ГФ11-1. Общие методы анализа редакционная коллегия государственной фармакопеи ссср
 Скачать 1.83 Mb.
|
|
Параллельно нагревают 25 мл спиртового раствора едкого кали (0,5 моль/л). Оба раствора тотчас же после прекращения нагревания разбавляют 25 мл свежепрокипяченной горячей воды, прибавляют по 1 мл раствора фенолфталеина и титруют раствором хлористоводородной кислоты (0,5 моль/л) до обесцвечивания. Из количества миллилитров раствора хлористоводородной кислоты (0,5 моль/л), израсходованного в контрольном опыте, вычитают количество миллилитров раствора хлористоводородной кислоты (0,5 моль/л), израсходованное на титрование исследуемого вещества. Полученная разность представляет собой количество миллилитров раствора едкого кали (0,5 моль/л), израсходованное на нейтрализацию свободных кислот и кислот, образовавшихся при полном гидролизе сложных эфиров во взятой навеске. Число омыления (Ч) вычисляют по формуле: (а - б) 28,05 Ч = ---------------, в где а - количество миллилитров раствора хлористоводородной кислоты (0,5 моль/л), израсходованное на титрование в контрольном опыте; б - количество миллилитров раствора хлористоводородной кислоты (0,5 моль/л), израсходованное на титрование исследуемого вещества; в - навеска вещества в граммах; 28,05 - количество миллиграммов едкого кали, соответствующее 1 мл раствора едкого кали (0,5 моль/л). ЭФИРНОЕ ЧИСЛО Эфирным числом называют количество миллиграммов едкого кали, необходимое для нейтрализации кислот, образующихся при гидролизе сложных эфиров, содержащихся в 1 г исследуемого вещества. Эфирное число определяют по разности между числом омыления и кислотным числом. ЙОДНОЕ ЧИСЛО Йодным числом называют количество граммов йода, связываемое 100 г исследуемого вещества. Определение йодного числа. Точную навеску исследуемого вещества (см. примечание) помещают в сухую колбу с притертой пробкой вместимостью 250-300 мл, растворяют в 3 мл эфира или хлороформа, прибавляют 20 мл раствора йода монохлорида (0,1 моль/л), закрывают колбу пробкой, смоченной раствором йодида калия, осторожно взбалтывают вращательным движением и выдерживают в темном месте в течение 1 ч. Затем прибавляют последовательно 10 мл раствора йодида калия, 50 мл воды и титруют раствором тиосульфата натрия (0,1 моль/л) при постоянном энергичном взбалтывании до светло - желтой окраски, после чего прибавляют 3 мл хлороформа, сильно взбалтывают, затем прибавляют 1 мл раствора крахмала и титруют до обесцвечивания. Параллельно проводят контрольный опыт. При анализе твердых жиров навеску растворяют в 6 мл эфира, прибавляют 20 мл раствора йода монохлорида (0,1 моль/л) и 25 мл воды. Дальнейшее определение проводят, как указано выше. Из количества миллилитров раствора тиосульфата натрия (0,1 моль/л), израсходованного в контрольном опыте, вычитают количество миллилитров раствора тиосульфата натрия (0,1 моль/л), израсходованное на титрование исследуемого вещества. Полученная разность соответствует количеству миллилитров раствора йода (0,1 моль/л), связанному навеской исследуемого вещества. Йодное число (I) вычисляют по формуле: (а - б) х 0,01269 х 100 I = -----------------------, в где а - количество миллилитров раствора тиосульфата натрия (0,1 моль/л), израсходованное на титрование в контрольном опыте; б - количество миллилитров раствора тиосульфата натрия (0,1 моль/л), израсходованное на титрование исследуемого вещества; в - навеска вещества в граммах. Приготовление раствора йода монохлорида (0,1 моль/л). 11,06 г йодида калия и 7,10 г йодата калия помещают в склянку с притертой пробкой, прибавляют 50 мл воды и 50 мл концентрированной хлористоводородной кислоты, закрывают пробкой и встряхивают до полного растворения образующегося при реакции йода. Раствор переносят в делительную воронку и взбалтывают с 10 мл хлороформа. Если хлороформный слой окрашивается в фиолетовый цвет, то прибавляют при сильном взбалтывании по каплям 1% раствор йодата калия до обесцвечивания хлороформного слоя. Если же хлороформный слой остается бесцветным, то прибавляют по каплям 1% раствор йодида калия до появления бледно - розовой окраски. После отстаивания водный слой сливают в мерную колбу и доводят объем раствора водой до 1 л. Приготовленный раствор должен иметь лимонно - желтый цвет. Примечание. Величина навески вещества в граммах в зависимости от ожидаемого йодного числа приведена в нижеследующей таблице. ┌────────────────────────────────┬───────────────────────────────┐ │ Йодное число │ Навеска, г │ ├────────────────────────────────┼───────────────────────────────┤ │ От 0 до 30 │ 1,1 - 0,7 │ │ >> 31 >> 50 │ 0,7 - 0,5 │ │ >> 51 >> 100 │ 0,5 - 0,25 │ │ >> 101 >> 150 │ 0,25 - 0,15 │ │ Свыше 150 │ Менее 0,15 │ └────────────────────────────────┴───────────────────────────────┘ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОКРАСКИ ЖИДКОСТЕЙ Окраску жидкостей определяют визуально путем сравнения с соответствующими эталонами. Исследуемые жидкости и эталоны берут для сравнения в равных количествах. Сравнение производят в пробирках одинакового стекла и диаметра при дневном отраженном свете на матово - белом фоне. Окраска исследуемого образца должна быть вполне идентична эталону или только приближаться к отмеченной окраске, не превышая ее по интенсивности, но несколько отличаясь от нее по тону. Жидкость, которая должна быть бесцветной, рассматривают сверху через весь слой жидкости на матово - белом фоне. Бесцветными считают жидкости, которые по цвету не отличаются от воды, а в случае растворов - от соответствующего растворителя. Приготовление исходных растворов Раствор А. Около 6,00 г (точная навеска) растертого хлорида кобальта (СоCl2 х 6Н2О; М.м. 237,93) растворяют в растворе серной кислоты (0,1 моль/л) в мерной колбе вместимостью 100 мл, перемешивают и доводят объем раствора раствором серной кислоты (0,1 моль/л) до метки. Содержание хлорида кобальта в растворе определяют следующим образом: 5 мл раствора хлорида кобальта помещают в коническую колбу вместимостью 250 мл с притертой пробкой, прибавляют 5 мл 3% раствора перекиси водорода и 30 мл раствора едкого натра, смесь кипятят с обратным холодильником в течение 10 мин, затем охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 2 г йодида калия и 15 мл 50% раствора серной кислоты. Выделившийся йод титруют раствором тиосульфата натрия (0,1 моль/л) (индикатор - крахмал). Параллельно проводят контрольный опыт. 1 мл раствора тиосульфата натрия (0,1 моль/л) соответствует 0,02379 г хлорида кобальта (II). Объем раствора хлорида кобальта (СоСl2 х 6Н2О) разбавляют таким образом, чтобы содержание хлорида кобальта в 1 мл составляло 0,060 г. Раствор Б. 0,4900 г растертого бихромата калия (К2Сr2О7; М.м. 294,18) растворяют в растворе серной кислоты (0,1 моль/л) в мерной колбе вместимостью 100 мл и доводят объем раствора раствором серной кислоты (0,1 моль/л) до метки. 1 мл полученного раствора должен содержать 0,0049 г бихромата калия (К2Сr2О7). Содержание бихромата калия в растворе определяют следующим образом: 20 мл раствора бихромата калия помещают в коническую колбу вместимостью 250 мл с притертой пробкой, прибавляют 30 мл разведенной хлористоводородной кислоты, 1 г йодида калия, оставляют на 5 мин в темном месте, затем прибавляют 80 мл воды и титруют выделившийся йод раствором тиосульфата натрия (0,1 моль/л) (индикатор - крахмал) до изменения окраски в зеленый цвет. Параллельно проводят контрольный опыт. 1 мл раствора тиосульфата натрия (0,1 моль/л) соответствует 0,004903 г бихромата калия. Раствор В. Около 6,00 г (точная навеска) растертого сульфата меди (II) (СuSО4 х 5Н2О; М.м. 249,68) растворяют в растворе серной кислоты (0,1 моль/л) в мерной колбе вместимостью 100 мл и доводят объем раствора раствором серной кислоты (0,1 моль/л) до метки. Содержание сульфата меди в растворе определяют следующим образом: 10 мл раствора сульфата меди помещают в коническую колбу вместимостью 250 мл с притертой пробкой, прибавляют 40 мл воды, 4 мл разведенной уксусной кислоты, 3 г йодида калия, смесь перемешивают и выделившийся йод титруют раствором тиосульфата натрия (0,1 моль/л) (индикатор - крахмал). Параллельно проводят контрольный опыт. 1 мл раствора тиосульфата натрия (0,1 моль/л) соответствует 0,02497 г сульфата меди (II). Объем раствора сульфата меди (CuSО4 х 5H2О) разбавляют таким образом, чтобы содержание сульфата меди в 1 мл составляло 0,060 г. Раствор Г. Около 4,50 г (точная навеска) хлорида железа (III) (FеСl3 х 6Н2О; М.м. 270,30) растворяют в мерной колбе вместимостью 100 мл в растворе серной кислоты (0,1 моль/л) и доводят объем раствора раствором серной кислоты (0,1 моль/л) до метки. Содержание хлорида железа (III) в растворе определяют следующим образом: 10 мл раствора хлорида железа помещают в коническую колбу вместимостью 250 мл с притертой пробкой, прибавляют 15 мл разведенной хлористоводородной кислоты, 4 г йодида калия и оставляют на 15 мин в темном месте. После прибавления 100 мл воды выделившийся йод титруют раствором тиосульфата натрия (0,1 моль/л) (индикатор - крахмал). 1 мл раствора тиосульфата натрия (0,1 моль/л) соответствует 0,02703 г хлорида железа (III). Объем раствора хлорида железа (FеСl3 х 6Н2О) разбавляют таким образом, чтобы содержание хлорида железа в 1 мл составляло 0,045 г. Срок годности исходных растворов 1 год. Приготовление основных растворов Основные растворы получают смешением исходных растворов хлорида кобальта (А), бихромата калия (Б), сульфата меди (В) и хлорида железа (Г) с раствором серной кислоты (0,1 моль/л) в следующих соотношениях. ┌────────┬───────┬───────┬───────┬───────┬───────────────────────┐ │Основной│Раствор│Раствор│Раствор│Раствор│Раствор серной кислоты │ │раствор │А, мл │Б, мл │В, мл │Г, мл │ (0,1 моль /л), мл │ ├────────┼───────┼───────┼───────┼───────┼───────────────────────┤ │I │35,00 │ 8,00 │17,00 │40,00 │ - │ │II │ 9,50 │10,70 │ 1,90 │ 4,00 │ 73,90 │ │III │40,50 │ 6,30 │ 6,10 │12,00 │ 35,10 │ │IV │ 3,50 │10,40 │20,10 │ 4,00 │ 62,00 │ └────────┴───────┴───────┴───────┴───────┴───────────────────────┘ Срок годности основных растворов 1 год. Приготовление эталонов Эталоны для сравнения приготавливают из основных растворов путем разбавления их раствором серной кислоты (0,1 моль/л). Эталоны следует хранить по 5 мл в бесцветных, герметически укупоренных пробирках или запаянных ампулах вместимостью 5 мл в защищенном от света месте. Срок годности эталонов N 1, 2, 3, 4 - 4 дня. Эталоны N 5, 6, 7 следует применять свежеприготовленными. ┌───┬────────────────┬────────────────┬────────────────┬────────────────┐ │Н э│Эталоны коричне-│ Эталоны желтых │Эталоны розовых │Эталоны зеленых │ │о т│вых оттенков │ оттенков │ оттенков │ оттенков │ │м а├────────────────┼────────────────┼────────────────┼────────────────┤ │е л│ │ │ │ │ │р о│ шкала а │ шкала б │ шкала в │ шкала г │ │ н│ │ │ │ │ │ а│ │ │ │ │ │ ├────────┬───────┼────────┬───────┼────────┬───────┼────────┬───────┤ │ │основной│раствор│основной│раствор│основной│раствор│основной│раствор│ │ │раствор │серной │раствор │серной │раствор │серной │раствор │серной │ │ │ I, мл │кислоты│II, мл │кислоты│III, мл │кислоты│IV, мл │кислоты│ │ │ │(0,1 │ │(0,1 │ │(0,1 │ │(0,1 │ │ │ │моль/ │ │моль/ │ │моль/ │ │моль/ │ │ │ │л), мл │ │л), мл │ │л), мл │ │л), мл │ ├───┼────────┼───────┼────────┼───────┼────────┼───────┼────────┼───────┤ │1. │100,00 │ - │100,00 │ - │ 100,00 │ - │100,00 │ - │ │2 │ 50,00 │ 50,00 │ 50,00 │ 50,00 │ 50,00 │ 50,00 │ 50,00 │ 50,00 │ │3. │ 25,00 │ 75,00 │ 25,00 │ 75,00 │ 25,00 │ 75,00 │ 25,00 │ 75,00 │ │4. │ 12,50 │ 87,50 │ 12,50 │ 87,50 │ 12,50 │ 87,50 │ 12,50 │ 87,50 │ │5. │ 6,30 │ 93,70 │ 6,30 │ 93,70 │ 6,30 │ 93,70 │ 6,30 │ 93,70 │ │6. │ 3,10 │ 96,90 │ 3,10 │ 96,90 │ 3,10 │ 96,90 │ 3,10 │ 96,90 │ │7. │ 1,60 │ 98,40 │ 1,60 │ 98,40 │ 1,60 │ 98,40 │ 1,60 │ 98,40 │ └───┴────────┴───────┴────────┴───────┴────────┴───────┴────────┴───────┘ При сравнении окраски испытуемого раствора с эталонами указывают, кроме номера эталона, букву шкалы. Например, окраска раствора не должна превышать эталон N 5б. Примечание. Раствор серной кислоты (0,1 моль/л): медленно и осторожно, при постоянном перемешивании, вливают 6 мл концентрированной серной кислоты в 1020 мл воды. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПРОЗРАЧНОСТИ И СТЕПЕНИ МУТНОСТИ ЖИДКОСТЕЙ Прозрачность и степень мутности жидкостей определяют путем сравнения испытуемой жидкости с растворителем или эталонами. Испытание проводят при освещении электрической лампой матового стекла мощностью 40 Вт на черном фоне при вертикальном расположении пробирок (рис. 21) <*>. -------------------------------- <*> Рис. 21. Схема просмотра прозрачности и степени мутности жидкостей: 1 - источник света; 2 - экран; 3 - зона контроля; 4 - глаза. (Рисунок не приводится). Жидкость считают прозрачной, если при ее рассмотрении невооруженным глазом не наблюдается присутствие нерастворенных частиц, кроме единичных волокон. Сравнение проводят с растворителем, взятым для приготовления жидкостей. Эталонами для определения степени мутности служат взвеси из гидразина сульфата и гексаметилентетрамина. I. Приготовление раствора гидразина сульфата. 0,50 г гидразина сульфата (ГОСТ 5841-74, ч.д.а.) помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в 40 мл воды, перемешивают, доводят объем раствора водой до метки и оставляют на 6 ч. II. Приготовление раствора гексаметилентетрамина. 3,00 г гексаметилентетрамина растворяют в 30 мл воды, взятых пипеткой или бюреткой. III. Приготовление исходного эталона. К 25 мл раствора гидразина сульфата прибавляют 25 мл раствора гексаметилентетрамина, тщательно перемешивают и оставляют на 24 ч. Растворы гидразина сульфата и гексаметилентетрамина берут пипеткой или бюреткой. Срок годности исходного эталона 2 мес в склянках с притертыми пробками. Примечание. Перед применением исходный эталон, основной эталон и эталонные растворы следует тщательно перемешать в течение 3 мин. IV. Приготовление основного эталона. 15 мл исходного эталона, взятого пипеткой, помещают в мерную колбу вместимостью 1 л, доводят объем жидкости водой до метки и перемешивают. Срок годности основного эталона 24 ч. V. Приготовление эталонных растворов. Для приготовления эталонных растворов I, II, III, IV основной эталон берут пипеткой или бюреткой в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем жидкости водой до метки. ┌───────────────────┬────────────────────────────────────────────┐ │ │ Эталонные растворы │ ├───────────────────┼─────────┬──────────┬───────────┬───────────┤ │ │ I │ II │ III │ IV │ │ ├─────────┼──────────┼───────────┼───────────┤ │Основной эталон, мл│ 5 │ 10 │ 30 │ 50 │ │Вода, мл │ 95 │ 90 │ 70 │ 50 │ └───────────────────┴─────────┴──────────┴───────────┴───────────┘ Эталонные растворы I, II, III, IV должны быть свежеприготовленными. Для сравнения берут равные объемы эталонного раствора и испытуемой жидкости (5 или 10 мл). Сравнение проводят в пробирках бесцветного стекла или стекла одинакового оттенка, одного и того же диаметра с притертыми пробками. Определение степени мутности окрашенных жидкостей производят в компараторе. Часть испытуемой жидкости фильтруют через бумажный фильтр; в компараторе помещают рядом пробирки с фильтрованной и нефильтрованной жидкостями; позади пробирки с нефильтрованной жидкостью ставят пробирку с растворителем, позади пробирки с фильтрованной жидкостью помещают последовательно пробирки с соответствующими эталонами мутности до появления мути, сходной с мутью нефильтрованной жидкости. Пробирки просматривают при подсвечивании электрической лампой 40 Вт. СТАТИСТИЧЕСКАЯ ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ ХИМИЧЕСКОГО ЭКСПЕРИМЕНТА И БИОЛОГИЧЕСКИХ ИСПЫТАНИЙ В настоящей статье для предпочтительного использования приняты следующие обозначения: А - измеряемая величина; а - свободный член линейной зависимости; b - угловой коэффициент линейной зависимости; 0 D , D - доза стандартного и испытуемого препаратов; F - критерий Фишера; f - число степеней свободы; i - порядковый номер варианты; L - фактор, используемый при оценке сходимости результатов параллельных определений; m, n - объемы выборки; _ Р, Р - доверительная вероятность соответственно при дву- и односторонней постановке задачи; Q1, Qn - контрольные критерии для индентификации грубых ошибок; R - размах варьирования; r - коэффициент корреляции; s - стандартное отклонение; 2 s - дисперсия; s_ - стандартное отклонение среднего результата; х s - логарифмическое стандартное отклонение; lg 2 s - логарифмическая дисперсия; lg s _ - логарифмическое стандартное отклонение среднего lg x результата; g 2 2 2 s , s , s - общая дисперсия и дисперсия коэффициентов 0 b а линейной зависимости; t - критерий Стьюдента; U - коэффициент для расчета границ среднего результата гарантии качества анализируемого продукта; W - весовой коэффициент пробита; х, y - текущий координаты в уравнении линейной зависимости; _ Y - активность препарата; Xi, Yi - вычисленные, исходя из уравнения линейной зависимости значения переменных х и у; Y - пробит; _ _ х, y - средние выборки (координаты центра линейной зависимости); х , y - i-тая варианта (i-тая пара экспериментальных |