Краевое государственное бюджетное профессиональное образовательное учреждение барнаульский базовый медицинский колледж
 Скачать 112.84 Kb.
|
|
- Определение СОЭ Peaктивы и оборудование: 5% раствор цитрата натрия; аппарат Панченкова и капилляры; агглютинированные пробирки; часы. Порядок определения. Химически чистый капилляр промывают 5% раствором цитрата натрия, который затем набирают до метки «P» и выдувают в пробирку или на часовое стекло. В этот же капилляр дважды набирают кровь до метки «К». Из капилляра кровь выдувают в каплю реактива, перемешивают и набирают полученную смесь до метки «0». Зажав пальцем, верхнее отверстие капилляра, вытирают кровь с его кончика и ставят в аппарат Панченкова СТРОГО в вертикальном положении. При косом положении капилляра оседание эритроцитов ускоряется. СОЭ учитывают через 1 час по столбику светло-желтой прозрачной плазмы, отмечают его высоту, отсчитывая количество миллиметров сверху вниз. Отмечают каждые 15 мин в течение часа. Скорость оседания эритроцитов выражается в мм/час. Нормы: М 1-10 мм/час Ж 2-15 мм/час - Анализ полученных результатов, оформление бланка исследования. Результаты полностью регистрируются в рабочий журнал, коротко записываются в алфавитный журнал. Считывание результатов исследования записывается на направлении с указанием даты исследования и росписью врача. В бланк исследований пишут указывают ФИО, отделение, пол, возраст; количества различных клеток крови, их параметров и показателей, отражающих их соотношение и функционирование. Пишут от 8 до 30 параметров: подсчет количества эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов в 1 микролитре или литре крови, а также ряд других показателей, описывающих форму, объем и другие характеристики этих клеток, лейкоцитарную формулу и подсчет скорости оседания эритроцитов. Взятие капиллярной крови. -Техника взятия капиллярной крови Рабочий стол для взятия капиллярной крови: • Спиртовые салфетки • Одноразовые скарификаторы Предметные стекла Капилляры . . • 5% раствор цитрата натрия • дезинфицирующие растворы для обработки поверхностей • емкость для отходов класса Б • штатив с пробирками для взятия крови на СОЭ, эритроциты, гемоглобин, лейкоциты. Взятие капиллярной крови. Исследование рекомендуется проводить утром натощак. Кровь для проведения общего клинического анализа берут у пациента обычно из мякоти IV пальца руки, мочки уха или венозную кровь из локтевой вены (при работе на автоматических анализаторах) а у новорожденных — из пятки. Не рекомендуется брать кровь после физической и умственной нагрузки, применения медикаментов, особенно при внутривенном или внутримышечном их введении, воздействия рентгеновских лучей и после физиотерапевтических процедур. Кожу на месте укола протирают спиртовой салфеткой или, смоченным 70%-ым спиртом ватным тампоном. Затем вытирают ватным тампоном. Прокол кожных покровов осуществляется индивидуальным скарификатором. Скарификатор после использования опускается сразу в дезинфицирующий раствор. Укол лучше производить сбоку от срединной линии, где более густая капиллярная сеть, на глубину 2 мм зависимости от толщины кожи. Кровь из ранки должна вытекать свободно, так как при сильном надавливании разрушаются форменные элементы крови возможно смешивание с тканевой жидкостью приводящее к искажению результатов. Первую каплю после укола удаляют ваткой. Забор крови осуществляется индивидуальным стерильным капилляром. -Приготовление мазков Перед приготовлением мазков стекло достают из смеси Никифорова, просушивают и протирают сухой чистой салфеткой. Чистое предметное стекло необходимо положить на ровную горизонтальную поверхность и на один его край стеклянной трубочкой или пипеткой нанести небольшую каплю цельной крови или крови с антикоагулянтом. Стекло удерживают на поверхности одной рукой, а второе предметное стекло (распределительное, шлифованное), держа его большим и указательным пальцами другой руки, ставят на первое под углом примерно 30-350 слева от капли крови. Затем, не отрывая второе стекло от поверхности первого, приводят его соприкосновение с каплей крови и, как только капля расплывется по всему ребру, быстро продвигают распределительное стекло справа на лево, пока капля не будет исчерпана. При медленном размазывании ухудшается равномерность распределения форменных элементов в мазке. При нажимании стеклом на стекло, многие клетки повреждаются. Если угол стеклами меньше 45°, то большее количество клеток скапливается в конце мазка. Величина капли должна быть соразмерна тому, чтобы весь мазок помещался на стекле, не доходя 1-1,5 см до его конца. Мазок должен иметь желтоватый цвет. Густо-розоватые и красноватые мазки не пригодны для счета, так как лейкоциты в них деформированы, а эритроциты лежат один на другом. Если была взята слишком большая капля, то после того как она распределилась по ребру шлифованного стекла, последнее приподнимают, переносят на несколько миллиметров влево, вновь ставят на предметное стекло и отсюда начинают делать мазок. Толщина мазка зависит от вязкости крови в образце. Поэтому для того, чтобы получить мазок нужной толщины, угол между двумя стеклами увеличивают, если вязкость крови меньше нормальной (низкий гематокрит), или уменьшают при повышенной вязкости (высокий гематокрит). Если величина нанесенной на предметное стекло капли выбрано правильно, вся кровь при движении распределительного стекла должна остаться на стекле: в том месте, куда была нанесена капля, мазок будет толще, а на противоположном крае стекла тоньше (перистый край мазка). Если капля крови слишком велика, некоторое количество крови остается не размазанным на конце стекла, и это может привести к осложнению подсчета форменных элементов. Часто такие мазки слишком толсты, что затрудняет их оценку. Кроме того, если на стекле остаются агрегаты клеток, мазок становится непригодным для исследования. Каждое стекло необходимо маркировать, делая пометку на стекле, номер или кличку животного, при необходимости и дату взятия крови со стороны толстой части мазка простым карандашом, или войлочным маркером, содержащим тушь, не удаляемую при фиксации спиртом. Мазки рекомендуется фиксировать не позднее 24 час. после их приготовления. После высушивания неокрашенные мазки могут храниться не более 2-3 недель. После приготовления мазка его сразу же нужно высушить на воздухе. Затем зафиксировать: - метиловым спиртом в течение трех минут; -смесью Никифорова - 15мин; - хлороформом несколько секунд: - этиловым спиртом 960 20-20мин.; 1% раствором формалина - 1мин.; - ацетоном- 5мин. Зафиксированные препараты сушат и красят. Мазок должен иметь желтоватый цвет, отступать от края широких сторон предметного стекла на 1-3 мм и заканчиваться метелочкой», не доходя на 1,5-2,0 см до его левого узкого края. -Окраска мазка. Оборудование: контейнеры для окраски мазков с кюветами или «рельсы» стеклянные с эмалированными лотками; пинцет; цилиндры или стаканы градуированные; палочки стеклянные; стаканчики химические; бутылки с притертыми пробками. В строго нейтральной среде структурные элементы клеток крови в азур-эозиновой смеси окрашиваются в различные цвета: щелочные компоненты клетки (цитоплазма) розово-красный цвет: кислые (РНК в ядрышках и цитоплазме, ДНК в ядре) основными красителями в голубовато-синие цвета. Для приготовления красителей и смывания их с мазков используют воду нейтральной реакции. Вода кислой реакции ослабляет действие щелочного элемента красителя (азура II), вследствие чего лейкоциты плохо окрашиваются. Мазки имеют красный цвет за счет красной окраски эритроцитов и ядер лейкоцитов. Вода щелочной реакции ослабляет действие кислого компонента красителя (розина), поэтому эритроциты окрашиваются в серовато-синий цвет, а ядра лейкоцитов - B - эозином в очень темные цвета. Для подщелачивания и доведения реакции воды до нейтральной к ней по каплям прибавляют 1%-ный раствор натрия двууглекислого. Щелочную воду нейтрализуют 1% раствором уксусной кислоты. Можно брать дистиллированную и водопроводную воду в различных сочетаниях. Реакцию воды можно определить с помощью рН-метра или гематоксилина. При использовании гематоксилина к 10 мл дистиллированной воды прибавляют 2-3 капли свежеприготовленного спиртового раствора гематоксилина. Вода нейтральной реакции окрашивается в бледно-фиолетовый цвет не ранее чем через 1 мин и не позднее чем через 5 мин. Если вода окрасилась раньше, чем через 1 мин, значит она щелочная, а если позднее чем через 5 мин - кислая. Окрашивание мазков крови по Романовскому -Гимзе. Краска Романовского-Гимза заводского приготовления содержит азур 2 (смесь азур1 и метиленового синего в равных пропорциях) Зг водорастворимый желтый эозин - 0,8г, метиловый спирт - 250мл и глицерин 250мл. Рабочий раствор приготавливают из расчета 1-2 капли готовой краски на 1мл дистиллированной воды. Раствор готовят перед его применением. Щелочные компоненты (цитоплазма) красятся эозином в розово-красный цвет, кислые-(РНК в ядрышках и цитоплазме, ДНК в ядре) красятся основными красителями в голубовато-синий цвет. Фиксированные мазки кювете заливают рабочим раствором красителя и выдерживают 15-30мин., затем мазки промывают под проточной водой и высушивают на воздухе. Продолжительность окраски зависит от качества красителя и температуры воздуха. Чем ниже температура воздуха, тем продолжительнее окраска. Хорошо окрашенные мазки имеют розово-фиолетовый цвет, недоокрашенные - розовато-красноватый, перекрашенные - темно-фиолетовый. Подсчет лейкоцитарной формулы. Реактивы и оборудование: микроскопы; иммерсионное масло, окрашенные мазки крови; бинтовая салфетка, ксилол. Порядок определения: микроскопия мазка крови с подсчетом лейкоцитарной формулы на 100-200 клеток. Клиническое значение показателей лейкограммы. При анализе лейкограммы учитывают количество зрелых клеток: базофилов, эозинофилов, палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов, лимфоцитов и моноцитов. При ряде патологических состояний дают оценку незрелых, молодых форм эритроцитов и лейкоцитов (лимфобластов, промегакариоцитов, мегакариоцитов, нормобластов, промиелоцитов, мислоцитов, метамиелоцитов, пролимфоцитов). Различные виды лейкоцитов выполняют разные функции, поэтому определение соотношения разных видов лейкоцитов, содержания молодых форм, выявление патологических клеточных форм, описание характерных изменений морфологии клеток, отражающих изменение их функциональной активности, несет ценную диагностическую информацию. Лейкоциты крови представлены гранулоцитами, в цитоплазме которых при окрашивании выявляется зернистость (нейтрофильные, эозинофильные и базофильные лейкоциты), и агранулоцитами, цитоплазма которых не содержит зернистости (лимфоциты). Около 60% общего числа гранулоцитов находится в костном мозге, составляя костномозговой резерв, лишь менее 1% - в 40% - в других тканях периферической крови. Морфологически различают пять основных популяций лейкоцитов: лимфоциты, моноциты, нейтрофилы, эозинофилы и базофилы. - Анализ полученных результатов, оформление бланка исследования. Результаты полностью регистрируются в рабочий журнал, коротко записываются в алфавитный журнал. Считывание результ исследования записывается на направлен указанием даты исследования и росписи врача. В бланк исследований: Указывают ФИО, отделение, пол, возраст, количества различных клеток крови их параметров и показателей, отражающих соотношение и функционирование. Пишут от 8 до 30 параметров: подсчет количества эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов в 1 микролитре а также ряд других показателей, описывающих форму, объем и другие характеристики этих клеток, лейкоцитарную формулу подсчет скорости оседания эритроцитов. -Взятие капиллярной крови. Техника взятия капиллярной крови. Рабочий стол для взятия капиллярной крови: Спиртовые салфетки; Одноразовые скарификаторы; Предметные стекла Капилляры; 5% раствор цитрата натрия; дезинфицирующие растворы для обработки поверхностей; емкость для отходов класса Б; штатив с пробирками для взятия крови на СОЭ, эритроциты, гемоглобин, лейкоциты. Взятие капиллярной крови. Исследование рекомендуется проводить утром натощак. Кровать для проведения общего клинического анализа берут у пациента обычно из мякоти IV пальца руки, мочки уха или венозную кровь из локтевой вены (при работе на автоматических анализаторах) а у новорожденных из пятки. Не рекомендуется брать кровь после физической и умственной нагрузки, применения медикаментов, особенно при внутривенном или внутримышечном их введении, воздействия рентгеновских лучей и после физиотерапевтических процедур. 1. Кожу на месте укола протирают спиртовой салфеткой или, смоченным 70%-ым спиртом ватным тампоном. 2. Затем вытирают ватным тампоном. 3. Прокол кожных покровов осуществляется индивидуальным скарификатором. 4. Скарификатор после использования опускается сразу в дезинфицирующий раствор. Укол лучше производить сбоку от срединной линии, где более густая капиллярная сеть, на глубину 2-3 мм в зависимости от толщины кожи. Кровь из ранки должна вытекать свободно, так как при сильном надавливании на палец разрушаются форменные элементы крови и возможно смешивание с тканевой жидкостью, приводящее к искажению результатов. 5. Первую каплю после укола удаляют ватным тампоном. 6. Забор крови осуществляется индивидуальным стерильным капилляром. -Приготовление мазков Перед приготовлением мазков стекло достают из смеси Никифорова, просушивают и протирают сухой чистой салфеткой. Чистое предметное стекло необходимо положить на ровную горизонтальную поверхность и на один его край стеклянной трубочкой или пипеткой нанести небольшую каплю цельной крови или крови с антикоагулянтом. Стекло удерживают на поверхности одной рукой, а второе предметное стекло (распределительное, шлифованное), держа его большим и указательным пальцами другой руки, ставят на первое под углом примерно 30-350 за от капли крови. Затем, не отрывая второе стекло от поверхности первого, приводят его соприкосновение с каплей крови и, как только капля расплывется по всему ребру, быстро продвигают распределительное стекло справа на лево, пока капля не будет исчерпана. При медленном размазывании ухудшается равномерность распределения форменных элементов в мазке. При нажимании стеклом на стекло, многие клетки повреждаются. Если угол стеклами меньше 45°, то большее количество клеток скапливается в конце мазка. Величина капли должна быть соразмерна тому, чтобы весь мазок помещался на стекле, не доходя 1-1,5 см до его конца. Мазок должен иметь желтоватый цвет. Густо-розоватые и красноватые мазки не пригодны для счета, так как лейкоциты в них деформированы, а эритроциты лежат один на другом. Если была взята слишком большая капля, то после того как она распределилась по ребру шлифованного стекла, последнее приподнимают, переносят на несколько миллиметров влево, вновь ставят на предметное стекло и отсюда начинают делать мазок. Толщина мазка зависит от вязкости крови в образце. Поэтому для того, чтобы получить мазок нужной толщины, угол между двумя стеклами увеличивают, если вязкость крови меньше нормальной (низкий гематокрит), или уменьшают при повышенной вязкости (высокий гематокрит). Если величина нанесенной на предметное стекло капли выбрано правильно, вся кровь при движении распределительного стекла должна остаться на стекле: в том месте, куда была нанесена капля, мазок будет толще, а на противоположном крае стекла тоньше (перистый край мазка). Если капля крови слишком велика, некоторое количество крови остается не размазанным на конце стекла, и это может привести к осложнению подсчета форменных элементов. Часто такие мазки слишком толсты, что затрудняет их оценку. Кроме того, если на стекле остаются агрегаты клеток, мазок становится непригодным для исследования. Каждое стекло необходимо маркировать, делая пометку на стекле, номер или кличку животного, при необходимости и дату взятия крови со стороны толстой части мазка простым карандашом, или войлочным маркером, содержащим тушь, не удаляемую при фиксации спиртом. Мазки рекомендуется фиксировать не позднее 24 час. после их приготовления. После высушивания неокрашенные мазки могут храниться не более 2-3 недель. После приготовления мазка его сразу же нужно высушить на воздухе. Затем зафиксировать: - метиловым спиртом в течение трех минут; -смесью Никифорова - 15мин; - хлороформом несколько секунд; - этиловым спиртом 960 -20-20мин.; - 1% раствором формалина - 1 мин.; ацетоном-5мин. Зафиксированные препараты сушат и красят. Мазок должен иметь желтоватый цвет, отступать от края широких сторон предметного стекла на 1-3 мм и заканчиваться «метелочкой», не доходя на 1,5-2,0 см до его левого узкого края. -Окраска мазка. Оборудование: контейнеры для окраски мазков с кюветами или «рельсы» стеклянные с эмалированными лотками; пинцет; цилиндры или стаканы градуированные; палочки стеклянные; стаканчики химические; бутылки с притертыми пробками. В строго нейтральной среде структурные элементы клеток крови в азур-эозиновой смеси окрашиваются в различные цвета: щелочные компоненты клетки (цитоплазма) розово-красный цвет; кислые (РНК в ядрышках и цитоплазме, ДНК в ядре) - основными красителями в голубовато-синие цвета. Для приготовления красителей и смывания их мазков используют воду нейтральной реакции. Вода кислой реакции ослабляет действие щелочного элемента красителя (азура II), вследствие чего лейкоциты плохо окрашиваются. Мазки имеют красный цвет за счет красной окраски эритроцитов и ядер лейкоцитов. Во щелочной реакции ослабляет действие кислого компонента красителя (эозина), поэтому эритроциты окрашиваются в серовато-синий цвет, а ядра лейкоцитов – в очень темные цвета. Для подщелачивания и доведения реакции воды до нейтральной к ней по каплям прибавляют 1%-ный раствор натрия двууглекислого. Щелочную воду нейтрализуют 1% раствором уксусной кислоты. Можно брать дистиллированную и водопроводную воду в различных сочетаниях. Реакцию воды можно определить с помощью рН-метра или гематоксилина. При использовании гематоксилина к 10 мл дистиллированной воды прибавляют 2-3 капли эозином в свежеприготовленного спиртового раствора гематоксилина. Вода нейтральной реакции окрашивается в бледно-фиолетовый цвет не ранее чем через 1 мин и не позднее чем через 5 мин. Если вода окрасилась раньше, чем через 1мин, значит она щелочная, а если позднее чем через 5 мин-кислая. |