микра.экзамен. Кулихорадка Острое инфекционное заболевание, характеризующееся общей интоксикацией, лихорадкой и частым поражением лёгких. Возбудитель болезни
 Скачать 158.6 Kb.
|
Патогенез и факторы вирулентности:заражение происходит алиментарно, аэрогенно и трансмиссивно; возбудитель размножается в тканях и клетках ретикулоэндотелиальной системы, вызывая генерализованную инфекцию, и затем локализуется в основном в органах генитальной системы. Это приводит к абортам и выделению риккетсий с околоплодной жидкостью, плацентой, молоком. Фагоцитированные риккетсии не лизируются (фагоцитоз незавершенный); факторы вирулентности - эндотоксины. Методы диагностики.Бактериологическая диагностика. Материал для исследования: от живых животных - кровь, взятая из яремной вены (15-20 мл), клещи, собранные с животных, выделения из матки и влагалища, плацента абортировавшего животного; от погибших или убитых с диагностической целью - части пораженного легкого, головного мозга, селезенки, паренхимы вымени, регионарные лимфатические узлы. Микроскопия. методы окраски: по Граму, по Здродовскому. микрокартина: плеоморфный микроорганизм: кокковидные формы до 0,5 мкм, палочковидные до 3-4 мкм, нитевидные - до 10-40 мкм, располагающиеся одиночно, попарно и короткими цепочками. грамотрицательны; спор не образуют; капсулу не образуют; неподвижны. Культивирование. культивирование на биологических моделях: в желточных мешках куриных эмбрионов, клеточных культурах (фибриобласты, клетки L и др.), органах и тканях лабораторных животных (морские свинки, хомячки, белые мыши, кролики). особенности выделения возбудителя: из патологического материала готовят суспензию с использованием физиологического раствора (1:10), в которую добавляют пенициллин (1000 ЕД/мл) и стрептомицин (500 ЕД/мл) и проверяют ее на бактериальную стерильность. После этого суспензию (0,2-0,25 мл) асептически вводят с помощью шприца через скорлупу в желточный мешок 5-6-суточных куриных эмбрионов и помещают в термостат - при 35-37 oС. Так проводят 4-6 «слепых» пассажей. При положительном результате отмечают гибель и отставание в развитии (по сравнению с контрольными) зараженных эмбрионов. Риккетсии обнаруживают микроскопически в препаратах - мазках из растертых оболочек желточного мешка; можно использовать культуры куриных или мышиных фибробластов. Биопроба. Патологическим материалом (суспензия 1:5 после обработки антибиотиками) или эмбриональной культурой заражают двух молодых морских свинок (250-300 г) или четырех молодых белых мышей. Материал вводят внутрибрюшинно по 3-5 мл (морские свинки) и 0,5-1 мл (мыши). Для получения четкой реакции проводят 3-5 «слепых» пассажей. В последних пассажах у морских свинок через 3-10 сут после заражения появляется лихорадка, продолжающаяся 3-12 дней, затем животные погибают. Устойчивость. В высохшей крови, взятой от больных животных сохраняются 180 дней, в сухих фекалиях клещей - 586, в молока при 4oС - от 40 до 150 дней, в моче и навозе - несколько недель. Иммунитет. У зараженных животных (коровы, овцы и др.) отмечено длительное (свыше 2 лет) носительство возбудителя. В этот период возможна ре- и суперинфекция. Эрлихиоз собак – это трансмиссивная лихорадочная болезнь, возбудитель которой относится к обширной группе микроорганизмов – риккетсиям. Род Ehrlichia включает мелких облигатных внутриклеточных бактерий, размножающихся в паразитиформных вакуолях гранулоцитов, моноцитов и реже других клеток. Они передаются горизонтальным путем через вектор (клещей, реже трематод). Заражение эрлихиями происходит при их попадании в кровь восприимчивого организма. +Бактериальные клетки эрлихий ограничены двухслойной мембраной, причем наружная мембрана у разных видов различается своей толщиной и складчатостью. В оболочке эрлихий недостаточно пептидогликана, поэтому она непрочная. В-ль: Ehrlichia canis Морфология и цикл развития. E. canis – мелкая (1-3 мкм), грамотрицательная, кокковидная бактерия, паразитирующая в циркулирующих макрофагах и моноцитах собак. Вектором являются клещи, у которых E. canis паразитирует в гемоцитах, клетках среднего отдела кишечника и в слюнных железах. В этих клетках все стадии развития бактерии проходят в ограниченной мембраной паразитоформной вакуоли. Морфогенез возбудителя складывается из превращения элементарного тельца овальной или кокковидной формы (0,4 мкм) в инициальное тельце неопределенной формы размером 1-2 мкм с последующей трансформацией в морулу - колонию микроорганизмов, которую называют также тельцем-включением (2-4 мкм). Цикл завершается распадом морулы на элементарные тельца. С  наружи бактерия покрыта наружной и внутренней мембранами, причем наружная мембрана у эрлихий, в отличие от других представителей семейства риккетсий, не имеет утолщенных участков. В клеточной оболочке эрлихий не обнаружено большого количества пептидогликанов.Неподвижны, спор и капсул не образуют, ядерное вещество расположено диффузно в виде гранул, в цитоплазме находится нуклеоид, имеющий гранулярную структуру, обнаружены Тинкториальные свойства. Способность окрашиваться анилиновыми красителями у E. canis та же, что и у других представителей порядка Rickettsiales. По Граму окрашиваются в красный цвет. Как кокковидные риккетсии, E. canis по Романовскому-Гимзе окрашивается в различные оттенки голубого цвета, причем внутри дифференцируются хроматиновые включения с обычным для хроматина красноватым оттенком. По Здродовскому риккетсии в мазках крови окрашиваются в рубиново-красный цвет, а клеточные элементы клетки-хозяина – в голубой (протоплазма) или синий (ядра) цвета.4 Культуральные свойства. Возбудитель E. canis не растет на искусственных питательных средах, но размножается в культурах клеток. Для его репродукции используют первичные культуры моноцитов и макрофагов собаки, эпителия человека и ряд других культур клеток. Возбудитель может быть также изолирован культивированием лейкоцитов, взятых от подозреваемых в заражении животных. Поддерживающая среда для зараженных возбудителем культур клеток должна содержать не менее 10% сыворотки крови плода коровы и глютамин. Оптимальная температура инкубации инфицированных E. canis культур составляет 34-370С. Также для культивирования моноцитов собак используют среду Игла с добавлением 20% сыворотки крови собаки при температуре 370С.5 Биохимические свойства. Как и другие эрлихии, E. canis является облигатным аэробом, неспособным ферментировать углеводы и нуждающимся во внешнем источнике АТФ. Максимальную метаболическую активность он проявляет в кислой среде. Бактерия проявляет высокую чувствительность к доксициклину, окситетрациклину, миноциклину, хлорамфениколу, байтрилу и, в меньшей степени, к аминогликозидам. Налидиксовая кислота и эритромицин не оказывают выраженного бактерицидного или ингибирующего действия на E. canis. Геном E. canis мало изучен, его размер равен приблизительно 1 млн. пар оснований. В нем установлено наличие 5 генов, кодирующих синтез наружного мембранного протеина. Источниками инфекции в дикой природе служат волки, шакалы, лисицы. Среди восприимчивых животных E. canis циркулирует посредством вектора, в качестве которых служат иксодовые клещи. Вектор заражается при сосании крови инфицированных животных, гемоцитами возбудитель переносится в слюнные железы, где активно размножается. В последующем при нападении на здоровую собаку клещ заражает ее через содержащую E. canis слюну. Возбудитель сохраняет свою жизнеспособность в организме клеща на протяжении 5 месяцев, что позволяет заразившимся осенью клещам перезимовывать и передавать инфекцию собакам уже ранней весной. Не исключена возможность заражения при переливании крови от больного животного здоровому, поэтому в эндемичных по эрлихиозу районах существует необходимость тщательного обследования на эту инфекцию всех животных-доноров с учетом того, что возможно ее хроническое протекание. Возбудитель способен вызвать инфекцию у собак разных пород, возраста и пола. Предполагается наличие генетической предрасположенности к восприимчивости у собак некоторых пород: доберман, грейхаунд, немецкая овчарка, гончая – у них заболевание протекает значительно тяжелее и чаще завершается летальным исходом. На тяжесть течения болезни могут оказывать влияние патогенность штамма возбудителя, его заражающая доза, иммунное состояние организма животного и наличие конкурентных переносимых клещами, а также вторичных инфекционных и инвазионных болезней. В организме возбудитель, помимо клеток крови, обнаруживается в костном мозге и в селезенке, а также в других паренхиматозных органах – везде, куда происходят кровоизлияния. +Иммунитет нестерильный, возбудителя обнаруживают в крови более года. Антитела IgM и IgA к E. canis у собак выявляют на 7-й день, на 21-й день появляются иммуноглобулины класса IgG.11 Материал для исследования. Для прижизненной диагностики в лабораторию направляют кровь из вены и клещей, собранных с животных. В ряде случаев возникают нарушения функции воспроизводства, в том числе аборт, рождение нежизнеспособных щенков, продолжительная течка с обильным выделением крови. В таких случаях в лабораторию отправляют абортированный плод или выделения из влагалища. У погибших животных отмечают геморрагии в подкожной клетчатке и большинстве внутренних органов, из которых более всего поражаются костный мозг (обычно при хроническом течении заболевания), селезенка, легкие, центральная нервная система (кровоизлияния в головной мозг), сердце, желудок, кишечный тракт и урогенитальные пути. Патологический материал для лабораторной диагностики отбирают именно из этих органов. Биопрепараты. Специфического лечения и мер профилактики не разработано. E. canis – облигатная внутриклеточная бактерия, которая, заражает и размножается в моноцитах и макрофагах собак. Инфекция может протекать бессимптомно в течение нескольких месяцев или серьезные клинические признаки могут развиваться сразу по мере распространения эрлихиоза в организме. Гематологические признаки – это лейкопения, тромбоцитопения. А также повышение активности ферментов печени. Инфицирование E. canis протекает в трёх фазах: острой, подострой (субклинической) и хронической фазе. • Острая фаза В острой фазе бактерии E. Canis поселяются в моноцитах, распространяются по всему организму и заселяют систему моноцит-макрофаг печени, селезенки и лимфатических узлов. Также эрлихии поражают сосудистый эндотелий легких, почек и мозговых оболочек, где вызывают признаки васкулита, а иногда и кровотечения. • Подострая (Субклиническая) фаза В результате выработки антител после острой фазы заболевания начинается подострая (субклиническая), которая может длиться от 40 дней до нескольких лет. Общее состояние животного улучшается, клинические симптомы сглаживаются или пропадают. Однако возбудитель в организме сохраняется и продолжает размножаться, основное место размножения селезенка. В следствии подострой фазы эрлихиоза происходит сильное снижение иммунитета, что может привести к заражению животного вторичными инфекциями. • Хроническая фаза Вне зависимости от продолжительности субклинической фазы заболевания, она переходит в хроническую стадию. Эта фаза характеризуется средней тяжести либо тяжелым течением заболевания. Развивается хроническая почечная недостаточность, панцитопения, неврологические расстройства, кровотечения. Возможен летальный исход. Диагностируют данное заболевание с помощью серологических тестов крови на наличие антител против эрлихий. В период острой фазы данные тесты будут ложноотрицательными, поскольку антитела начинают вырабатываться через 2 - 4 недели. Общий анализ крови показан для определения снижения количества эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов. Также проводится микроскопия мазка крови для обнаружения в лимфоцитах эрлихий. Лечение эрлихиоза у собак предполагает назначение антибиотиков (доксициклин и др.) на продолжительный срок – несколько недель. Часто приходится назначать стероиды из-за возникшей тромбоцитопении. В некоторых случаях показано переливание крови или тромбоцитарной массы. Собаки с хроническим эрлихиозом часто не выздоравливают до конца. Даже после выздоровления многие из них остаются серопозитивными с риском рецидива болезни через несколько лет. Прогноз для питомцев с острым эрлихиозом хороший. Осторожный – для достигших хронической стадии, из-за угнетения функции костного мозга. Из всех пород собак тяжелее всего переносят заболевание немецкие овчарки и доберманы. Инфекционный гидроперикардит (лат. — Hydropericarditis; англ. — Heartwater; Disease; сердечная водянка, коудриоз) — трансмиссивная, преимущественно остро протекающая септическая болезнь жвачных и всеядных животных, характеризующаяся геморрагическим диатезом, лихорадкой, поражением центральной нервной системы, серозно-фибринозным перикардитом, плевритом, иногда перитонитом со скоплением экссудата в полостях тела и сердечной сорочке. Возбудитель болезни. Возбудитель Cowdria mminantum — грамотрица-тельные небольшие кокковидные эллипсоидные, иногда палочковидные микроорганизмы, локализующиеся в вакуолях цитоплазмы эндотелия сосудов коры головного мозга, аорты, яремных вен, почек. В крови животных обычно появляются на 2...4-е сутки болезни и сохраняют вирулентность иногда свыше 45 дней лихорадочного периода и 6 дней после гибели животного. В организме клещей С. ruminantum также размножается и накапливается в эндотелии и просвете кишечника. Возбудитель окрашивается всеми анилиновыми красками и по Романовскому—Гимзе (в темно-синий цвет), не культивируется на бесклеточ-ных средах. Его выращивают в желточном мешке 5-дневных куриных эмбрионов, которые погибают через 4...7 дней после заражения. В лабораторных условиях штаммы С. ruminantum поддерживают путем непрерывных пассажей на овцах (заражение цитрированной кровью). +Возбудитель нестоек и быстро погибает в патологическом материале и во внешней среде. Его выживаемость во внешней среде зависит от рН и температуры. В снятом молоке при температуре 4...6 °С он сохраняет жизнеспособность до 42 мес, при комнатной температуре (15...20 °С) — только до 24 мес. В водопроводной воде при низких температурах погибает только через 36 мес, при 15...20 "С — через 5 мес. В мозговой ткани при температуре холодильника (4...6 °С) риккетсии остаются жизнеспособными до 12 дней, а в трупе погибают сравнительно быстро. В крови переболевших животных (при хранении ее в холодильнике) возбудитель не теряет вирулентность 35...60 дней. В молоке выдерживает пастеризацию. При высушивании погибает. Эпизоотология. В естественных условиях к возбудителю гидроперикардита наиболее восприимчивы овцы, козы и крупный рогатый скот, а также верблюды и свиньи; из диких животных — южноафриканские газели и антилопы многих видов. Из лабораторных животных к экспериментальному заражению чувствительны кролики, морские свинки и белые крысы. Человек невосприимчив. Возбудитель этой облигатно-трансмиссивной болезни в естественных условиях передается восприимчивым животным иксодовыми клещами рода Amblyomma (A. hebraeum, A. vanegatum, A. gemma и A. pomposum), в организме которых он сохраняет жизнеспособность до 3 мес. Заражение происходит при укусах животных клещами на стадиях нимфы и имаго. Летальность у крупного рогатого скота достигает 60 %, причем наиболее высока она среди животных в возрасте около 18 мес, у овец и коз — 40...90%. У других видов животных смертность при гидроперикардите колеблется от 6 до 100 %. Патогенез. Попав в организм животного, С. ruminantum размножается в эндотелиаль-ных клетках кровеносных сосудов и кроветворных органов, повреждая их. Риккетсии можно обнаружить в лимфатических узлах, селезенке, почках, сердечной мышце, мозжечке. Преимущественно поражается эндотелий капилляров почечных сосудистых клубочков, яремной вены и аорты, серого вещества коры головного мозга, где чаще всего и обнаруживают шаровидные с бесцветной периферической зоной тельца-включения. В результате нарушения целостности эндотелия повышается порозность сосудов, плазма крови попадает в брюшную, грудную полость и в перикард, возникают кровоизлияния. Кровь сгущается, нарушаются окислительные процессы в организме. Проникновение риккетсий в кровь и клетки центральной нервной системы обусловливает лихорадку и симптомы энцефалита. Течение и клиническое проявление. Инкубационный период после искусственного заражения у овец колеблется в пределах 5...18, но чаще 8 дней; у крупного рогатого скота — от 10 до 35, но обычно около 14 дней; у свиней — 1...2нед. При естественном заражении инкубационный период удлиняется примерно на 4 дня. Заболевание у крупного и мелкого рогатого скота протекает молниеносно, остро или подостро, реже — хронически. Наряду с типичной может наблюдаться абортивная или легкая форма. Течение, форма и летальность при гидроперикардите зависят от вирулентности риккетсий, степени восприимчивости животных, их вида, возраста и породы, а также от местных условий и времени года. При молниеносном течении температура тела внезапно повышается до 42 °С, затем резко падает, и во время судорог, при явлениях пароксиз-мальных конвульсий конечностей (как при беге галопом), чаще через 36 ч после появления первых клинических признаков, наступает смерть. Часто животное погибает внезапно. Острое течение болезни начинается с повышения температуры до 40...41,6°С. На таком уровне она удерживается в течение нескольких дней, затем быстро падает в предагональном периоде или постепенно снижается при выздоровлении. В период температурного подъема наблюдают общую слабость, снижение аппетита, учащение пульса и дыхания. Угнетенное состояние сменяется беспокойством или даже возбуждением; животное часто ложится, вытягивает или подбирает под себя ноги, запрокидывает голову (описто-тонус). Если болезненный процесс затягивается, то аппетит пропадает, наблюдаются периодические движения языка и челюсти, слюнотечение; больное животное при ходьбе пошатывается, двигается по кругу, часто принимает неустойчивое положение с широко расставленными конечностями и низко опущенной головой и наконец падает. При обследовании обнаруживают атонию преджелудков, положение опистотонуса, вращательное движение глаз, оскал и скрежет зубов, судорожное подергивание мышц, галопирующие или плавательные движения конечностей и часто выпадение языка. Иногда наступает временное улучшение, которое сменяется более сильным проявлением нервных симптомов болезни, и животное погибает. В конце болезни у животного настолько повышается рефлекторная возбудимость, что самое незначительное воздействие на кожу может вызвать бурные нервные приступы, иногда напоминающие симптомы столбняка и отравления стрихнином. У крупного рогатого скота симптомы со стороны нервной системы могут проявляться в форме приступов неистовства; в некоторых случаях животное в припадке возбуждения бросается на различные предметы и даже на человека. Нередко отмечают диарею (дегтеобразные зловонные фекалии); у некоторых животных на коже живота появляется экзантема в виде небольших розовых пятен. Болезнь длится 2...6 дней, затем наступает коматозное состояние, изо рта и носа вытекает пенистая жидкость, и животное при развитии признаков поражения нервной системы обычно погибает. Лодострое течение характеризуется медленным развитием симптомов болезни, которая длится около 12 дней. Нервные явления нередко отсутствуют или выражены неясно. Животные угнетены, отказываются от корма, больше лежат; повышенная температура держится всего несколько дней. Ослабленные животные погибают чаще вследствие развития воспаления легких и атонии преджелудков. Если выздоровление затягивается (хроническое течение), то появляются признаки анемии, животные заметно худеют. Выздоравливают больные медленно (в среднем через 2...3 нед), а некоторые погибают. Абортивную форму болезни обычно наблюдают в случаях реинфекции, а также у аборигенного скота, антилоп и иранских овец, которые имеют высокую естественную резистентность к данной инфекции. Клинические признаки могут проявляться лишь 2...3-дневным повышением температуры с незначительным угнетением. Животные, как правило, выздоравливают. Коудриоз свиней характерен тем, что болеют не все животные одного опороса, у отдельных поросят отмечают признаки анемии, отставание в росте, желтушность видимых слизистых оболочек, повышение температуры тела до 40...40,5 "С; иногда обнаруживается воспаление суставов. У некоторых свиноматок прекращается молокоотделение. |