Федеральное агенство по здравоохранению и социальному развитию
 Скачать 1.05 Mb.
|
СТАФИЛОКОККИ1. Краткая характеристика инфекции. Основные клинические симптомы. История вопроса.Первых представителей рода выделили Кох (1878) и Пастёр (1880) из очагов гнойных поражений у человека. Бактерии распространены повсеместно; колонизируют кожные покровы и поверхности слизистых оболочек человека и животных. Основные инфекционные заболевания человека, вызываемые стафилококками
2. Характеристика возбудителя:
Стафилококки относят к отделу Firmicutes, семейству Microсоссасеае, роду Staphylococcus. Наиболее часто заболевания учеловека вызывают 3 вида: S. aureus; S. epidermidis и S. saprophyticus. 2.2 Морфологические и тинкториальные свойства.Представлены неподвижными клетками диаметром 0,5-1,5 мкм. В мазках расположены одиночно, парами или гроздьями. Свойство образовывать скопления, напоминающие гроздья винограда в результате деления во взаимно перпендикулярных плоскостях, определило их название [от греч. staphyle, виноградная гроздь, + kokkos, зерно, ягода]. Основные дифференцировочные признаки стафилококков — характерная морфология и положительная окраска по Граму. 2.3 Культуральные свойстваТемпературный оптимум 30-37 °С. Стафилококки устойчивы к повышенному содержанию хлорида натрия и хорошо растут на средах с содержанием-5-10% NaCl (что и учитывают при приготовлении дифференциально-диагностических сред). На плотных средах через 18-24 ч культивирования в аэробных условиях бактерии формируют мутные круглые ровные колонии белого, кремового, жёлтого или оранжевого цвета. Образующиеся липохромные пигменты защищают бактерии от действия токсических кислородных радикалов. Стафилококки калаза-положительны, содержат цитохромы, но обычно оксидаза-отрицательны. На жидких питательных средах дают равномерное помутнение. 2.4 Биохимические свойства. Бактерии проявляют высокую биохимическую активность: восстанавливают нитраты, вырабатывают H2S, разлагают мочевину и ферментируют многие углеводы с образованием кислоты. По наличию коагулазы все стафилококки разделяют на две группы. Среди коагулаза-положительных стафилококков поражения у человека вызывает лишь S. aureus; среди коагулаза-отрицательных видов — S. epidermidis и S. saprophyticus. 2.5 Токсигенные свойства. Мембранотоксины (стафилолизины, или гемолизины). Выделяют токсины четырех антигенных типов; бактерии способны одновременно синтезировать несколько подобных продуктов. Стафилолизины обусловливают гемолитическую активность на средах с кровью. α-Токсин имеет наибольшее значение, его часто выявляют у бактерий, выделенных из клинических образцов. Он взаимодействует с клеточной мембраной и вызывает локальный протеолиз. К его действию чувствительны эндотелиоциты, полиморфно-ядерные лейкоциты, фибробласты, гепатоциты, тромбоциты и др. При введении лабораторным животным вызывает кожные некротические реакции, после внутривенного введения — гибель животного. β-Токсин (сфингомиелиназа) выявляют у 20% изолятов. Он проявляет выраженные свойства холодового гемолизина, то есть его активность максимальна при низкой температуре. γ-Токсин — двухкомпонентный гемолизин с умеренной активностью в отношенииэритроцитов человека. Гемолитическую активность на кровяных средах он обычно не проявляет, так как серосодержащие полимеры, присутствующие в агаре, инактивируют один из его компанентов. σ-Токсин — агрегат низкомолекулярных соединений, проявляющих детергентные свойства, последние обусловливают цитотоксичность широкого спектра. Эксфолиатины А и В выделяют у 3-5% клинических изолятов. Эксфолиатины вызывают разрушение десмосом зернистого слоя эпидермиса и отслойку рогового слоя. Токсин синдрома токсического шока (TSST-1) — экзотоксин, обусловливающий развитие специфического симптомокомплекса (предположительно за счёт стимулирования выделения ФНО). Лейкоцидин (токсин Пантона-Валентайна). Он нарушает водно-электролитный баланс в клетке, повышает внутриклеточное содержание циклического АМФ (одно из звеньев патогенеза стафилококковых диарей). Энтеротоксины А, В, С, D, Е — термостабильные низкомолекулярные белки. Именно эти токсины ответственны за развитие пищевых отравлений. Наиболее часто регистрируют интоксикации, вызываемые энтеротоксинами А и D. Энтеротоксины В и С способны также вызывать развитие синдрома токсического шока в случаях, не связанных с менструациями. Проявляют свойства суперантигена. 2.6 Антигенные свойства. У стафилококков выделяют более 50 антигенных субстанций, разделяемых на родовые, видовые и типовые Аг. Многие стафилококки признаны аллергенами. Родовые Аг нередко способны перекрёстно реагировать с изоантигенами клеток организма человека (эритроцитов, почек и др.), что может привести к развитию аутоиммунной патологии. Видоспецифичными Аг стафилококков могут служить тейхоевые кислоты. Для S. aureus видоспецифичным Аг также является белок А. 2.7 Резистентность. Стафилококки хорошо переносят высушивание, сохраняя вирулентность; погибают при прямом воздействии солнечного света в течение 10-12 ч. Они устойчивы к нагреванию— при 70-80°С погибают за 20-30 мин, при 150°С — за 10 мин; сухой жар убивает их за 2 ч. Бактерии менее устойчивы к действию дезинфицирующих средств, резистентны к чистому этанолу. 2.8 Патогенность для животных. Свиньи, домашняя птица, КРС, овцы, зайцы, собаки и голуби являются одними из основных хозяев золотистого стафилококка. У животных стафилококк может вызывать гнойно-септические заболевания различной локализации. 3. ЭПИДЕМИОЛОГИЯ И ПАТОГЕНЕЗ Бактерии колонизируют слизистые оболочки носовой полости и носоглотки, кожные покровы (особенно подмышечных областей и промежности). Золотистый стафилококк также обитает в толстой кишке и влагалище. S. aureus часто выявляют у новорождённых, но в течение нескольких месяцев количество носителей резко сокращается, и основную группу составляют лица старшего возраста (микроорганизм выделяют у 15-50% здоровых взрослых лиц). Временное носительство отмечают у 60% людей, но в большинстве случаев оно продолжается несколько недель или месяцев. Как правило, повторно организм инфицируется другим штаммом. Хроническое носительство типично для персонала медицинских учреждений; пациентов, страдающих атопическими дерматитами, а также лиц, регулярно получающих инъекции различных препаратов (наркоманы, больные сахарным диабетом). Для эпидемиологии госпитальных поражений характерен весь комплекс факторов, типичный для любого нозокомиального патогена: увеличение количества носителей среди медицинского персонала, формирование специфичных «госпитальных штаммов» (эковаров), увеличение числа пациентов с повышенной восприимчивостью, появление новых «ворот» для инфицирования за счёт широкого внедрения в практику инвазивных диагностических методов и др.). Эпидемиологическую опасность представляет наличие 10 млн микробных тел в 1 мл носового отделяемого. Подавляющее большинство инфекционных заболеваний, вызываемых стафилококками, носит эндогенный характер. Механизм инфицирования обычно связан с переносом возбудителя из участков колонизации на травмированную поверхность; существенную роль играют также тесные контакты с носителями и лицами, страдающими стафилококковыми поражениями. Пути передачи - алиментарный, контактный, аэрогенный. ПАТОГЕНЕЗ ПОРАЖЕНИЙ Факторы патогенности возбудителя — адгезины, капсула, компоненты клеточной стенки, ферменты и токсины. Учитывая высокую частоту носительства S. aureus среди практически здоровых лиц, его следует считать не патогенным, а скорее условно-патогенным микроорганизмом. Другими словами, стафилококковые инфекции носят, как правило, вторичный характер и протекают в виде гнойно-воспалительных поражений. АДГЕЗИНЫ-поверхностные белки, взаимодействующие с различными веществами; муцицином слизистых оболочек, протеогликанами соединительной ткани, белками внеклеточного матрикса и др. КАПСУЛА-защищает бактерии от комплемент-опосредованного поглощения полиморфно-ядерными фагоцитами, способствует адгезии микроорганизмов и их распространению по тканям. КОМПОНЕНТЫ КЛЕТОЧНОЙ СТЕНКИ стимулируют развитие воспалительных реакций: усиливают синтез ИЛ-1 макрофагами, активируют систему комплемента и служат мощными хемоаттрактантами для нейтрофилов. -тейхоевые кислоты активируют систему комплемента по альтернативному пути, свёртывающую и калликреин-кининовую системы, а также облегчают адгезию бактерий к эпителиальным поверхностям. Тейхоевые кислоты способны ингибировать поглотительную активность фагоцитов. Белок А неспецифически связывает Fc-фрагменты молекул IgG (что активирует систему комплемента по классическому и альтернативному путям) и усиливает активность естественных киллеров. Белок А проявляет свойства суперантигена, что совместно с активацией комплемента приводит к проявлению различных местных и системных реакций (анафилаксии, феномена Артюса, угнетению активности фагоцитов и т.д.). ФЕРМЕНТЫ-проявляют разнонаправленное действие, часто не связанное непосредственно с патогенным эффектом. Каталаза разрушает перекись водорода, защищая бактерии от действия токсических кислородных радикалов. Лактамазы разрушают молекулы β-лактамных антибиотиков. Липазы облегчают адгезию и проникновение в ткани. Коагулаза вызывает свёртывание плазмы крови. Сам фермент не взаимодействует с фибрином, а образует тромбиноподобное вещество, предположительно взаимодействующие с протромбином. Образующаяся фибриновая плёнка играет роль своеобразной дополнительной капсулы, защищающей бактерию. Среди прочих ферментов в патогенезе стафилококковых инфекций принимают участие гиалуронидаза, дезоксирибонуклеаза, фибринолизин, стафилокиназа, лецитиназа и др. Сенсибилизирующий эффект. Многие компоненты бактериальных клеток и их метаболиты проявляют сенсибилизирующее действие, выражающееся в реакциях немедленного и замедленного типов. Клинически сенсибилизация бактериальными аллергенами характеризуется дерматитами, бронхоспастическим синдромом и т. д.
5. ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ – определяется очагом поражения (гной, кровь, мокрота, смыв со слизистых, моча, фекалии и т. д.). 1)МИКРОСКОПИЧЕСКИЙ МЕТОД - не основной 2)БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД – основной.
Кровь засевают в 100-150 мл сахарного бульона, культивируют в термостате до 10 суток. При помутнении среды производят высев на 5% КА.
Чистую культуру выделяют на скошенном МПА.
Для экспресс- идентификации применяют тест латекс- агглютинации с использованием коммерческих наборов частиц латекса, нагруженных АТ. Для золотистого стафилококка проводят фаготипирование. Определяют чувствительность к антибиотикам 3)СЕРОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД – не применяют. 4)БИОПРОБА – для выявления энтеротоксинов проводят внутривенное заражение кошек фильтратом бульонной культуры. При попадании токсинов в кровоток у кошек развиваются рвота и диарея. 6. Препараты для специфической профилактики и лечения: стафилококковый анатоксин, стафилококковый антифагин, анти стафилококковая человеческая плазма и иммуноглобулин, стафилококковая вакцина, стафилококковые бактериофаги, Вакцина стафило-протейно-синегнойная адсорбированная. СТРЕПТОКОККИ 1. Краткая характеристика инфекции. Основные клинические симптомы. История вопроса. В тканях человека стрептококки впервые были обнаружены при роже и раневых инфекциях (Бильрот, 1874), септицемии и гнойных поражениях (Пастер 1879; Огстон, 1881). Впервые пневмококк выделил Пастёр (1881) во время работы над антирабической вакциной и первоначально считал его возбудителем бешенства. Этиологическую роль в развитии пневмоний у человека доказали К. Френкель и А. Вайхзельбаум Основные поражения человека, вызываемые стрептококками.
2.1 Классификация Наибольшее распространение получила классификация Ребекки Лэнсфилд (1933), основанная на наличии группоспецифичных углеводов (С-полисахаридов) в клеточной стенке. B соответствии с этим выделяют 17 серогрупп, обозначаемых заглавными латинскими буквами (А – О). Внутри групп стрептококки разделяют на серовары по специфичности белковых М-, Р-, и Т- Аг. Зеленящие стрептококки и пневмококки лишены групповых Аг и не включены в какую – либо серологическую группу. Стрептококки также можно разделять по гемолитической активности на агаре с кровью барана. Соответственно выделяют α – (дают частичный гемолиз и позеленение среды), β – (полностью гемолизирующие) и γ- (дающие визуально необнаруживаемый гемолиз) стрептококки. Основные возбудители болезней человека — β – гемолитические виды. Все стрептококки разделяют на группы по культуральным особенностям: способности к росту в экстремальных условиях — на средах с рН, равным 9,6; при 10 и 45оС или после прогрева при 60°С в течение 30 мин; способности к росту на средах, содержащих 6,5% NaСl или 40% солей желчных кислот и др. Энтерококки – у человека наиболее часто поражения вызывают E.faecalis, E.faecium и Е. durans. 2.2 Морфологические и тинкториальные свойства. Стрептококки представлены неподвижными сферическими клеткам, размером 0,5-2,0 мкм. В мазках они располагаются парами или короткими цепочками, особенно при выращивании в жидких питательных средах, что и послужило основанием для их названия [от греч. streptos, цепочка, + kokkos, ягода]. Клеточная стенка содержит тейхоевые кислоты, углеводы и пептидогликаны, на её поверхности расположены фимбрии, а у патогенных видов имеется капсула. При неблагоприятных воздействиях стрептококки способны образовывать L-формы. Пневмококки представлены овальными или ланцетовидными кокками диаметром около 1 мкм. В мазках из клинического материала они располагаются парами, каждая пара окружена капсулой. Образование капсул стимулирует внесение в среду крови. Энтерококки – овальные бактерии размером 0,6-2,0x0,6-2,5 мкм; в мазках из культур, выращенных в жидких средах, они располагаются парами или короткими цепочками. Энтерококки не образуют капсул; некоторые виды ограниченно подвижны (имеют небольшие жгутики). Грам-положительные. 2.3. Культуральные свойства. Растут на средах с добавлением крови. На плотных питательных средах образуют мелкие серые колонии, окруженные зоной гемолиза. На жидких средах растут в виде придонного, пристеночного осадка или можно наблюдать равномерное помутнение среды. На агаре пневмококки образуют нежные полупрозрачные, чётко очерченные колонии диаметром около 1 мм; иногда они могут быть плоскими с углублением в центре. Подобно прочим стрептококкам, колонии никогда не сливаются между собой. На КА колонии окружает зона α-гемолиза в виде зеленоватой обесцвеченной зоны. 2.4 Биохимические свойства. Характерные особенности стрептококков — отсутствие каталазной активности и способность большинства видов лизировать эритроциты.
2.5 Токсигенные свойства - рассматриваются для каждой группы отдельно. 2.6 Антигенные свойства – основа некоторых классификаций. Стрептококки имеют несколько типов антигенов. По полисахаридным антигенам подразделяют на 17 серогрупп. Дифференциация на серотипы проводится по белковому М-антигену.
СТРЕПТОКОККИ ГРУППЫ А. Большинство изолятов этой группы принадлежит к виду S. pyogenes. Стрептококки группы А обнаруживают повсеместно. Они часто колонизируют кожные покровы и слизистые оболочки человека, а в холодный сезон частота носительства в носоглотке у школьников может достигать 25%. Резервуаром служит больной человек или носитель. Основные пути передачи - контактный (с заносом в рот грязными руками) и воздушно-капельный, а также через инфицированные пищевые продукты, хранящиеся при комнатной температуре (например, молоко). патогенез поражений. Первый этап инфекционного процесса — адгезия микроорганизма к эпителию слизистых оболочек. Основные адгезины — липотейхоевые кислоты, покрывающие поверхностные фимбрии. Не менее важную роль в прикреплении к субстратам играют гиалуронидаза, стрептокиназа и стрептодорназа. Белок М [от англ, mucoid, слизистый, так как колонии штаммов-продуцентов имеют слизистую консистенцию] по структуре напоминает фимбрии грамотрицательных бактерий. Белок М-основной фактор вирулентности и типоспецифический Аг. AT к нему обеспечивают длительную невосприимчивость к повторному заражению, однако выделяют более 80 сероваров белка М, что значительно снижает эффективность гуморальных защитных реакций. Белок М ингибирует фагоцитарные реакции, непосредственно действуя на фагоциты либо маскируя рецепторы для компонентов комплемента и опсонинов, адсорбируя на своей поверхности фибриноген, фибрин и продукты его деградации. Белок также проявляет свойства суперантигена, вызывая поликлональную активацию лимфоцитов и образование AT с низким аффинитетом. Подобные свойства играют существенную роль в нарушении толерантности к тканевым изоантигенам и развитии аутоиммунной патологии. Капсула-.второй по значимости фактор вирулентности. Она защищает бактерии от антимикробного потенциала фагоцитов и облегчает адгезию к эпителию. Капсула образована гиалуроновой кислотой, аналогичной входящей в состав соединительной ткани. Соответственно капсула проявляет минимальную иммуногенную активность и не распознаётся как чужеродный агент. Интерес представляет способность бактерий самостоятельно разрушать капсулу при инвазии в ткани за счёт синтеза гиалуронидазы. Роль гиалуронидазы в патогенезе поражений изучена плохо: с одной стороны, она участвует в разрушении соединительнотканной стромы, с другой – имеет сходство со многими аутоантигенами и, возможно, участвует в запуске аутоиммунных реакций. С5а-пептидаза — третий фактор патогенности, подавляющий активность фагоцитов. Фермент расщепляет и инактивирует С5а компонент комплемента, выступающий мощным хемоаттрактантом. Стрептолизин-О [от англ, oxygen sensitive, чувствительный к кислороду] проявляет свойства гемолизина, разрушая эритроциты в анаэробных условиях. Проявляет иммуногенные свойства, титры Ат к нему имеют прогностическое значение. Стрептолизин S [от англ, stable, устойчивый] резистентен к кислороду, не несёт антигенной нагрузки и вызывает поверхностный гемолиз на кровяных средах. Оба фермента разрушают не только эритроциты, но и другие клетки; например, стрептолизин О вызывает повреждение кардиомиоцитов, а стрептолизин S — фагоцитов, поглотивших бактерии. Эритрогенные (пирогенные) токсины весьма схожи с токсинами стафилококков. Иммунологически их разделяют на три типа (А, В и С); способность к образованию токсинов детерминирована заражением бактериальной клетки умеренным фагом, несущим ген токсинообразования. Эритрогенные токсины проявляют свойства суперантигенов: оказывают митогенное действие на Т-клетки, а также стимулируют секрецию макрофагами ИЛ-1 и ФНО. Кардиогепатический токсин синтезируют некоторые штаммы стрептококков группы А. Он вызывает поражения миокарда и диафрагмы, а также образование гигантоклеточных гранулем в печени. Прочие экзоферменты. Стрептокиназа (фибринолизин) активирует плазминоген, что при-водит к образованию плазмина и растворению фибриновых волокон (фермент не проявляет прямой фибринолитической активности). Гиалуронидаза облегчает перемещение бактерий по соединительной ткани. Роль ДНКазы (стрептодорназа) и НАДаз изучена плохо, но выявление Ат к стрептодорназе В используют в диагностике различных осложнений, вызванных стрептококками группыА. Медицинское применение нашла очищенная смесь стрептокиназы, стрептодорназы и других протеолитических ферментов стрептококков (стрептокиназа-стрептодорназа), используемая для рассасывания тромбов, фибринозных и гнойных экссудатов. СТРЕПТОКОККИ группы В Стрептококки группы В обычно колонизируют носоглотку, ЖКТ и влагалище; подавляющую часть составляет S. agalactiae. Серологически стрептококки группы В разделяют на1а, 1b,1с, II и III. Бактерии сероваров 1а и III тропны к тканям ЦНС и дыхательных путей, они часто вызывают менингиты у новорождённых. Наиболее типичен вертикальный путь заражения - при прохождении плода по родовым путям, инфицированным стрептококками. Горизонтальная передача возбудителя происходит значительно реже. Большинство поражений обусловлено проникновением возбудителя в кровоток. Особо необходимо отметить стрептококковые пневмонии, развивающиеся на фоне ОРВИ. «Чистые» бактериальные поражения наблюдают редко, но как осложнения ОРВИ пневмонии отмечают так часто, что создаётся впечатление, что сами стрептококки группы В не способны вызывать поражения лёгких. Подобные пневмонии обусловлены активацией микрофлоры в зеве и носоглотке, реже регистрируют заражение от больного вирусами в ассоциации с высоковирулентными стрептококками. Поражения, вызванные стрептококками группы В, отмечают во всех возрастных категориях, но доминирует патология новорождённых. Заболевания новорожденных протекают тяжело; смертность достигает 37%. У рожениц стрептококки группы В вызывают послеродовые инфекции: эндометриты, поражения мочевыводящих путей и осложнения хирургических ран после кесарева сечения, Также отмечают способность микроорганизмов приводить к развитию поражений кожных покровов и мягких тканей, пневмоний, эндокардитов и менингитов у взрослых. Бактериемию диагностируют у лиц старшего возраста, страдающих сахарным диабетом, заболеваниями периферических сосудов, печени и злокачественными новообразованиями.Гематогенное диссеминирование возбудителя во многом обусловлено дефицитом специфических Ат,С1q.С4 компонентов комплемента (небольшое содержание последних коррелирует с низкой бактерицидной активностью в целом). Определённую роль играет полисахаридная капсула, снижающая эффективность фагоцитарных реакций. В отличие от бактерий группы А, капсула стрептококков группы В проявляет иммуногенные свойства, и AT к её Аг (в достаточном количестве) способны оказывать протективное действие. Как патогенетический фактор следует рассматривать и нейраминидазу, модифицирующую мембрану клеток хозяина, что облегчает адгезию микроорганизмов. ПНЕВМОКОКК эпидемиология. Пневмококк — один из основных возбудителей внебольничных бактериальных пневмоний (2-4 случая на 1000 человек). Наиболее подвержены инфекции дети и лица преклонного возраста. Резервуар инфекции — больные и носители (20-50% детей дошкольного возраста и 20-25% взрослых), основной путь передачи — контактный, а в период вспышек также воздушно-капельный. Пик заболеваемости приходится на холодное время года. В подавляющем большинстве случаев клинические формы инфекции развиваются при нарушениях резистентности организма (в том числе вследствие холодовых стрессов), а также на фоне сопутствующей патологии (серповидноклеточной анемии, болезни Ходжкина, ВИЧ-инфекции, миеломы, диабета, состояний после спленэктомии) или алкоголизма. ПАТОГЕНЕЗ ПОРАЖЕНИЙ. В большинстве случаев пневмонии развиваются после аспирации слюны. Затем бактерии проникают в нижние отделы дыхательных путей. Существенное значение имеет нарушение защитных дренирующих механизмов — кашлевого толчка и мукоцилиарного клиренса. Формирование мощных инфильтратов сопровождается нарушением гомеостаза лёгочной ткани. Инфекции, вызванные наиболее вирулентным сероваром 3, могут сопровождаться образованием полостей в паренхиме лёгких. Из первичного очага возбудитель может проникать в плевральную полость и перикард либо гематогенно диссеминировать и вызывать менингиты, эндокардиты и суставные поражения. Главными факторами патогенности считают капсулу и субстанцию С. КАПСУЛА - основной фактор вирулентности. Она защищает бактерии от микробицидного потенциала фагоцитов и действия опсонинов. Некапсулированные штаммы практически авирулентны, их обнаруживают редко. Большую часть пула противопневмококковых AT составляют Ат к Аг капсулы. СУБСТАНЦИЯ С— тейхоевая кислота клеточной стенки, содержащая холин и специфически взаимодействующая с С-реактивным белком. Следствие подобного реагирования — активация комплементарного каскада и высвобождение медиаторов острой фазы воспаления. Их накопление в лёгочной ткани стимулирует миграцию полиморфно-ядерных фагоцитов. ЭНТЕРОКОККИ. Входят в состав микробных ценозов полости рта, кишечника и мочеполовой системы взрослых. Большинство инфекций носит эндогенный характер и обусловлено инвазией микроорганизмов при избыточной колонизации. Также показана возможность нозокомиальной передачи микроорганизмов; частота подобных инфекций возрастает на фоне широкого применения цефалоспоринов широкого спектра действия. НЕГЕМОЛИТИЧЕСКИЕ СТРЕПТОКОККИ. Негемолитические стрептококки входят в состав микробных ценозов полости рта (составляют 30-60% всей микрофлоры) и кишечника человека. Микроорганизмы отличает низкая вирулентность; вызываемые ими системные поражения можно в определённой степени рассматривать как оппортунистические.Основную их часть составляют бактериальные эндокардиты, развивающиеся после проникновения бактерий в кровоток при травмировании слизистых оболочек (например, после чистки зубов, пережёвывании грубой пищи). Эндокардиты носят злокачественный характер и сопровождаются поражением сердечных клапанов. Способность вызывать эндокардиты обусловлена особенностями структуры гликанов (декстранов) клеточной стенки бактерий, облегчающих адгезию стрептококков к агрегатам тромбоцитов и фибрина на поврежденных клапанах. Для поражений характерны эмболии периферических сосудов: в ЦНС их отмечают в 30% случаев, в селезёнке — в 40% (данные аутопсий), в кожных покровах и глазах – в 20-40% Вторая по значимости, но несравненно более частая, патология — кариозное поражение зубов, вызываемое зеленящими стрептококками биогруппы mutatis.Микроорганизмы содержат поверхностный белок, связывающий гликопротеины слюны, и (совместно с другими бактериями) образуют бактериальные бляшки на поверхности зубов. Бактерии разлагают сахарозу, поступающую с пищей, до молочной кислоты, вызывающей деминерализацию зубной эмали. 4.ИММУНИТЕТ. После перенесенного заболевания формируется напряженный антитоксический иммунитет ( гуморальный ответ), аллергизация организма( клеточный ответ). 5. ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА СТРЕПТОКОККИ ГРУППЫ А.Исследуемый материал определяется локализацией процесса 1)Экспресс – методы. Стрептококки группы А легко можно выявить в мазках из зева, используя коммерческие наборы; групповой А-Аг экстрагируют химическими реагентами или ферментами и идентифицируют в реакциях латекс-агглютинации, коагглютинации или ИФА. 2)Микроскопический метод – не имеет диагностического значения. 3)Бактериологический – основной Основу микробиологической диагностики составляют выделение и идентификация возбудителя. Через 24 ч на КА стрептококки группы А образуют блестящие вязкие колонии. В жидких средах бактерии дают придонный, иногда поднимающийся вверх рост. Весьма информативные методы раннего выявления стрептококков — определение чувствительности к антимикробным агентам методом дисков. Наиболее часто их используют для идентификации стрептококков в мазках из зева. Для дифференцировки стрептококков группы А от прочих b-гемолитических стрептококков применяют тест чувствительности к бацитрацину Более чем в 99% случаев изоляты стрептококков группы А чувствительны к бацитрацину, тогда как представители других серогрупп обычно устойчивы. Также можно применить тест чувствительности к триметоприм-сульфаметоксазолу. Стрептококки групп А и В обычно чувствительны к действию антимикробного агента. По сравнению с чувствительностью к бацитрацину более специфичен тест гидролиза пирролидонил-b-нафтиламида (ПИР-тест). S. pyogenes — единственный стрептококк дающий положительную реакцию. Для этого в пробирки вносят полоски фильтровальной бумаги, пропитанные ПИР. Под действием бактериальных пептидаз ПИР расщепляется до b-нафтиламида, и после внесения 0,01% раствора p-диметиламиноциннамальальдегида полоски окрашиваются в вишнево-красный цвет. 4)СЕРОДИАГНОСТИКА Для экспресс-диагностики ревматического процесса и гломерулонефрита можно определять AT к стрептолизину О или стрептодорназе; серологические исследования также позволяют выявить носителей. Следует помнить, что Ат к стрептолизину О не образуются при кожных инфекциях, вызываемых стрептококками группы А. СТРЕПТОКОККИ ГРУППЫ В Принципы микробиологической диагностики аналогичны таковым при выделении стрептококков группы А. 1)ЭКСПРЕСС – МЕТОД - микроорганизмы можно быстро идентифицировать в мазках отделяемого влагалища, используя коммерческие наборы, аналогичные применяемым для выявления стрептококков группы А. 2)БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ Колонии, выросшие на КА, через 24 ч после посева прозрачные или мутноватые, выпуклые, диаметром 0,5-1,0 мм, окружены зоной гемолиза (5-15% изолятов может не проявлять гемолитических свойств). S. agalactiae обычно не чувствителен к бацитрацину и триметоприм-сульфаметоксазолу, что определяют в тесте с соответствующими дисками. Весьма специфичен тест гидролиза гиппурата. Обычно его используют для дифференцировки со S. pyogenes (даёт отрицательную реакцию). Другая дифференцирующая peaкция - САМР-тест, основанный на феномене усиления гемолитического действия золотистого стафилококка в присутствии гемолизинов других бактерий .Дальнейшую идентификацию проводят путём серотипирования в реакции латекс-агглютинации или коагглютинации с коммерческими реагентами либо при помощи инкубации мазков с моноклональными AT, меченными флюоресцеинами. ПНЕВМОКОКК 1) МИКРОСКОПИЯ – Гр+ланцетовидные инкапсулированные диплококки. 2)БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕМатериал необходимо исследовать как можно быстрее после его получения, так как бактерии склонны к быстрому аутолизу, обусловленному активностью внутриклеточных ферментов. Выделение возбудителя проводят на КА или на жидкой коммерческой среде для стрептококков. Для дифференцировки от прочих стрептококков наиболее широко используют тест чувствительности к оптохину. Это средство угнетает рост практически 100% клинических изолятов. От зеленящих стрептококков S. pneumoniae отличает способность ферментировать инулин, а также чувствительность к солям жёлчных кислот (дезоксихолатная проба), в присутствии которых происходит лизис пневмококков. Выделенные изоляты следует серотипировать, используя коммерческие реагенты для реакций латекс-агглютинации или коагглютинации, выявляющих капсульные Аг. 3)БИОЛОГИЧЕСКАЯ ПРОБА При сомнительных результатах можно внутрибрюшинно заразить белых мышей материалом, взятым от больного, а затем провести бактериологические и серологические исследования перитонеального экссудата. НЕГЕМОЛИТИЧЕСКИЕ СТРЕПТОКОККИ. Микробиологическая диагностика аналогична мероприятиям, проводимым для выделения и идентификации прочих стрептококков. 1) Бактериологический метод – основной. На наличие возбудителей указывает появление мелких колоний, окружённых зоной α-гемолиза. Дальнейшую дифференцировку проводят по отсутствию способности расти в жидких средах, содержащих 6,5% NaCl, и гидролизовать эскулин в присутствии солей жёлчных кислот; также дифференцирующим признаком считают отсутствие чувствительности к оптохину (последний не ингибирует рост бактерий). Дополнительным признаком служит высокая чувствительность большинства изолятов к пенициллину. ЭНТЕРОКОККИ. 1) Бактериологический метод Обычно не представляет затруднений, так как энтерококки хорошо растут на простых питательных средах. Через 18-24 ч они образуют сероватые колонии диаметром 0,4-1мм. На КА энтерококки могут приводить к образованию зоны неполного или полного гемолиза. Селективно-дифференциальными средами для энтерококков служат Диф-3 и Диф-5. На среде Диф-3, содержащей теллурит калия, энтерококки образуют характерные чёрные колонии, что обусловлено способностью бактерий восстанавливать теллур. Для дифференцировки стрептококков и энтерококков также используют инертность последних к солям желчных кислот. Основные тесты – способность расти в присутствии 6,5% NaCl и ПИР-тест, в котором энтерококки дают положительный результат. Также заслуживает внимания способность бактерий обесцвечивать молоко с метиленовым синим через 4-6 часов инкубации в термостате.
ДОМАШНЕЕ ЗАДАНИЕ К ЗАНЯТИЮ № 5. 1. Стафилококки и стрептококки. Морфология, кулътуралъные свойства, биохимические особенности. Пигменты, токсины, ферменты, выделяемые патогенными кокками (признаки патогенности). 2. Лабораторная диагностика заболеваний, вызываемых стафилококками, стрептококками. Определение признаков патогенности. Фаготипирование стафилококков. 3. Специфическое лечение и профилактика заболеваний, вызываемых патогенными кокками. Практическое занятие №6 Дата________________ ОТЧЕТ ПО ТЕМЕ: ПИЩЕВЫЕ ТОКСИКОИНФЕКЦИИ И ИНТОКСИКАЦИИ (ТОКСИКОЗЫ). ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:
ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА. Решить один из 4 варианта задач по выделению бактерий и определению токсинов. В итоге - коллективно разобрать решение каждой ситуационной задачи, сделать запись подробного протокола (начиная с описания ситуации и заканчивая полученным аргументированным микробиологическим диагнозом) одной из задач. ПОЯСНЕНИЯ К ЗАНЯТИЮ |