: 126.49 Kb.
• Имя файла: итожик микр.docx
• Тип: Лекции; #195366
• страница: 8 из 8

Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (рнга, рпга)

Реакция ставится:

1) для обнаружения полисахаридов, белков, экстрактов бактерий и других высокодисперстных веществ, риккетсий и вирусов, комплексы которых с агглютининами в обычных РА увидеть не удается,

2) для выявления антител в сыворотках больных к этим высокодисперстным веществам и мельчайшим микроорганизмам.

Под непрямой, или пассивной, агглютинацией понимают реакцию, в которой антитела взаимодействуют с антигенами, предварительно адсорбированными на инертных частицах (латекс, целлюлоза, полистерол, оксид бария и др. или эритроциты барана, I(0)-группы крови человека)

В реакции пассивной гемагглютинации (РПГА) в качестве носителя используют эритроциты. Нагруженные антигеном эритроциты склеиваются в присутствии специфических антител к данному антигену и выпадают в осадок. Сенсибилизированные антигеном эритроциты используют в РПГА как эритроцитарный диагностикум для обнаружения антител (серодиагностика). Если нагрузить эритроциты антителами (эритроцитарный антительный диагностикум), то можно применять для выявления антигенов.

Постановка. В лунках полистироловых планшетов готовят ряд последовательных разведений сыворотки. В предпоследнюю лунку вносят - 0,5 мл заведомо положительной сыворотки и в последнюю 0,5 мл физиологического раствора (контроли). Затем во все лунки добавляют по 0,1 мл разведенного эритроцитарного диагностикума, встряхивают и помещают в термостат на 2 ч.

Учет. В положительном случае эритроциты оседают на дне лунки в виде ровного слоя клеток со складчатым или зазубренным краем (перевернутый зонтик), в отрицательном - оседают в виде пуговки или колечка.



Копрокультура – выделение бактерий брюшного тифа из кала. С

Уринокультура (латинское urina моча + культура бактериальная) - культура микроорганизма, выделенная из мочи человека или животного при бактериологическом исследовании.

ГЕМОКУЛЬТУРА

Гемокультура (греч. haima кровь + лат. cultura возделывание) — культура микроорганизмов, выделенная из крови. Термин «гемокультура» обычно употребляется при определении культур бактерий, спирохет и грибов, для выделения которых применяют бактериологическое исследование крови.
На первой неделе заболевания бе­рут кровь для выделения гемокультуры. С соблюдением правил асеп­тики из локтевой вены берут кровь в количестве 10 мл, засевают в 100 мл желчного бульона, направляют в лабораторию. Выделенную чистую культуру (гемокультуру) идентифицируют по морфологии, биохимическим свойствам и антигенной структуре, определяют фаговар.

Начиная с третьей недели заболевания, возбудителя выделяют из испражнений, мочи, желчи.

В сыворотке крови определяют антитела, титр которых нарас­тает к концу первой - началу второй недели заболевания. Ставят реакцию агглютинации по Видалю, РНГА с эритроцитарными диагностикумами, ИФА.

Для выявления бактерионосительства исследуют с целью обна­ружения возбудителя испражнения, мочу, желчь; с целью обнаружения Vi-антигена ставят РНГА с эритроцитарным Vi-диагностикумом. Используют аллергическую кожную пробу с Vi-тифином (Vi-антигеном).

1. Метод гемокультуры

Тщательно соблюдая правила асептики, кровь больного в количестве 10 мл берут с помощью шприца с локтевой вены в ранние сроки (начиная с первых часов заболевания) и у постели больного сеют во флакон с 100 мл желчного бульона или среды Рапопорт (10% желчный бульон из 2 % глюкозы, 1% индикатора Андраде, перед стерилизацией в среду помещают стеклянную поплавок для улавливания газа).В случае невозможного посева крови у постели больного, его доставляют в лабораторию в пробирке. Сыворотку отделяют от сгустка и используют для серологического исследования. Сгусток тщательно измельчают и засевают на те же среды в соотношении 1:10. Такое разведение необходимо для устранения бактерицидных свойств крови. В более поздние периоды болезни при наличии лихорадки надо пахать 15-20 мл крови и сеять на 150-200 мл питательной среды. Желчные среды является элективных для возбудителей брюшного тифа и паратифов. У маленьких детей кровь для посева берут с мочки уха, пятки или пальца и в меньшем количестве.Засеяны флаконы инкубируют при 37 ° С. На второй день изучают характер роста. При отсутствии роста флаконы оставляют в термостате до 10 дней, а при подозрении на L-формы - до 3-4 недель. Следующие висел на дифференциальные среды делают через 48 и 72 год, на 5 и 10 сутки.Сальмонеллы брюшного тифа вызывают покраснение бульона Рапопорт результате ферментации глюкозы до кислоты, а возбудители паратифа еще и газа, который накапливается в поплавке. Культуру, выросшую во флаконе, высевают на трицукрове среду Олькеницького и Эндо (Плоскирева, Левина, висмут-сульфит-агар). Если культура чистая (при микроскопии грамотрицательные палочки), продолжают работать лишь со средой Олькеницького.Посевы только на Эндо (или другие элективные среды) исследуют в тех случаях, когда на агаре Олькеницького вырастает не чистая культура, что случается редко. В таком случае типичные изолированные колонии пересевают на среду Олькеницького (или скошенный МПА), получают чистую культуру и идентифицируют ее. Колонии всех трех возбудителей на средах Эндо, Левина и Плоскирева бесцветные, нежные, прозрачные, на висмут-сульфитном агаре - черного цвета.

13.Брюшнотифозная спиртовая вакцина ,обогащенная Vi – Антигеном
Препарат :леч-проф. Содержит АГ.Представляет собой раствор капсульного полисазарида , извлеченного из супернатанта культуры сальмонелла тифи очищенного ферментативными физико-химическими методами с добавлением лиофилизированнх брюшнотифозных бактерий,убитых этиловым спиртом.  П/к или в/м, однократная инъекция 0.5 мл. Ревакцинация через 3 года. Индуцирует развитие выраженного иммунного ответа, сероконверсию через 1-2 нед антител к Ви-антигену, играющему ключевую роль в развитии брюшнотифозной инфекции; невосприимчивость к инфекции сохраняется в течение 2-х лет. Ревакцинация проводится через каждые 2 года.Препарат хорошо переносится, апирогенен. Реакции на введение вакцины довольно редки и расцениваются как слабые. Вакцина содержит консервант - фенол в конечной концентрации не более 0.25%. Вакцину хранят при температуре 2-8 град.С.Иммунитет : актив, исскуств, потсвакцин.

14.Холерная вакцина
Препарат : леч-проф Содержит АГ.Содержитаг ( корпускулярный и растворенный ) .Представляет собой взвесь выращенных на агаре холерных и эль-торных вибрионов Инаба и Огова,убитых нагреванием или формалином. Транспортировка жидкой вакцины недопустима при температуре ниже 0°С, а при 20-30°С не должна превышать срок 10 суток. Лиофилизированная вакцина не может транспортироваться при температуре ниже 0°С более 1 мес. Хранить как жидкую, так и сухую вакцину следует в сухом, затемненном месте при 5- 10°С. При условии соблюдения указанных режимов транспортировки и складирования срок годности сухой гретой холерной вакцины 5 лет. Выпускается сухая холерная вакцина в ампулах по 1 мл, прививки проводят подкожно шприцем или безыгольныминъектором двукратно с интервалом 7-10 дней указанными в наставлении дозами для иммунизации детей разного возраста, а также подростков старше 15 лет и взрослых. Иммунитет : актив, исскуств, потсвакцин.антитоксич, антибактер.

15.Вакцина холерная бивалентная химическая таблетированная
Препарат : леч-проф .Содержит Аг. Представляет собой препарат ,полученный из надосадочной жидкости бульонной культуры холерного вибриона штаммов 569-В серовараИнаба и 41 серовараОгова путем инактивирования формалином , очистки сернокислым аммонием и концентрирования по белку. Дозирование:  Внутрь, за 1 ч до еды, таблетки проглатывают целиком, не разжевывая, запивая 1/8-1/4 стакана кипяченой воды. Рекомендуемая доза для вакцинации взрослых - 3 таблетки первого вида или 6 таблеток второго. В сухом, защищенном от света месте, при температуре 0–10 °C.Иммунитет : актив, исскуств, потсвакцин,антитоксич, антибактер.

46.Агглютинирующая неадсорбированная сыворотка к сальмонеллам тифимуриум.

Препарат диагностический. Содержит антитела. Представляет сыворотку крови животных, иммунизированных убитой культурой сальмонелл. Предназначены для серологической идентификации бактерий рода Salmonella в реакции агглютинации на стекле.монорецепторная сыворотка агглютинирующая сальмонеллезная (О)Пренадлежность к группе

Диагност. Ат, кот. получают в 3 этапа: на 1-ом выбираем сальмонелу (например S.typhimurium c Аг структурой О-1,4,5,12; Mi 1,2) нагревают на водяной бане для разрушения жгутиков Н-Аг,ост. Только О-Аг 1,4,5,12. На втором этапе проводят гипериммунизацию кроликов оставшимся О-Аг сальмонелл, у кролика  образуются О-1,4,5,12 Ат . Это поливалентная сыворотка. На 3-ем этапе проводим истощение сыворотки по Кастеллани. Для этого и получают сыворотку добавляют предварительно нагретых на вод. Бане из той же сер.группы например S.hudelberg o-45,12 Аг, произойдет связь Аг и оставшегося О-1 Ат. Полученная сыворотка используется для сероидентификациисальмонел в РА на 3 этапе бакт. анализа.

47Агглютинирующая адсорбированная поливалентная сыворотка к Shigellaflexneri I-V.

Препарат диагностический. Содержит антитела. Представляют собой сыворотки кроликов, иммунизированных формалинизированными и живыми взвесями типичных по всем признакам шигелл. При взаимодействии с соответствующими микроорганизмами сыворотки вызывают их агглютинацию. Предназначены для серологической идентефикации Shigellaflexneri I-V.


48Агглютинирующая адсорбированная сальмонеллёзная О-сыворотка рецептор 9.

Препарат диагностический. Содержит антитела. Представляет сыворотку крови животных, иммунизированных убитой культурой сальмонелл. Получен по методу Кастеллани. Предназначены для серологической идентификации бактерий рода Salmonella в реакции агглютинации на стекле.

50.Агглютинирующая адсорбированная поливалентная сальмонеллёзная О-сыворотка (групп А, В, С, Д, Е).

Препарат диагностический. Содержит антитела к О-антигену. Представляет сыворотку крови животных, иммунизированных убитой культурой сальмонелл. Получен по методу Кастеллани. Предназначены для серологической идентификации бактерий рода Salmonella в реакции агглютинации на стекле.


51Агглютинирующая адсорбированнаясальмонеллёзная Н-сыворотка рецептор d

Препарат диагностический. Содержит антитела к Н-антигену рецептору d. Представляет сыворотку крови кроликов, иммунизированных убитой культурой сальмонелл. Получен по методу Кастеллани. Предназначены для серологической идентификации бактерий рода Salmonella в реакции агглютинации на стекле.

50.Агглютинирующая адсорбированная поливалентная сыворотка к Shigellaflexneri I-V.

Препарат диагностический. Содержит антитела. Представляют собой сыворотки кроликов, иммунизированных формалинизированными и живыми взвесями типичных по всем признакам шигелл. При взаимодействии с соответствующими микроорганизмами сыворотки вызывают их агглютинацию. Предназначены для серологической идентефикации Shigellaflexneri I-V. Диагностические шигеллёзные сыворотки представляют собойлиофилизированные адсорбированные сыворотки кроликов, содержащие монорецепторные антитела к 38 наименованиям антигенов. К восьми группам антигенов выпускаются поливалентные сыворотки.
Препараты предназначены для идентификации бактерий рода Shigella в реакции агглютинации.
Диагностические шигеллёзные сыворотки имеют титр антител в реакции агглютинации не менее 1:40.
С помощью данных сывороток можно определить любые бактерии рода Shigella согласно международной классификации.
Препарат разлит в ампулы по 2мл.
Выпускают в сухом виде.
Срок годности монорецепторных сухих сывороток - 5 лет, поливалентных сухих – 3 года при хранении в сухом тёмном месте при температуре 4-80 С.

48Агглютинирующие неадсорбированные типовые ОВ-коли сыворотки.

Препарат диагностический. Содержит антитела. Получены путем иммунизации кроликов взвесью эшерихий соответствующей серогруппы. Применяются в реакции агллютинации для идентефикацииэнтеропатогенныхэшерихий соответствующих серотипов. Агглютинирующую сыворотку получают иммунизацией кроликов (внутривенно, подкожно или внутрибрюшинно) взвесью убитых бактерий, начиная с дозы 200 млн., затем 500 млн., 1 млрд., 2 млрд., микробных тел в 1 мл, с интервалами 5 дней. Через 7—8 дней после последней иммунизации берут кровь и определяют титр антител. Титром агглютинирующей сыворотки называется то максимальное разведение сыворотки, при котором происходит агглютинация с соответствующим микроорганизмом.Агглютинирующие сыворотки применяются при идентификации микроба в развернутой реакции агглютинации. Если изучаемый микроорганизм агглютинируется сывороткой до титра или до половины значения титра, его можно считать принадлежащим к тому виду, название которого указано на этикетке ампулы.Неадсорбированные агглютинирующие сыворотки обладают высоким титром — до 1:12 800 — 1:25 600.Недостатком таких сывороток является то, что они способны давать групповые реакции агглютинации, так как они содержат антитела к бактериям, имеющим общие антигены в пределах семейства, группы и рода.Поэтому в настоящее время большинство агглютинирующих сывороток выпускаются адсорбированными, монорецепторными и адсорбированными поливалентными, содержащими только типовые или видовые антитела и соответствующими или определенному типу или виду микроорганизма. Эти сыворотки не подлежат разведению.Для получения таких сывороток применяют метод Кастелляни — метод адсорбции, который состоит в том, что при насыщении агглютинирующей сыворотки родственными гетерогенными бактериями происходит адсорбция групповых антител, а специфические антитела остаются в сыворотке. В зависимости от полноты истощения групповых агглютининов можно получить монорецепторные сыворотки — сыворотки, имеющие антитела только к одному рецептору-антигену или адсорбированные, поливалентные, дающие реакции агглютинации с двумя — тремя родственными бактериями, имеющими общий антиген, в отношении которого проводилась адсорбция.Адсорбированные сыворотки применяют при идентификации выделенных возбудителей в реакции агглютинации на стекле (пластинчатый метод).

49Агглютинирующая неадсорбированная комплексная ОВ-коли сыворотка.

Препарат диагностический. Содержит антитела. Получены путем иммунизации кроликов взвесью эшерихий. Применяются в реакции агглютинации для идентефикацииэнтеропатогенныхэшерихий.Агглютинирующие сыворотки применяются при идентификации микроба в развернутой реакции агглютинации. Если изучаемый микроорганизм агглютинируется сывороткой до титра или до половины значения титра, его можно считать принадлежащим к тому виду, название которого указано на этикетке ампулы.Неадсорбированные агглютинирующие сыворотки обладают высоким титром — до 1:12 800 — 1:25 600.Недостатком таких сывороток является то, что они способны давать групповые реакции агглютинации, так как они содержат антитела к бактериям, имеющим общие антигены в пределах семейства, группы и рода.Поэтому в настоящее время большинство агглютинирующих сывороток выпускаются адсорбированными, монорецепторными и адсорбированными поливалентными, содержащими только типовые или видовые антитела и соответствующими или определенному типу или виду микроорганизма. Эти сыворотки не подлежат разведению.Для получения таких сывороток применяют метод Кастелляни — метод адсорбции, который состоит в том, что при насыщении агглютинирующей сыворотки родственными гетерогенными бактериями происходит адсорбция групповых антител, а специфические антитела остаются в сыворотке. В зависимости от полноты истощения групповых агглютининов можно получить монорецепторные сыворотки — сыворотки, имеющие антитела только к одному рецептору-антигену или адсорбированные, поливалентные, дающие реакции агглютинации с двумя — тремя родственными бактериями, имеющими общий антиген, в отношении которого проводилась адсорбция.

53Преципитирующие сыворотки (сыворотка, преципитирующая белок человека, сыворотка, преципитирующая белок барана и т.д.)


Препарат диагностический. Содержит антитела. Преципитирующие сыворотки получаются путем искусственной иммунизации животного живыми или убитыми микробами, а также разнообразными лизатами и экстрактами микробных клеток. Путем искусственной иммунизации можно получить преципитирующие сыворотки к любому чужеродному белку растительного и животного происхождения, а также к гаптенам при иммунизации животного полноценным антигеном, содержащим данныйгаптен. Применяется для постановки реакций преципитации.
_________________________________________________________________

54 Люминесцирующие сыворотки против глобулинов кролика, человека и др. 

Препарат диагностический. Содержит антитела, меченные флюоресцирующими веществами. Готовят из специфических иммунных сывороток, которые в свою очередь получают подобно агглютинирующим и преципитирующим сывороткам. Из них извлекают глобулиновую фракцию методом высаливания сернокислым аммонием. Полученные глобулины обрабатывают флюорохромами, изоцианатомфлюоресцеина или изотиоцианатомфлюоресцеина в соотношении 3 мг красителя на 100 мг белка. Обработанные таким образом белки-антитела обладают способностью люминесцировать (светиться) в ультрафиолетовых или фиолетово-синих лучах. Такие люминесцирующие антитела используются для обнаружения соответствующего микроба (антигена). Наличие и локализация микробов (антигена) в микроскопическом препарате выявляются в результате реакции антиген - антитело. Продукт этой реакции ярко люминесцирует и может быть открыт даже в отдельных участках клеток и в единичных бактериях. 
__________________________________________________________________

55.Кроличья сыворотка против глобулинов человека, меченая ФИТЦ, рабочее разведение 1:160.

Препарат диагностический. Содержит антитела, меченные флюоресцирующими веществами, к антигенам крови человека.
56.Диагностикумы (диагностикум сальмонелл тифа или сальмонелл паратифа А и В, шигеллФлекснера, Зонне и др., сальмонеллёзные О-диагностикумы, сальмонеллёзные Н-диагностикумы, Vi-брюшнотифозный диагностикум).

Препараты диагностические. Содержат антигены. В диагностических целях при обнаружении антител в сы­воротке крови больных, реконвалесцентов и бактерионосите­лей используются серологические реакции. Бактериальные диагностикумы могут содержать инактивированную микробную взвесь или отдельные антигенные компоненты бактерий: О, Н или Vi-антигены и используются в реакциях агглютинации.


57. Эритроцитарные диагностикумы (эритроцитарныйсальмонеллёзный О-диагностикум, эритроцитарныйVi-диагностикум). 


Препараты диагностические. Содержат антигены. Представляют собой эритроциты (обработанные танином или формалином) с ад­сорбированными на них антигенами, извлеченными из бакте­рий. Применяются в РПГА (реакции пассивной гемагглютинации).

64 Поливалентный брюшнотифозный сухой бактериофаг.
Препарат лечебно-диагностический. Содержит бактериофаги. Представляет собой смесь бактериофагов, активных в отношении значительного числа циркулирующих на территории страны возбудителей брюшного тифа. Препарат является стабилизированной субстанцией фильтрата фаголизата брюшнотифозных бактерий, полученных в условиях глубинной культивации. Применяется для профилактики и лечения брюшного тифа.


65 Поливалентный сальмонеллёзный жидкий бактериофаг групп А, В, С, Д, Е.
Препарат лечебно-диагностический. Содержит бактериофаги. Представляет собой смесь бактериофагов, активных в отношении значительного числа циркулирующих на территории страны сальмонелл. Применяется для профилактики и лечения сальмонеллезов.

66. Поливалентный дизентерийный бактериофаг. 


Препарат лечебно-диагностический. Содержит бактериофаги. Представляет собой смесь бактериофагов, активных в отношении значительного числа шигелл. Применяется для профилактики и лечения дизентерии.
67.Бактериофаг коли жидкий.

Препарат лечебно-диагностический. Содержит бактериофаги. Представляет собой смесь бактериофагов, активных в отношении значительного числа эшерихий. Применяется для профилактики и лечения эшерихиозов.

68.Бактериофаг протейный.

Препарат лечебно-диагностический. Содержит бактериофаги. Представляет собой смесь бактериофагов, активных в отношении значительного числа протеев. Применяется для профилактики и лечения протейных инфекций.

69.Коли-протейный бактериофаг жидкий.

Препарат лечебно-диагностический. Содержит бактериофаги. Представляет собой смесь бактериофагов, активных в отношении значительного числа протеев и эшерихий. Применяется для профилактики и лечения протейных инфекций и эшерихиозов. Препарат используют для приема внутрь (через рот), ректального введения, аппликаций, орошений, введения в полости ран, вагины, матки, носа, пазух носа и дренированные полости.При введении в полости (плевральную, суставную и другие ограниченные полости) до 100 мл, после чего оставляют капиллярный дренаж, через который бактериофаг вводят в течение нескольких дней.

71.Бифидумбактерин.

Препарат лечебный. Содержит бактерии. Живые бифидобактерии обладают высокой антагонистической активностью против широкого спектра патогенных и условно-патогенных микроорганизмов кишечника (включая стафилококки, протей, энтеропатогенную кишечную палочку, шигеллы, некоторые дрожжеподобные грибы), восстанавливают равновесие кишечной и влагалищной микрофлоры, нормализуют пищеварительную и защитную функции кишечника, активизируют обменные процессы, повышают неспецифическую резистентность организма.

72Колибактерин. 

Препарат лечебный. Взрослым при острой диарее назначают по 10-15 доз (20-30 мл) каждые 3 ч в течение 1-2 дней, затем по 5-10 доз (10-20 мл) 3 раза в день в течение 3-5 дней;при хронической диарее, дисбактериозе, колите после облучения, хроническом энтероколите, дисфункции кишечника (метеоризм, кишечная колика), хроническом гепатите - по 5 доз (10 мл) 3 раза в день в течение 1-3 мес;при нарушении обмена веществ, сниженном иммунитете, а также для уменьшения побочного действия антибиотиков и др. ЛС - по 5 доз (10 мл) 2-3 раза в день в течение 1-3 мес;для профилактики в очагах инфекции, а также на начальных стадиях заболеваний, при стрессовой ситуации, пребывании в экстремальных условиях - по 5 доз (10 мл) 3 раза в день в течение всего инкубационного периода и 2-3 дня после его окончания.
При необходимости возможно увеличение дозировки препарата. Содержит коли-бактерии.

73.Бификол.
Препарат лечебный. Препарат представляет собой микробную массу живых антагонистически активных штаммов бифидобактерий (B.bifidum 1) и кишечной палочки (E.coli М-17), лиофилизированную в среде культивирования с добавлением защитной среды высушивания: сахарозо-желатино-молочной. 
Кристаллическая или пористая масса бежевого или беловато-серого цвета различной интенсивности, со специфическим запахом. В одной дозе содержится не менее 10⁷ живых бифидобактерий и не менее 10⁷живых кишечных палочек. Бификол инструкция по применению и дозировкаПрепарат применяют орально с 6 мес возраста за 30-40 мин до еды. Срок годности. Условия хранения и транспортированияСрок годности - 1 год. Хранят и транспортируют в соответствии с СП 3.3.2.1248-03 при температуре не выше 10 °С в недоступном для детей месте.Содержит коли-бактерии и бифидобактерии.
74.Лактобактерин.
Препарат лечебный. Основной способ применения лактобактерина - через рот. 
Препарат следует применять за 40-60 мин до еды и желательно запивать молоком. Лечение рекомендуется сопровождать применением витаминов. Лактобактерин применяют в следующих суточных дозах у взрослых и детей в зависмости от возраста:детям до 6 месяцев по 1-2 дозы;детям от 6 месяцев до 1 года по 2-3 дозы;от 1 года до 3-х лет по 3-4 дозы;старше 3-х лет по 4-10 доз или 4-10 таблеток;взрослым по 6-10 доз или 6-10 таблеток.Суточные дозы можно делить на 2-3 приема. Длительность лечения:при затяжном и хроническом течении дизентерии, пост-дизентерийном колите, долечивании реконвалесцентов после ОКИ (острых кишечных инфекций),а также при длительной кишечной дисфункции неустановленной этиологии лечение проводится не менее 4-6 недель;при неспецифическом язвенном колите, а также хронических колитах и энтероколитах лечение проводится 1.5 - 2 месяца;Содержитлактобактерии.