Фармакопея 12 - 1 часть. Научный центр экспертизы средств медицинского применения
 Скачать 3.93 Mb.
|
|
значениями динамической вязкости. Плотность шариков ро вычисляют по ш формуле: 6 х m ро = ----------, (12) ш 3 пи x d где: m - масса шарика, определяемая взвешиванием; d - диаметр шарика. Перед проведением измерений вискозиметр следует тщательно промыть и высушить. 9. ОПРЕДЕЛЕНИЕ СПИРТА ЭТИЛОВОГО В ЖИДКИХ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТАХ (ОФС 42-0039-07) Спирт этиловый в жидких фармацевтических препаратах в зависимости от состава и физико-химических свойств присутствующих в препарате компонентов может быть определен одним из методов: дистилляцией или газовой хроматографией. Метод количественного определения спирта должен быть указан в частной фармакопейной статье. Метод дистилляции Данный метод заключается в отгонке спирта этилового от растворенных в нем веществ. В круглодонную колбу (1) вместимостью 200-250 мл вносят точно отмеренное количество препарата. При содержании спирта в препарате до 20% для определения берут 75 мл препарата, при содержании от 20 до 50% - 50 мл, при содержании от 50% и выше - 25 мл; перед перегонкой препарат разбавляют водой до 75 мл. Колбу присоединяют через каплеотбойник (2) к вертикально расположенному шариковому холодильнику с отводной трубкой (3), направляющей дистиллят в приемник - мерную колбу вместимостью 50 мл (4), помещенный в стакан с водой (5) (рис. 9.1 - не приводится). Нагревают перегонную колбу с помощью электроплитки с сеткой. Для равномерного кипения в колбу с раствором препарата помещают капилляры, пемзу или кусочки прокаленного фарфора. Если раствор препарата при перегонке сильно пенится, то прибавляют 2-3 мл концентрированных фосфорной или серной кислот, кальция хлорид, парафин, воск (2-3 г). Собирают около 48 мл отгона, охлаждают его до температуры 20 град. C, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. Отгон может быть прозрачным или слегка мутным. Определяют плотность отгона пикнометром и по алкоголеметрическим таблицам находят содержание спирта в процентах объемных. Содержание спирта в препарате в процентах объемных (X) вычисляют по формуле: 50 x a X = -------, b где: 50 - объем отгона, в миллилитрах; a - содержание спирта в отгоне, в процентах объемных; b - объем испытуемого препарата, взятый для перегонки, в миллилитрах. Если препарат содержит летучие вещества - эфирные масла, хлороформ, этиловый эфир, камфару, летучие кислоты или основания, свободный йод и т.д., его предварительно обрабатывают. При содержании в препарате эфирных масел, хлороформа, этилового эфира, камфоры к нему добавляют в делительной воронке равные объемы насыщенного раствора натрия хлорида и петролейного эфира. Смесь взбалтывают в течение 3 мин. После разделения слоев спиртоводный слой сливают в другую делительную воронку и обрабатывают таким же образом половинным количеством петролейного эфира. Спиртоводный слой сливают в колбу для перегонки, а объединенные эфирные извлечения взбалтывают с половинным количеством насыщенного раствора натрия хлорида, потом присоединяют к жидкости, находящейся в колбе для перегонки. Если препарат содержит менее 30% спирта, то высаливание проводят не раствором, а 10 г сухого натрия хлорида. При содержании в препарате летучих кислот их нейтрализуют раствором щелочи, а при содержании летучих оснований - фосфорной или серной кислотами. Рис. 9.1. Прибор для определения содержания спирта этилового Рисунок не приводится. Препараты, содержащие свободный йод, перед дистилляцией обрабатывают до обесцвечивания цинковой пылью или рассчитанным количеством сухого натрия тиосульфата. Для связывания летучих сернистых соединений к препарату прибавляют несколько капель 10% раствора натрия гидроксида. Метод газовой хроматографии Данный метод основан на сорбционном хроматографическом отделении спирта от растворенных в нем веществ. Для проведения анализа используют газовый хроматограф с пламенно-ионизационным детектором и с хроматографической колонкой размером 150x0,4 см, заполненной полимерным сорбентом Porapak Q с размером частиц 100-120 меш. Температура колонки - 150 град. C; температура испарителя - 170 град. C; температура детектора - 170 град. C. Скорость газа-носителя (азот или гелий) - 30 мл/мин. Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают точно отмеренное количество испытуемого препарата, достаточное для получения раствора, содержащего 4-6% этанола по объему, прибавляют 5,0 мл пропанола (внутренний стандарт), перемешивают, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. 10 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. Раствор стандартного образца. В мерную колбу вместимостью 100 мл вносят 5,0 мл спирта этилового 95% (стандартный образец) и 5,0 мл пропанола (внутренний стандарт), доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. 10 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. В испаритель газового хроматографа, выведенного на рабочий режим, вводят последовательно по 1-2 мкл испытуемого раствора и раствора стандартного образца и регистрируют хроматограммы. Содержание спирта этилового в препарате в процентах объемных (X) рассчитывают по формуле: / S x S x 5,0 x P ст. X = -------------------, / S x S x V ст. пр. где: / S и S - площади пика спирта этилового на хроматограммах анализируемого раствора и раствора стандартного образца соответственно; / S и S - площади пика пропанола на хроматограммах испытуемого ст. ст. раствора и раствора стандартного образца соответственно; V - объем препарата, взятый для анализа, в миллилитрах; пр. P - содержание спирта этилового в стандартном образце, в процентах. Результаты анализа считаются достоверными, если выполняются требования теста "Проверка пригодности хроматографической системы". Проверка пригодности хроматографической системы. Система считается пригодной, если: - разрешение (R) пиков спирта этилового и пропанола не менее 2,0; - коэффициент асимметрии (T) пика спирта этилового не превышает 1,5; - относительное стандартное отклонение (RSD) не превышает 2,0%. 10. РЕФРАКТОМЕТРИЯ (ОФС 42-0040-07) Показателем преломления (индексом рефракции) называют отношение скорости света в вакууме к скорости света в испытуемом веществе (абсолютный показатель преломления). На практике определяют так называемый относительный показатель преломления (n), который является отношением скорости света в воздухе к скорости света в испытуемом веществе. Показатель преломления зависит от температуры и длины волны света, при которой проводят определение. В растворах показатель преломления зависит также от концентрации вещества и природы растворителя. Рефрактометрию применяют для установления подлинности и чистоты вещества. Метод применяют также для определения концентрации вещества в растворе, которую находят по графику зависимости показателя преломления раствора от концентрации. На графике выбирают интервал концентраций, в котором наблюдается линейная зависимость между показателем преломления и концентрацией. В этом интервале концентрацию вычисляют по формуле: X = (n - n )/F, o где: X - концентрация, в процентах; n - показатель преломления раствора; n - показатель преломления растворителя при той же температуре; o F - фактор, равный величине прироста показателя преломления при увеличении концентрации на 1% (устанавливается экспериментально). Для определения показателя преломления применяют рефрактометры. Определение проводят при температуре (20 +/- 0,5) град. C и длине волны линии D спектра натрия (589,3 нм). Показатель преломления, определенный при 20 таких условиях, обозначается индексом n . D Современные приборы откалиброваны таким образом, что отсчеты, полученные по их шкалам, соответствуют показателям преломления для D линии спектра натрия. При проведении измерений следует соблюдать указания в отношении соответствующего источника света, приведенные в инструкции к прибору. Если используют белый свет, то рефрактометр снабжен компенсирующей системой. Цена деления термометра не должна превышать 0,5 град. C. Обычно измерения показателя преломления проводят на рефрактометрах Аббе, в основу которых положено явление полного внутреннего отражения при прохождении светом границы раздела двух сред с разными показателями преломления. Диапазон измеряемых показателей преломления при измерении в проходящем свете 1,3-1,7. Точность измерения показателя преломления должна -4 быть не ниже +/- 2 x 10 . Могут быть использованы рефрактометры других типов с такой же или большей точностью. Рефрактометры юстируют по эталонным жидкостям, приведенным в табл. 10.1, значения показателей преломления которых обозначены на этикетке, или 20 25 по дистиллированной воде, для которой n = 1,3330 и n = 1,3325 D D (дельта n/дельта t = - 0,000085). Таблица 10.1 Температурные коэффициенты эталонных жидкостей
11. ПОЛЯРИМЕТРИЯ (ОФС 42-0041-07) Оптическое вращение - свойство вещества вращать плоскость поляризации при прохождении через него поляризованного света. В зависимости от природы оптически активного вещества вращение плоскости поляризации может иметь различное направление и величину. Если от наблюдателя, к которому направлен свет, проходящий через оптически активное вещество, плоскость поляризации вращается по часовой стрелке, то вещество называют правовращающим и перед его названием ставят знак (+); если же плоскость поляризации вращается против часовой стрелки, то вещество называют левовращающим и перед его названием ставят знак (-). Величину отклонения плоскости поляризации от начального положения, выраженную в угловых градусах, называют углом вращения и обозначают греческой буквой альфа. Величина угла вращения зависит от природы оптически активного вещества, длины пути поляризованного света в оптически активной среде (чистом веществе или растворе) и длины волны света. Для растворов величина угла вращения зависит от природы растворителя и концентрации оптически активного вещества. Величина угла вращения прямо пропорциональна длине пути света, т.е. толщине слоя оптически активного вещества или его раствора. Влияние температуры в большинстве случаев незначительно. Для сравнительной оценки способности различных веществ вращать плоскость поляризации света вычисляют величину удельного вращении [альфа]. 20 Удельное оптическое вращение [альфа] представляет собой угол вращения D альфа плоскости поляризации монохроматического света при длине волны линии D спектра натрия (589,3 нм), выраженный в градусах, измеренный при температуре 20 град. C, рассчитанный для толщины слоя испытуемого вещества 1 дм и приведенный к концентрации вещества, равной 1 г/мл. Выражается в -1 -1 градус-миллилитрах на дециметр-грамм [(град.) x мл x дм x г ]. Иногда для измерения используют зеленую линию спектра ртути с длиной волны 546,1 нм. При определении [альфа] в растворах оптически активного вещества необходимо иметь в виду, что найденная величина может зависеть от природы растворителя и концентрации оптически активного вещества. Замена растворителя может привести к изменению [альфа] не только по величине, но и по знаку. Поэтому, приводя величину удельного вращения, необходимо указывать растворитель и выбранную для измерения концентрацию раствора. Удельное вращение определяют либо в пересчете на сухое вещество, либо из высушенной навески, что должно быть указано в частной фармакопейной статье. Измерение угла вращения проводят на поляриметре, позволяющем определить величину угла вращения с точностью +/- 0,02 град. C, при температуре (20 +/- 0,5) град. C. Измерения оптического вращения могут проводиться и при других значениях температуры, но в таких случаях в частной фармакопейной статье должен быть указан способ учета температуры. Шкалу обычно проверяют при помощи сертифицированных кварцевых пластинок. Линейность шкалы может быть проверена при помощи растворов сахарозы. Оптическое вращение растворов должно быть измерено в течение 30 мин. с момента их приготовления; растворы или жидкие вещества должны быть прозрачными. При измерении, прежде всего, следует установить нулевую точку прибора или определить величину поправки с трубкой, заполненной чистым растворителем (при работе с растворами), или с пустой трубкой (при работе с жидкими веществами). После установки прибора на нулевую точку или определения величины поправки проводят основное измерение, которое повторяют не менее 3 раз. Для получения величины угла вращения альфа показания прибора, полученные при измерениях, алгебраически суммируют с ранее найденной величиной поправки. Величину удельного вращения [альфа] рассчитывают по одной из следующих формул. Для веществ, находящихся в растворе: альфа x 100 [альфа] = ------------, (1) l x c где: альфа - измеренный угол вращения, в градусах; l - толщина слоя, в дециметрах; c - концентрация раствора, в граммах вещества на 100 мл раствора. Для жидких веществ: альфа [альфа] = --------, (2) l x ро где: альфа - измеренный угол вращения, в градусах; l - толщина слоя, в дециметрах; ро - плотность жидкого вещества, в граммах на 1 мл. Измерение величины угла вращения проводят либо для оценки чистоты оптически активного вещества, либо для определения его концентрации в растворе. Для оценки чистоты вещества по уравнению (1) или (2) рассчитывают величину его удельного вращения [альфа]. Концентрацию оптически активного вещества в растворе находят по формуле: альфа x 100 C = ------------, (3) [Альфа] x l Поскольку величина [альфа] постоянна только в определенном интервале концентраций, возможность использования формулы (3) ограничивается этим интервалом. 12. СПЕКТРОСКОПИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ Спектроскопические методы анализа основаны на избирательном поглощении электромагнитного излучения анализируемым веществом и служат для исследования строения, идентификации и количественного определения светопоглощающих соединений. В зависимости от используемой аппаратуры в фармацевтическом анализе различают следующие методы анализа, основанные на поглощении электромагнитного излучения и испускании света: - спектрофотометрия в ультрафиолетовой (УФ) и видимой областях; - спектрофотометрия в инфракрасной (ИК) области; - атомно-эмиссионная и атомно-абсорбционная спектроскопия (АЭС и ААС); - флуориметрия; - спектроскопия ядерного магнитного резонанса (ЯМР). Ряд длин волн, для которых проводятся измерения методами абсорбционной спектрофотометрии, охватывает спектральную область от коротких длин волн в УФ-области до ИК-области. Для удобства отнесений этот спектральный ряд делится на следующие диапазоны длин волн: УФ (от 190 до 380 нм), видимый (от 380 до 780 нм), ИК (от 0,78 до 400 мкм). 12.1. СПЕКТРОФОТОМЕТРИЯ В УЛЬТРАФИОЛЕТОВОЙ И ВИДИМОЙ ОБЛАСТЯХ (ОФС 42-0042-07) Уменьшение величины монохроматического излучения, проходящего через гомогенную поглощающую среду, количественно описывается законом Бугера-Ламберта-Бера: log10(1/T) = A = эпсилон x c x b, (1) где: T - пропускание; T - I/I ; o I - интенсивность прошедшего монохроматического излучения; I - интенсивность падающего монохроматического излучения; o эпсилон - молярный показатель поглощения; c - молярная концентрация вещества в растворе; b - длина оптического пути или толщина слоя, в сантиметрах. Величина log10(1/T) носит название оптической плотности, обозначается буквой A и является измеряемой величиной. В отсутствии других физико-химических факторов измеренная оптическая плотность (A) пропорциональна концентрации вещества в растворе (c) и толщине слоя (b). 1% Величина A представляет собой удельный показатель поглощения, т.е. 1 см оптическую плотность раствора вещества с концентрацией 10 г/л (1 г/100 мл) 1% в кювете с толщиной слоя 1 см. Величины A и эпсилон связаны 1 см соотношением: 1% 10 x эпсилон A = -------------, (2) 1 см М.м. где М.м. - молекулярная масса исследуемого вещества. Измерение оптической плотности. Если нет других указаний в частной статье, измерение оптической плотности проводят при указанной длине волны с использованием кювет с толщиной слоя 1 см и при температуре (20 +/- 1) град. C по сравнению с тем же растворителем или той же смесью растворителей, в которой растворено вещество. При измерении оптической плотности раствора при данной длине волны оптическая плотность кюветы с растворителем, измеренная против воздуха при той же длине волны, не должна превышать 0,4 и желательно, чтобы она была менее 0,2. Для снижения величины ошибки при определении оптической плотности концентрация раствора (а иногда и толщина слоя) подбираются таким образом, чтобы оптическая плотность в исследуемой спектральной области находилась в пределах от 0,2 до 0,8. |