Методичка по микробиологии. Методические рекомендации для студентов, в том числе для самостоятельной аудиторной и внеаудиторной работы

• Название: Методические рекомендации для студентов, в том числе для самостоятельной аудиторной и внеаудиторной работы
• Анкор: Методичка по микробиологии.doc
• Дата: 02.05.2017
• Размер: 1.09 Mb.
• Имя файла: Методичка по микробиологии.doc
• Тип: Методические рекомендации; #6585
• страница: 2 из 18

Тема: ОСОБЕННОСТИ СТРОЕНИЯ РАЗЛИЧНЫХ ГРУПП

МИКРООРГАНИЗМОВ. МЕТОДЫ ИХ ИЗУЧЕНИЯ.
Цель: усвоить основные отличия различных групп микроорганизмов.

Изучить окраску по методу Романовского - Гимзе.
ВОПРОСЫ ДЛЯ ПОДГОТОВКИ:

1. 
   Морфология и ультраструктура спирохет. Классификация. Патогенные виды. Методы изучения.
   
2. 
   Морфология и ультраструктура микоплазм. Патогенные для человека виды.
   
3. 
   Морфология и ультраструктура риккетсий и хламидий. Патогенные виды и методы изучения.
   
4. 
   Морфология актиномицетов. Патогенные для человека виды.
   
5. 
   Морфология грибов. Принципы классификации.
   

Патогенные виды.

6. 
   Морфология простейших, принципы их классификации.
   

Патогенные представители

7. 
   Особенности биологии вирусов. Принципы классификации.
   

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:

1. 
   По таблицам и микропрепаратам изучить и зарисовать:
   

а) спирохеты в окраске по Романовскому-Гимзе, описать метод окраски, б) риккетсии в окраске по Здродовскому,

в) актиномицеты в окраске по Граму, г) нитевидные грибы,

д) дрожжевые грибы, е) токсоплазмы, ж) структуру вирусов.

2. 
   Приготовить мазок из грибов рода Кандида, окрасить по Граму, изучить под микроскопом и зарисовать.
   
3. 
   Уборка рабочего места.
   
4. 
   Отчет преподавателю по протоколу.
   

Работа № 1: Морфология различных групп микроорганизмов.
А) Спирохеты в окраске по Романовскому-Гимзе

Техника окраски:

1. 
   мазки фиксировать в смеси Никифорова ____ мин.
   
2. 
   опустить в краску Гимзе (___________________________) - ___мин.
   

Трепонемы окрашиваются в ____________________цвет, лептоспиры – _______________, боррелии – в ______________цвет.

Трепонемы

Боррелии Лептоспиры

Б) Риккетсии в окраске по Здродовскому:


Эукариотическая клетка
риккетсии


В) Актиномицеты в окраске по Граму


Чистая культура

Грам (+)
Г) Плесневые грибы при малом увеличении. Различаются характером

мицелия и расположением спор.




Мукор
эндоспоры
мицелий несептированный


Аспергилл
экзоспоры
мицелий септированный



Пеницилл
экзоспоры
мицелий септированный

Д) Дрожжевые грибы в окраске простым методом.



е) Токсоплазмы в окраске по Романовскому-Гимзе



токсоплазмы
эритроциты
лейкоциты

ж) Структура вируса гриппа (электронная микроскопия)



Нуклеиновая кислота (РНК)

суперкапсид
капсид

шипы суперкапсида


Работа № 2: Мазок грибов рода Кандида в окраске

по Граму.




Candida albicans Грам (+)
псевдомицелий
Подпись преподавателя:_____________________

Вопросы для самоконтроля:

1. 
   Особенности строения спирохет.
   
2. 
   Методы окраски спирохет?
   
3. 
   Методы изучения спирохет в нативном состоянии.
   
4. 
   В чем сходство спирохет с простейшими?
   
5. 
   Применение метода окраски по Романовскому-Гимзе.
   
6. 
   Бактерии, не имеющие клеточной стенки?
   
7. 
   Таксономия и морфология микоплазм.
   
8. 
   Отличительные признаки микоплазм.
   
9. 
   Чем представлена оболочка у микоплазм?
   
10. 
    Таксономия риккетсий.
    
11. 
    Морфология риккетсий.
    
12. 
    С кем имеют сходство риккетсии?
    
13. 
    Каким методом окрашивают риккетсии?
    
14. 
    Признаки, сходные у риккетсий и вирусов.
    
15. 
    Таксономия хламидий.
    
16. 
    Особенности морфологии хламидий.
    
17. 
    Внутриклеточные формы хламидий.
    
18. 
    В каком виде хламидии находятся вне клетки?
    
19. 
    Отличия хламидий от риккетсий.
    
20. 
    Таксономия актиномицет.
    
21. 
    Особенности строения актиномицетов.
    
22. 
    С кем имеют сходство актиномицеты?
    
23. 
    Каким методом окрашивают актиномицеты?
    
24. 
    Какие микроорганизмы образуют споры?
    
25. 
    Таксономическое положение грибов.
    
26. 
    Характерные признаки грибов.
    
27. 
    Морфологические отличия грибов.
    
28. 
    Кто относится к низшим грибам?
    
29. 
    Какие грибы имеют септированный мицелий?
    
30. 
    Какие грибы образуют псевдомицелий?
    
31. 
    Нитчатые грибы.
    
32. 
    Особенности морфологии грибов рода Кандида.
    
33. 
    Таксономическое положение простейших?
    
34. 
    Кто относится к простейшим?
    
35. 
    Отличия в строении простейших.
    
36. 
    Характеристика вирусов.
    
37. 
    Геном вирусов.
    
38. 
    Отличия вирусов от про- и эукариотов.
    
39. 
    Структурные элементы вирусов.
    
40. 
    Методы определения размеров вирусов.
    

Лабораторное занятие № 4.
Тема: КОЛЛОКВИУМ ПО РАЗДЕЛУ: «МОРФОЛОГИЯ

МИКРООРГАНИЗМОВ».
Цель: оценить степень усвоения практических навыков по методам

исследования морфологических свойств микроорганизмов

и теоретических знаний по пройденной теме.
ВОПРОСЫ ДЛЯ ПОДГОТОВКИ:
Теоретические вопросы и вопросы для самоподготовки к занятиям 1-3.
САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:

1. 
   Ответить на 20 вопросов тест-контроля.
   
2. 
   Каждый студент готовит мазок с неизвестной чистой культуры,
   

красит по Граму, микроскопирует и определяет культуру по ее

морфологическим и тинкториальным свойствам.

3. Каждый студент готовит микропрепарат и определяет неизвестный микроорганизм и метод его окраски (стафилококки, гонококки, кишечная палочка, бациллы антракоида, туберкулезная палочка, грибы рода Кандида, споровые и капсульные бактерии, смесь бактерий в окраске простыми и сложными методами).

4. Уборка рабочего места.
РАЗДЕЛ 2. ФИЗИОЛОГИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ.
Лабораторное занятие № 5
Тема: ПИТАНИЕ, ДЫХАНИЕ И РАЗМНОЖЕНИЕ БАКТЕРИЙ.

КУЛЬТИВИРОВАНИЕ И ВЫДЕЛЕНИЕ ЧИСТОЙ

КУЛЬТУРЫ АЭРОБНЫХ БАКТЕРИЙ.
Цель: отработать методику посева микроорганизмов на жидкие

и плотные питательные среды, усвоить принцип выделения

чистой культуры аэробов.
ВОПРОСЫ ДЛЯ ПОДГОТОВКИ:

1. 
   Л. Пастер. Способы получения энергии бактериями.
   
2. 
   Типы и механизмы питания бактерий.
   
3. 
   Р. Кох. Основные принципы культивирования бактерий.
   
4. 
   Рост и размножение бактерий. Фазы размножения
   
5. 
   Искусственные питательные среды, их классификация,
   

требования к ним.

6. 
   Принципы и методы выделения чистых культур аэробов.
   

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:

1. 
   Описать способы получения чистых культур.
   
2. 
   Записать основные требования к питательным средам.
   
3. 
   Познакомиться с жидкими и плотными питательными средами (МПБ, МПА, Ру и др.).
   
4. 
   Изучить методы разобщения бактерий. Научиться делать посевы петлей на плотные и жидкие среды.
   
5. 
   Разобрать и записать в протоколе этапы выделения чистой культуры аэробных бактерий
   
6. 
   Изучить и зарисовать характер роста на жидких средах кишечной палочки, стафилококка, стрептококка, холерного вибриона, сибиреязвенной палочки.
   
7. 
   Описать культуральные свойства отдельной колонии на чашке Петри с агаром (паспорт колонии).
   
8. 
   С одной части колонии сделать мазок, окрасить по Граму, изучить и зарисовать; другую часть колонии отсеять на скошенный МПА, подписать и убрать в термостат.
   
9. 
   Уборка рабочего места
   
10. 
    Отчет по протоколу.
    

Работа № 1: Способы получения чистых культур бактерий.

1. 
   Посев на ______________________________________________
   

2. 
   Посев по Щукевичу _____________________________________
   

_________________________________________________________

3. 
   Биопроба _____________________________________________
   

4. 
   Использование ________________________________________
   

5. 
   Применение ___________________________________________
   

6. 
   Воздействие физическими факторами _____________________
   

7. 
   _____________________________________________________.
   
8. 
   ______________________________________________________
   

Работа № 2: Основные требования к питательным средам

1. 
   ____________________________________________________
   
2. 
   ____________________________________________________
   
3. 
   ____________________________________________________
   
4. 
   ____________________________________________________
   
5. 
   ____________________________________________________
   
6. 
   ____________________________________________________
   
7. 
   ____________________________________________________
   

8. _____________________________________________________

9. _____________________________________________________
Работа № 3: Жидкие и плотные питательные среды.
Консистенция среды зависит от содержания агар-агара.

Жидкие среды не содержат его, в полужидкие он добавлен в ___%,

в плотных средах агара до ___%.

Среды по назначению подразделяют на:
Универсальные –

мясопептонный бульон – МПБ (__________________________), сахарный бульон СБ (________________),

мясопептонный агар МПА (_____________________________________).
Дифференциально-диагностические -

кровяной агар КА (__________________) для выявления гемолитических свойств; среда Эндо – для дифференциации энтеробактерий по сахаролитическим свойствам; желточно-солевой агар ЖСА - для дифференциации патогенных стафилококков от непатогенных.
Элективные среды – только для одного вида бактерий:

ЖСА -10% NaCl выдерживают только стафилококки;

щелочной пептонный агар ЩПА – для холерного вибриона,

среда Ру (__________________________) –- для дифтерийной палочки.
Специальные среды -

среда Мак Коя – для туляремийных бактерий, среда Левенштейна-Йенсена, ФИН-2 – для туберкулезных палочек.




Среда Ру Среда Левенштейна

Йенсена

Работа № 4: Методы механического разобщения бактерий.

Техника посева бактерий бак.петлей.

• 
  Метод Коха –______________________________________________
  
• 
  Метод Дригальского –_______________________________________
  
• 
  Посев бак.петлей.
  

Техника посева:

Материал, взятый петлей, втирают круговыми движениями в поверхность агара у края чашки, затем агар прокалывают петлей, снимая избыток материала, и производят зигзагообразные штрихи без отрыва по всей поверхности агара.
Работа № 5: Схема выделения чистой культуры

аэробных бактерий (зарисовать)
I этап Изучение исследуемого материала

1) микроскопия

2) посев на жидкие или плотные элективные или дифференциально-диагностические среды.
II этап. Изучение культуральных свойств

а) на жидких средах – ______________________________________

б) на плотных средах – _____________________________________

• 
  описание колонии (паспорт колонии)
  
• 
  микроскопия части колонии
  
• 
  отсев на скошенный агар для накопления.
  

III этап. Изучение чистой культуры ( ее свойства)

1. 
   морфологические и тинкториальные – ________________________
   
2. 
   биохимические – ________________________________________
   
3. 
   антигенные - ___________________________________________
   
4. 
   вирулентные - __________________________________________
   
5. 
   токсигенные - __________________________________________
   
6. 
   чувствительность к антибиотикам _________________________
   
7. 
   чувствительность к фагам –_______________________________
   

IV этап. Учет результатов. Заключение о виде.
Работа № 6: Характер роста бактерий на жидких питательных

средах




большинство бактерий (стафилококк,

кишечная палочка и др.)
_________________________________



холерный вибрион
__________________________________



палочка чумы
_________________________________





патогенные грибы
__________________________________




стрептококк пиогенный
______________ _____________________





Бациллы сибирской язвы

_____________________________________

Работа №7: Описание полонии (паспорт колонии).

1. 
   Исследование в проходящем свете –
   

1) Форма колонии: -правильная, -неправильная, -амебовидная,

-ризоидная.

2) Величина колонии:-карликовая (до 1мм), -мелкая (1-2 мм),

- средняя (2-4 мм), -крупная (5 мм).

3) Степень прозрачности: - прозрачная, -полупрозрачная,

-непрозрачная.

2. 
   Исследование в отраженном свете –
   

1) Цвет: -бесцветная, -мутная, -молочная, -пигментированная

(фарфоровая, кремовая, желтая, синяя и т.д.)

2) Поверхность: -матовая, -блестящая, -влажная, -сухая,

-бородавчатая, -шагреневая, -складчатая.

3) Рельеф:- плоская, -плосковыпуклая, -каплеобразная,

-с вдавленным центром, -с приподнятым центром,

-с валиком по периферии.
3. Исследование под малым увеличением –

1)Характер контура края: -ровный, -неровный (фестончатый,

бахромчатый, расплывчатый)

2) Поверхность: -матовая, -блестящая, -влажная, -сухая,

-шагреневая, -бородавчатая

3) Структура: -гиалиновая, волокнистая, -зернистая

(мелко- или грубозернистая).
4. Исследование бактериальной петлей -

1) Консистенция: -пастообразная, -вязкая, -слизистая, -плотная,

кожистая, -сухая, -хрупкая, -в виде пленки, -прилипающаяся, тянущаяся за петлей, -рассыпающаяся при прикосновении.
Работа №8: Микроскопия колонии в окраске по Граму.


Грам ( ) _____________________

Подпись преподавателя________________

Вопросы для самоконтроля:

1. 
   Рост бактерий сопровождается…?
   
2. 
   Что такое размножение бактерий?
   
3. 
   Как происходит размножение у фирмикутес и грациликутес?
   
4. 
   Основной способ размножения бактерий.
   
5. 
   Способы размножения спирохет, хламидий, грибов.
   
6. 
   Какие микроорганизмы размножаются спорами?
   
7. 
   У каких видов происходит размножение фрагментацией?
   
8. 
   Какой процесс характеризует время генерации?
   
9. 
   Транспорт питательных веществ у бактерий.
   
10. 
    Отличительные признаки процессов питания у бактерий.
    
11. 
    Поступление питательных веществ в клетку без затраты энергии.
    
12. 
    Поступление питательных веществ в клетку с затратой энергии.
    
13. 
    Как культивируют большинство бактерий?
    
14. 
    Какое требование для питательных сред необязательное?
    
15. 
    Естественные питательные среды.
    
16. 
    Плотные питательные среды.
    
17. 
    Дифференциально-диагностические среды.
    
18. 
    Элективные среды.
    
19. 
    Элективный компонент ЩПВ.
    
20. 
    Элективный компонент среды ЖСА.
    
21. 
    Дифференциальный компонент ЖСА.
    
22. 
    Универсальные среды.
    
23. 
    Способы получения чистых культур.
    
24. 
    На какой среде выделяют чистую культуру аэробов?
    
25. 
    Что проводят на первом этапе выделения чистой культуры
    

аэробов?

26. 
    Второй этап выделения чистой культуры аэробов.
    
27. 
    Третий этап выделения чистой культуры аэробов.
    
28. 
    Классификация бактерий по источнику энергии.
    
29. 
    Как делят бактерии по источнику углерода?
    
30. 
    Как подразделяют бактерии по источнику азота?
    
31. 
    Какие бактерии называют гетеротрофами?
    
32. 
    Какие бактерии относятся к автотрофам?
    
33. 
    Какие бактерии называют ауксотрофами?
    
34. 
    Бактерии, усваивающие углерод из СО_2.
    
35. 
    Бактерии, усваивающие углерод из органических соединений.
    
36. 
    По донорам электронов бактерии бывают…?
    
37. 
    Факторы роста.
    
38. 
    Бактерии, нуждающиеся в факторах роста.
    
39. 
    Бактерии, не нуждающиеся в факторах роста.
    
40. 
    Облигатные аэробы.
    
41. 
    Бактерии, растущие в присутствии кислорода.
    
42. 
    При каких условиях растут факультативные анаэробы?
    
43. 
    Что представляет энергетический обмен у облигатных аэробов?
    
44. 
    При каких процессах акцептором электронов выступает кислород?
    
45. 
    Характер роста различных бактерий на жидких питательных средах.
    
46. 
    Характер роста бактерий на плотных питательных средах.
    
47. 
    Методы получения изолированных колоний аэробов.
    
48. 
    В проходящем свете у бактерий описывают…?
    
49. 
    Какие свойства описывают у колоний в отраженном свете?
    
50. 
    Какие свойства колоний описывают при малом увеличении?
    

Лабораторное занятие № 6.