Исследование включает в себя определение концентрации гемоглобина, величины гематокрита, концентрации эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов, а также расчёт эритроцитарных индексов (mcv, rdw, mch, mchc).
 Скачать 93.06 Kb.
|
|
1.ОАК. Исследование включает в себя определение концентрации гемоглобина, величины гематокрита, концентрации эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов, а также расчёт эритроцитарных индексов (MCV, RDW, MCH, MCHC).Кровь состоит из жидкой части (плазмы) и клеточных, форменных элементов (эритроциты, лейкоциты, тромбоциты). Состав и концентрация клеточных элементов в крови меняются при различных физиологических и патологических состояниях: обезвоживании, воспалении, бактериальных или вирусных инфекциях, нарушениях в системе кроветворения, кровотечениях, интоксикациях, онкологических заболеваниях и пр.Общий анализ крови позволяет получить представление об объёмном соотношении клеточных элементов и жидкой части крови (гематокрите), содержании отдельных видов форменных элементов крови (эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов), концентрации гемоглобина, основных характеристиках эритроцитов (эритроцитарные индексы). Общий анализ крови относится к базовым клиническим тестам.Гемоглобин - дыхательный пигмент крови, который содержится в эритроцитах и участвует в транспорте кислорода и углекислоты. Содержание гемоглобина в крови у мужчин несколько выше, чем у женщин. У детей первого года жизни может наблюдаться физиологическое снижение концентрации гемоглобина. Патологическое снижение гемоглобина крови (анемия) может быть следствием повышенных потерь при различных видах кровотечений, результатом ускоренного разрушения эритроцитов, нарушения образования эритроцитов. Анемия может быть как самостоятельным заболеванием, так и симптомом какого-либо хронического заболевания.Гематокрит – это процентная доля, которую составляют все форменные элементы (количественно, в основном, это эритроциты) от общего объёма крови. Эритроциты (RBC, Red Blood Cells) Эритроциты (красные кровяные клетки) - высокоспециализированные безъядерные клетки крови, заполненные дыхательным пигментом - железосодержащим белком гемоглобином. Основная функция эритроцитов – транспорт кислорода. Образуются они в красном костном мозге. Образование эритроцитов стимулирует эритропоэтин, синтезирующийся в почках (в повышенных количествах при гипоксии). Для нормального синтеза гемоглобина и образования эритроцитов необходимы витамин В12 и фолиевая кислота, должно быть достаточное поступление железа. В норме срок жизни эритроцита в кровеносном русле – 120 дней. Разрушаются эритроциты в селезёнке и ретикуло-эндотелиальной системе. Определение количества эритроцитов, в комплексе с исследованием содержания гемоглобина, оценкой гематокрита и характеристикой эритроцитов (эритроцитарными индексами) используют в дифференциальной диагностике анемий. .Тромбоциты - безъядерные клетки, которые в своих гранулах и на поверхности содержат многие активные вещества и некоторые факторы свёртывания, поступающие в кровь при активации тромбоцитов. Тромбоциты способны к агрегации (соединение друг с другом) и адгезии (прилипание к повреждённой сосудистой стенке), что позволяет образовывать временный сгусток и останавливать кровотечения в мелких сосудах. Образуются в красном костном мозге. Продолжительность жизни тромбоцита в кровотоке – 7 - 10 дней. Снижение количества тромбоцитов может происходить как из-за повышенного их потребления, так и вследствие недостаточной продукции. Клинические проявления (повышенная кровоточивость, вплоть до угрожающих жизни состояний) возникают при концентрации тромбоцитов менее 50*103 клеток/мкл.Лейкоциты (белые кровяные клетки) - ядросодержащие клетки крови, участвующие в распознавании и обезвреживании чужеродных элементов, устранении изменённых и разрушающихся клеток собственного организма, различных иммунных и воспалительных реакциях Подготовка рабочего места для исследования.На двоих студентов для забора крови должны быть подготовлены:Реактивы:спирт этиловый 70%; 5% раствор цитрата натрия; физраствор, трансформирующий раствор; 5% раствор уксусной кислоты ,вата; стерильные скарификаторы; стерильные капилляры Панченкова; капилляры Сали; предметные стекла с лункой; предметные стекла; шлифованное стекло; штатив с пробирками; штатив Панченкова; градуированные пипетки; резиновые груши; емкости с дезраствором для использованной ваты, капилляров, скарификаторов.Промывают капилляр Панченкова 5% раствором цитрата натрия. Набирают цитрат натрия в капилляр Панченкова до метки «75» и выдуваютего в лунку предметного стекла (или в пробирку). Разливают реактивы по пробиркам: в одну пробирку вносят 4мл физраствора; в другую — 5мл трансформирующего раствора; в третью — 0,4 мл 5% раствора уксусной кислоты. Забор крови из пальцаДелают прокол кожи. После удаления первой капли делают 2 мазка. Набирают из пальца кровь в капилляр Панченкова выше метки «0» («К») – почти полный капилляр. Спускают кровь из капилляра Панченкова до метки О «К» на предметное стекло – она будет использована для определения содержания гемоглобина,подсчета количества эритроцитов и лейкоцитов. Остальную кровь из капилляра Панченкова спускают в цитрат натрия и тщательно перемешивают кровь с цитратом. Капилляром Сали с предметного стекла набирают 0,02 мл цельной крови и вносят её в физраствор – для подсчета эритроцитов. 2-3 промывают капилляр Сали физраствором. Перемешивают кровь с физраствором. Капилляром Сали с предметного стекла набирают 0,02 мл цельной крови и вносят её в трансформирующий раствор – для определения концентрации гемоглобина. 2-3 промывают капилляр Сали трансформирующим раствором. Тщательно перемешивают содержимое пробирки и замечают время – 20минут.Капилляром Сали с предметного стекла набирают 0,02 мл цельной крови и вносят её в раствор уксусной кислоты – для подсчета количества лейкоцитов. 2-3 промывают капилляр Сали раствором уксусной кислоты. Тщательно перемешивают содержимое пробирки. Набирают смесь крови с цитратом в капилляр Панченкова без пузырьков воздуха до метки «0» и ставят капилляр в штатив Панченкова на 1 час. Проведение исследованийЧерез 20 минут колориметрируют смесь крови с трансформирующим раствором на ФЭКе или МИНИГЕМе. При использовании ФЭКа концентрацию гемоглобина определяют по калибровочному графику.Готовят к работе счетную камеру – притирают к камере Горяева покровное стекло так, чтобы появились радужные кольца. Тщательно встряхивают пробирки с кровью, разведенной физраствором и уксусной кислотой. Заполняют одну сетку камеры Горяева смесью крови и физраствора (для подсчета эритроцитов), а другую – кровью с уксусной кислотой (для подсчета лейкоцитов). Оставляют камеру в горизонтальном положении на 1 минуту для оседания клеток крови. Готовят микроскоп к работе: настраивают свет, конденсор опускают. Подсчитывают под микроскопом (окуляр 10х или 15, объектив 8х) в одной сетке камеры Горяева эритроциты в пяти больших разграфленных квадратах по диагонали сетки, а затем, в другой сетке счетной камеры — лейкоциты в 100 больших не разграфленных квадратах. По формулам рассчитывают количество эритроцитов и лейкоцитов в 1л крови .Через 1 час снимают показания СОЭ. 2. Эритроциты – красные кровяные тельца, содержащие дыхательный пигмент – гемоглобин. Эти безъядерные клетки образуются в красном костном мозге, а разрушаются в селезенке. В зависимости от размеров делятся на нормоциты, микроциты и макроциты. Примерно 85 % всех клеток имеет форму двояковогнутого диска или линзы с диаметром 7,2–7,5 мкм. Такая структура обусловлена наличием в цитоскелете белка спектрина и оптимальным соотношением холестерина и лецитина. Благодаря данной форме эритроцит способен переносить дыхательные газы – кислород и углекислый газ.Важнейшими функциями эритроцита являются:1) дыхательная;2) питательная;3) ферментативная;4) защитная;5) буферная.Гемоглобин участвует в иммунологических реакциях.Дыхательная функция связана с наличием гемоглобина и бикарбоната калия, за счет которых осуществляется перенос дыхательных газов.Питательная функция связана со способностью мембраны клеток адсорбировать аминокислоты и липиды, которые с током крови транспортируются от кишечника к тканям.Ферментативная функция обусловлена присутствием на мембране карбоангидразы, метгемоглобинредуктазы, глютатионредуктазы, пероксидазы, истинной холинэстеразы и др.Защитная функция осуществляется в результате оседания токсинов микробов и антител, а также за счет присутствия факторов свертывания крови и фибринолиза.Поскольку эритроциты содержат антигены, то их используют в иммунологических реакциях для выявления антител в крови.Эритроциты являются самыми многочисленными форменными элементами крови. Так, у мужчин в норме содержится 4,5–5,5 ? 1012/л, а у женщин – 3,7–4,7 ? 1012/л. Однако количество форменных элементов крови изменчиво (их увеличение называется эритроцитозом, а при уменьшение – эритропенией).Эритроциты обладают физиологическими и физико-химическимисвойствами:1) пластичностью;2) осмотической стойкостью;3) наличиемкреаторныхсвязей;4) способностью к оседанию;5) агрегацией;6) деструкцией.Пластичность во многом обусловлена строением цитоскелета, в котором очень важным является соотношение фосфолипидов и холестерина. Это соотношение выражается в виде липолитического коэффициента и в норме составляет 0,9. Пластичность эритроцитов – способность к обратимой деформации при прохождении через узкие капилляры и микропоры. При снижении количества холестерина в мембране наблюдается снижение стойкости эритроцитов.Осмотическое давление в клетках немного выше, чем в плазме, за счет внутриклеточной концентрации белков. Также на осмотическое давление оказывает влияние и минеральный состав (в эритроцитах преобладает калий и снижено содержание ионов Na). За счет наличия осмотического давления обеспечивается нормальный тургор.настоящее время установлено, что эритроциты являются идеальным переносчиками, поскольку обладают креаторными связями, транспортируют различные вещества и осуществляют межклеточное взаимодействие.Способность к оседанию обусловлена удельным весом клеток, который выше, чем все плазмы крови. В норме она невысока и связана с наличием белков альбуминовой фракции, которые способны удерживать гидратную оболочку эритроцитов. Глобулины являются лиофобными коллоидами, которые препятствуют образованию гидратной оболочки.Соотношение альбуминовой и глобулиновой фракций крови (белковый коэффициент) определяет скорость оседания эритроцитов. В норме он составляет 1,5–1,7.При уменьшении скорости кровотока и увеличении вязкости наблюдается агрегация. При быстрой агрегации образуются «монетные столбики» – ложные агрегаты, которые распадаются на полноценные клетки с сохраненной мембраной и внутриклеточной структурой. При длительном нарушении кровотока появляются истинные агреганты, вызывающие образование микротромба.Деструкция (разрушение эритроцитов) происходит через 120 дней в результате физиологического старения. Оно характеризуется:1) постепенным уменьшением содержания липидов и воды в мембране;2) увеличенным выходом ионов K и Na;3) преобладанием метаболических сдвигов;4) ухудшением способности к восстановлению метгемоглобина в гемоглобин;5) понижением осмотической стойкости, приводящей к гемолизу.Стареющие эритроциты за счет понижения способности к деформации застревают в миллипоровых фильтрах селезенки, где поглощаются фагоцитами. Около 10 % клеток подвергаются разрушению в сосудистом русле.норме содержание красных телец в крови у взрослых мужчин составляет 3.9•1012–5,5•1012клеток/л. У женщин этот показатель чуть меньше: 3,9•1012–4,7•1012 клеток/л. Что касается детей, то нормы эритроцитов отличаются в зависимости от возраста ребенка.причинам эритроцитоза, относят опухоли почек или желез внутренней секреции, а также избыток стероидных гормонов в организме (они назначаются при некоторых заболеваниях). Содержание эритроцитов в крови повышается также в ситуациях, связанных с нехваткой кислорода: например, если человек недавно вернулся из похода в горы либо если он страдает заболеваниями легких и сердца, при которых нарушается процесс транспорта кислорода. К таким патологиям относятся хронический бронхит, бронхиальная астма и пороки сердца.Эритропения — это пониженное содержание эритроцитов в крови. Она проявляется слабостью, быстрой утомляемостью, шумом в ушах и выраженной бледностью кожных покровов. Вот возможные причины эритропении:острая кровопотеря (при травме или во время операции);хроническая кровопотеря (обильные менструации у женщин или скрытое кровотечение – при язве желудка или двенадцатиперстной кишки, геморрое, раке кишечника и других болезнях);недостаточное поступление в организм с пищей железа (оно необходимо для синтеза гемоглобина);плохое усвоение или дефицит в пище витамина В12 и фолиевой кислоты;избыточное употребление жидкости или введение избыточного количества физраствора внутривенно, посредством капельницы;слишком быстрое разрушение красных кровяных телец вследствие ошибки при переливании крови, из-за наследственных заболеваний (таких как серповидно-клеточная анемия), при отравлении тяжелыми металлами или другими ядами, а также у больных с искусственным клапаном сердца 3)Гемоглобин. Гемоглобин (Hb) – молекула, с помощью которой переносится кислород. Клеточное дыхание – клетки насыщаются кислородом;внешнее дыхание – в легкие поступает кислород, а организмом выделяется углекислый газ;внутреннее дыхание – в легких кислород захватывает гемоглобин, они трансформируются в оксигемоглобин и разносятся по всем клеткам. В пробирку, содержащую 5 мл трансформирующего раствора, добавляют 0,02 мл крови (разведение в 251 раз). Хорошо перемешивают и оставляют стоять 10 мин. Фотометрируют при длине волны 500—560 им (зеленый светофильтр) в кювете с толщиной слоя 10 мм против контрольной пробы (трансформирующий раствор). Измеряют в тех же условиях стандартный раствор. Расчет содержания гемоглобина производят по калибровочному графику, построенному по разведениям стандартного раствора гемиглобинцианида в трансформирующем растворе. мужчины — 132–164 г/л;женщины — 120–145 г/л;новорожденные (кровь из пуповины) — 135–195 г/л; 4) Анемия - клинико-гематологический синдром, характеризующийся уменьшением содержания гемоглобина в единице объема крови, чаще при одновременном уменьшении количества эритроцитов, что приводит к развитию кислородного голодания тканей. Анемии вследствие кровопотери (постгеморрагические). Острая,Хроническая,II. Анемии вследствие нарушения образования эритроцитов и гемоглобина.1. Железодефицитная анемия.2. Мегалобластные анемии, связанные с нарушением синтеза ДНК. (В12- и фолиеводефицитные анемии)3. Анемии, связанные с костномозговой недостаточностью (гипопластические).Ш. Анемии вследствие усиленного кроворазрушения (гемолитические).IV. Анемии смешанные. Характерной особенностью истинной анемии является либо абсолютное уменьшение эритроцитарной массы, либо функциональная недостаточность системы эритроцитов в силу пониженного содержания гемоглобина в каждом отдельном эритроците. В качестве анемии следует рассматривать те состояния, при которых наблюдается снижение концентрации гемоглобина (в граммах на литр крови — г/л) для детей от 6 месяцев до 6 лет ниже 110, от 6 до 14 лет — 120, взрослых женщин — 120, взрослых мужчин — 130. 5)Лейкоциты, или белые кровяные тельца, являются ядросодержащими клетками диаметром 4-20 мкм.Лейкоциты – белые кровяные клетки иммунной системы, которые защищают организм человека от разных инфекций. Лейкоцит содержит в себе массу клеток различных подклассов лимфоциты,нейтрофифилы,эозинофилымоноциты,базофилы.Нормы:У женщин = от 3,9 до 10,4х10.У мужчин = от 4,2 до 9х10. Функции лейкоцитов:Защитная - заключается в уничтожении лейкоцитами микроорганизмов путем их фагоцитоза или действием на них другими бактерицидными лейкоцитарными факторами; противоопухолевом действии на опухолевые клетки самого организма; противогельминтном действии; антитоксической активности; участии в формировании различных форм иммунитета, а также в процессах свертывания крови и фибринолизе.Регенеративная - высвобождение лейкоцитами факторов способствующих заживлению поврежденных тканей.Регуляторная - образование и высвобождение цитокинов, ростовых и других факторов, регулирующих гемоцитопоэз и иммунный ответ.Лейкоцитоз – это состояние, которое характеризуется высоким уровнем лейкоцитов в крови. Наиболее распространенные причины лейкоцитоза:Заболевания инфекционного характера. Это может означать наличие в организме различных бактерий, вирусов, грибов и паразитов.Аутоиммунные заболевания.Воспалительные процессы, в том числе и хронические.Неправильное питание. Аллергические реакции.Лейкоз и онкология.Значительные повреждения кожи (ожоги, раны, обморожения).Инсульты и инфаркты.Сильные эмоциональные нагрузки.Тяжелый физический труд.Беременность, в особенности период токсикоза. А также внематочнаябеременность.Длительный прием препаратов, которые не принимает организм.Лейкопения — это снижение количества лейкоцитов в единице объёма крови. Лейкопении встречаются только при патологических состояниях. Особенно тяжелая лейкопения может наблюдаться в случае поражения костного мозга — острых лейкозах и лучевой болезни. При этом изменяется функциональная активность лейкоцитов, что приводит к нарушениям специфической и неспецифической защиты, попутным заболеваниям, часто инфекционного характера, и даже смерти. 6) Лейкоз (рак крови) – это опухолевое злокачественное заболевание кроветворной системы организма. При данной патологии первичным объектом поражения являются кроветворные клетки костного мозга.ФОРМЫ:Острый – замещение нормальных кроветворных клеток происходит бластами (незрелыми клетками); Хронический – основными опухолевыми элементами являются зрелые или созревающие клетки."Лейкемическое зияние" это когда в мазке периферической крови и костного мозга, преобладают"бласты" (99%),но встречаются зрелые клетки (1-5%),характерно только для острого лейкоза. Протекает с лейкоцитозом до 100-300 на 10⁹ в 1 л крови,но может быть лейкопения до 0.2-0.3 на 10⁹в 1л крови.Появляется анемия,Hb до (0.3-1г),Эритроциты понижаются до 1-1.5-10⁹в 1л крови,тромбоцитопения,СОЭ возрастает.Острый лейкоз частая форма у детей-85%,у взрослых-20%. 7. Цветовой показатель крови-клинический анализ, в ходе которого осуществляется определение степени концентрации Hb в 1 клетке. Норма у м и ж-0,86–1,05 ед; у новорожденных и до 5 дней -0,9–1,3 ед.Формула для расчета: массу Hb умнож. на 3 и разделить полученную сумму на три первые цифры от кол-ва эритроцитов в крови. Ретикулоциты клетки -предшественники эритроцитов в процессе кроветворения, составляющие около 1 % от всех циркулирующих в крови эритроцитов.Окраска обезжиренное предметное стекло подогревают над пламенем горелки. Стеклянной палочкой наносят на стекло каплю бриллиантового крезилового и готовят мазок из краски шлифованным стеклом. Перед проведением анализа готовят влажную камеру. Наносят каплю крови на мазок, готовят из нее тонкий мазок и тотчас помещают во влажную камеру на 3-10 мин. Затем высушивают на воздухе. Подсчет мазки микроскопируют с маслом. В мазке ретикулоциты и эритроциты окрашены в желтовато-зеленоватый цвет, зернисто-нитчатая субстанция 8. Гематокрит. Методы определения: Гематокрит представляет собой количество красных клеток крови в ее общем объеме. Средние значения гематокрита можно определить невооруженным взглядом, если осуществить забор крови и дать ей отстояться. Эритроциты, осевшие на дно, будут указывать гематокрит в процентном соотношении по сравнению с поднявшейся наверх плазмой крови. Нормы: М: 0,44-0,48, иногда до 0,52. Ж: 0,36-0,43. Во время беременности,с 20 недели срока, уровень начинает снижаться. Дети: 0,44-0,62 –новорожденные, 0,32-0,44 – млад до 3 мес, 0,36-0,44 –дети до 1, 0,37-0,44 – дети до 10 л. Понижение и повышение гематокрита крови указывает на степень концентрации в ней красных кровяных телец. 9) СОЭ – скорость оседания эритроцитов, красных кровяных клеток, которые под воздействием антикоагулянтов за какое-то время оседают внизу медицинской пробирки или капилляра.Время оседания оценивается по высоте слоя плазмы, полученного в результате анализа, оценивается в миллиметрах за 1 час. СОЭ обладает высокой чувствительностью, хотя и относится к неспецифическим показателям.Нормой для мужчин является 1-10 мм/ч, для женщин в среднем – 3-15мм/ч. После 50 лет данный показатель способен увеличиваться. Во время беременности иногда показатель может достигать 25 мм/ч.Факторы:плотный прием пищи до сдачи анализа;голодание, строгая диета;• менструация, беременность и послеродовой период у женщин;• аллергические реакции• Показатель превышает уровень 100 м/ч при острых инфекционных процессах:• ОРВИ;• Бронхит;• Цистит;• Пиелонефрит;• Гайморит;• Грипп;• Воспаление лёгких;• Туберкулёз;• Вирусный гепатит;• Инфекции грибковой природы;• Злокачественные образования.Соэ ниже нормы• нарушения работы кровеносной системы, связанные с выработкой эритроцитов (эритремия, эритроцитозы и т.д.), изменением их формы (гемоглобинопатия, сфероцитоз, серповидно-клеточная анемия и другие);• длительное голодание, обезвоживание;• врожденная или наследственная недостаточность кровообращения;• нарушение нервной системы: эпилепсия, стрессы, неврозы, а также психические расстройства;• регулярный прием определенных медикаментов: хлорид кальция, салицилаты, препараты с содержанием ртути. 10)подсчет Лейкоцитарная формула крови — это соотношение различных видов лейкоцитов, обычно выраженное в процентах. Исследование проводится в рамках общего анализа крови. Выделяют следующие виды лейкоцитов:1. Эозинофилы. Проявляются при аллергических, паразитарных, инфекционных, аутоиммунных и онкологических заболеваниях.2. Нейтрофилы. Защищают от инфекций, способны разрушать вирусы и бактерии. Классифицируются на: o миелоциты (зарождающиеся) и метамиелоциты (юные — происходят от миелоцитов) — отсутствуют в крови здорового человека, образуются только в крайних случаях, при наиболее тяжёлых заболеваниях; o палочкодерные (молодые) — их количество увеличивается при бактериальных заболеваниях, если сегментоядерные нейтрофилы не справляются с инфекцией;o сегментоядерные (зрелые) — представлены в самом большом количестве, обеспечивают иммунную защиту организма в здоровом состоянии.3. Лимфоциты. Являются своеобразными чистильщиками: способны обнаруживать, распознавать и разрушать антигены, а также принимают участие в синтезе антител (соединений, способных стимулировать лимфоидные клетки, формируя и регулируя иммунный ответ организма), обеспечивают иммунную память.4. Моноциты. Их основная задача поглощать и переваривать погибшие (отмирающие или остатки разрушенных) клетки, бактерии и другие инородные частицы.5. Базофилы. Функции этих клеток полностью не изучены. Известно, что они принимают участие в аллергических реакциях, в процессах свёртываемости крови, активизируются при воспалениях.Техника :Мазок готовится на обезжиренном стекле с помощью покровного или предметного стекла. Чистые стекла хранятся до употребления в смеси Никифорова (эфир со спиртом в отношении 1:1) в банке с притертой пробкой. Стекла вынимают пинцетом и тщательно протирают салфеткой. Кровь берут с помощью скарификатором. Большим и средним пальцами левой руки берут предметное стекло за ребро и наносят каплю крови на край стекла. Правой рукой берут покровное стекло, ставят его узким краем рядом с каплей крови так, чтобы она растеклась в углу, образованном двумя стеклами. Покровным стеклом под углом 45° проводят по предметному стеклу, растягивая каплю тонким слоем (не толкать ее вперед, иначе кровь не ляжет ровным слоем). Хорошо сделанный мазок должен быть достаточно тонким, немного уже и короче предметного стекла, иметь желтоватый цвет и просвечивать. Высушивают мазок на воздухе, не подогревая. По середине высушенного мазка надписывают имя (фамилию) исследуемого. Мазок фиксируют в смеси Никифорова 10 минут, затем вынимают и сушат в вертикальном положении.Высушенный мазок окрашивают краской Романовского из расчета 3 капли краски на 1 мл дистиллированной воды. Мазок покрывают тонким слоем краски и оставляют на 30 минут. Затем мазок промывают под проточной водой и сушат. Смотрят под микроскопом при увеличении 90 с иммерсионным маслом.Подсчитывают 100 форменных элементов белой крови и результат заносят в таблицу.Нейтрофилы пал 1-6 Нейтрофилы сегмент 45-72 Эозинофил 0-5 Базофилы 0-1 Моноциты 3-11 11).техника приготовления мазков крови Для фиксации мазков можно использовать метиловый спирт (5 мин), 95%-й этиловый спирт (30 мин), смесь (1:1) этилового спирта и этилового эфира (30 мин), денатурированный спирт (30 мин), пары формалина (30 мин) и др. Мазки помещают в кюветы или ванночки с соответствующим фиксатором и закрывают крышкой, следят за тем, чтобы предметные стекла не соприкасались друг с другом. После фиксации мазки высушивают на воздухе или в термостате.Окраска мазков. Метод Романовского — Гимзы. Предварительно фиксированные препараты укладывают мазком вниз на стеклянный мостик в кювете и наливают под них рабочий раствор краски (фабричный раствор краски Романовского — Гимзы разбавляют дистиллированной водой из расчета 2 капли краски на 1 мл воды). Время окрашивания составляет 15—30 мин в зависимости от температуры в помещении (чем она ниже, тем дольше нужно окрашивать) и качества красителя. В заключение мазок промывают дистиллированной водой и высушивают..Хорошо окрашенные мазки розово-фиолетового цвета, недо- крашенные — розово-красноватые, а перекрашенные — темно-фиолетовые.Так же применяют окраски по Нохту и по Крюкову-Папенгейму 12)тромбоциты Физиологическая роль в организме .Тромбоциты, или кровяные пластинки, представляют собой третий форменный элемент крови, являясь цитоплазматическими осколками гигантских клеток костного мозга - мегакариоцитов. Тромбоциты выполняют в организме важные биологические функции, главным образом в процессах гемостаза. Их физиологическая активность связана с содержанием большого количества ферментов - тромбоцитарных факторов, которые определяют фибринопластическое, тромбопластическое, антигепариновое, адгезивное, ретрактильпое, сосудосуживающее свойство тромбоцитов. Благодаря этим факторам тромбоциты являются важным звеном в свертывающей системе крови. Срок пребывания тромбоцитов, в периферической крови составляет 5-8 дней; ежедневно обновляется 12-20% общей массы кровяных пластинок .Клиническое значение В НОРМЕ количество тромбоцитов у взрослого человека колеблется от 180 до 320 тысяч в 1 мкл крови. УВЕЛИЧЕНИЕ КОЛИЧЕСТВА .В физиологических условиях тромбоцитоз наблюдается при возбуждении симпатической нервной системы после физических упражнений. Возникает оно в связи с выбросом в периферическую кровь пластинок из селезенки, которая является депо тромбоцитов. В патологии увеличение количества тромбоцитов отмечается: при асфиксиях, ожогах, гемолитических кризах, после кровотечений, в период выздоровления от инфекционных болезней ,при некоторых лейкозах - хроническом миелолейкозе, эритремии, остеомиелофиброзе. СНИЖЕНИЕ ЧИСЛА ТРОМБОЦИТОВ (тромбоцитопения) Уменьшение количества кровяных пластинок ниже критического уровня (менее 50000 в 1 мкл) обычно сопровождается развитием геморрагического синдрома. В патологии тромбоцитопения отмечается при следующих состояниях:при токсических экзогенных (интоксикация бензолом, золотом, лучевая радиация) и эндогенных (уремия, тяжелые поражения печени) состояниях, инфекционно-токсических (сепсис, скарлатина, дифтерия, брюшной тиф) и токсико-аллергических состояниях (хинин, стрептомицин, сульфаниламиды, пищевые аллергены),при гипопластических и апластических состояниях костномозгового кроветворения (лучевая болезнь, бензольная интоксикация),при остром лейкозе, нередко при миеломной болезни. Определение количества кровяных пластинок (тромбоцитов) 1. Метод подсчета в мазке крови. Принцип метода: в мазке крови подсчитывают количество тромбоцитов по отношению к 1000 эритроцитов. Зная абсолютное число эритроцитов в 1 мкл крови, вычисляют количество тромбоцитов в 1 мкл крови. Для предотвращения агглютинации тромбоцитов на место укола пальца наносят каплю 14% раствора сульфата магнезии. Выделившуюся каплю крови, смешивают с магнезией и из смеси готовят мазки на предметных стеклах, которые окрашивают по Романовскому - Гимзе в течение 2-3 часов. Подсчет тромбоцитов на 1000 эритроцитов производят под иммерсионной системой микроскопа с использованием сетчатого окуляра или вкладного окошка. 2. Метод подсчета в камере Горяева. Принцип метода: кровь разводится в консервирующей жидкости для предотвращения свертывания крови и агглютинации тромбоцитов (5-7% раствор трилона В), затем камера заполняется и подсчет ведется как при подсчете лейкоцитов (по всей камере). 3. Метод определения количества тромбоцитов с помощью фазовоконтрастной и люминесцентной микроскопии. 4. Электронно-автоматический метод |