Краевое государственное бюджетное профессиональное образовательное учреждение барнаульский базовый медицинский колледж
 Скачать 112.84 Kb.
|
|
Окрашивание мазков крови по Романовскому -Гимзе. Краска Романовского-Гимза заводского приготовления содержит азур 2 (смесь a3ypl и метиленового синего в равных пропорциях) зг водорастворимый желтый эозин - 0,8г. метиловый спирт - 250мл и глицерин 250мл. Рабочий раствор приготавливают из расчета 1-2 капли готовой краски на 1 мл дистиллированной воды. Раствор готовят перед его применением. Щелочные компоненты (цитоплазма) красятся эозином в розово-красный цвет, кислые-(РНК в ядрышках и цитоплазме, ДНК в ядре) красятся основными красителями в голубовато-синий цвет. Фиксированные мазки в кювете заливают рабочим раствором красителя и выдерживают 15-30мин., затем мазки промывают под проточной водой и высушивают на воздухе. Продолжительность окраски зависит от качества красителя и температуры воздуха. Чем ниже температура воздуха, тем продолжительнее окраска. Выбор оптимального времени окраски проводят всякий раз, когда начинают использовать новый флакон заводского красителя. Хорошо окрашенные мазки имеют розово-фиолетовый цвет, недоокрашенные - розовато-красноватый, перекрашенные - темно-фиолетовый. Подсчет лейкоцитарной формулы Реактивы и оборудование: микроскопы; иммерсионное масло, окрашенные мазки крови; бинтовая салфетка, ксилол. Порядок определения: микроскопия мазка крови с подсчетом лейкоцитарной формулы на 100-200 клеток. Клиническое значение показателей лейкограммы. При анализе лейкограммы учитывают количество зрелых клеток: - базофилов, эозинофилов, палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов, лимфоцитов и моноцитов. При ряде патологических состояний дают оценку незрелых, молодых форм эритроцитов и лейкоцитов (лимфобластов, промегакариоцитов, мегакариоцитов,нормобластов, промиелоцитов, мислоцитов, метамиелоцитов,пролимфоцитов). Различные виды лейкоцитов выполняют разные функции, поэтому определение соотношения разных видов лейкоцитов, содержания молодых форм, выявление патологических клеточных форм, описание характерных изменений морфологии клеток, отражающих изменение их функциональной активности, несет ценную диагностическую информацию. Лейкоциты крови представлены гранулоцитами, в цитоплазме которых при окрашивании выявляется зернистость (нейтрофильные, эозинофильные и базофильные лейкоциты), и агранулоцитами, цитоплазма которых не содержит зернистости (лимфоциты и моноциты). Около 60% общего числа гранулоцитов находится в костном мозге, составляя костномозговой резерв, 40% - в других тканях и лишь менее 1% - в периферической крови. Морфологически различают пять основных популяций лейкоцитов: лимфоциты, моноциты, нейтрофилы, эозинофилы и базофилы. -Анализ полученных результатов, оформление бланка исследования. Результаты полностью регистрируются в рабочий журнал, коротко записываются в алфавитный журнал. Считывание результатов исследования записывается на направлении с указанием даты исследования и росписью врача. В бланк исследований пишут Указывают ФИО, отделение, пол, возраст; количества различных клеток крови, их параметров и показателей, отражающих их соотношение и функционирование. Пишут от 8 до 30 параметров: подсчет количества эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов в 1 микролитре или литре крови. а также ряд других показателей, описывающих форму, объем и другие характеристики этих клеток, лейкоцитарную формулу и подсчет скорости оседания эритроцитов. -Взятие капиллярной крови. Техника взятия капиллярной крови Рабочий стол для взятия капиллярной крови: Спиртовые салфетки; Одноразовые скарификаторы; Предметные стекла; Капилляры; 5% раствор цитрата натрия; дезинфицирующие растворы для обработки поверхностей; емкость для отходов класса Б; штатив с пробирками для взятия крови на СОЭ, эритроциты, гемоглобин, лейкоциты. Взятие капиллярной крови. Исследование рекомендуется проводить утром натощак. Кровь для проведения общего клинического анализа берут у пациента обычно из мякоти IV пальца руки, мочки уха или венозную кровь из локтевой вены (при работе на автоматических анализаторах) а у новорожденных — из пятки. Не рекомендуется брать кровь после физической и умственной нагрузки, применения медикаментов, особенно при внутривенном или внутримышечном их введении, воздействия рентгеновских лучей и после ризиотерапевтических процедур. 1 Кожу на месте укола протирают спиртовой салфеткой или, смоченным 70%-ым спиртом ватным тампоном. 2. Затем вытирают ватным тампоном. 3. Прокол кожных покровов осуществляется индивидуальным скарификатором. 4. Скарификатор после использования опускается сразу в дезинфицирующий раствор. Укол лучше производить сбоку от срединной линии, где более густая капиллярная сеть, на глубину 2-3 мм в зависимости от толщины кожи. Кровь из ранки должна вытекать свободно, так как при сильном надавливании на палец разрушаются форменные элементы крови и возможно смешивание с тканевой жидкостью, приводящее к искажению результатов. 5. Первую каплю после укола удаляют ватным тампоном. 6. Забор крови осуществляется индивидуальным стерильным капилляром. -Подсчет тромбоцитов в камере Горяева. Реактивы: 1) реактив 1: кокаина гидрохлорид - 3 г; натрия хлорид -0,25 г; фурацилин - 0,25 г: дистиллированная вода-100мл; 2) реактив 2:1% раствор оксалата аммония. Раствор кипятят и фильтруют, хранят в холодильнике. Ход определения. Исследуемую кровь разводят в 200 раз, для этого в сухую пробирку набирают 4 мл реактива 1 или 2 и 0,02 мл крови. Перемешивают и оставляют на 25-30 мин для гемолиза эритроцитов. Подготавливают камеру Горяева и заполняют ее предварительно перемешанной разведенной кровью. Счетную камеру помещают во влажную среду (чашка Петри с уложенной по краям смоченной водой фильтровальной бумагой) на 5 мин для оседания тромбоцитов. Используя объектив 40х с фазово- контрастным устройством, производят подсчет тромбоцитов в 25 больших квадратах счетной камеры. Тромбоциты выглядят в счетной камере как мелкие, хорошо преломляющие свет образования. -Приготовление и окраска мазка для подсчета тромбоцитов в камере Горяева. Реактивы и оборудование: смесь Никифорова, предметное стекло; шпатели; марлевые салфетки; кровь; капилляр; краска Романовского-Гимзе. Ход работы: Мазок готовится на обезжиренном стекле с помощью покровного или предметного стекла. Чистые стекла хранятся до употребления в смеси Никифорова (эфир со спиртом в отношении 1:1) в банке с притертой пробкой. Большим и средним пальцами левой руки берут предметное стекло за ребро и наносят каплю крови на край стекла. Правой рукой берут шпатель, ставят его узким краем рядом с каплей крови так, чтобы она растеклась в углу, образованном двумя стеклами. Шпателем под углом 45° проводят по предметному стеклу, растягивая каплю тонким слоем. Высушивают мазок на воздухе, не подогревая. Маркируют. Мазок фиксируют в смеси Никифорова 10 минут, затем вынимают и сушат вертикальном положении. Высушенный мазок окрашивают краской Романовского (для подсчета тромбоцитов концентрация краски вдвое больше, чем для окраски мазка для подсчета лейкоцитарной формулы). Мазок покрывают тонким слоем краски и оставляют на 45 минут. Затем мазок промывают под проточной водой и сушат. -Проведение пробы Дюке и Сухарева. Проба Дюке. Наносят более глубокий, чем обычно укол в палец (3 мм). Включают секундомер. Через 30 сек с полоской фильтровальной бумаги прикасаются к капле крови (1-ую каплю не снимают!). Постепенно капли крови на бумаге становятся все меньше и меньше и в конце концов исчезают. В норме кровотечение составляет от 2-3-5 мин. Проба Сухарева. Кровь берут из пальца в чистый и сухой капилляр Сали. Первая капля крови содержит примесь тканевой жидкости и для исследования не пригодна. В капилляр набирают столбик крови высотой 25-30 мм и переводят ее в середину капиллярной трубки. Включают секундомер и через каждые 30 сек. наклоняют капилляр вправо и влево под углом 30-45 градусов. Кровь свободно перемещается внутри капилляра. С началом свертывания её движение замедляется. В момент полного свертывания кровь перестает двигаться. По секундомеру отмечают моменты начала и конца свертывания. Начало свертывания в норме наступает в период от 30 до 2 мин, конец от з. до 5 мин. - Анализ полученных результатов, оформление бланка исследования. Результаты полностью регистрируются в рабочий журнал, коротко записываются в алфавитный журнал. Считывание результатов исследования записывается на направлении с указанием даты исследования и росписью врача. В бланк исследований пишут Указывают ФИО, отделение, пол, возраст, количества различных клеток крови, их параметров и показателей, отражающих их соотношение и функционирование. Пишут от 8 до 30 параметров: подсчет количества эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов в 1 микролитре или литре крови, а также ряд других показателей, описывающих форму, обьем и другие характеристики этих клеток, лейкоцитарную формулу и подсчет скорости оседания эритроцитов. Взятие капиллярной крови. -Техника взятия капиллярной крови Рабочий стол для взятия капиллярной крови: Спиртовые салфетки; Одноразовые скарификаторы; Предметные стекла; Капилляры; 5% раствор цитрата натрия дезинфицирующие растворы для обработки поверхностей; емкость для отходов класса Б; штатив с пробирками для взятия крови на СОЭ, эритроциты, гемоглобин, лейкоциты. Взятие капиллярной крови. Исследование рекомендуется проводить утром натощак. Кровь для проведения общего клинического анализа берут у пациента обычно из мякоти IV пальца руки, мочки уха или венозную кровь из локтевой вены (при работе на автоматических анализаторах) а у новорожденных — из пятки. Не рекомендуется брать кровь после физической и умственной нагрузки, применения медикаментов, особенно при внутривенном или внутримышечном их введении, воздействия рентгеновских лучей и после физиотерапевтических процедур. 1. Кожу на месте укола протирают спиртовой салфеткой или, смоченным 70%-ым спиртом ватным тампоном. 2. Затем вытирают ватным тампоном. 3. Прокол кожных покровов осуществляется индивидуальным скарификатором. 4. Скарификатор после использования пускается сразу в дезинфицирующий раствор. Укол лучше производить сбоку от срединной линии, где более густая капиллярная сеть, на глубину 2-3 мм в зависимости от толщины кожи. Кровь из ранки должна вытекать свободно, так как при сильном надавливании на палец разрушаются форменные элементы крови и возможно смешивание с тканевой жидкостью, приводящее к искажению результатов. 5. Первую каплю после укола удаляют ватным тампоном. 6. Забор крови осуществляется индивидуальным стерильным капилляром. -Подсчет тромбоцитов в камере Горяева. Реактивы: - 1) реактив 1: кокаина гидрохлорид - 3 г; натрия хлорид 0,25 г; фурацилин - 0,25 г; дистиллированная вода-100мл; 2) 2) реактив 2:1% раствор оксалата аммония. Раствор кипятят и фильтруют, хранят в холодильнике. - Ход определения. Исследуемую кровь разводят в 200 раз, для этого в сухую пробирку набирают 4 мл реактива 1 или 2 и 0,02 мл крови. Перемешивают и оставляют на 25-30 мин для гемолиза эритроцитов. Подготавливают камеру Горяева и заполняют ее предварительно перемешанной разведенной кровью. Счетную камеру помещают во влажную среду (чашка Петри с уложенной по краям смоченной водой фильтровальной бyмaгoй) Ha 5 Mин для оседания тромбоцитов. Используя объектив 40х с фазово- контрастным устройством, производят подсчет тромбоцитов в 25 больших квадратах счетной камеры. Тромбоциты выглядят в счетной камере как мелкие, хорошо преломляющие свет образования. Проба Сухарева. Кровь берут из пальца в чистый и сухой капилляр Сали. Первая капля крови содержит примесь тканевой жидкости и для исследования не пригодна. В капилляр набирают столбик крови высотой 25-30 мм и переводят ее в середину капиллярной трубки. Включают секундомер и через каждые 30 сек, наклоняют капилляр вправо и влево под углом 30-45 градусов. Кровь свободно перемещается внутри капилляра. С началом свертывания ее движение замедляется. В момент полного свертывания кровь перестает двигаться. По секундомеру отмечают моменты начала и конца свертывания. Начало свертывания в норме наступает в период от 30 до 2 мин, конец от 3. до 5 мин. - Анализ полученных результатов, оформление бланка исследования. Результаты полностью регистрируются в рабочий журнал, коротко записываются в алфавитный журнал. Считывание результатов исследования записывается на направлении с указанием даты исследования и росписью врача. В бланк исследований пишут Указывают ФИО, отделение, пол, возраст; количества различных клеток крови, их параметров и показателей, отражающих их соотношение и функционирование. Пишут от 8 до 30 параметров: подсчет количества эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов в 1 микролитре или литре крови, а также ряд других показателей, описывающих форму, объем и другие характеристики этих клеток, лейкоцитарную формулу и подсчет скорости оседания эритроцитов. - Изучение и анализ окрашенных препаратах при негематологических заболеваниях. Мазки микроскопируют. Количество ретикулоцитов отражает эритропоэтическую активность костного мозга, и ее оценка широко используется при различных анемиях. Норма. В периферической крови здоровых людей содержится 2-100/00, (0,2-1%) ретикулоцитов. Повышение количества ретикулоцитов служит критерием активации кроветворения и наблюдается, при кровопотери, при гемолитических анемиях, особенно в период криза (количество м/б 20-30%), а также на фоне лечения анемии Адиссона-Бирмера амином В12 в начале ремиссии при политических анемии, при эффективной терапии анемии. Снижение количества ретикулоцитов- показатель снижения интенсивности кроветворения. Наблюдается при апластической анемии, железодефицитной анемии, при приеме цитостатических препаратов, лучевой терапии, заболеваниях почек. Если происходит разрушение эритроцитов (гемолиз) или нарушается их синтез в костном мозге, возникает анемия. Также ее развитию способствует потеря эритроцитов из-за кровотечения - тогда организм усиливает образование эритроцитов в костном мозге и количество ретикулоцитов в крови возрастает. Поражение костного мозга (например, опухолью, химиопрепаратами или ионизирующим излучением) приводит к снижению производства эритроцитов и количества ретикулоцитов в костном мозге и периферической крови. Недостаточное образование эритроцитов приводит к уменьшению их циркуляции в кровяном русле, количества гемоглобина и способности переносить кислород. Соответственно, образуется меньше ретикулоцитов. В свою очередь, число ретикулоцитов и эритроцитов увеличивается при более активной работе костного мозга. К этому могут приводить разные причины, например, увеличение продукции эритропоэтина, хронические расстройства, повышающие число эритроцитов, или курение. -Взятие крови и определение СОЭ Взятия крови. Рабочий стол для взятия капиллярной крови: Спиртовые салфетки; одноразовые скарификаторы; Предметные стекла; Капилляры; 5% раствор цитрата натрия дезинфицирующие растворы для обработки поверхностей емкость для отходов класса Б; штатив с пробирками для взятия крови на СОЭ, эритроциты, гемоглобин, лейкоциты. Исследование рекомендуется проводить утром натощак. Кровь для проведения общего клинического анализа берут у пациента обычно из мякоти IV пальца руки, мочки уха или венозную кровь из локтевой вены (при работе на автоматических анализаторах) а у новорожденных — из пятки. Не рекомендуется брать кровь после физической и умственной нагрузки, применения медикаментов, особенно при внутривенном или внутримышечном их введении, воздействия рентгеновских лучей и после физиотерапевтических процедур. 1. Кожу на месте укола протирают спиртовой салфеткой или, смоченным 70%-ым спиртом ватным тампоном. 2. Затем вытирают ватным тампоном. 3. Прокол кожных покровов осуществляется индивидуальным скарификатором. 4. Скарификатор после использования опускается сразу в дезинфицирующий раствор. Укол лучше производить сбоку от срединной линии, где более густая капиллярная сеть, на глубину 2-3 мм в зависимости от толщины кожи. 5. Первую каплю после укола удаляют ватным тампоном. 6. Забор крови осуществляется индивидуальным стерильным капилляром. Определение СОЭ Реактивы и оборудование; 5% раствор цитрата натрия; аппарат Панченкова и капилляры; агглютинированные пробирки; часы. Порядок определения. Химически чистый капилляр промывают 5% раствором цитрата натрия, который затем набирают до метки «P» и выдувают в пробирку или на часовое стекло. В этот же капилляр дважды набирают кровь до метки «К». Из капилляра кровь выдувают в каплю реактива, перемешивают набирают полученную смесь до метки «0». Зажав пальцем, верхнее отверстие капилляра, вытирают кровь с его кончика и ставят в аппарат Панченкова в строго вертикальном положении. СОЭ учитывают через 1 час по столбику светло-желтой прозрачной плазмы. Отмечают его высоту, отсчитывая количество миллиметров сверху вниз. Отмечают каждые 15 мин в течение часа. Нормы: М 1-10 мм/час Ж 2-15 мм/час -Выполнение общего анализа крови на геманализаторе. Перед выполнением манипуляции проверить заземление, наличие внешних повреждений. Перед выполнением общего анализа крови на геманализаторе пробы проверяют на наличие сгустков. кровь должна быть тщательно перемешана в течение нескольких минут для разведения антикоагулянта и равномерного распределения Форменных элементов в плазме. Для этого используют смеситель-встряхиватель ротационный ELMI RM-IL. Действия лаборанта: Измерение бланка в случае, если прибор некоторое время не эксплуатировался; Введение данных пробы и пациента; Размещение пробы для анализа в роторе: • Вывод результатов на печать. - Анализ полученных результатов, оформление бланка исследования. Результаты полностью регистрируются в рабочий журнал, коротко записываются в алфавитный журнал. Считывание результатов исследования записывается на направлении с указанием даты исследования и росписью врача. В бланк исследований пишут Указывают ФИО, отделение, пол, возраст; количества различных клеток крови. их параметров и показателей, отражающих их соотношение и функционирование. Пишут от 8 до 30 параметров: подсчет количества эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов в 1 микролитре или литре крови, а также ряд других показателей, описывающих форму, объем и другие характеристики этих клеток, лейкоцитарную формулу и подсчет скорости оседания эритроцитов. |