I. общая часть (бактериология, микология, вирусология, микробная экология, санитарная микробиология)
 Скачать 5.14 Mb.
|
40. Вирус иммунодефицита человека. ВИЧ-инфекция и СПИД. Лабораторная диагностика.1. Семейство Retroviridae, род Lentivirus, виды: HIV-1 и HIV-2. ВИЧ-1 (группы M,N,O,P) – основной возбудитель СПИДа. ВИЧ-2 – эндемичен для Западной Африки. 2. морфология и структура: 1РНК+ (2 копии=диплоидный геном); кубический тип симметрии капсида; обратная транскриптаза, высокая изменчивость вируса. Структурные гены: gag (группоспецифические белки сердцевины), pol (полимераза), env (envelope=оболочка, т.е. gp шипов); шипы gp120 (скорость антигенного дрейфа в 100 раз выше, чем у вируса гриппа), gp41. Регуляторные гены: tat (трансактиватор транскрипции) - активация синтеза РНК вируса на матрице ДНК-транскрипта; rev (регулятор экспрессии вирусных белков) - перенос РНК-транскрипта в цитоплазму и синтез белков вируса (переход от латентной инфекции к продуктивной); vif (фактор инфекционности вируса) - отпочковывание вируса; nef (отрицательный фактор экспрессии) - переход к латентной инфекции - снижение экспрессии клеточных CD4; vpu (вирусный белок u) и vpr (вирусный белок r) - репликация провирусной ДНК. Длинные концевые повторы (long terminal repeat – LTR) - интеграция в геном клетки, регуляция экспрессии генов провируса Клетки-мишени: имеющие CD4 (Т-хелперы, моноциты/макрофаги) и не имеющие CD4 (астроциты, эндотелиальные клетки, эпителиальные клетки) 3. Стадии развития ВИЧ-инфекции: Инкуб. период 10-15 лет 1) ВИЧ-инфекция: - острая инфекция (лихорадка, интоксикация, увеличение лимфатических узлов и др.) - бессимптомная инфекция (может длиться годами) - персистирующая генерализованная лимфоаденопатия 2) преСПИД - поражение ЦНС (абсцессы, менингиты, энцефалиты и др.) - поражения лёгких (пневмонии) - поражения ЖКТ (диарея, похудание и др.) - возникновение опухолей (саркома Капоши, первичная лимфома мозга и др.) 3) СПИД (фатальное снижение всех иммунологических показателей) - кахексия - адинамия - деменция и др. 4. Культивирование и репродукция: из периферической крови пациента – на фракцию мононуклеарных клеток (МПК) в градиенте фикола – сокультивирование с обработанным ФГА (фитогемагглютининами) МПК доноров (37 градусов, атмосфера СО2, до 28 дней). Затем определение маркеров репликации вируса: активность ОТ, р24, РНК ВИЧ, ЦПД (дегенерация, гибель, синцитий и др.). Потом вируссодержащим супернатантом (первичная культура вируса) заражаем перевиваемые Т-лимфобластоидные линии, экспрессирующие CD4, и изучаем фенотип выделенного ВИЧ. 5. пути передачи: половой, парентеральный (гемотрансфузии, инъекционные наркоманы), вертикальный (ч/з плаценту в последние месяцы беременности, при рождении ребёнка, при грудном вскармливании) 6. материал для исследования: количество вируса достаточное для заражения содержится в крови, сперме, влагалищном секрете, цервикальном секрете, грудном молоке, ликворе. Обычно для анализа берут кровь. 7. методы лабораторной диагностики: 1) Выявление антител к ВИЧ (период окна) - ИФА – Ig к gp 120 (скрининг) - иммуноблотинг – Ig к gp 120 и 41 и другим белкам вируса (подтверждение) 2) Выявление вирусного геномного материала: -ПЦР (ДНК провируса, РНК вируса в крови): уровень вирусной репликации = «вирусная нагрузка» - до 20-50 копий/мл; контроль эффективности терапии 8. Этиотропная терапия ВИЧ-инфекции – тритерапия: 1) Ингибиторы обратной транскриптазы: нуклеозидные (зидовудин, ламивудин, абакавир) и ненуклеозидные (невирапин); 2) Ингибиторы вирусной протеазы (ритонавир, саквинавир); 3) Ингибиторы слияния (энфувиртид) IV. ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЕ ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫА. ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ:Диагностические сыворотки, антигены, бактериофаги, аллергены 1. Монорецепторная сыворотка агглютинирующая сальмонеллезная (О).Состав: изготавливают из крови кроликов, гипериммунизированных О-АГ сальмонелл, с последующей адсорбцией из сывороток неспецифических антител. Назначение: применяют для сероидентификации сальмонелл в РА. 2. Монорецепторная сыворотка агглютинирующая сальмонеллезная (Н).Состав: изготавливают из крови кроликов, гипериммунизированных H-АГ сальмонелл, с последующей адсорбцией из сывороток неспецифических антител. Назначение: применяют для сероидентификации сальмонелл в РА. 3. Сухая агглютинирующая адсорбированная поливалентная сыворотка к шигеллам.Состав: препарат представляет собой лиофилизированная иммунная сыворотка, полученная из крови кроликов или баранов, гипериммунизированных антигенами шигелл (flexneri/sonnei), инактивированными формалином или мертиолятом. Назначение: применяют для сероидентификации шигелл в РА. Содержит At Применяется для диагностики Получают путём гипериммунизации кроликов Ag кишечной палочки Используют в РА на стекле, для идентификации возбудителя. |