Федеральное агенство по здравоохранению и социальному развитию
 Скачать 1.05 Mb.
|
Общее микробное число (ОМЧ)Общее микробное число – это количество бактерий, имеющихся в определенном объеме исследуемого материала. Этот показатель служит лишь для приближенных относительных оценок. Методы определения ОМЧ можно разделить на 2 группы:
Санитарно-показательные микроорганизмы (СПМ) Санитарно-показательными являются микроорганизмы, указывающие на загрязнения внешней среды выделениями человека или животных. Обычно это комменсалы естественных полостей. При выявлении СПМ производится их количественное определение, результаты исследований выражаются в двух величинах: индекс СПМ (это количество СПМ, обнаруженное в определенном объеме или количестве исследуемого объекта, для определения которого используют метод мембранных фильтров и метод бродильных проб) и титр СПМ (это наименьший объем исследуемого материала, в котором обнаружена хотя бы одна особь СПМ) – величина, обратная индексу. Например: 1000 coli-titr = -------- (см. таблицу) индекс Основные характеристики СПМ.
СПМ воды – кишечная палочка, воздуха – зеленящий стрептококк, почвы – клостридиум перфрингенс, молока – кишечная палочка. СПМ делят на 3 группы: Группа А включает обитателей кишечника человека и животных, их расцениваются как индикаторы фекального загрязнения (эшерихии, энтерококки, протеи, сальмонеллы, сульфитвосстанавливающие клостридии, термофилы, бактериофаги, бактероиды, синегнойная палочка, кандиды). Группа В включает обитателей верхних дыхательных путей и носоглотки, их расценивают как индикаторы орального загрязнения (стрептококки, стафилококки). Группа С включает сапрофитные микроорганизмы, обитающие во внешней среде, их расценивают как индикаторы процессов самоочищения (бактерии-протеолиты, бактерии-аммонификаторы, бактерии-нитрификаторы, грибы, актинимицеты, синезеленые водоросли). Патогенные микроорганизмы (ПМ) Обнаружение ПМ во внешней среде производится:
Идентификация ПМ производится согласно общепринятым схемам. Согласно ГОСТу “патогенные микроорганизмы и их токсины должны отсутствовать в питьевой воде и пищевых продуктах”. ДОМАШНЕЕ ЗАДАНИЕ К ЗАНЯТИЮ №1
ДЛЯ ЗАМЕТОК ________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ №2 Дата ________________ ТЕМА: «ОТЧЕТ ПО МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКЕ ИНФЕКЦИЙ, ВЫЗВАННЫХ ВИБРИОНАМИ, САЛЬМОНЕЛЛАМИ, ШИГЕЛЛАМИ, КЛЕБСИЕЛЛАМИ, ПРОТЕЕМ» ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ: 1. Определить уровень усвоения студентами пройденного материала. Вопросы для письменного контроля:
ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ № 3 ДАТА ________________ ТЕМА: ПАТОГЕННЫЕ АНАЭРОБЫ: КЛОСТРИДИИ – ВОЗБУДИТЕЛИ ГАЗОВОЙ ГАНГРЕНЫ, СТОЛБНЯКА, БОТУЛИЗМА. БАКТЕРОИДЫ. ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:
ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА:
 C.perfringens C.tetani C.botulinum
 среда Китта-Тароцци среда Китта-Тароцци молоко молоко   в исходном виде при росте анаэробов в исходном виде при росте анаэробов  среда Вильсона-Блера среда Вильсона-Блера сахарный агар сахарный агар в исходном виде при росте анаэробов в исходном виде при росте анаэробов
ПОЯСНЕНИЯ К ЗАНЯТИЮ:
Анаэробная раневая инфекция – полимикробное заболевание в развитии, которого принимают участие несколько видов клостридий (C.perfringens, C.novyi (oedematiens), C.septicum, C.histolyticum, C.sordellii и др.), часто – в ассоциации с аэробными бактериями (стафилококками, стрептококками и др., легко инфицирующими раны). Газовая гангрена – субфасциальная анаэробная инфекция, сопровождающаяся некрозом мышечной ткани и выраженной интоксикацией организма. Кожные покровы серо-синего цвета. Рана резко болезненна, края её бледные, отечные, безжизненные, дно раны сухое. Окраска видимых в ране мышц напоминает вареное мясо. При надавливании на края раны из тканей выделяются пузырьки газа с неприятным сладковато-гнилостным запахом. Пальцами определяется типичная крепитация. Состояние больного быстро ухудшается, наступает шок.
Классификация Клостридии относятся к 18 группе грамположительных образующих споры анаэробов, включены в род Clostridium. Возбудителями газовой гангрены являются несколько видов: C.perfringens, C.novyi (oedematiens), C.septicum, C.histolyticum, C.sordellii и др. Морфологические и тинкториальные свойства Все клостридии – возбудители анаэробной раневой инфекции – грамположительные палочки с центрально или субтерминально расположенными спорами. C.perfringens не имеет жгутиков, в организме человека и животных образует капсулу, которая утрачивается при пересевах на питательные среды. C.novyi – перитрих, капсулы не образует. C.septicum – полиморфна, встречаются нитевидные формы до 50 мкм в длину, перитрих, капсулы не образует. Остальные клостридии – возбудители анаэробной раневой инфекции – небольшие палочки, перитрихи. Культуральные свойства Культивируют клостридии в средах для анаэробных микроорганизмов (среда Китта-Тароцци, Вильсона-Блера, молоко, сахарно-кровяной агар, КАБ-среда, тиогликолевые среды). C.perfringens, C.histolyticum, C.sordellii могут расти в присутствии небольшого количества кислорода (умеренные облигатные анаэробы), а C.novyi и C.septicum не выносят даже малого количества кислорода (строгие облигатные анаэробы). Биохимические свойства C.perfringens сбраживает многие углеводы до кислоты и газа, разжижает желатину и свернутую сыворотку, при расщеплении белков выделяется H2S и NH3. C.novyi сбраживает небольшое количество углеводов, разжижает желатину, но не свернутый белок, не образует H2S. C.septicum обладает выраженной сахаролитической активностью и разжижает желатину, разлагает белки с выделением H2S и NH3, индола не образует. C.histolyticum не ферментирует углеводы, но обладает выраженной протеолитической активностью, образуя большое количество H2S. C.sordellii ферментирует некоторые углеводы, разжижает желатину, свернутую сыворотку, образует индол. Клостридии образуют ферменты патогенности: коллагеназа, желатиназа, гиалуронидаза, ДНК-аза, нейраминидаза, лецитиназа. Токсигенные свойства C.perfringens продуцирует целый ряд белковых экзотоксинов: мембранотоксины (гемолизины и лейкоцидин), цитотоксины, энтеротоксин. α-гемолизин (альфа-токсин или фосфолипаза С) относительно термолабилен, способен гидролизовать фосфолипиды мембран клеток (лецитин, сфингомиелин, фосфатидилсерин, фосфатидилинозитол и др.), вызывает лизис эритроцитов и некротические изменения в тканях. θ-гемолизин (тета-токсин) является термолабильным белком, способен реагировать с холестерином клеточных мембран, разрушая эритроциты, лейкоциты, эндотелиальные клетки, обеспечивая инвазию и участвуя в некрозе тканей; также воздействует на миокард и нарушает сердечную деятельность. β-токсин (бета-токсин) является белковым термолабильным токсином с некротическим действием. ε-токсин (эпсилон-токсин) – белковый токсин, обладающий нейротоксическим действием вследствие повышенной тропности к тканевым структурам мозга. Лейкоцидин снижает фагоцитарную активность и хемотаксическую подвижность лейкоцитов, в высоких дозах повреждает лейкоцитарные мембраны и вызывает лизис лейкоцитов. Серовары А,С и Д C.perfringens образуют энтеротоксин – термолабильный белок, прочно связанный с оболочкой микробной клетки, способный понижать потребление кислорода тканями и вызывающий развитие энтерита. C.novyi также продуцирует несколько токсинов. Действие α-токсина на ткани приводит к образованию отека, β-токсин обладает дермонекротической и гемолитической активностью. C.histolyticum выделяет α-токсин, оказывающий летальное и некротическое действие при прямом повреждении тканей, и гемолизин (ε-токсин). Антигенные свойства C.perfringens имеет 6 сероваров (A, B, C, D, E, F), а C.novyi - 3 серовара (А, В, С), которые отличаются друг от друга по антигенным свойствам вырабатываемых ими токсинов. C.septicum подразделяется на серовары по Н-антигену, вырабатываемые разными сероварами токсины не различаются между собой. Резистентность Споры клостридий отличаются большой устойчивостью к различным воздействиям. Споры C.perfringens погибают при кипячении лишь в течение 15-30 минут. Споры C.novyi кипячение выносят в течение 1-2 часов, а в окружающей среде сохраняются до 20-25 лет. Споры C.septicum менее устойчивы и при кипячении погибают в течение нескольких минут. Патогенность для животных Из экспериментальных животных восприимчивыми к C.perfringens являются морские свинки, кролики, мыши. C.perfringens патогенна для домашних животных: серовар В вызывает дизентерию у ягнят и других животных, серовар С – геморрагическую энтеротоксинемию у овец, коз, поросят, телят, серовар D – инфекционную энтеротоксемию у людей и животных, серовар Е – некротический энтерит у людей, энтеротоксемию у ягнят и телят. Серовары В и С C.novyi вызывают заболевание у животных. При подкожном введении кроликам, белым мышам, морским свинкам возникает студенистый, желеобразный отек, обычно без пузырьков газа. |