Ответы ординатура БАКТЕРИОЛОГИЯ. Правила работы и поведения в бактериологической лаборатории общего назначения
 Скачать 1.49 Mb.
|
Патогенез: Заболевания, обусловленные энтеробактериями, чаще всего развиваются у лиц с иммунодефицитом.Группу риска по энтеробактериальной инфекции составляют:Новорожденные, Пожилые люди, Часто болеющие лица, Больные хроническими патологиями ЖКТ, Пациенты, длительно находящиеся на стационарном лечении. Кишечные микробы вызывают не только заболевания органов пищеварения, но и близлежащих структур. Воспаление может развиться практически в любой части тела человека: от зева до ануса. Патологии, которые вызывают энтеробактерии: Дисбактериоз, дизентерия, сальмонеллез, эшерихиоз. Воспаление мочевыводящих путей и органов. Пневмония. Менингит, абсцедирование мозговой ткани и прочие ликворные нарушения. Инфекция органов женской репродуктивной системы. Воспаление органов гепатобилиарной зоны. Гематогенные расстройства — бактериемия, сепсис. Энтеробактерии являются возбудителями внутрибольничных инфекций. Микробы проникают в кровяное русло при проведении инвазивных манипуляций, катетеризации мочевого пузыря или внутривенного введения нестерильных лекарств. В обширных очагах довольно сложно снизить активность бактерий. В результате взаимодействия возбудителя и соответствующих структур макроорганизма развивается инфекционный процесс, который состоит из адгезии, инвазии, колонизации, токсинообразования. Энтеробактер обладает тропизмом к эпителиоцитам кишечника. Адгезия осуществляется за счет приближения микроба, а также взаимодействия его ворсинок с рецепторами эпителия. Бактерии проникают внутрь клетки и начинают активно размножаться. Процессы колонизации и токсинообразования определяют выраженность и разнообразие клинических проявлений инфекции. Лабораторная диагностика: Бакпосев мочи проводится с целью выделения возбудителя патологии органов мочевыделения. Бактериурия — содержание в 1 мл мочи более 105 микробных тел энтеробактерий. Когда этот признак сочетается с выраженной и характерной симптоматикой, требуется незамедлительное лечение в стационаре. Исследование кала проводят с целью определения причины кишечной дисфункции. Для выявления патогенных бактерий у больных берут мазок из прямой кишки и делают посев на среды, содержащие специальные красители и углеводы. Для этого используют простые пластинчатые среды Эндо, Плоскирева, висмут-сульфитный агар, а также среды накопления — селенитовый бульон или магниевую среду. После суточной инкубации изучают характер роста и проводят дальнейшую идентификацию путем изучения биохимических свойств на средах цветного ряда. В окрашенных по Граму мазках обнаруживают красные короткие палочки, образующие цепочки или располагающиеся хаотично. Enterobacter cloacae на твердых питательных средах образует слизистые лактозонегативные колонии. Подтверждают предполагаемый диагноз с помощью реакции агглютинации на стекле. После обнаружения возбудителя патологии проводят тест на чувствительность к антибиотикам и фагам. Микробиологический анализ кала на условно-патогенные энтеробактерии проводится количественным методом. Для этого нативный кал пациента суспендируют в физрастворе и готовят ряд его десятикратных разведений. Затем производят высев из каждого разведения на селективные среды. Для энтеробактера используют чашечную среду Симмонса. После инкубации изучают рост культуры, подсчитывают количество характерных колоний и готовят препарат для микроскопии. Расчет производят по специальным формулам. В норме общее число энтеробактерий не должно превышать 104 КОЕ в 1 грамме фекалий. Увеличение этого количества является признаком кишечного дисбиоза. Постановку диагноза при пневмонии, вызванной энтеробактериями, облегчает микробиологическое исследование мокроты на микрофлору. Энтеробактерии в мазке у женщин можно обнаружить во время микробиологического исследования отделяемого влагалища или цервикального канала на микрофлору. Если наблюдается сплошной рост на чашках или количество характерных колоний превышает 100, делают вывод об этиологической роли энтеробактерий. Вспомогательные методы – УЗИ желчного пузыря, поджелудочной железы, почек и эндоскопическое исследование желудка и кишечника. Клебсиеллы— короткие, толстые, неподвижные грамотрицательные палочки, образующие в отличие от других энтеробактерий выраженные полисахаридные капсулы. – Протеи - представляют собой прямые грамотрицательные палочки. Могут встречаться кокковидные и нитевидные формы. Спор и капсул не образуют, имеют перитрихиально расположенные жгутики, пили и микрокапсулу. 43.Сем. Vibrionaceae. Род Vibrio Plesiomonas Aeromonas Photobacterium Род Vibrio насчитывает 25 видов. Морфология. Короткие изогнутые или прямые палочки. Степень изогнутости 90°Счетверть окружности; Гр(-); спор и капсул не образуют; подвижны (есть жгутик монотрих); размеры 3×0,5 мкм.; факультативные анаэробы со свойствами аэрофильности. Скапливаются в местах богатых О2, т.е. на поверхности воды. Культуральные свойства. На плотных средах – S-форма: гладкие, плоские колонии, d -2мм. Рост через 18 часов. Цикл деления клетки 15 мин. (короткий); - на ЩА, рН 8,5 – колонии гладкие, стекловидно-прозрачные, вязкой консистенции. В проходящем свете – серовато-голубоватый оттенок; - на TCBS (тиосульфат- цитрат- бромтимоловый - сахарозный агар + соли желчных кислот). V. сholerae ферментируют сахарозу - рост желтых колоний на голубой среде; - лактозо-сахарозная среда: лактоза (-), сахароза (К); - столбик желатина разжижает через 2 сут при 22-23°С. На жидких средах. 70 - на 1% п.в. (рН 8,6-9,0 + 0,5-1% NaCl) через 6 ч -пленка голубоватосероватого цвета, спаянная с краями пробирки, бульон прозрачный. При встряхивании пленка разрывается и оседает на дно пробирки; - в молоке – через 24-48 ч свертывание, затем пептонизация, а через 3-4 дня погибают из-за сдвига рН в кислую сторону. Температурный оптимум 37°С, Т диапазон 10-40°С; рН 8,6-9,0, могут размножаться от 6 до 9,6; оптимум 7,6-7,7 (у энтеробактерий – 7,0-7,2). Некоторые виды не растут в отсутствии NaCl (галофильные вибрионы). По способности ферментировать 3 углевода разбиты на 8 хемогрупп (триада Хейберга): - манноза - арабиноза - сахароза. V. сholerae О1 относится к 1 группе: манноза (+), сахароза (+), арабиноза (-). Антигенное строение. - Н-Аг – термолабильный, белковый, жгутиковый, общий для рода Vibrio (холерные вибрионы и вибриозы). - О-Аг –термостабильный, по О-Аг выделяют 139 серогрупп: О1-О139. V.сholerae asiatica и V. cholerae eltor объеденены в О1. О1 Аг состоит из 13 фракций, Vibrio сholerae состоит из 5 – А, В,С,Д,Е : - А – видоспецифическая, присутствует у всех 3 сероваров; - В и С –типоспецифические. Выделяют 3 серовара: АВ – Огава; АС - Инаба; АВС - Гикошима. Сероваротипирование используется для эпидемиологического маркирования – для дифференциации очагов по возбудителям, иногда от одного больного можно выделить бактерии разных сероваров. Холерный вибрион в стадии диссоциации имеет ОR- и R- Аг, поэтому для идентификации V.сholerae используют диагностические сыворотки О1, ОR и типоспецифические Инаба и Огава. В 1992-93гг в Индии, Китае, Малазии появился новый серовар О-139, он гомологичен О1, отличается только по Аг структуре – результат мутации. НАГ – вибрионы (неагглютинирующиеся), холероподобные вибрионы не агглютинируются антисыворотками О1 и О139 (не О1, не О139). Факторы патогенности. 1. подвижность, Mot (-) – вирулентность исчезает или снижается в 100-1000 раз; 2. хемотаксис – преодоление слизистого слоя и взаимодействие с эпителиальными клетками. Мутанты по Che (-) имеют сниженную вирулентность; 3. пенетрация слизи – способствует приближению к энтероциту. Выделяют ферменты: муциназа протеаза нейроминидаза (готовит рецепторы для Vibrio) 71 лецитиназа; 4. адгезины – белки наружной мембраны, ЛПС; 5. возбудитель атакует эпителий, но сам внутрь энтероцита не попадает, синтезирует экзотоксин (холероген). Это термостабильный белок, разрушается фенолом и формалином, устойчив к действию протеолитических ферментов. Молекула токсина состоит из 2 компонентов: 2S A и 5S B. Токсин А делится на: А1 – собственно токсин А2 – связующая роль, формула токсина - А1А2В5. Токсин В: - распознает рецептор (моносиалоганглиозид) энтероцита и связывается с ним (gm1); - формирует гидрофобный канал для прохождения А. Внутрь энтероцита проникает А1, вызывает гидролиз НАД и отщепление АДФ-рибозы, которая связывается с регуляторной единицей аденилатциклазы. Комплекс ГТФ и аденилатциклаза вызывает гидролиз АТФ с образованием большого количества цАМФ. Токсин подавляет действие ферментов, которые в норме переводят цАМФ в АМФ. Через мембрану энтероцитов в кишечник уходят ионы К, Na, Cl и большое количество воды. Развивается диарея с нарушением ВЭБ; 6. фактор, повышающий проницаемость капилляров; 7. токсины типа LT, ST, SLT (термолабильный и термостабильный цитотоксины, шигаподобный токсин); 8. эндотоксин: -сильные эндотоксичные свойства (интоксикация, рвота); -АТ обладают вибриоцидным свойством (растворяют вибрионы в присутствии комплемента). Отвечают за постинфекционный и вакцинальный иммунитет. Генетический контроль токсинообразования. Гены, контролирующие синтез А и В фрагментов холерогена, объединены в оперон vct AB и ctx B, управляются 2-мя регуляторными генами: - ген tox R – позитивный контроль, мутация этого гена снижает продукцию токсина в 1000 раз; - ген htx – негативный контроль, мутация в этом гене усиливает продукцию токсина в 3-7 раз. Выделяют штаммы: - холерогенные (вирулентные); - слабохолерогенные; - нехолерогенные (невирулентные). Прямые методы обнаружения холерогена: 1. Биологическая проба на кроликах. Внутрикишечное заражение кроликовсосунков - развивается диарея, безвоживание, гибель. На вскрытии - толстый кишечник увеличен и наполнен прозрачной жидкостью с хлопьями и пузырьками газа; 2. РИФ, ИФА; 3. Реакция пассивного иммунного гемолиза – холероген связыавется с gm1 72 (сиалоганглиозид) энтероцитов, которые лизируются при добавлении антитоксических АТ и комплемента; 4. заражение культуры клеток - активность аденилатциклазы; 5. использование в качестве ДНК-зонда фрагмента хромосомы V. сholerae, несущего оперон холерогена. 6. ПЦР. Косвенные признаки отсутствия холерогена: 1. отсутствие заболеваемости среди людей; 2. положительная гемолитическая активность; 3. отсутствие лизиса фагом ХДФ-5. Резистентность. -выживают при низких температурах; - на льду -1 месяц; - в морской воде – 1,5 месяцев; - в речной воде – от нескольких дней до нескольких недель; - в почве – 3 месяца; - в испражнениях – 3 суток; - на полотняном белье – до 2 суток; - на влажном материале – недолго; - при 80°С – гибель через 2 мин; при 100°С – мгновенно; - высокочувствительны к хлору, кислотам, дезинфектантам; - долго сохраняются и размножаются в воде открытых водоемов и сточных водах, богатых органическими веществами, с щелочной рН, температурой выше 10-12°С. Эпидемиология. - антропоноз; - больной, вибрионоситель, загрязненная вода; - заражение: фекально – оральный способ, пути передачи - вода, контактнобытовой, пищевой; - больной выделяет испражнения от 100 млн до 1 млрд / на мл; - вибрионоситель- 100-100 тыс./мл; - заражающая доза – 1 млн. вибрионов; - переболевшие выделяют возбудитель 7-10 дней, носители – 7- 42 дня. - V.сholerae О1 (токсигенные и нетоксигенные) сохраняются в водных экосистемах в виде некультивируемых форм. Обнаружение методом ПЦР vct- генов (НФБ). Клиника. - и.п. – от нескольких часов до 6 суток (2-3 дня); - возбудитель попадает в тонкий кишечник → пенетрация слизи с помощью ферментов → выделение холерогена в клетку (энтероцит) → гиперсекреция жидкости: диарея, обезвоживание, обессоливание организма; - тяжело протекает у людей с пониженной кислотностью; - 1 стадия – энтерит. Только понос в виде рисового отвара, повышение Т тела; - 2 стадия – гастроэнтерит, присоединяется рвота, Т тела нормальная, понос без предшествующих позывов, затем вид «рисового отвара», рвота 73 кишечным содержимым,; - 3 стадия – холерный алгид (переходит без лечения). Потеря Н2О2, солей; - 4 стадия – холерная кома: снижение АД, компенсированная тахикардия, нитевидный пульс, нарушение обмена K и Na, анурия, накопление азотистых шлаков, цианоз, снижение тургора кожи, симптом «очков», судороги. Letalis за счет снижения СД, в развивающихся странах –до 50%. Иммунитет. Постинфекционный: прочный и длительный. Антитоксический и антимикробный, обусловлен АТ, клетками иммунной памяти, фагоцитами, Ig A. Лабораторная диагностика. 1. Бактериологический метод. Биохимические свойства 1. расщепляет углеводы и многоатомные спирты до К: глюкоза сахароза манноза мальтоза не расщепляют: арабинозу лактозу инозит дульцит салицин 2.протеолитическая активность (+) (желатин, казеин); 3.лецитиназа (+); 4.амилаза (+) (расщепление крахмала- диастатическая активность); 5.нейроминидаза (+); 6.каталаза (+); 7.расщепляет ам-кту триптофан до индола (посев в 1% п.в. – в ней есть триптофан) (+); 8.ацетилметилкарбинол (р-ция Фогес-Проскауэра): биовара Эль-Тор (+); биовар классика (–). 9. не выделяют Н2S; 10. гемолитическая активность б/в Эль-Тор (+) (особенно из внешней среды); б/в классика (–). 11. выделен белковый фермент гемолизин. У переболевших людей в крови обнаруживаются АТ к гемолизину (замаскированный токсин), но выделенные культуры гемолитической активностью не обладают. Говорят о присутствии Hly- гена, но об отсутствии его экспрессии. 2.Ускоренные методы диагностики нативного материала. - ЛСМ (РИФ); - РИВ (реакция иммобилизации вибрионов О - холерной сывороткой); - РНГА (с антительным эритроцитарным диагностикумом); - ИФА; Ускоренный метод по Ермоловой. 74 Посев 2-3 петли материала в 3 пробирки: - 1% п.в. - 1% п.в. + О-холерная сыворотка в титре 1: 1000 - 1% п.в. с крахмалом Учет через 3 часа при 37С. - в 1 пробирке – помутнение, пленка; - во 2-ой на дне зонтик, при встряхивании – агглютинация; - в 3-ю – закапывают 2-3 капли Люголя (йод), посинения не наступает, т.к. вибрионы расщепляют крахмал. Фаготипирование. Набор фагов для типирования: I. (Мукереджи) V.сholerae asiatica V. cholerae eltor. Используются для определения биовара. II. ТЭПВ 1,2,3,4,5,6,7 – для фаготипирования неагглютинирующихся холерной О1 сывороткой вибрионов. Выделены 7 фаготипов V. cholerae не О1; III. ДДФ (дифференциально- диагностичекий фаг) – для идентификации вирулентных м/о вида V. cholerae O1 классического и эль-тор биоваров, V. cholerae не О1, V. albensis и дифференциации от: - V. parahamoliticus; Aeromonas; Plesiomonas; Commamonas; Pseudomonas; Escherichia. IV. Монофаги ХДФ-3, ХДФ-4, ХДФ-5 – определение вирулентности вибрионов эль-тор (сероваров Инаба, Огава, Гикошима): Если из 3 фагов 3 или 2 лизируют, гемолиз (-), то вирулентные; Если из 3 фагов 3 или 2 лизируют, гемолиз ±, то слабовирулентые; Если из 3 фагов 1 или 0 лизируют, гемолиз ±, то авирулентные. V. Фаги ctx – (не вирулентные); ctx + (вирулентные). Лечение. 1. регидротация и восстановление ВСО; 2. антибиотикотерапия (тетрациклин после прекращения рвоты). Профилактика (ИБП п. 3.3-3.5). 1. вакцина холерная корпускулярная инактивированная); 2. вакцина холерна (холероген – анатоксин + О-антиген); 3. вакцина холерная бивалентная химическая. 44. Холерный вибрион V. cholerae был выделен Р. Кохом в 1882 г. Слегка изогнутая грам(-) полиморфная палочка. Монотрих. Спор и капсул не образует. Вибрионы относятся к хемоорганотрофам с окислительным и бродильным типами метаболизма. Ферментируют многие углеводы: глюкозу, мальтозу, сахарозу и другие с образованием кислоты. Разжижают желатин, образуют индол, восстанавливают нитраты в нитриты. Продуцируют такие ферменты как нецитиназа, лизиндекарбоксилаза, орнитиндекарбоксилаза, нейраминидаза. Способность восстанавливать нитраты и образовывать индол нежит в основе положительной нитрозо-индоловой пробы — реакции холера-рот. Вибрионы хорошо растут на простых средах при щелочной реакции pH = 8,5-9,0. На плотных средах образуют небольшие прозрачные круглые колонии, на жидких — пленку с легким помутнением среды. Вибрионы — факультативные анаэробы, образуют цитохромоксидазу. Антигены. Холерные вибрионы имеют два антигена: О-антиген шноспецифический термолабильный и Н-антиген жгутиковый видом цифический термостабильный. Возбудители холеры имеют 01-ангш'ен. Вибрионы, относящиеся к серогруппам 02, 03, 04 могут вызыва энтериты и гастроэнтериты. 01-антиген состоит из трех компонентов — А, В, С, разные сочетания которых образуют серовары Огава (ЛИ), Инаба (АС), Гикошима(АВС). Часто выделяются вибрионы, не агглютинирующиеся 01 антисывороткой. Их называют неагглютинирующимися НАГ-вибрионами. Патогенность и патогенез. Холерный вибрион с помощью жгутика и фермента муциназы проникает в слизистую оболочку тонкой кишки и прикрепляется к энтероцитам. Адгезия происходит за счет филаментоподобного вещества, находящегося на клеточной стенке вибриона. Затем начинается колонизация слизистой кишки. При этом вибрионы не проникают в энтероциты, а находятся на их поверхности. Основным фактором патогенности вибриона является секреция белковых токсинов. Это прежде всего холероген, который относится к функциональным блокаторам. Он, как и многие другие экзотоксины, состоит из двух субъединиц А и В. Последняя не ядовита. Она обеспечивает прикрепление специфического рецептора мембраны энтероцитов тонкой кишки — моносиалоганглиозида — к клеткам кишечного эпителия, способствующего трансмембранному переносу А-субъединицы в цитоплазму. Субъединица А обеспечивает токсичность, вызывая активацию аденилатциклазы. Это при водит к увеличению количества цАМФ (циклический монофосфат) и соответственно — к нарушению водно-солевого обмена, обусловленного выделением ионов натрия и хлора и обезвоживанию организма — характерного синдрома холеры. При этом организм теряет до 30 л 'жидкости в сутки. Одновременно блокируется АТФ-аза, что приводит к нарушению внутриклеточного транспорта и потере воды, а также нарушению межклеточных контактов. Холерный вибрион, также как и другие грамотрицательные бактерии, образует эндотоксин (ЛПС в составе клеточной стенки), который защищает возбудителя от фагоцитоза и обладает другими функциями. При холере наблюдается гуморальный иммунный ответ, который характеризуется появлением антитоксических (к холерогену) и антибактериальных иммуноглобулинов. При этом существенную роль играют секреторные иммуноглобулины (SIgA), препятствующие адгезии вибриона. Экология и эпидемиология. Единственным источником инфекции в природе является больной человек и бактерионосители. При холере El-Тог отмечается длительное бактерионосительство и многочисленные атипические формы болезни, что способствует распространению возбудителя. Заражение человека происходит через воду или продукты. Возможно заражение контактным путем. Лабораторная диагностика. Ускоренные методы (экспресс): ПЦР, МФА, РИВ Бактериологическое исследование: 1 этап-посевы исследуемого материала инкубируют в первой среде накопления (1% пептонной воде) 6-8ч при 37С 2 этап- высевают на 2 чашки Щелочной агар и селективно-дифференциальную среду (TCBL), и на вторую среду накопления (1% пептонную воду), все посевы выдерживают в термостате при 37С еще 6-8 часов 3 этап – со второй пептонной воды высевают на 2 чашки Щелочной агар и селективно-дифференциальную среду (TCBL) и в термостате при 37С еще 6-8 часов, отбор колоний на основании морфологии на плотных средах и высев подозрительных колоний чистой культуры возбудителя. 4 этап- отбор подозрительных колоний на холерный вибрион колоний в посевах нативного материала на плотные среды, а также в посевах из первой и второй накопительных сред. Чашки просматривают в проходящем свете невооруженным глазом или с помощью лупы, а также под стереоскопическим микроскопом в косо проходящем свете. На чашках со ЩА колонии холерных вибрионов О1 и О139 серогрупп в типичной S-форме – круглые, гладкие, плоские, голубоватые, гомогенные, с ровными кроями, прозрачные в проходящем свете и светло-серые с голубым иои зеленоватым оттенком под микроскопом в косом свете. На среде TCBL колонии ярко-желтые на зеленом фоне среды, полупрозрачные. Подозрительные оксидазоположительные колонии агглютинируют сыворотками О1 и О139. Если О1 + то агглютинируют с сыворотками Инаба и Агава, делают мазок по Грамму, а также положительный результат ПЦР, то можно выдавать предварительный положительный ответ о наличии в материале холерного вибриона О1. Если О139 + и ПЦР +, то о наличии в материале холерного вибриона О139. Далее идет идендификация – высев на полиуглеводную среду (Клиглер) и различные тест системы с последующим определением чувствительности к антибиотикам. 45. АЭРОБНЫЕ, МИКРОАЭРОФИЛЬНЫЕ, ПОДВИЖНЫЕ, СПИРАЛЬНО-ИЗОГНУТЫЕ ГРАМОТРИЦАТЕЛЬНЫЕ БАКТЕРИИ. Кампилобактер Род Campylobacter (Campyla — изогнутые) относится к группе аэробных или микроаэрофильных подвижных спирально изогнутых грамотрицательных бактерий. Наибольшее значение в патологии человека имеет С. jejunii. Реже встречаются С. fetus и С. coli. Ранее отнесенный к данному роду С. pylori выделен в род Helicobacter. Морфология и физиология. Тонкие вибриоидные клетки, имеющие один или более витков спирали. Споры не образуют. Подвижные, совершают характерное винтовое движение с помощью одиночных жгутиков, расположенных на одном или обоих частях клетки. Хемоорганотрофы не требовательны к питательному субстрату не сбраживают углеводы. Для получения энергии используют аминокислоты, а не углеводы. Оксидазоположительные и уреазоотрицательные. Пигментов не образуют. Антигены. Кампилобактеры содержат О-, К- и Н-антигены. В настоящее время выделено свыше 50 О-серогрупп кампилобактеров. Патогеность и патогенез. К факторам вирулентности относя і жгутики и муциназу, способствующие проникновению в слизистую оболочку тонкой кишки. Обладают умеренной пенетрационной активностью. Их токсичность связана с секрецией энтеротоксинов (функциональные блокаторы), нарушающими водно-солевой обмен через образование цАМФ, аналогично энтеротоксинам Е. coli и V. cholerae. При разрушении кампилобактеров освобождается эндотоксин. Описаны цитотоксины, вызывающие гибель чувствительных клеток. После колонизации участка тонкой кишки они могут проникнуть в кровяное русло, вызывая генерализованную инфекцию, чаще у иммунодефицитных лиц. В патогенезе кампилобактериозных энтеритов преобпадают явления диареи или дизентериеподобных состояний. При этом ( jejunii и С. fetus вызывают энтериты у людей. С. jejunii встречается также при абортах овец. С.fetus чаще встречается у пожилых людей с иммунодефицитами, а также при некишечных формах кампинобактериоза, вызывая поражение паренхиматозных органов и даже сепсис. Иммунитет. При кампилобактериозе наблюдается гуморальный иммунный ответ. Однако образующиеся антитела не обладают выраженными протективными свойствами. Экология и эпидемиология. Источником инфекции являются больные животные и люди, от которых кампилобактеры попадают н пищевые продукты (мясо, молоко) и воду. Передача инфекции происходит алиментарным путем. Возможен и контактно-бытовой путь. В окружающей среде при 4°-10°С сохраняются около недели, («регистрированы пищевые, молочные и водные вспышки кампииобактериоза, чаще у детей. Лабораторная диагностика. Проводится бактериологическим методом с выделением чистой культуры возбудителя и ее идентификацией. Хеликобактер Род Helicobacter ранее относился к роду Кампилобактер, однако в настоящее время выделен в самостоятельный род. Морфология и физиология. H.pylori представляют собой мелкие грамотрицательные палочки, лофотрихи, микроаэрофилы. Растут на сложных питательных средах. Продуцируют каталазу и оксидазу. Патогенность и патогенез. К факторам вирулентности хеликоБактеров относят их способность к движению и участие в проникновении в слизистую оболочку. Фермент уреаза при разрушении мочевины до аммиака и С02 приводит к образованию газовой оболочки, защищающей от кишечного сока. Хеликобактеры продуцируют фосфолипазы, разрушающие фосфолипиды. Их токсичность связана с цитотоксином, действующим на эпителиальные клетки, токсином, нарушающим межклеточные контакты, и с ЛПС. Кроме того, на поверхности клеток образуются белки теплового шока, которые рассматривают как реакцию на стресс. Это приводит к аутоиммунному воспалению и образованию язв в желудке и двенадцатиперстной кишке. Н. pylori выделяются в 80% случаев язвенных гастритов. Экология и эпидемиология. Является представителем нормальной микрофлоры животных. Пути передачи люди заражаются алиментарным путем. Лабораторная диагностика. Используют такие тесты, как обнаружение продуктов распада мочевины в выдыхаемом воздухе, определяют уреазную активность биоптата. Проводят бактериоскопическое и бактериологическое исследование биоптата. 46. Характеристика рода Clostridium. Таксономия. Дифференциация клостридий. Значение отдельных видов в патологии человека. Методы лабораторной диагностики газовой гангрены. Clostridium это род грамположительных бактерий, которые широко распространены во многих средах планеты: почве, воде и других. Он был открыт в 1880 году. Многие из бактерий, которые составляют этот род, очень токсичны и смертельны для человека. Это потому, что они производят токсины, которые попадают в организм и наносят ему вред. Бактерии этого рода являются возбудителями некоторых заболеваний, которые преследуют человечество годами. Среди них столбняк, ботулизм и газовая гангрена. Все с очень высоким уровнем смертности. Токсин Clostridium botulinum является одним из самых токсичных и ядовитых веществ на планете. С другой стороны, эти бактерии также могут быть использованы в определенных полезных для человечества приложениях, таких как использование ботокса и лечение некоторых заболеваний, влияющих на нервы. Таксономическое положение возбудителей Возбудители анаэробной клостридиальной инфекции относятся к типу (филуму) Firmicutes, классу Clostridia, порядку Clostridiales, семейству Clostridiaceae, роду Clostridium. Род Clostridium объединяет более 100 видов, в том числе – C. perfringens, C. novyi, C. septicum, C. histoliticum, C. bifermentans, C. ramosum, C. sporogenes, C. fallax, C. sordelli и другие. Основными возбудителями анаэробной клостридиальной инфекции являются C. perfringens, C. histolyticum, C. 7 novyi, C. septicum. По антигенной структуре внутри видов выделяют серовары (серотипы), а внутри серотипов – подтипы. В частности у C. perfringens различают 6 серотипов (A, B, C, D, E, F), у C. novyi – 4 серотипа (A, B, C, D). Морфологические и тинкториальные свойства Клостридии анаэробной инфекции представляют собой крупные (3÷10х0,4÷1,2 мкм) спорообразующие грамположительные палочки. Споры располагаются терминально или субтерминально/ Культуральные и биохимические свойства Клостридии являются факультативными или облигатными анаэробами. Оптимальной для роста является температура 35-37ОС, оптимальное значение рН 7,2-7,4. На плотных питательных средах формируют колонии S-формы с ровным краем и гладкой поверхностью или R-формы с неровным краем и шероховатой поверхностью. В глубине агара колонии напоминают комочки ваты или зерна чечевицы В среде Китта-Тароцци рост клостридий сопровождается помутнением среды и активным газообразованием В молоке рост клостридий сопровождается створаживанием молока и образованием губкообразного сгустка - “штормовая реакция” На желточном агаре в результате разложения лецитина лецитиназой вокруг колоний наблюдается зона опалесценции. Диагностика Исследуемым материалом при клостридиальной анаэробной инфекции служат пораженные и некротизированные ткани, взятые из раны на границе со здоровыми тканями, экссудат, гной, раневое отделяемое, кровь. От трупов берут кусочки мышц, печени, селезенки; кровь из сердца, раневое отделяемое. При пищевых токсикоинфекциях исследуют рвотные массы, фекалии, кровь, остатки пищевых продуктов. При лабораторной диагностике клостридиальной анаэробной инфекции используют бактериоскопический, культуральный и биологический методы. Бактериоскопический метод включает микроскопию мазков, приготовленных из исследуемого материала и окрашенных по Граму (рисунок 21) и Бурри-Гинсу (для выявления капсулы). Подвижность культур определяют методом “висячей капли”. В качестве экспресс-метода используют РИФ. Культуральный метод предусматривает посев исследуемого материала в жидкую питательную среду Китта-Тароцци для накопления бактерий с последующим пересевом культуры на плотные среды (кровяной сахарный агар Цейсслера, среду Вильсона-Блера). Посевы инкубируют в анаэростате при температуре 37ОС. Выросшую культуру идентифицируют по морфологическим и биохимическим свойствам. Биологический метод основан на реакции нейтрализации токсинов (фильтратов бульонных культур или центрифугатов исследуемого материала) специфическими антитоксическими сыворотками с последующим заражением белых мышей или морских свинок. Кроме результатов лабораторных исследований в диагностике клостридиальной анаэробной инфекции важное значение имеет характерная клиническая картина заболевания, общая интоксикация организма, рентгенологическое исследование (“пористость” мышечной ткани). 47. Гемофильные палочки. Характеристика рода Наеmophilus. Значение в патологии человека. Лабораторная диагностика заболеваний, обусловленных гемофильной палочкой. Гемофильная палочка, палочка Пфайффера, (ошибочно «палочка инфлюэнцы») (лат. Haemophilus influenzae) — вид грамотрицательных неподвижных патогенных бактерий семейства Pasteurellaceae, возбудитель бактериальной пневмонии и других гемофильных («любящих кровь») инфекционных болезней человека. Некоторые виды гемофил входят в состав нормальной микрофлоры человека, другие вызывают тяжёлые инфекционные заболевания (менингит, эпиглоттит, пневмонию, перикардит и др.) Мелкая (0,3—0,5 × 0,2—0,3 мкм) неподвижная коккобацилла, располагается одиночно, попарно и скоплениями, образует капсулу. Жгутиков не имеет, слабо прокрашивается анилиновыми красителями. Диагностика. Симптомы гемофильных инфекций обычно определяются локализацией воспалительного процесса, а не этиологическим агентом, поэтому их диагностика базируется главным образом на выделении и идентификации возбудителя. Материалом для исследования служат мазок из носоглотки, кровь, мокрота или ликвор, гнойное отделяемое (при отитах и синуситах), суставная жидкость (при септических артритах). Бактериоскопиче- ский метод применяют при гнойном менингите (изучение мазков из цереброспинальной жидкости, окрашенных по Граму). Для ускоренной диагностики и дифференциации гемофильной палочки от других возбудителей менингита используют тесты для обнаружения b-капсульного антигена H. influenzae: встречный иммуноэлектрофорез, прямую РИФ или реакцию латекс-агглютинации с анти-b- антителами. При высокой концентрации возбудителя в исследуемом материале возможна также постановка теста набухания капсулы. +Бактериологический метод исследования применяют для выделения и идентификации возбудителя из исследуемого материа- ла. Для дифференциации H. influenzae от других родственных им грамотрицательных палочек определяют их потребность в Х- и V-факторах роста, отсутствие гемолиза на кровяном агаре Для быстрой диагностики инфекций, вызванных Н. influenzae типа b, используются серологические методы обнаружения капсульного антигена в СМЖ, крови, плевральной жидкости и моче: латекс-агглютинация, реакция коагглютинации со стафилококковым протеином А и иммуноферментный анализ. +Более простыми методами являются реакции латекс- и коагглютинации с образцами СМЖ. В настоящее время наиболее широко применяется иммуноферментный анализ. 48. Нейссерии. Принципы классификации. Значение в патологии человека. Лабораторная диагностика менингококковой инфекции. Заболевания у человека вызывают 2 вида кокков рода Neisseria: N.meningitidis – менингококки и N.gonorrhoae – гонококки. Остальные представители этого рода являются обитателями носоглотки здоровых людей и редко вызывают заболевания. Морфология. Имеют овоидную форму, напоминают кофейное зерно. Располагаются парами. Имеют нежную капсулу, которая утрачивается при пересевах на средах в лабораторных условиях. Для размножения на питательных средах нуждаются в сыворотке или крови. Растут лучше в атмосфере 5–8% CO2. На поверхности сывороточного агара образуют нежные бесцветные колонии вязкой консистенции. Лабораторная диагностика менингококковых заболеваний основана на бактериоскопии выделеной культуры и биохимической идентификации Neisseria meningitidis. Материал для исследования – спинномозговая жидкость (СМЖ), кровь и отделяемое носоглотки, взятое тампоном из глубоких отделов позади мягкого нёба. Забор материала желательно проводить до начала антибактериальной терапии. В окрашенных мазках крови или отделяемого из носоглотки обнаруживают грамотрицательные одиночные кокки или диплококки, что значительно облегчает распознавание Neisseria meningitidis при характерной клинической картине. Грамотрицательные парные кокки в окрашенных по Граму мазках СМЖ больного с неврологической симптоматикой указывают на менингококковую этиологию заболевания. Следует помнить, что обнаружение Neisseria meningitidis в мазках СМЖ затруднено, и в этих случаях диагноз менингококкового менингита подтверждают обнаружением АГ Neisseria meningitidis в реакциях латекс-агглютинации или встречного иммуноэлектрофореза. В период менингококцемии грамотрицательные диплококки могут быть обнаружены в окрашенных мазках из соскобов петехий, а также в лейкоцитах периферической крови. Посев материала для получения культуры производят на твёрдые или полужидкие питательные среды, содержащие сыворотку, кровь или асцитическую жидкость. Культуры инкубируют в течение 18-24 ч. при 37°С в сосуде со свечой или специальном термостате с повышенным содержанием (8-10%) СО2. Оксидаза-положительные колонии предположительно рассматривают как принадлежащие к видам Neisseria. +Наличие в культуре Neisseria meningifidis подтверждают образованием уксусной кислоты при ферментации глюкозы и мальтозы (но не лактозы, сахарозы и фруктозы). Лабораторная диагностика N.gonorrhoae Бактериоскопическое исследование. Материал для исследования должен быть максимально быстро доставлен в лабораторию во избежание аутолиза гонококков, которые очень чувствительны к изменению температуры и охлаждению. Из материала готовят мазки, окрашивают их по Граму, а также метиленовым синим. При положительном результате в мазках обнаруживают гонококки - грамотрицательные диплококки бобовидной формы, находящиеся внутри лейкоцитов. Положительный бактериоскопический диагноз ставится в основном при острой форме гонореи до применения антибиотиков. При хронической гонорее бактериоскопическое исследование часто дает отрицательный результат, так как в этих случаях гонококки могут иметь атипичную форму в виде шаров или, наоборот, очень мелких образований. Кроме того, в препарате обнаруживают разнообразную микрофлору, лейкоциты, эпителиальные и другие клеточные элементы. Бактериологическое исследование. Материал засевают на чашку Петри со специальными питательными средами – КДС, сывороточным агаром и др. Среда КДС содержит питательный агар с добавлением определенной концентрации казеина, дрожжевого экстракта и сыворотки крови. Посевы инкубируют при 370 в течении 24-72 часов. Гонококки образуют прозрачные колонии, напоминающие капли росы, в отличие от более мутных колоний стрептококков или пигментированных колоний стафилококков, которые также могут расти на этих срезах. Подозрительные колонии пересевают в пробирки на соответствующие среды для получения чистых культур, которые идентифицируют по сахаролитическим свойствам на средах «пестрого» ряда (полужидкий агар с сывороткой и углеводами). Гонококк ферментирует только глюкозу с образованием кислоты. +Серодиагностика. В некоторых случаях ставят РСК Борде - Жангу. В качестве антигена используют взвесь убитых гонококков. Реакция Борде-Жангу имеет вспомогательное значение при диагностике гонореи. Она положительна при хронической и осложненной гонорее. 49. Бордетеллы. Характеристика рода бордетелла. Значение в патологии человека. Лабораторная диагностика коклюша и паракоклюша. Впервые бордетеллы выделены в 1906 г. французскими микробиологами Ж. Борде и О. Жангу. Классификация Возбудители относятся к семейству Alcaligenaceae, роду Bordetella. В настоящее время род включает 9 видов бордетелл. Патологию у человека вызывают 3 вида бактерий: В. pertussis – возбудитель коклюша, В. parapertusis – паракоклюша; В. bronchiseptica является возбудителем болезней животных, у человека весьма редко вызывает респираторные инфекции (оппортунистический патоген). Данные виды обладают более чем 90% гомологией ДНК, однако традиционно они разделяются в связи со значительными отличиями бактерий по патогенности. Морфология Очень мелкие овоидной формы, грамотрицательные палочки (коккобактерии). Не имеют спор, жгутиков (кроме B. bronchiseptica). Возбудители коклюша имеют капсулу. При окраске толуидиновым синим выявляются метахроматические биполярные гранулы. Культуральные свойства Лучшими средами являются глицерино-картофельно-кровяной агар (среда Борде-Жангу); КУА (казеиново-угольный агар). На этих средах возбудитель коклюша образует колонии в виде капелек ртути, паракоклюша – коричневые колонии. Время культивирования – 48-72 часа. Биохимические свойства Биохимическая активность не выражена. Строгие аэробы, каталазоположительны. Факторы патогенности Возбудители коклюша обладают набором факторов адгезии, определяющих их тропизм к эпителию верхних дыхательных путей. Ведущим является филаментозный гемагглютинин, который связывается с интегриновыми рецепторами мерцательного эпителия трахеи. Бактерии имеют многочисленные фимбрии. В. pertussis продуцирует ряд токсинов. Коклюшный токсин представляет собой термостабильный белок. Он состоит из А и В субъединиц. Компонент В связывается с мембраной эукариотических клеток, обеспечивая поступление токсина в клетки. Компонент А обладает АДФ-рибозилазной активностью, вызывая рибозилирование некоторых G-белков-ГТФаз. Их инактивация нарушает внутриклеточную регуляцию с повышением концентрации цАМФ. Действие токсина на ткани приводит к увеличению их чувствительности к гистамину, стимулирует лимфоцитоз, усиливает секрецию инсулина. Имеется дермонекротический токсин, который также взаимодействует с внутриклеточными ГТФазами и может вызывать некроз и гибель клеток. Трахеальный цитотоксин имеет небелковую природу и представляет собой продукт трансформации муреина. Активирует макрофаги с выделением провоспалительных цитокинов. Воспаление приводит к повреждению эпителиального слоя. Аденилатциклаза повышает концентрацию цАМФ в различных клетках, включая макрофаги и нейтрофилы, что подавляет их активность. Также обладает гемагглютинирующим действием. Эндотоксин (ЛПС) стимулирует воспаление. Капсула В. pertussis предохраняет от фагоцитоза и участвует в адгезии. Резистентность Бордетеллы – весьма чувствительные микроорганизмы, быстро погибают под действием солнечных лучей или при повышении температуры. Не проявляют устойчивости к основным антисептикам и дезинфектантам. Патогенез и характеристика заболевания В. pertussis вызывает коклюш – острое антропонозное респираторное инфекционное заболевание, которое характеризуется циклическим течением и приступообразным спастическим кашлем. В. parapertusis вызывают паракоклюш – заболевание, сходное по клинике с коклюшной инфекцией, но с более легким течением. Возбудитель коклюша весьма контагиозен. При контакте с источником инфекции вероятность непривитых лиц заболеть превышает 70%. Болеют преимущественно дети. Источник инфекции – больной ребенок и бактерионоситель. Путь передачи – воздушно-капельный. Инкубационный период болезни составляет 1-2 недели. Для заболевания характерны тяжелые приступы пароксизмального кашля, иногда приводящие к рвоте, ларингоспазму и кратковременной асфиксии. Возбудитель при помощи адгезинов связывается с мерцательным эпителием трахеи и бронхов, быстро размножается на поверхности клеток и выделяет токсины. Он не способен проникать в нижележащие слои. Развитие перибронхиального воспаления и действие токсинов приводят к повреждению эпителия, раздражению периферических нервных окончаний с возникновением приступов кашля. Механизм кашлевых пароксизмов до конца не выяснен. Они сохраняются и после элиминации бактерий. Считается, что инфекция снижает порог возбуждения периферических рецепторов трахеи и бронхов к внешним раздражителям. Выделяют 3 периода заболевания. Начальный катаральный период очень заразен. Сопровождается насморком, кашлем, длится около 2-х недель. Для периода судорожного кашля характерны приступы кашлевых пароксизмов, его длительность составляет 4-6 недель. В конце периода при осложненном течении могут возникать вторичные бактериальные инфекции – отиты, пневмонии. Тяжелые вторичные бронхопневмонии у детей 1 года жизни могут заканчиваться летально. Период реконвалесценции характеризуется снижением частоты и силы пароксизмов, выздоровление наступает медленно. Общая длительность заболевания может достигать 2-3 месяцев. Возможны более легкие формы заболевания без четкой периодизации, протекающие по типу обычных респираторных инфекций. Лабораторная диагностика Клинический диагноз может быть установлен при выявлении типичных симптомов заболевания. Для лабораторной диагностики инфекции материалом для исследования является слизь задней стенки носоглотки, взятая тампоном. Бактериологический метод эффективен в катаральный период болезни (более 90% позитивного культивирования). В конце периода пароксизмального кашля выделение возбудителей не превышает 10-20%. Для прямого посева используют метод «кашлевых пластинок». Посев производят на среду Борде-Жангу или казеиново-угольный агар. Идентификацию возбудителя проводят по морфологическим, культуральным, биохимическим и антигенным свойствам. Выполняют реакцию агглютинации с О-сыворотками к 1, 14, 12 и 7 вариантам антигенов или используют МИФ. Дифференцируют возбудителя коклюша от других видов бордетелл (см. табл. 12). B. рertussis растет только на специальных средах, на казеиново-угольном агаре – в виде капелек ртути. Возбудитель имеет капсулу, дает гемолиз на кровяном агаре. Агглютинируется сывороткой к антигену 1. B.рarapertussis не имеет капсулы. Растет на МПА в виде коричневых колоний. Выделяет уреазу. Агглютинируется антисывороткой к антигену 14. B. bronchiseptica имеет жгутики, агглютинируется сывороткой к антигену 12. Остальные свойства как у B. parapertussis. Таблица 12. Дифференциальные признаки патогенных видов бордетелл
+Серологический метод имеет ограниченное значение. Выявляют антитела в парных сыворотках больного, начиная со II периода заболевания в ИФА, реакции агглютинации, РСК или РПГА. Определяют также IgG и IgA против филаментозного гемагглютина и против токсина B. рertussis. В качестве экспресс-метода разработан ПЦР-анализ с набором праймеров к B. рertussis и B. рarapertussis. 50. Коринебактерии. Биологические свойства коринебактерий. Значение в патологии человека. Лабораторная диагностика дифтерии. Род Corynebacterium семейства Corynebacteriaceae относится к порядку Actinomycetales и типу Actinobacteria. В род коринебактерий входят десятки патогенных и непатогенных бактерий, часть из которых играет роль в патологии человека, животных или растений. Ведущим патогенным микроорганизмом для человека является C. diphtheriае – возбудитель дифтерии. Кроме C. diphtheriае в редких случаях дифтерию могут вызывать C. ulcerans и С. pseudotuberculosis, так как они способны приобретать гены, кодирующие дифтерийный экзотоксин. Другие коринебактерии иногда могут становиться возбудителями оппортунистических инфекций. Например, C. riegelii вызывает инфекции мочевыводящих путей; C. minutissimum связана с кожным заболеванием эритразмой, а в отдельных случаях может быть причиной септицемий, абсцесса мозга, остеомиелитов, фарингитов. Возбудители дифтерии были открыты Т. Клебсом в 1883 г., выделены в чистой культуре Ф. Леффлером в 1884 г. Позднее Э. Беринг и Э. Ру получили противодифтерийную сыворотку, а Г. Рамон – дифтерийный анатоксин. Морфология У бактерий выражен полиморфизм, чаще они имеют вид тонких палочек, расположенных под углом в виде римских цифр Х или V, на концах расположены зерна волютина, состоящие из полифосфатов. При окраске по Нейссеру зерна волютина имеют сине-фиолетовый цвет, а цитоплазма бактерий – желтый. При окраске корифосфином в люминесцентном микроскопе зерна волютина дают красное свечение на фоне желто-зеленого тела клетки. Спор и жгутиков у коринебактерий нет, иногда образуют капсулу. Грамположительны. Культуральные свойства Для культивирования широко применяют среду Леффлера (1 часть бульона с глюкозой и 3 части лошадиной сыворотки). На кровяном и сывороточном агарах C. diphtheriае через 18-20 часов образуются крошковидные колонии кремового цвета, напоминающие «булыжную мостовую». Селективными средами являются среда Тинсдаля (цистин-теллурит-сывороточный агар), на которой коринебактерии растут в виде коричневатых колоний; среда Клауберга (МПА, гемолизированная кровь, теллурит калия, глицерин), на ней образуются серые колонии, т.к. теллурит калия восстанавливается в металлический теллур. На жидких средах коринебактерии дифтерии могут давать равномерное помутнение или поверхностную пленку, которая растет, крошится и хлопьями оседает на дно пробирки. Биохимические свойства Факультативные анаэробы, метаболизм окислительно-ферментативный. Разлагают глюкозу, мальтозу, галактозу, крахмал до кислоты, не разлагают лактозу, сахарозу, маннит. Выделяют фермент цистиназу, который выявляют на среде Пизу (МПА, цистин, уксуснокислый свинец, гипосульфит натрия). Посев на эту среду производят уколом. Если есть фермент цистиназа, то среда по ходу укола чернеет, так как образуется сернистый свинец. Не образуют фермента пиразинамидазы. Данный тест, а также продукция цистиназы отличает возбудителей дифтерии от других коринебактерий. Не выделяют уреазу, следовательно, не разлагают мочевину; не разжижают желатин, не образуют индол. Восстанавливают нитраты в нитриты, кроме C. diphtheriае, биовар belfanti. Возбудитель дифтерии продуцирует каталазу, гиалуронидазу, нейрамидазу, ДНКазу. В 1931 г. Андерсен подразделил возбудителей дифтерии на 3 биовара: gravis – R-тип, mitis – S-тип и intermedius – R-S-тип. Он полагал, что I тип выделяется при тяжелых формах, II – при легких, а III занимает промежуточное положение. В основу дифференциации биоваров положены биохимические и культуральные свойства. В настоящее время доказано, что биовары имеют эпидемиологическое значение. При массовых вспышках чаще выделяются R-типы, при спорадических – S-типы. Дифференциальные признаки различных биоваров возбудителя, включая биовар belfanti, а также свойства C. ulcerans и С. pseudotuberculosis и некоторых других представлены в таблице. Антигенная структура Имеют 2 основных антигена: К-АГ – типоспецифический, термолабильный белковой природы; О-АГ – группоспецифический, термостабильный, липополисахарид. В реакции агглютинации выделяют 57 серотипов, чаще встречаются 11 серотипов. Факторы вирулентности Фимбрии и поверхностные структуры клеточной стенки обеспечивают адгезию и колонизацию клеток к эпителию слизистой оболочки. Главным фактором вирулентности, вызывающим заболевание, является дифтерийный экзотоксин. Продукция экзотоксина обусловлена наличием в геноме возбудителя tox-гена умеренного бактериофага, полученного в результате трансдукции. Данный ген кодирует синтез токсина. Не инфицированная специфическим фагом дифтерийная палочка не способна к токсинообразованию. Экзотоксин состоит из двух фракций (А и В), соединенных дисульфидной связью. Фракция А обладает токсическими свойствами, вызывая некроз клеток. Она проявляет ферментативную АДФ-рибозилазную активность, вызывая рибозилирование фактора элонгации-2 или EF-2. В норме данный фактор выполняет элонгацию (наращивание) полипептидных цепей на рибосомах. В результате блокируется белковый синтез в любых клетках, в том числе в миокарде и клетках нервной системы. Это приводит к демиелинизации нервных волокон, развиваются параличи и парезы, токсин повреждает эндотелий сосудов, вызывает усиленную экссудацию. Фракция В (транспортный полипептид) обеспечивает доставку фракции А в клетки. Он связывается на мембранах клеток со специфическим рецептором HB-EGF – белком из семейства эпидермального фактора роста. Токсин попадает в клетки посредством эндоцитоза. Субъединица В образует пору в мембране эндосомы, через которую в цитоплазму выходит субъединица А и останавливает белковый синтез в клетке. |