Микробиология. микра зачет. Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика кишечных инфекций
 Скачать 57.17 Kb.
|
|
34. Бактерифаг брюшнотифозный поливалентный с кислотоустойчивым покрытием. Бактериофаг брюшнотифозный поливалентный с кислотоустойчивым покрытием - медико-биологический препарат. Содержит брюшнотифозный бактериофаг. В ЧК возбудителя брюшного тифа выделяют с последующим культивированием в ней бактериофага с последующим получением фильтрата фаголизата и определением титра фага. Используется для лечения и профилактики брюшного тифа в возрасте от 6 месяцев. Кратность и длительность приема определяется врачом. 35. Диарейныеэшерихии. Их биологические свойства.дифференциация патогенных эшерихий от представителей нормальной микрофлоры. .Патогенные эшерихии , кот. являются возбудителями кишечного эшерихиоза, ОКИ ,называются диареегенными. 4 основные категории: энтеротоксигенные КП, энтероинвазивные КП, энтеропатогенные КП, энтерогеморрагические КП. Эти виды отличаются по антигенной структуре и вызывают характерные для каждого вида кишечные заболевания. Повреждающее действие на клетки и ткани оказывает эндотоксин, кот. выделяется при гибели микроорганизма. Способность вызывать патологические процессы связана с наличием у КП фимбрий , обеспечивающих прикрепление к эпителиальным клеткам. Адгезины фимбрий обладают специфичностью узнавания комлементарных им рецепторов ЭТКП является возбудителем холероподобных заболеваний у детей и взрослых за счет действия токсина, сходного с холерогеном, токсин термолабильный. Большое количество эндотоксинов высвобождается при колонизации ими слизистой оболочки .Это приводит к нарушению водно-солевого обмена, приводя к водянистой диареии. Воспалительной реакции нет. Механизм развития диарейного сидрома связан с активацией аденилатциклазы кишчнника. Заражение ЭТКП происходит водным и алиментрным путями. ЭИКП адгезируются на поверхности эпит.клеток слизистой оболочки тонкой кишки, проникают в эпителиоциты в цитоплазме, которых они размножаются. Клетки при этом гибнут-возникает язвенно-катаральное воспаление. Клинически это проявляется дизентериеподобным синдромом. Водный и алиментарный пути заражения ЭПКП размножается на поверхности эпителия тонкого кишечника с разрушением микроворсинок и повреждения апикальной поверхности эпителия. Возникают эрозии. Попадание бактерий в макрофаги и лейкоциты приводит к бактеремии (после разрушения фагоцитирующих клеток).Контактно-бытовой путь заражения. ЭГКП способна вызывать кровавый понос с последующим осложнением в виде гемолитического уремического синдрома, тромбоцитопенической пурпуры. Источник-крупный рогатый скот и овцы .Путь передачи алиментарный через мясо, прошедшее недостаточную термическую обработку. Механизм действия такой же ,как и у ЭПКП. Эти типы КП различаются по антигенной структуре, а именно по О-АГ . Для определения О-АГ в ряд пробирок с диагностическими сыворотками вносят гретую(кипяченную в течние1-2часов) взвесь микроорганизмов. Кипячение разрушает поверхностно расположенный К-АГ, кот. мешает определению О-АГ. Через сутки инкубирования при 37град. гомологичные сыворотке штаммы агглютинируются до титра . Культуру, давшую развернутую РА с одной из сывороток , сеют на дифференциальные среды для окончательной идентификации. 36. Вакцина тифозно-паратифозная столбнячная химическая сорбированная. Вакцина тифозно –паратифозная, столбнячная сорбированная- медико –биологический препарат. Содержит полные антигены возбудителя брюшного тифа и паратифов А и В, а также столбнячный анатоксин, сорбированные на гидроокиси аллюминия . Предназначена для профилактики брюшного тифа, паратифов и столбняка. Вводят однократно подкожно.Ревакцинацию проводят только по эпид. показаниям. Столбнячный анатоксин- обезвреженный токсин получают путем воздействия 0,4 % формальдегида, 37гр., В течение 3-4 недель. Полученный анатоксин подвергают очистке и концентрированию физико-химическими методами для удаления балластных веществ. К такому анатоксину добавляют адъюванты. Полученные таким образом препараты наз-ся очищенными сорбированными анатоксинами. 37. Эшерихии, их основные свойства (морфологические, культуральные, ферментативные,антигенные). Семейство: Enterobacteriacae Род: Esherichia Вид: E. coli Морфология: прямые Гр – палочки, размер 1:5*0.4:0.8 мкм, подвижные за счёт перетрехиально расположенных жгутиков, спор не образует. Ферментативные свойства. Обладают дыхательным и бродильным метаболизмом. Оксидазоотрицательны, каталазоположительны. Способны восстанавливать нитраты,за счёт наличия нитратредуктазы Биохимические свойства. 1) продуцируют кислоту при ферментации глюкозы; 2) ферментация лактозы; 3) не образуют сероводород; 4) продуцируют индол. Культуральные свойства. На плотных средах образуют колонии S-R формы Растут на простых питательных средах, большинство культивируется при t=37 гр. Факультативные анаэробы. Антигенные свойства: E. coli 1) Имеет соматический О-антиген,определяющий серогруппу, 171 разновидностей О-антигенов 2) поверхностный К-антиген(А,В,L-отличающиеся по чувствительности к температуре. 3) типоспецифический Н-антиген, определяющий серовар. Резистентонсть: в течении нескольких месяцев сохраняется в воде и почве. Погибает при нагревании до 55 гр. В течении 60 мин.,при 60 гр.-15 мин. 38. Микробиологическая диагностика пищевых токсикоинфекций, вызываемых протеем. Пищевые токсикоинфекции отличаются от интоксикации тем, что в первом случае в организм могут попасть не только микроорганизмы, но и готовые экзотоксины. Материал для исследования отбирает врач: рвотные массы, остатки пищи. Бактериальный метод проводится длительно, поэтому для оказания быстрой своевременной помощи используется экспресс-диагностика: РН, РИФ, ИФА. В основе РН лежит способность специальной антитоксической сыворотки нейтрализовать экзотоксин. Для проведения реакции исследуемый материал смешивают с антитоксической сывороткой, выдерживают в термостате и вводят животным (морским свинкам,мышам). Контрольным животным вводят фильтрат исследуемого материала, не обработанный сывороткой. В том случае, если произойдёт нейтрализация экзотоксина антитоксический сывороткой, животные опытной группы останутся живыми. Контрольные животные погибнут в результате действия экзотоксина. Антитоксические сыворотки для людей получают путем гипериммунизации лошадей. Введение осуществляется по методу Безредки,для профилактики сывороточной болезни: вначале вводят небольшую дозу( 0,01; 0,1 мл), а затем через 1-1,5 часа-основную дозу, для адаптации организма к препарату. Необходимо выяснить источник инфекции для предупреждения многочисленных заболеваний, чаще всего это мясо крупного рогатого скота. Бактериологический метод исследования: Не уверена, что правильно. По-моему это здесь писать не нужно. На первом этапе из исследуемого материала делают посев на среду Эндо и инкубируют в термостат на 24ч, 37гр. для получения изолированых колоний. На втором этапе производим макроскопию и микроскопию полученных колоний. Макроскопия-??? Микроскопия-Гр-палочки Далее делаем посев на скошенный агар или на среду Ресселя. Инкубируем на24ч, 37гр.для выделения чистой культуры. На третьем этапе тоже проводим макроскопию-гомогенный ползучий ,образуя роящиеся Н-колонии рост. Микроскопия- Гр-палочки. Это проверка чистоты культуры. Пересев на пестрый ряд: ферментируют углеводы с образованием кислоты и газа, продуцируют сероводород, индол. Определяем чувствительность к фагу, используя протейный бактериофаг. Микроорганизмы сеют газоном на чашки Петри ,разделяют на сектора, затем добавляют бактериофаг и если некоторое время образуются образуются стерильные пятна, значит это действительно протеи , также определяют чувствительность к антибиотикам , используя фильтровальную бумагу с антибиотиком .Инкубируем в термостат на24ч,37гр.. Выявляем зоны лизиса. На четвертом этапе производим учет результатов. Возбудитель протеи чувствителен к тому или иному антибиотику. 39. Вакцина брюшнотифозная споровая, обогащенная Vi-антигеном. Вакцина брюшнотифозная споровая, обогащённая Vi-аг- МБП, содержит капсюлярный антиген возбудителя брюшного тифа. Состоит из двух компонентов: сухой брюшнотифозный спиртовой вакцины и раствора Vi-аг, кот. соединяются непосредственно перед применением. Раствор Vi-аг- поверхностый аг выделенный из лиофилизированных микробных клеток S.tiphi 1 мл комплексного препарата содержит 500 млн микробных клеток и 400 мкг Vi-АГ Используется для профилактики брюшного тифа. 40. Значение нормальной микрофлоры. Микрофлора- стабильное сообщество микроорганизмов, т.е. микробиоциноз. Место обитания сообщества микроорганизмов наз-ся биотопом. - большинство микроорганизмов, входящие в состав нормальной микрофлоры, выделяют кислоты, лизоцим, спирты, что оказывают тормозное влияние на развитие гнилостных бактерий в кишечнике. - способствуют пищеварению: расщепление клетчаткки,пектинов. с деятельностью микроорганизмов связаны обмен липидов, различных желчных кислот,различных белков до конечных продуктов. -участие в процессах обезвреживания токсинов,поступающих с пищей -НМ способствует всасыванию из кишечника ионов Fe, вит. Д, участвует в образовании вит. К., фолиевой,никотиновойкислот и т.д. ,участвует в водно-солевом обмене. НМ обеспечивает образование Ig A,не позволяет возбудителям проникать в ткани. -у взрослого человека по весу в толстом кишечнике нахдится 1,5 кг полезных микроорганизмов. -НМ выполняет антимутагенную функцию, разрушая канцерогенные вещества в кишечнике. -НМ участвует в переваривании и детоксикации субстратов и метаболитов , что сравнимо с функцией печени. -участие в колонизационной резистентности. 41. Диагностика дисбактериоза. Посевы изучают на наличие патогенных микроорганизмов и на нарушение соотношения различных видов микробов. Результаты исследования следует считать объективными при анализе роста изолированных колоний в том числе, если можно изучить морфологию и подсчитать количество колоний на чашку Петри. После идентификации проводят пересчет содержания микроорганизмов каждого вида на 1 г исследуемого материала. При обнаружении патогенной микрофлоры необходимо изучить ее чувствительность к антибактериальным препаратам и бактериофагам. Отбор и доставка материала на дисбактериоз Материалом для исследования является кал не позже 2 часов после дефекации. Для получения достоверного результата стул должен быть обязательно утренним, самостоятельным, не на фоне лечения. У грудных детей забирать материал не с памперсов и пеленок. Одну столовую ложку фекалий помещают в прокипяченную стеклянную баночку. Лабораторная диагностика дисбактериоза кишечника Метод исследования - бактериологический: мерный посев исследуемого материала с целью определения количества микроорганизмов наиболее значимых групп. Этапы исследования: •приготовление серийных разведений суспензии испражнений; •посев на питательные среды из разведений; •учет результатов посева и ориентировочная идентификация микроорганизмов; •оценка результатов. На первом этапе 1 грамм нативных фекалий растирают в ступке с 9 мл физ.растовора. из этого разведения делают посев на плотные питательные среды( среда Плоскирева или Левина). Одновременно делают массивный посев нативного кала на жидкие среды обогащения( Мюллера,селенитовая).Из основного разведения 1:10 делают дополнительные 100-кратные,затем вносят по 1 мл на среды( Эндо,Левина)и 0,01 мл на 3-5% кровяной агар. Для получения роста изоллированных ,доступных для счета колоний, применяют стеклянные бусы.Стерилизованные бусинки опускают в чашку с посевным материалом,при лёгком покачивании чашки с бусами в течении 1 мин материал равномерно распределяется по питательной среде.Посев бусами начинают с кровянного агара, затем бусы переносят на чашки с другими средами,все седы помещают в термостат(37 гр.,24 ч) На втором этапе на среде Эндо посчитывают число и процент лактозонегативных бесцветных колоний (по отношению ко всему числу выросших колоний). Колонии со слабовыраженными ферментативными свойствами (слабое разложение лактозы-розовые колонии) подсчитывают по отношению к общему числу колоний. С чашек со средами (Эндо,Левина,Плоскирева ) выделяют не менее 4-5 колоний отличающихся по морфологии окраски. Пересевают на среды Реселла или на среду Олькеницкого, а так же в пробирку с бульоном, под пробку которой подвешена индикаторная бумажка для определения индола. В дальнейшем лактозонегативные культуры изучают прежде всего в отношении энтеробактерий(33 вопрос) Рост микробов рода Протея характеризуется разложением мочевины и окрашиванием среду Ресселя фиолетово-коричневый цвет. Необходимо делать расчеты всех микроорганизмов, входящих в состав микрофлоры. Определить чувствительность к антибиотикам. 42. Факторы, влияющие на состав нормальной микрофлоры. Лечение и профилактика дисбактериозов. Дисбактериоз – состояние, развиваются в результате утраты нормальных функций микрофлоры. При дисбактериозе происходят стойкие количественные и качественные изменения бактерий, входящих в состав НМ. Развитию дисбактериоза способствует: 1) длительное применение антибиотиков. 2) снижение местного и общего иммунитета 3) чрезмерное использование антибактериальных средств 4) нарушения в гормональной системе организма 5) общее ухудшение экологии, несбалансированное питание, низкое качество воды. 6) раннее искусственное вскармливание Для восстановления нормальной микрофлоры а) проводят селективную деконтаминацию-избирательное удаление из пищ.тракта аэробных бактерий и грибов для повышения сопротивляемости организма к инфекционным агентам. б) назначают препараты пробиотиков (эубиотиков),полученные из лиофильно высушенных живых бактерий-представителей нормальной микрофлоры кишечника-бифидобактерий (бифидумбактерии),кишечной палочки(колибактерин),лактобактерий(лактобактерин) и др. Профилактика: 1) во время беременности необходимо отказаться от использования лекарственных препаратов, в частности антибиотиков 2) постоянно употреблять в пищу продукты, богатые бифидо- и лактобактериями, а также взять себе за правило 1-2 раза в полгода проводить лечбно-профилактический курс Нормофлоринами Л, Б и Д, а также Зостерин-Ультра 30%. 3) строго следить за питанием, обязательно включать в рацион кисломолочные продукты, обогащенные микрофлорой, употреблять биологически активные добавки, поливитамины, полиферменты, а также противогрибковые препараты (пребиотики и пробиотики), создающие благоприятные условия для роста собственной микрофлоры. 4) беспорядочный прием антибиотиков или гормонов приводит к очень тяжелым и стойким нарушениям микробиоценоза. 5) Рациональное питание |