микробиология. Мікробіологічна діагностика чуми
 Скачать 56.14 Kb.
|
|
14. Мікробіологічна діагностика чуми. Схема мікробіологічної діагностики чуми (проводять в спеціалізованих лабораторіях) Матеріал для дослідження: виділення з виразки, пунктат з бубону, кров, фекалії, мокротиння (залежить від форми інфекції); секційний матеріал Бактеріоскопічний метод: (попередня діагностика) - мазок, забарвлення за Грамом -мазок, забарвлення за Леффлером - пряма РІФ Бактеріологічний метод: -висів матеріалу у флакони з 50-100 мл МПБ, на МПА, на середовище Туманського, цитратний дезоксіхолевий агар -дослідження колоній через 10-12 год., через 18-20год. врахування типового росту у МПБ (мазок, забарвлення за Грамом, Леффлером) -пересівання ізольованих колоній на скошений агар -через 24 год. ідентифікація чистої культури: -РА з діагностичною О-сироваткою - РП з діагностичною К-сироваткою - проба на фаголізабельність чумним бактеріофагом (метод стікаючої краплі) - визначення цукролітичних властивостей на середовищах Гіса (диференційні ознаки єрсиній див.нижче) Біологічний метод - зараження морських свинок або білих мишей (підшкірно, внутрішньоочеревинно, нашкірно) - дослідження загиблих через 2-3 дня (заражені в черевну порожнину) або 5-7 днів тварин: -мазки з внутрішніх органів; - висів крові на поживні середовища, виділення чистої культури, ідентифікація Серологічний метод (ретроспективна діагностика) Матеріал для дослідження: сироватка крові -РНГА; діагностичний титр 1:40 Алергічна проба з пестином (визначення поствакцинального імунітету, ретроспективна діагностика) Прискорені методи діагностики ( базуються на визначенні антигенів збудника в матеріалі) -РІФ; -РНГА з анти тільним еритроцитарним діагностикумом; - реакція кільцепреципітації по типу Асколі; - визначення фаголізису культури протичумним бактеріофагом. 15. Збудник туляремії, біологічні властивості. Методи мікробіологічної діагностики туляремії Возбудитель туляремии Возбудитель впервые был обнаружен Ч. Мак-Коем и Ш. Чепиным в 1921 г. при изучении чумоподобного заболевания у сусликов в местности Туляре в Калифорнии и назван Bacterium tularensis. В 1921 г. Э. Френсис доказал, что этот возбудитель патогенен для человека. В итоге род получил название Francisella., а вид – F. tularensis. Классификация Семейство Francisellaceae, род Francisella, виды F. tularensis, F. philomiragia (патогенность для людей не доказана). Морфология Мелкие, полиморфные, грамотрицательные биполярно окрашиваемые коккобактерии, неподвижны, не имеют спор, есть тонкая слизистая капсулоподобная оболочка. Культуральные свойства Очень требовательны к условиям культивирования, растут на яичных или на агаровых средах. Используют кровяной агар с глюкозой и цистеином, рост медленный, скудный (через 3-7 дней). Колонии нежные, блестящие, бесцветные (S-формы). На жидких средах – скудный поверхностный рост. Лучше культивируются в организме морских свинок и кроликов. Биохимические свойства Аэробы, метаболизм окислительный. Ферментируют глюкозу, мальтозу до кислоты. Белки разлагают до сероводорода. Имеют ферменты глутаминазу, аспарагиназу, цитруллинуреидазу. Выделяют каталазу, оксидазу не продуцируют. Антигенная структура различна у S- и R-форм туляремийного возбудителя. S-формы имеют 2 антигена: О-АГ – соматический и Vi-АГ – поверхностный, который выявляется у свежевыделенных культур и обеспечивает вирулентность. У R-форм присутствует только О-антиген. В О-антигене возбудителя туляремии есть общие субстанции с антигенами бруцелл, что может приводить к перекрестным реакциям. Географические расы (подвиды) возбудителей туляремии: 1. Голарктическая – встречается в странах северного полушария. Не имеет фермента цитруллинуреидазы, не ферментирует глицерин, слабо патогенна для кроликов. 2. Среднеазиатская – слабо патогенна для кроликов, имеет цитруллинуреидазу, ферментирует глицерин. 3. Американская – высокопатогенна для кроликов, выделяет цитруллинуреидазу, ферментирует глицерин. Факторы вирулентности Факторы вирулентности возбудителей туляремии до конца не изучены. Считается, что ведущими в патогенезе являются структуры, ответственные за выживание бактерий при фагоцитозе и развитие реакций гиперчувствительности. Возбудители туляремии имеют капсулу, которая обладает протективным действием. Липополисахаридный эндотоксин так же, как и у бруцелл, не способен вызывать активную продукцию провоспалительных цитокинов. Отсюда фагоцитоз носит незавершённый характер, возбудители размножаются в фагоцитах, подавляют их киллерный эффект, препятствуя слиянию фагосомы с лизосомами. Бактерии выделяют нейраминидазу, что способствует адгезии. Имеются рецепторы для взаимодействия с Fс-фрагментами IgA. Это способствует нарушению активности комплемента и тормозит опсонизацию. Аллергены клеточной стенки вызывают ГЧЗТ. Резистентность Возбудители проявляют заметную устойчивость в окружающей среде. В воде при 40С сохраняются 4 месяца, при температуре 200С – 2 месяца. Чувствительны к повышенным температурам (60-800), к основным дезинфицирующим веществам (карболовой кислоте, лизолу), к антибиотикам. Патогенез и характеристика заболевания Туляремия – зоонозное природно-очаговое особо опасное заболевание, протекающее с явлениями лимфаденита, лихорадкой, интоксикацией с последующей генерализацией и поражением внутренних органов. Источниками инфекции являются еcтественные хозяева возбудителя – грызуны, хомяки, зайцы, домашние мыши, крысы, животные. Основные пути передачи: контактный – при контакте с больными животными или их трупами; алиментарный – через воду и продукты, инфицированные возбудителем. Возможна передача клещами, комарами, которые являются переносчиками. От больного человека возможно заражение только при вторичной бубонной форме. Инфекционная доза при туляремии минимальна, особенно при ингаляционном заражении (10-50 микробных клеток). Входные ворота: кожа, конъюнктива глаз, слизистая ротовой полости, носа, пищеварительного тракта. Возбудитель обладает высокой инвазивностью, поэтому возможно его проникновение через неповрежденную кожу. Инкубационный период обычно составляет всего 3-6 дней. Заболевание начинается остро, с озноба и лихорадки. У входных ворот часто появляется местная реакция в виде язвы. Далее возбудитель попадает в лимфу, лимфатические узлы, проникает в фагоциты и размножается в них, после чего поступает в кровь. Макрофаги служат резервуаром бактерий и средством их распространения. В очагах скопления возбудителя образуются специфические туляремийные гранулёмы, т.е. первичные бубоны. При дальнейшем распространении возбудителя могут появляться вторичные бубоны. Бактерицидные факторы крови действуют на возбудителя, он разрушается, высвобождается эндотоксин, который способствует появлению реактивных проявлений со стороны внутренних органов и тканей, развивается ГЧЗТ. Клинические формы: бубонная (ангинозно-бубонная, глазобубонная, язвенно-бубонная); легочная форма – результат гематогенного заноса возбудителя или при заражении от больного человека воздушно-капельным путём; генерализованная форма – чаще при заражении алиментарным путём, её называют ещё тифоидной туляремией; абортивная или желудочно-кишечная форма – язвенные очаги в желудочно-кишечном тракте и специфическое воспаление брыжеечных лимфатических узлов, лихорадка, диарея, возможны желудочно-кишечные кровотечения. Наиболее опасными являются легочная и генерализованная формы болезни, летальность при которых составляет 30-60%. При наиболее частых локальных формах летальность не превышает 3%. В связи с устойчивостью во внешней среде, высокой инвазивной способностью, минимальной инфекционной дозой с развитием тяжелой генерализованной инфекции, туляремийные возбудители могут являться потенциальным средством биотерроризма, а само заболевание относится к особо опасным инфекциям. Иммунитет Иммунный ответ при заболевании развивается преимущественно по клеточному типу, ведущую роль в защите играют сенсибилизированные Т-лимфоциты и макрофаги. Лабораторная диагностика Основным методом при установлении диагноза туляремии является серологическая диагностика. Начиная со второй недели заболевания ставят реакцию агглютинации или РПГА. Диагностический титр 1:100-1:200. Необходимо проверять титр антител в динамике в реакции с парными сыворотками. Применяют аллергический метод – пробу с аллергеном тулярином (взвесь возбудителя, убитого нагреванием при температуре 700С, вводят 0,1 мл – 100 млн микробных тел). Реакция положительна с 3-4 дня заболевания (ГЧЗТ). Для выявления антигена в исследуемом материале используют РИФ, ИФА, реакцию преципитации. Бактериологический метод проводят в специализированных лабораториях с соблюдением мер биобезопасности, так как франциселлы относятся ко II группе патогенности микроорганизмов. Первые генерации возбудителя растут очень медленно и скудно, поэтому лучше использовать биобактериологический метод. При этом заражают морских свинок или белых мышей, через 10-15 дней они гибнут. Трупный материал засевают на кровяной агар с глюкозой и цистином или на яичные среды. Наблюдается рост через 2-3 недели. Идентификацию культуры проводят по биохимическим, антигенным и культуральным свойствам. Выделить возбудителя можно и в желточном мешке куриного эмбриона. Идентификацию проводят в РИФ со специфическими сыворотками. Лечение Препаратами выбора в лечении туляремии являются антибиотики группы аминогликозидов (гентамицин, амикацин) или фторхинолоны. Профилактика Специфическую профилактику проводят живой вакциной Б.Я. Эльберта и Н.А. Гайского в эндемических районах лицам из группы риска (например, сотрудникам специализированных лабораторий). Длительность иммунитета составляет 1-2 года. Неспецифическая профилактика включает меры по дератизации в эндемических районах, санитарный контроль за водными источниками, продовольственными складами, санитарно-просветительную работу среди населения. 16. Бруцели, види, диференціація -17. Епідеміологія, патогенез при бруцельозі. Методи мікробіологічної діагностики бруцельозу, їх оцінка. Препарати для специфічної профілактики і терапії. В 1886 г. английский военный врач Д. Брюс в селезенке больного, погибшего от мальтийской лихорадки, обнаружил мелкие коккобактерии, выделил их в чистой культуре и назвал Micrococcus melitensis. В этом же году ученый Б. Банг выделил такие же коккобактерии из околоплодных вод при аборте коров. В 1887 г. А. Райт установил, что сыворотка больных мальтийской лихорадкой дает реакцию агглютинации с культурой, выделенной Брюсом. В 1914 г. Д. Траум выделил похожего возбудителя при инфекционном аборте свиней. Классификация В 1920 г. все эти возбудители были отнесены к одному роду, и в честь первого открывателя Д. Брюса род получил название Brucella, семейство Brucellaceae, а виды получили исходные названия, зависящие от источника инфекции: B.melitensis – поражает мелкий рогатый скот; B.abortus (bovis) – крупный рогатый скот; B. suis – свиней. B.canis – собак. B. ovis – овец. B.neotomаe – крыс и других грызунов. Анализ генома бруцелл показал, что по степени гомологии ДНК все они образуют один общий вид. Однако с учетом фенотипических отличий и особенностей заболеваний вышеприведенное деление на группы сохраняется. Патологию у человека наиболее часто вызывают первых три возбудителя. Морфология Бруцеллы представляют собой мелкие грамотрицательные коккобактерии, не имеют жгутиков и спор, могут образовывать капсулу при культивировании на специальных средах с добавлением иммунной сыворотки. Культуральные свойства Бруцеллы весьма прихотливы при культивировании. Способны расти на сложных средах с добавлением глюкозы, крови, тиамина и биотина. Рост более активный на средах с печеночным экстрактом (печеночный бульон или агар). Первые генерации размножаются очень медленно (2-4 недели), последующие – 1-2 недели. На плотных средах бруцеллы могут диссоциировать на S и R-формы, а под действием антибиотиков могут переходить в L-формы. B.abortus в первых генерациях являются микроаэрофилами и нуждаются в повышенной концентрации углекислого газа (5-10%) при культивировании. Биохимические свойства Строгие аэробы. Образуют каталазу, часть штаммов – оксидазу. Разлагают глюкозу и некоторые другие углеводы до кислоты, гидролизуют белки до аминокислот, а B.abortus – до сероводорода. Обладают уреазой. Выделяют ферменты липазу, фосфатазу, гиалуронидазу. С учетом ферментативной активности, чувствительности к фуксину и тиамину, лизабельности фагом Т-6 и способности агглютинироваться монорецепторными сыворотками бруцеллы подразделяются на биовары. B. melitensis имеет 3 биовара, B. abortus – 8, B.suis – 4. Антигенные свойства Бруцеллы имеют два термостабильных соматических антигена А и М. Количество их варьирует у разных видов бруцелл. М-АГ обнаруживается преимущественно у B. melitensis, А – у B. abortus. Имеется G-антиген – полисахаридный, общий для всех бруцелл. Есть еще L-антиген – поверхностный термолабильный, сходен с Vi-антигеном у сальмонелл. У R-форм бруцелл имеется R-антиген. Его определяют специфическими антисыворотками при серотипировании бруцелл. Факторы патогенности Бруцеллы обладают редким для бактерий вариантом генома, состоящим из 2 кольцевидных хромосом. Плазмид не обнаружено. Несмотря на явную патогенность возбудителей для животных и человека, при анализе генома не выявлено генетических островов патогенности. Отсюда основными факторами вирулентности являются компоненты бруцелл, обеспечивающие их выживание в фагоцитах и распространение по организму. Капсула бруцелл предохраняет от фагоцитоза. ЛПС-эндотоксин возбудителей менее биологически активен в сравнении с эндотоксином энтеробактерий. Тем самым бруцеллы не вызывают усиленной продукции провоспалительных цитокинов, что увеличивает их выживаемость. Ферменты бактерий гиалуронидаза, липаза ускоряют инвазию возбудителей. Низкомолекулярные продукты бруцелл ингибируют фагосомо-лизосомальное слияние, что способствует незавершенному фагоцитозу. Резистентность Устойчивы к низким температурам, долго сохраняются в почве, навозе (4-5 месяцев), в шерсти овец (3-4 месяца). В замороженных мясных продуктах сохраняют жизнеспособность до 5 месяцев. К высоким температурам, дезинфицирующим растворам и УФ-лучам бруцеллы очень чувствительны, что используется для неспецифической профилактики бруцеллеза. Патогенез и характеристика заболевания Бруцеллез – зоонозное особо опасное инфекционное заболевание, склонное к хроническому течению. Протекает по типу хронического сепсиса с длительной лихорадкой, поражением опорно-двигательного аппарата, сердечно-сосудистой, нервной, мочеполовой и других систем организма. B.melitensis, B.abortus, B. suis являются патогенными для людей. B.ovis, B. canis и B.neotomae патогенны только для животных и грызунов. Из организма животных они выделяются в окружающую среду и обсеменяют ее. Заболевание носит профессиональный характер, обычно страдают лица, имеющие возможность контакта с больными животными (ветеринарный и зоотехнический персонал, работники ферм, мясокомбинатов, пастухи и т.д.) Инкубационный период может быть длительным и составляет от 1 до 6 недель. Пути передачи – алиментарный (через мясные и молочные продукты от больных животных при недостаточной их термической обработке); контактный (прямой контакт с больными животными, у них особенно много возбудителя в околоплодных водах; возможен непрямой контакт через объекты окружающей среды); воздушно-капельный и воздушно-пылевой через верхние дыхательные пути. Входные ворота – кожа и слизистые, которые даже могут быть неповрежденными. От входных ворот бруцеллы диссеминируют лимфогенно и гематогенно. Депонируются в лимфоузлах, проникают в макрофаги. Возбудители блокируют слияние фагосом с лизосомами вследствие быстрого закисления их содержимого. Отсюда фагосомы становятся местом пребывания и активного размножения бактерий. Бактерии устойчивы к действию нейтрофилов и макрофагов. Происходит диффузная пролиферация и гиперплазия клеток макрофагальной системы, которые переносят возбудителей. Попадая в кровь, бруцеллы инфицируют печень, селезенку, почки, костный мозг, ткани лимфоидной системы. Бактерицидные факторы крови частично разрушают возбудителя, в результате выделяется эндотоксин, который способствует появлению очагов некроза в пораженных органах. При аэрогенном проникновении возбудителя первым признаком заболевания является вялотекущая пневмония. В патогенезе заболевания имеет значение рано развивающаяся гиперчувствительность замедленного типа к возбудителю. Она сохраняется в течение всей болезни и длительное время после выздоровления. При бруцеллезе развивается вторичный иммунодефицит. Бруцеллы могут персистировать в организме, переходя в L-формы и обеспечивать рецидивы заболевания. Клинические проявления очень разнообразны. Развиваются полиартрит, невриты, миозиты, пневмония, орхиты, эпидидимиты, часто прерывается беременность. Заболевание приводит к длительной потере трудоспособности и возможной инвалидности. В связи с высокой инвазивной способностью, устойчивостью во внешней среде, резистентностью к фагоцитозу, склонностью к хроническому прогрессирующему течению патологии, а также из-за отсутствия высокоэффективных вакцин, бруцеллезные возбудители могут являться потенциальным средством биотерроризма. Иммунитет Иммунитет после заболевания стойкий, клеточный и гуморальный, ведущую роль в защите играют сенсибилизированные Т-лимфоциты и макрофаги. Повторные инфекции возникают редко. Лабораторная диагностика Основными методами диагностики являются серологический и аллергический. Для серологического диагноза исследуют сыворотку первоначально качественным методом (реакция агглютинации Хеддельсона), а затем количественным (реакция Райта). Агглютинины появляются на 2-й неделе острой фазы заболевания. Реакция Хеддльсона ставится на стекле с концентрированной сывороткой больного в разных количествах с единым бруцеллезным диагностикумом. Для подтверждения диагноза ставят развернутую реакцию агглютинации Райта. Диагностический титр реакции составляет 1:160-1:200. С этой же целью можно использовать РСК, РПГА, ИФА. В ранних сроках в сыворотке выявляют АТ класса IgМ, в поздних – IgG. Аллергический метод – кожно-аллергическая проба Бюрне с бруцеллином (протеиновый фильтрат культуры бруцелл) для выявления ГЧЗТ. Реакция становится положительной на 2-3 неделе болезни. Для ускоренной диагностики используют РИФ с целью выявления антигена в синовиальной жидкости, ликворе, крови или моче. Можно использовать пробу Банга для выявления антигена в молоке. Реакция проводится по принципу кольцепреципитации. Бактериологический метод проводят в специализированных лабораториях с соблюдением мер биобезопасности, так как бруцеллы относятся ко II группе патогенности микроорганизмов. Выделение чистой культуры более эффективно на ранних стадиях бруцеллеза. Делают посев 5-10 мл крови на специальные жидкие среды. с добавлением крови, факторов роста. Затем пересевают на плотные среды и через 3-4 недели проводят идентификацию выделенной культуры по антигенным и биохимическим свойствам (таблица № ). Метод используют не так часто, поскольку возбудители культивируются с трудом, имеют сходные антигены и малую биохимическую активность. Дифференциальные признаки типов бруцелл
Молекулярно-биологический метод – применяют полимеразную цепную реакцию (ПЦР) с праймерами к основным видам бруцелл. Лечение Для лечения назначают аминогликозиды (гентамицин, ранее стрептомицин), фторхинолоны, реже тетрациклины. Для активации системы иммунитета при хроническом течении болезни может применяться убитая бруцеллезная вакцина. Профилактика Неспецифическая – обеззараживание продуктов от больных животных, мест содержания скота. Обязательно использование молочных и мясных продуктов с достаточной термической обработкой. Специфическая профилактика – вакцинация лиц из группы риска (работников специализированных лабораторий, ветврачей, доярок, работников мясокомбинатов) живой ослабленной бруцеллезной вакциной из вакцинного штамма B. abortus. Активный искусственный иммунитет сохраняется 1-3 года. Ревакцинацию проводят, если титр антител низкий и нет ГЧЗТ. Разработана химическая вакцина, эффективность которой изучается. . 18.-19 Бацили сибірки. Біологічні особливості, патогенез, специфічна профілактика сибірки. Мікробіологічна діагностика сибірки. Бактериальное происхождение заболевания было отмечено еще в середине XIX века (А. Полландер, 1849 г.; К. Давейн, 1850 г.) В чистой культуре возбудитель был выделен в 1876 г. Р. Кохом. Само заболевание приобрело название «сибирская язва» из-за обширной эпидемии в Сибири в 1786-1788 г.г., которая была детально изучена С. Андриевским. Классификация Семейство Bacillaceae является весьма многочисленным и объединяет более 30 родов. В свою очередь, род Bacillus также включает несколько десятков отдельных видов. Основным возбудителем заболеваний у животных и человека является Bacillusanthracis, который вызывает сибирскую язву. Название вида произошло от греческого anthrax (антракс – уголь) по виду сибиреязвенного карбункула – черного гнойного первичного очага в коже. Среди других бацилл Bacilluscereusможет вызывать у человека пищевые токсикоинфекции. Морфология Крупные неподвижные грамположительные палочки размерами 1х8-10 мкм, располагаются цепочками, окруженными общей капсулой. В неблагоприятных условиях вне организма образуют споры, которые чаще располагаются центрально. Цепочки бактерий при микроскопировании напоминают «бамбуковую трость». При культивировании на средах с пенициллином палочковидные формы микробных клеток превращаются в глобулы (феномен «жемчужного ожерелья»). Культуральные свойства Неприхотливы к питательным средам. Хорошо растут на простых питательных средах. Вирулентны в R-форме – образуют крупные шероховатые колонии. Под микроскопом колонии напоминают «львиную гриву» или «голову медузы», имеют волокнистое строение. Могут диссоциировать на S- (гладкие, авирулентные), М- (слизистые) и SM- (смешанные) колонии. При росте на жидких средах образуют осадок, напоминающий «комочки ваты». Бактерии способны продуцировать гемолизин, но на кровяном агаре гемолиз либо отсутствует, либо проявляется очень медленно. Биохимические свойства Факультативные анаэробы. Биохимическая активность весьма выражена. Разлагают глюкозу, мальтозу, сахарозу и другие углеводы, не разлагают лактозу, маннит и дульцит. Гидролизуют крахмал. Восстанавливают нитраты в нитриты. Белки разлагают до аммиака и сероводорода, желатин разжижают в виде «перевернутой елочки». Молоко свертывают на 3-5 сутки. Выделяют ферменты каталазу, оксидазу, дегидрогеназу, лецитиназу. Антигенная структура Соматический антиген представляет собой полисахарид клеточной стенки; капсульный – полипептид D-глутаминовой кислоты, протективный антиген является рецепторной частью в токсическом комплексе возбудителя. Факторы вирулентности Гены патогенности возбудителя локализованы в двух плазмидах. Одна из них кодирует синтез полипептидной капсулы, которая обладает выраженным антифагоцитарным действием. Бескапсульные штаммы обычно авирулентны Другая плазмида определяет синтез двух основных экзотоксинов возбудителя – отечного токсина и летального токсина. Эти токсины представляют собой сложные белковые комплексы, состоящие из рецепторной и ферментативной частей. По отдельности каждый из компонентов биологически неактивен. Рецепторным компонентом обоих токсинов является протективный антиген, который обеспечивает связывание токсинов с клетками и их проникновение в цитоплазму. В состав отечного токсина входит отечный фактор – фермент аденилатциклаза. В свою очередь, летальный токсин включает летальный фактор – фермент Zn-металлопротеиназу. Начальные этапы действия токсинов зависят от протективного антигена. Он связывается с белковыми рецепторами на поверхности клеток. При этом протективный АГ расщепляется мембранными протеазами на 2 субъединицы. Большая субъединица полимеризуется с образованием полой структуры, которая приобретает свойства трансмембранного канала. С этой структурой связывается несколько молекул отечного фактора (образуется отечный токсин) или летального фактора (образуется летальный токсин). Сформированные токсины поступают в клетку посредством эндоцитоза. Летальный и отечный факторы выходят из эндосомы в цитоплазму через канал, образованный субъединицами протективного АГ. Отечный фактор (фермент аденилатциклаза) увеличивает содержание цАМФ в клетке. Это подавляет функцию макрофагов, а также ведет к повышению проницаемости эндотелия и тканевому отеку с повреждением сосудов микроциркуляции. Летальный фактор (фермент Zn-металлопротеиназа) гидролизует регуляторную внутриклеточную протеинкиназу (МАПК-киназу). Тем самым блокируется нормальный клеточный цикл, что приводит к апоптозу пораженных клеток. Резистентность Споры возбудителя сибирской язвы характеризуются крайней устойчивостью. В почве они могут сохранять жизнеспособность более 50 лет. Вегетативные клетки погибают при 60оС за 15 мин, при 100оС – за 1-2 минуты. Споры гораздо более стабильны. Выдерживают кипячение в течение 15-20 минут и автоклавирование при 110оС в течение 5-10 минут. Инактивируются под действием 1% формальдегида и 10% NaOH в течение 2-х часов Патогенез и характеристика заболевания Сибирская язва – острая бактериальная зоонозная особо опасная инфекция, характеризуется выраженной интоксикацией, серозно-геморрагическим воспалением кожи, лимфатических узлов, внутренних органов. Источник инфекции – больные животные (дикие и домашние), выделяющие возбудителя с испражнениями и мочой. Поскольку споры бацилл могут сохраняться годами в почве, мерзлоте, трупах павших животных, факторы окружающей среды играют важную роль в передаче заболевания (сапронозная инфекция). Также споры могут находиться длительное время в меховом и кожевенном сырье, изделиях из него. Основные пути передачи: контактный – прямой контакт с больными животными или с изделиями из шерсти, кожи, щетины; алиментарный – через мясо от больных животных или продукты, инфицированные в процессе хранения; трансмиссивный – через кровососущих насекомых (слепни, мухи-жигалки); воздушно-пылевой. Входные ворота – поврежденная кожа и слизистые. В зависимости от места проникновения возбудителя, его вирулентности и восприимчивости организма у человека может быть 3 основных клинических формы сибирской язвы: Кожная форма. Инкубационный период составляет 1-7 дней. У входных ворот возбудителя появляется красное пятно, переходящее в папулу медно-красного цвета, возникает зуд. Папула переходит в везикулу с серозным, затем геморрагическим содержимым. Образуется карбункул с черным струпом, присоединяется отек, интоксикация. Прогноз при своевременном лечении благоприятный. Легочная форма. Развивается при попадании возбудителя или его спор через верхние дыхательные пути. Появляются катаральные явления со стороны верхних дыхательных путей, слезотечение, подъем температуры до 400С. Развивается пневмония, часто сменяющаяся токсическим отеком легких, в мокроте появляется кровь. Даже при назначении антибиотиков летальность при данной форме может превышать 40-50%. Без лечения возбудитель диссеминирует по организму, при этом летальность значительно увеличивается. Абдоминальная (кишечная) форма. Развивается редко. Возникает при алиментарном пути заражения. Характерными признаками являются лихорадка, озноб, рвота, диарея с кровью, боли в животе, на коже геморрагии. Смерть может наступить через 3-5 дней от начала заболевания. Летальность при данной форме составляет 25-60%. В связи с чрезвычайной устойчивостью спор возбудителя в окружающей среде, наличием высокоактивных экзотоксинов и возможностью ингаляционного распространения инфекции бацилла сибирской язвы представляет серьезную опасность как потенциальное средство биотерроризма. В 2001 г. в США произошли неоднократные случаи заболевания сибирской язвой как результат биотеррористической атаки. Споры возбудителя распространялись в письмах при почтовых рассылках. Заражение происходило либо контактным, либо ингаляционным путем. Было подтверждено 22 случая заражения, 5 заболевших погибли. Предполагается, что реальное число пострадавших превышало 60 человек. Иммунитет Иммунитет после заболевания стойкий, клеточный и гуморальный. В течение болезни развивается специфическая сенсибилизация, выявляется ГЧЗТ. Лабораторная диагностика Материал зависит от формы заболевания: кровь, моча, мокрота, кал, рвотные массы, отделяемое из сибиреязвенного карбункула. Так как B. anthracis относится ко II группе патогенности, а заболевание относится к группе особо опасных инфекций, все работы по выделению возбудителя проводят в специализировнной лаборатории особо опасных инфекций. Материал от больного доставляется в особой упаковке (сосуды парафинируют, прикрепляют этикетку с обозначением материала, Ф.И.О. больного и лица, взявшего материал), сосуды с материалом заворачивают в салфетки, смоченные дезраствором и помещают в специальные контейнеры. Бактериоскопический метод. Готовят мазок из вышеуказанного материала, окрашивают по Граму. Выявляют цепочки грамположительных палочек в общей капсуле. Бактериологический метод – посев на МПА с последующей идентификацией возбудителей по морфологическим, культуральным, биохимическим свойствам. Для диагностики инфекции также используют биопробу (заражение лабораторных животных). Мышам вводят 0,1-0,2 мл исследуемого материала, кроликам и морским свинкам – 0,2-0,5 мл. Животные гибнут через 2-10 дней. Трупы вскрывают, делают протокольные посевы и микроскопируют мазки-отпечатки из внутренних органов трупов животных с целью выявления возбудителя и его идентификации. Для ускоренной диагностики оценивают чувствительность к специфическому бактериофагу. Необходима дифференциация возбудителя от сапрофитических бацилл. Основными отличительными признаками возбудителя являются наличие капсулы, характер роста на средах, феномен «жемчужного ожерелья» при культивировании с пенициллином, чувствительность лабораторных животных к инфекции (мышей, морских свинок, кроликов). Иногда применяют кожно-аллергическую пробу с антраксином для выявления ГЧЗТ (вводят внутрикожно 0,1 мл антраксина). Для обнаружения антигена в экстрактах из тканей трупного материала, кожевенном сырье, шерсти используют реакцию термопреципитации по Асколи. Также для выявления антигена в материале применяют ИФА или РПГА с антительным диагностикумом. Лечение Раннее назначение антибиотикотерапии является жизненно необходимым. Препараты назначают в высоких дозах. Пенициллин используют для лечения случаев заболевания, вызванных чувствительными к нему штаммами B. anthracis. Также в терапии эффективны фторхинолоны, тетрациклины, ванкомицин. Для экстренной профилактики и лечения возможно назначить противосибиреязвенный иммуноглобулин. Профилактика Специфическая профилактика: животных вакцинируют живой авирулентной вакциной из некапсулированного штамма Bacillus anthracis СТИ-1 и протективным антигеном. Лица из групп профессионального риска (работники ветеринарной и лабораторной службы, скотоводы, доярки) вакцинируются протективным антигеном. Неспецифическая профилактика включает изоляцию больных и подозрительных животных, сжигание их трупов, обеззараживание мест стоянок больных животных; необходим постоянный санитарный надзор за предприятиями, перерабатывающими животное сырье. 20. Класифікація патогенних для людини анаеробів – збудників газової ранової інфекції і гнійно-запальних ускладнень
| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||