микробиология. Мікробіологічна діагностика чуми

• Название: Мікробіологічна діагностика чуми
• Анкор: микробиология
• Дата: 15.10.2020
• Размер: 56.14 Kb.
• Имя файла: 14-22.docx
• Тип: Документы; #143092
• страница: 4 из 4

Правець – гостра токсична ранова інфекція, яка викликається нейротоксином C. tetani, і проявляється судомами скелетних м’язів і періодичними генералізованими судомами.

Механізм та шляхи передачі захворювання	Патогенез	Форми захворювання/ інкуб. період	Основні клінічні ознаки	Імунітет	Профілактика	Лабораторна діагностика
Контактний Фактори передачі: інорідні тіла в рані; Нестерильний інструмент, тощо Джерело інфекції Тварини, людина (клостридії –постійні коменсали ШКТ людей і тварин)	1.Потрапляння спор у рану 2.проростання спор в анаеробних умовах 3. Фіксація екзотоксину в м’я-зево-нейронних синапсах 4. Ретро-градний аксональний транспорт токсину до ЦНС 5.Фіксація в синапсах гальмінівних нейронів, зв’язування медіаторів	Інкубаційний період – від 2 до 14 діб. Форми: -рановий правець; -правець новонароджених; - після-пологовий правець; - крипто-генний правець.	Посмикування в області рани; Розвиток вегетативних порушень; Тризм; розвиток судом по нисхідному типу; Опістотонус; параліч	Постінфек-ційний, Антибакте-ріальний Антитоксич-ний, Слабко напружений, нетривалий.	Неспецифічна Хірургічна обробка рани, видалення чужерідних тіл, згустків крові; дотримання асептики при хірургічних втручаннях Специфічна: 1) планова (імунізація дітей АКДП,АДП); 2) екстрена: -активна (анатоксин); -активно-пасивна (анатоксин+сироватка; Пасивна (антитоксична сироватка)	Здійснюється рідко Основні методи: Бактеріоскопічний Біологічна проба (реакція нейтралізації на білих мишах) Бактеріологічний (посів по Філдсу) Серологічний (визначення тетеноспазміну в матеріалі за допомогою ІФА,

5. 
   Епідеміологія, патогенез і лабораторна діагностика ботулізму
   

Ботулізм – гостре інфекційне захворювання, обумовлене специфічною дією нейротоксину С.botulinum , яке характеризується розвитком прогресуючих в’ялих паралічів і гастроінтестинального синдрому

Механізм та шляхи передачі захворювання	Патогенез	Форми захворювання/ інкуб. період	Основні клінічні ознаки	Імунітет	Профілактика	Лабораторна діагностика
Аліментарний Фактори передачі: Консервовані продукти, м’ясні вироби; В’ялена, копчена, солона риба	Екзотоксин накопичується в продуктах, при потраплянні в шлунок може активуватись протеолітичними ферментами; Всмоктування в кров; Фіксація в нервово-м’язових синапсах; транспорт до ЦНС	Інкубаційний період - від 2 годин до 10 діб Форми: 1)гастроінтестинальна; 2) рановий ботулізм; 3) ботулізм новонароджених	Симптоми харчової токсикоінфекції + неврологічні порушення з боку рухомих ЧМН (порушення ковтання, птоз, очні симптоми) Вегетативні порушення	Постінфек-ційний, Антибакте-ріальний Антитоксич-ний, Слабко напружений, нетривалий.	Неспецифічна: Контроль за виготовленням консервованої іжі; Специфічна екстрена: 1) активна (рідко); 2) пасивна (полівалентна антитоксична вакцина)	1)Бактеріоскопічний метод 2)Біологічна проба 3)Бактеріологічний метод 4)Серологічний метод для виявлення ботулотоксину в харчових продуктах, матеріалі від хворого (ІФА, РНГА з анти тільним діагности кумом)

Схема мікробіологічної діагностики правця

Матеріал для дослідження: рановий вміст, ексудат, некротизовані тканини, тампони з рани, при пологовому правцеві – віділення і біоптати з матки, вагіни; при правцеві новонароджених – виділення з пупка

Бактеріоскопічний метод (попередня діагностика):

Мазок, забарвлення за Грамом (виявлення типових бактерій у вигляді «барабанних паличок)

Імунофлюоресцентна мікроскопія

Бактеріологічне метод

1. 
   Матеріал прогрівають при 80⁰С протягом 20 хв;
   
2. 
   Висів матеріалу на середовище Кітта-Тароцці або у конденсаційну воду скошеного кров’яного агару по Філдсу;
   
3. 
   Інкубація 48-72 год., пересів на кров’яний агар Цейслера;
   
4. 
   Інкубація 24-48 год, ізольовані колонії пересівають на Кітта-Тароцці;
   
5. 
   Інкубація 24-48 год.
   
6. 
   Ідентифікація чистої культури на підставі:
   
   1. 
      Морфології, культуральних властивостей;
      
   2. 
      Ферментативних ознак;
      
   3. 
      Результатах біологічної проби (реакція нейтралізації)
      

Методи для визначення нейротоксину клостридій правця в дослідному матеріалі

Біологічний метод (реакція нейтралізації)

1. 
   введення суміші фільтрату матеріалу ( або рідкої культури) і антитоксичної сироватки, попередньо витриманої в термостаті 30-40хв. (контрольна миша)
   
2. 
   введення фільтрату матеріалу без антитоксичної сироватки (дослідна миша);
   
3. 
   врахування результатів біологічної проби через 4-5 діб
   

Серологічний метод:

4. 
   визначення тетаноспазміну за допомогою РНГА з анти тільним еритроцитарним діагности кумом;
   
5. 
   виявлення токсину за допомогою ІФА
   

Схема мікробіологічної діагностики ботулізму

Матеріал для дослідження: промивні води шлунка, блювотні маси, кров, залишки харчових продуктів

Бактеріоскопічний метод (попередня діагностика):

Мазок із залишків харчових продуктів,, забарвлення за Грамом (виявлення типових бактерій у вигляді «тенісних ракеток»)

Бактеріологічне метод

1. 
   Матеріал прогрівають при 80⁰С протягом 20 хв;
   
2. 
   Висів матеріалу на середовище Кітта-Тароцці; інкубація 48-72 год.,
   
3. 
   пересів на кров’яний агар Цейслера; інкубація 24-48 год.
   
4. 
   ізольовані колонії пересівають на Кітта-Тароцці; інкубація 24-48 год.
   
5. 
   Ідентифікація чистої культури на підставі:
   

1. 
   Морфології, культуральних властивостей;
   
2. 
   Ферментативних ознак;
   
3. 
   Результатах біологічної проби (реакція нейтралізації) для визначення серотипу токсину
   

Методи для визначення типу ботулотоксину в дослідному матеріалі

Біологічний метод (реакція нейтралізації) – проводять на 5 парах мишей

6. 
   введення суміші фільтрату матеріалу ( або рідкої культури) і антитоксичної сироватки певного типу (A, B, E, F), попередньо витриманої в термостаті 30-40хв. (контрольні миші)
   
7. 
   введення фільтрату матеріалу без антитоксичної сироватки (дослідна миша);
   
8. 
   врахування результатів біологічної проби через 2-3 доби
   

Серологічний метод:

9. 
   визначення ботулотоксину за допомогою РНГА з анти тільним еритроцитарним діагности кумом;
   
10. 
    виявлення токсину за допомогою ІФА, імуноелектрофорезу
    

Схема мікробіологічної діагностики газової анаеробної інфекції

Матеріал для дослідження: некротизовані тканини, ексудат з ран, перев’язувальний та шовний матеріал, чужорідні предмети.

Бактеріоскопічне дослідження

• 
  мазок, забарвлення за Грамом;
  
• 
  мазок, забарвлення метиленовим синім;
  
• 
  мазок, забарвлення за Буррі-Гінсом;
  
• 
  РІФ.
  

Відповідь.
Бактеріологічне дослідження

• 
  посів на середовище Кітта-Тароцці, Вільсон-Блера, молоко, середовище Вілліса-Хобса;
  
• 
  пересів на глюкозо-кров’яний агар;
  
• 
  характер колоній;
  
• 
  мазок, забарвлення за Грамом;
  
• 
  препарат “роздавлена крапля” для виявлення рухливості;
  
• 
  пересів на середовище Кітта-Тароцці (чиста культура);
  
• 
  посів на вуглеводний ряд Гіса, желатину;
  
• 
  реакція нейтралізації токсину антитоксином.
  

Відповідь.

Прискорений метод.

• 
  лецитиназна проба для виявлення токсину перфрінгенс в досліджуваному матеріалі за допомогою діагностичної сироватки анти-perfringens.
  

Відповідь.
Біологічне дослідження.

- РН з метою встановлення типу токсинів в дослідах на мишах, заражених сумішшю матеріалу та специфічних антитоксичних сироваток.

Відповідь.

Диференційні ознаки патогенних клостридій – збудників газової анаеробної інфекції

Вид	Цукролітичні властивості			Розрідження желатину	Ріст у молоці	Колонії на середовищі Вілліса-Хобса
	лактоза	глюкоза	маніт
C.perfringens	+ (КГ)	+ (КГ)	-	+	Швидке згортання («штормова реакція»)	Червоні, з зоною опалесценції (за рахунок розщеплення лактози і утворення лецитинази)
C.hystoliticum	-	-	-	+	Швидке згортання і пептонізація	Безбарвні, без зони опалесценції (лактозо- і лецитиназонегативні)
C.novyi	-	+	-	+	Повільне згортання	Безбарвні з зоною опалесценції (лактозо-негативні, але утворюють лецитиназу)
C.septicum	+(КГ)	+(КГ)	-	+	Повільне згортання	Безбарвні з зоною опалесценції
C.sporogenes	-	+ (КГ)	-	+	Повільне згортання	Безбарвні, без зони опалесценції (лактозо- і лецитиназонегативні)
C.sordelii	-	+(КГ)	-	+	Повільне згортання	Безбарвні з зоною опалесценції (лактозо-негативні, але утворюють лецитиназу)
C.difficile	-	+	+	+	Не згортає	Безбарвні, без зони опалесценції (лактозо- і лецитиназонегативні)