нейссерии менингитис. Таксономия возбудителя 4 Морфологические и тинкториальные свойства 4
 Скачать 52.28 Kb.
|
|
Содержание: Введение 3 Таксономия возбудителя 4 Морфологические и тинкториальные свойства 4 Культуральные свойства 5 Биохимические свойства 7 Антигенные свойства 7 Факторы патогенности 9 Эпидемиология, источник, механизмы заражения 11 Вызываемые болезни 14 Методы микробиологической диагностики 17 Материал для микробиологического исследования 19 Специфическая профилактика и специфическое лечение инфекционного заболевания 19 Заключение 22 Введение Нейссерии - грамотрицательные аэробные кокки, относящиеся к роду Neisseria. Этот род назван в честь немецкого врача Альберта Нейссера, обнаружившего возбудителя в гное больного гонореей. Neisseria - это большой род бактерий, которые колонизируют слизистые оболочки многих животных. Из одиннадцати видов, колонизирующих человека, только два являются патогенами: N. meningitidis и N. gonorrhoeae. Большинство гонококковых инфекций протекают бессимптомно, а эпидемические штаммы менингококка могут переноситься в 95% популяции, где системное заболевание встречается с частотой меньше одного процента. Виды Neisseria - грамотрицательные бактерии, входящие в состав протеобактерий, большой группы грамотрицательных форм. Диплококки Neisseria напоминают кофейные зерна при микроскопическом рассмотрении. Нейссер открыл патоген, Mycobacterium leprae, вызывающий проказу. Эти открытия стали возможными благодаря разработке новых методов окрашивания, которые он помог разработать. В данной работе были рассмотрены вопросы истории изучения нейссерий, их морфологические, культуральные, биохимические и антигенные свойства, факторы патогенности менингококков и гонококков, патогенез менингита и гонореи, клинические симптомы этих заболеваний, их профилактика и лечение. Таксономия возбудителя Таксономия возбудителя Neisseria выглядит следующим образом: Домен: Bacteria Отдел: Proteobacteria Семейство: Neisseriaceae Род: Neisseria Виды: N.gonorrhoeae (вызывает гонорею), N.meningitidis (один из возбудителей бактериального менингита и менингококкового сепсиса)N.cinerea, N.elongata, N.flavescens, N.lactamica, N.mucosa, N.polysaccharea, N.sicca, N.subflava и другие. Видами, патогенными для человека, являются менингококки и гонококки. Непатогенные нейссерии обитают на слизистых оболочках человека и животных, являясь представителями нормальной микрофлоры слизистой оболочки ротовой полости, верхних дыхательных путей и мочеполового тракта (N. sicca, N. flavescens, N. perflava, N. mucosa, N. lactamica). Условно патогенные нейссерии являются этиологическими агентами отитов, синуситов и других гнойновоспалительных заболеваний у иммунокомпромиссных лиц. Морфологические и тинкториальные свойства Нейссерии представляют собой грамотрицательные кокки диаметром 0,6-10 мкм, неподвижные, жгутиков не имеют, спор не образуют. Отличительной особенностью нейссерий является то, что клетки располагаются попарно (диплококки), а обращенные друг к другу поверхности ровные или вогнутые, то есть имеют вид кофейных зерен или бобов. Отношение к окраске по Граму выражено недостаточно четко, поэтому в мазках наблюдается неравномерное окрашивание — молодые клетки окрашиваются интенсивно, а отмирающие и мертвые клетки — очень слабо. Среди нейссерий встречаются короткие (0,5 мкм) палочки (диплобациллы), располагающиеся в цепочках (Neisseria elongate). Некоторые виды нейссерий имеют капсулу и микроворсинки - пили. Менингококки по Граму окрашиваются в красный цвет, имеют округлую форму диаметром 0,6-1,0 мкм. Гонококки представляют собой неподвижные диплококки размером 1,25÷1,0x0,7÷0,8 мкм. У гонококков отмечается полиморфизм – в препаратах встречаются мелкие или крупные кокки, а также палочковидные формы. Хорошо окрашиваются анилиновыми красителями (метиленовым синим, бриллиантовым зеленым и др.). По Граму окрашиваются в розовый цвет, то есть являются грамотрицательными. Под действием пенициллина гонококки способны образовывать L-формы: округлые образования, превышающие в несколько раз в диаметре исходные клетки. Культуральные свойства Нейссерии являются аэробами. Оптимальная температура роста 35-37°С, патогенные виды могут расти в интервале температур 24-41°С, а непатогенные виды способны к росту при температура ниже 24°С. Оптимум рН 6-8. Патогенные виды прихотливы к условиям культивирования, не растут на обычных питательных средах; непатогенные виды менее прихотливы. Для выращивания патогенных нейссерий используют среды с кровью, сывороткой крови, многочисленными факторами роста (сывороточный агар, кровяной агар, шоколадный агар, среда Мак-Конки и др.). Высокие ростовые качества агара Мак-Конки обеспечивают входящие в его состав пептоновая смесь и желатин, богатые питательными элементами: азотом, витаминами и минеральными солями. Культивирование проводят в атмосфере углекислого газа (5-7%). На плотных питательных средах через 24 часа нейссерии образуют нежные выпуклые круглые колонии с ровными краями. Виды, обитающие на слизистых оболочках верхних дыхательных путей, образуют желтый пигмент. Повышенная концентрация С02 и влажность стимулируют рост менингококков. Менингококки являются строгими аэробами и капнофилами. Они очень требовательны к условиям культивирования и хорошо растут в присутствии 5-7% углекислого газа. Оптимальное значение рН среды составляет 7,2-7,4. На сывороточном агаре образует круглые бесцветные нежные колонии маслянистой консистенции диаметром от 0,5 до 1,5 мм. • В отличие от условно-патогенных нейссерий, не образует пигмента. На кровяном агаре образует нежные округлые колонии слегка сероватого цвета с блестящей поверхностью. Не дает гемолиза, что отличает его колонии от колоний стафилококков, стрептококков и гемофилов. При первичном посеве очень требователен к условиям культивирования, • отсутствие роста на бессывороточном агаре при 37 °С, на сывороточном агаре при 20 °С и среде с 5 % желчи дифференцируют менингококки от условно-патогенных нейссерий. На шоколадном агаре менингококки растут в виде нежных полупрозрачных сероватых колоний с ровными краями, блестящей поверхностью, маслянистой консистенции размером 1-2 мм. На 0,1% полужидком сывороточном агаре менингококк вызывает интенсивное помутнение в верхней части столбика среды. В сывороточном бульоне менингококки вызывают гомогенное помутнение ближе к поверхности среды. Гонококки требовательны к питательным средам. Для их выращивания используют среды, содержащие кровь, сыворотку крови или асцитическую жидкость. На плотных питательных средах через 24 часа гонококки образуют слегка мутные или прозрачные бесцветные колонии круглой формы с ровными краями диаметром 1-3 мм, На средах с кровью гемолиза не вызывают. В жидких питательных средах гонококки растут диффузно и образуют поверхностную пленку, через несколько дней оседающую на дно. Биохимические свойства Ферментативная активность нейссерий низкая. Они продуцируют каталазу (за исключением Neisseria elongata) и цитохромоксидазу, ферментируют углеводы с образованием кислоты. Некоторые виды на среде с сахарозой образуют 7 полисахарид. Многие виды нейссерий редуцируют нитриты, некоторые восстанавливают нитраты. Биохимическая активность менингококков низкая. Они разлагают глюкозу и мальтозу до кислоты без газа, не разжижают желатин, не образуют индол и сероводород, не восстанавливают нитраты. На среде с сахарозой не образуют полисахарид, что отличает менингококки от условно-патогенных нейссерий. Биохимическая активность гонококков крайне низкая. Они разлагают только глюкозу с образованием кислоты без газа, продуцируют каталазу и цитохромоксидазу. Протеолитическая активность отсутствует, аммиака, сероводорода и индола не образуют. Антигенная структура Все виды нейссерий имеют полисахаридный соматический О-антиген. Штаммы, образующие капсулу, также имеют капсульный антиген. В клеточной мембране патогенных нейссерий содержится нейссериальный поверхностный белок А (NspA). По капсульным полисахаридным антигенам менингококки делят на основные серогруппы А, В, С, D и дополнительные X, Y, Z, W-135, 129 и др. (более 13 серогрупп). По антигенам белков наружной мембраны и липополисахарида клеточной стенки менингококки разделяются на серовары, или серотипы 1, 2, 3 … 20. • Наиболее частыми возбудителями менингококковой инфекции являются представители серогрупп А, В, С, X, Y и W135. В клеточной мембране менингококков содержится нейссериальный видоспецифический поверхностный белок А (NspA) и поверхностные типоспецифические белки Р (классы Р1 - PorA, Р2 и Р3 - PorB, Р4 - Rmp и Р5 – Opa и Орс). Часть этих белков выполняет функцию поринов. Белки наружной мембраны класса Р5 (Ора и Орс) называются белками мутности колоний. Штаммы, имеющие эти белки, формируют мутные колонии. На основании типоспецифических белков вид N. meningitidis делят на серотипы (по PorB-белку выделяют 20 серотипов). В свою очередь, по составу субтиповых белков класса Р1 (по PorA-белку) серотипы подразделяются на 10 субтипов. Одни и те же типовые и субтиповые белки встречаются у менингококков разных серогрупп. Таким образом, антигенный состав каждого штамма включает капсульный групповой полисахарид, типовой белок и субтиповой белок. В практической работе изучение антигенной структуры штаммов ограничивается определением серогруппы, реже – серотипа и субтипа. Липополисахариды клеточной стенки N. meningitidis в антигенном отношении неоднородны, в результате чего менингококки подразделяются на иммунотипы (L1, L2, L3 и т. д.). Пили, находящиеся на поверхности клеток, содержат разнообразные 12 белковые антигены. Под влиянием факторов внешней среды, в результате мутаций и рекомбинаций у менингококков происходит возникновение новых генетических клонов, содержащих разный набор поверхностных антигенов. Это позволяет менингококкам “ускользать” от действия антител, образующихся в организме в ответ на циркуляцию среди населения предшествующего штамма. Гонококки содержат следующие антигены: - соматический антиген; - капсульный антиген; - липоолигосахарид (ЛОС); - антигены пилей; - белки наружной мембраны. Среди антигенов гонококков основная роль принадлежит антигенам пилей и белкам наружной мембраны. Пили состоят из белковых субъединиц, остатков сахаров и фосфорной кислоты. Последовательность соединения белковых субъединиц пилей может меняться, в результате чего изменяются антигенные свойства клеток. Наружная мембрана содержит протеины разных классов. Эти протеины проявляют сильные иммуногенные свойства. По составу протеинов наружной мембраны выделяют несколько серотипов гонококков. Антитела к протеинам клеточной стенки в присутствии комплемента проявляют бактерицидные свойства. Факторы патогенности Основной фактор патогенности — капсула, защищающая менингококки от различных воздействий, в первую очередь от фагоцитоза. – AT, образующиеся к полисахаридам капсулы, проявляют бактерицидные свойства. Токсические проявления менингококковой инфекции обусловлены высокотоксичным эндотоксином. Для генерализованных форм менингококковой инфекции характерны кожные высыпания, ЛПС менингококков проявляют выраженное пирогенное действие, а также вызывают образование AT. Тяжесть болезни определяется количеством эндотоксина в крови больного. Эндотоксину принадлежит ведущая роль в патогенезе поражений сосудов и кровоизлияний во внутренние органы. Пили являются фактором адгезии к слизистой оболочке носоглотки и, предположительно, тканям мозговой оболочки. Гиалуронидаза и нейраминидаза способствуют распространению возбудителя по организму. Протеаза (IgA-протеаза) расщепляет иммуноглобулин А в шарнирной области, защищая бактерии от действия антител. Факторы патогенности гонококков: - капсула; - пили (фимбрии); - липоолигосахарид (ЛОС); - поверхностные белки наружной мембраны; - трансфериновые рецепторы TbrA и TbrB; - IgA-протеаза; - рибосомальный белок. Все свежевыделенные культуры имеют капсулу, которая состоит из полифосфатов. Капсула препятствует фагоцитозу и маскирует антигены клеточной стенки. Пили состоят из белка пилина и обеспечивают адгезию гонококка к эпителию. Изменение структуры пилина приводит к изменению антигенного состава фимбрий. Вариабельность строения пилей способствует выживаемости гонококков на эпителиальных клетках при смене хозяина и воздействии антител. Клетки, не имеющие пилей, заболевания не вызывают. Утрата гонококками пилей называется сменой фаз роста. Смена фаз роста позволяет гонококкам отрываться от эпителиальных клеток и разноситься по организму. Входными воротами для возбудителя гонококковой инфекции служит цилиндрический эпителий уретры, шейки матки, конъюнктивы и дистального отдела прямой кишки. На слизистой оболочке гонококки с помощью пилей закрепляются на поверхности эпителиальных клеток. В месте входных ворот посредством IgA-протеазы и поверхностных белков возбудитель подавляет защитные факторы организма и размножается, колонизируя эпителий Эпидемиология, источник, механизмы заражения Источником инфекции при менингококковой инфекции 13 являются больные генерализованными формами (около 1% от общего числа инфицированных лиц), больные назофарингитом (10-20% от общего числа инфицированных лиц) и здоровые носители (80-90% от числа инфицированных). Бактерионосительство у детей 1-2 лет встречается редко, максимальное количество носителей отмечается в возрасте 14-19 лет. Чаще всего носительство продолжается в течение 2-3 недель. Механизм передачи - аэрогенный, путь передачи - воздушнокапельный. При менингококковом менингите отмечается осенне-зимняя сезонность заболеваемости. Болеют в основном дети до 15 лет (70-80%) и лица юношеского возраста (10- 15%). Возникновению вспышек способствует скученность детей в детских организованных коллективах, учащихся в школах, студентов. Уровень заболеваемости зависит от распространенности носительства менингококка: заболевания не регистрируются в коллективах, где носительство составляет 20% и выше. В этих случаях интенсивная циркуляция менингококка обеспечивает “естественную иммунизацию” населения. В настоящее время менингококковая инфекция зарегистрирована более чем в 150 странах мира, в том числе в России. В Африке имеется зона высокой заболеваемости менингококковой инфекцией (“менингитный пояс”). Эта зона располагается к югу от пустыни Сахара и распространяется от Эфиопии на востоке до Гамбии на западе. Она включает 15 стран и более 260 млн. человек. Эпидемии менингококкового менингита происходят в этих странах через каждые 7-14 лет. В этой зоне регистрируются высокие показатели заболеваемости менингококковой инфекцией. Так, за эпидемический сезон 2009 г. в 14 странах было зарегистрировано 88199 случаев заболевания, из которых 5352 случая закончились летальным исходом. Заболеваемость менингококковой инфекцией в Российской Федерации за 1998-2002 годы составила 2,7 на 100 тыс. населения, в 2003 г. показатель заболеваемости составил 3,01 на 100 тыс. населения. За 2007-2009 гг. число генерализованных форм менингококковой инфекции по Российской Федерации снизилось с 2246 случаев (1,58 на 100 тыс. населения) до 1795 случаев (1,26 на 100 тыс. населения), а число летальных исходов – с 293 до 239 случаев. Патогенез менингококковой инфекции включает несколько этапов. На 14 первом этапе менингококки, проникнув в организм человека с вдыхаемым воздухом, попадает на слизистую оболочку верхних дыхательных путей. С помощью нейраминидазы возбудитель преодолевает слой вязкой слизи, с помощью IgA-протеазы разрушает секреторный иммуноглобулин А и колонизируют слизистую оболочку носоглотки. Колонизации носоглотки способствует связывание менингококковых пилей с рецепторами CD46 эпителиоцитов. В этот период бактерии не вызывают выраженных морфологических изменений в месте проникновения, поэтому процесс условно называют “здоровым” носительством. В большинстве случаев колонизация длится от 1 недели до 1 месяца и прекращается благодаря действию защитных сил организма. Бактерионосительство вызывают менингококки, не имеющие капсулы. Примерно у 30-50% бактерионосителей инфекционный процесс переходит в следующий этап. В этом случае бескапсульные менингококки с помощью поверхностных белков Ора и Орс прикрепляется к мембране эпителиальных клеток и внедряется в них путем инвагинации. Те менингококки, которые сохранили капсулу, проникают в эпителиальные клетки путем “непрофессионального” фагоцитоза (поглощение бактерий эпителиальной клеткой). Проникшие в эпителиальные клетки менингококки с помощью липополисахарида стимулируют выброс цитокинов, которые вызывают воспаление слизистой оболочки. Поглощенные менингококки проникают в дальнейшем в субэпителиальный слой. В месте входных ворот (в носоглотке) развивается катаральное воспаление. При этом в кровь проникает эндотоксин, обусловливая интоксикацию организма, которая длится в течение 3-7 дней. Это состояние называется острым менингококковым назофарингитом. У лиц, не имеющих специфической иммунной защиты и с низким уровнем общей резистентности, менингококки вызывают развитие генерализованной формы инфекции - септицемию. Это наблюдается примерно в одном случае на несколько тысяч случаев носительства. Генерализованную инфекцию вызывают капсульные клетки, имеющие пили. Проникшие в подслизистую оболочку менингококки поглощаются фагоцитами (но не переваривается в них) и с их помощью распространяются по организму. В кровяном русле часть клеток погибает, а другие начинают усиленно размножаться. В результате гибели клеток в кровоток поступает эндотоксин (эндотоксинемия), а быстрое размножение возбудителя приводит к бактериемии. При бактериемии происходит гематогенная диссеминация менингококков в различные органы и системы. В местах оседания возбудителя формируются очаги гнойного воспаления. Развивается сепсис, известный как менингококцемия (менингококкемия). Эндотоксин возбудителя угнетает фагоцитарную активность нейтрофилов, усиливает свертывание крови, активирует систему комплемента и образование цитокинов (α-ФНО, ИЛ-1, ИЛ-6, ИЛ-8, ИЛ-10). Эндотоксинемия приводит к незавершенности фагоцитоза, вазодилатации, тромбообразованию в мелких капиллярах, множественным кровоизлияниям в слизистых оболочках, коже и внутренних органах. При резком нарушении свертывающей системы крови вначале увеличивается содержание фибриногена, затем происходит выпадение фибрина в мелких сосудах с образованием тромбов. Снижение содержания фибриногена в крови является причиной кровотечений и кровоизлияний в различные органы и ткани. 15 Попав в головной мозг, менингококки с помощью пилей прикрепляются к эндотелию сосудов мягкой и паутинной оболочек, а с помощью белка Орс проходит сквозь эндотелий. Так происходит преодоление менингококком гематоэнцефалического барьера. Проникновение возбудителя из крови в ЦНС вызывает воспаление мозговых оболочек. Характер воспаления вначале серозный, а затем - гнойный (гнойный менингит). В субарахноидальном пространстве менингококки размножаются. Воспалительный процесс вызывает чрезмерное образование спинномозговой жидкости, приводящее к внутричерепной гипертензии и отеку головного мозга. В патогенезе генерализованной менингококковой инфекции кроме бактериемии и интоксикации большую роль играет развитие гиперчувствительности замедленного типа, что выражается накоплением циркулирующих иммунных комплексов, которые обусловливают клиническую картину миокардита, перикардита, артрита. Гонорея относится к наиболее распространенным инфекционным заболеваниям, передаваемым половым путем. В мире ежегодно более 60 млн. человек заболевают этой инфекцией. В 2005 г. в Российской Федерации было зарегистрировано 99911 случаев гонококковой инфекции, в 2008 г. – 80100 случаев. Источником инфекции при гонорее является больной человек, особенно с хронической бессимптомно протекающей формой болезни. Механизм передачи возбудителя - контактный, путь передачи - половой. Восприимчивость к гонококкам очень высокая. Вызываемые заболевания Менингококковая инфекция клинически протекает в виде первично-локализованных форм (менингококконосительство, острый назофарингит) или в виде генерализованных форм (менингококцемия или менингококковый сепсис, менингококковый менингит, менингоэнцефалит). При генерализованных формах возможно развитие эндокардита, артрита, полиартрита, иридоциклита, пневмонии. Менингококковый назофарингит проявляется повышением температуры до 38ОС, насморком, болью в горле, головной болью. При этом кожа остается бледной и сухой. При менингококцемии температура повышается до 39-40ОС, наблюдаются озноб, боли в мышцах и суставах. Характерным симптомом менингококцемии является сыпь, которая начинается с образования розовых пятен размером 2-10 мм. Чаще всего эти пятна локализуются на ягодицах, туловище, ногах. В последующем розовые пятна превращаются в багровые пятна неправильной (звездчатой) формы, не выступающие над поверхностью кожи. Выражен полиморфизм сыпи – от едва заметных петехий диаметром 2-3 мм до крупных кровоизлияний диаметром 2-5 см. Отличие геморрагической сыпи при менингококковой инфекции от других высыпаний заключается в том, что она не изменяет свою окраску при надавливании. Для проверки этого признака проводится тест с помощью стакана: элементы сыпи не бледнеют и остаются заметными при прижатии боковой поверхности стакана к коже. Эпидемический цереброспинальный менингит начинается после 5-7- дневного инкубационного периода. В начале болезни отмечаются сильная головная боль, рвота, высокая лихорадка. Затем развивается оболочечный симптомокомплекс (менингеальный синдром), состоящий из общемозговых и менингеальных симптомов. Общемозговыми симптомами являются головная боль распирающего характера, обильная рвота, судороги, возбуждение. К менингеальным симптомам относятся симптом контрактуры коленных суставов В.М. Кернига, оболочечный скуловой симптом В.М. Бехтерева, 4 симптома Ю. Брудзинского и др. Больной находится в характерной позе: затылочные мышцы напряжены, голова запрокинута назад, спина выгнута, живот втянут, ноги согнуты и приведены к животу. Длительность менингококкового менингита составляет в среднем 2-6 недель. Инкубационный период заражения гонококковой инфекции составляет от 12 часов до 7 суток (в среднем 3 суток). У женщин и у 10% мужчин гонококковая инфекция протекает бессимптомно. Гонококковая инфекция проявляется в виде гнойного воспаления слизистой мочеполовых путей (гонорея), конъюнктивы глаз (бленнорея) и других органов. Гонококковый уретрит (воспаление слизистой мочеиспускательного канала) – самое частое проявление гонореи у мужчин. При этом отмечается острое начало заболевания с обильными гнойными выделениями из уретры, резью и болью при мочеиспускании. У женщин гонорея проявляется гонококковым цервицитом - поражением шейки матки и эндоцервикального канала. Практически всегда гонококковый цервицит протекает бессимптомно. В редких случаях отмечаются жалобы на появление скудных выделений из влагалища и боль внизу живота. Бессимптомное течение приводит к раннему развитию осложнений гонококковой инфекции. Гонококковый конъюнктивит или бленнорея взрослых сопровождается резкой болезненностью, слезотечением, припухлостью век, светобоязнью, появлением обильного гнойного отделяемого. Чаще поражается один глаз. Гонококковая инфекция имеет тенденцию к переходу в хроническую бессимптомную форму. Нелеченая гонорея является одной из основных причин бесплодия как у мужчин, так и у женщин. Диссеминированная гонококковая инфекция возникает при гонококковой бактериемии. Диссеминация проявляется петехиальными или пустулезными высыпаниями на коже, артралгией, артритом, эндокардитом, менингитом. Особое значение имеет гонорея новорожденных. До 50% новорожденных заражается гонореей от больной матери при прохождении через родовые пути. В этом случае развивается офтальмия новорожденных (бленнорея, гонобленнорея, 30 неонатальная гонококковая инфекция). Офтальмия (бленнорея) новорожденных обнаруживается у ребенка на 2-3 день после родов. Вначале она проявляется водянистыми желтоватыми выделениями из глаз. Через сутки отмечается сильная отечность и покраснение век, а выделения становятся мутными. Еще через 4-5 дней краснота век уменьшается, выделения приобретают гнойный характер. В этот период в процесс может вовлекаться роговая оболочка с образованием язв, на месте которых формируются рубцы. Нелеченая бленнорея новорожденных ведет к слепоте. Методы микробиологической диагностики Для лабораторной диагностики менингококковой инфекции в зависимости от формы заболевания отбирают носоглоточную слизь (от больных и носителей), ликвор, кровь, гной с мозговых оболочек, соскоб из элементов геморрагической сыпи на коже и др. Носоглоточную слизь берут специальным тампоном, изогнутым под углом, с задней стенки глотки при визуальном контроле, вводя тампон за мягкое нёбо. После отбора слизь засевают на сывороточный агар непосредственно у постели больного или тампон помещают в транспортную среду для доставки в лабораторию. При цереброспинальном менингите основным исследуемым материалом является ликвор, который берут в день госпитализации больного в количестве 2-5 мл. Спинномозговую жидкость собирают в стерильную пробирку и сразу же высевают на питательные среды или же немедленно, не допуская охлаждения, отправляют в лабораторию. При гнойном менингите ликвор мутный. Кровь отбирают из вены до начала антибиотикотерапии и используют для микроскопического исследования, бактериологического посева и постановки серологических реакций. От трупа исследуемый материал (гной с оболочек мозга, из кожных поражений и т. п.) берут во время вскрытия. Отобранный для исследования материал транспортируют в лабораторию в специальных контейнерах, позволяющих поддерживать температуру 37°С. При лабораторной диагностике менингококковой инфекции применяют бактериоскопический, бактериологический и серологический методы. Бактериоскопический метод. Носоглоточная слизь микроскопически не исследуется, так как в ней присутствуют условно-патогенные нейссерии, морфологически сходные с менингококками. Ликвор центрифугируют при 3500 об/мин в течение 5 минут, а затем из осадка готовят мазки, которые окрашивают по Граму в модификации Калины (использование спиртового раствора бриллиантовой зелени перед фиксированием препарата) или водно-спиртовым раствором метиленового синего. Микроскопируют с иммерсией под большим увеличением. Выявление в мазках грамотрицательных диплококков бобовидной формы, окруженных капсулой, позволяет предположить менингококковую природу заболевания. Для микроскопического исследования крови готовят препарат “толстой капли”, который высушивают и окрашивают водно-спиртовым раствором метиленового синего без предварительной фиксации. При микроскопии с иммерсией выявляются бактерии типичной морфологии, окруженные капсулой в виде бесцветного ореола. Трупный материал исследуют только бактериоскопическим методом из-за низкой жизнеспособности менингококка. Бактериологическое исследование проводят с целью выделения и идентификации чистой культуры менингококка. По возможности посев материала производят у постели больного. Бактериологическому исследованию подвергают носоглоточную слизь, кровь и ликвор. Посев материала для получения чистой культуры производят на плотные или полужидкие питательные среды, содержащие сыворотку крови, кровь или асцитическую жидкость. Культуры инкубируют в течение 18-24 часов при 37°С в атмосфере углекислого газа (8-10%). Идентификацию выделенной культуры проводят на основании следующих свойств: - продукция оксидазы; - ферментация глюкозы и мальтозы до кислоты; - принадлежность к серогруппам в реакции агглютинации. Серологические методы используют для обнаружения в исследуемых материалах бактериальных антигенов или антител в сыворотке крови. Для обнаружения антигенов применяют реакцию латекс-агглютинации, встречный иммуноэлектрофорез (ВИЭФ), реакцию непрямой гемагглютинации (РНГА) и другие методы. Наиболее простым является метод латекс-агглютинации, позволяющий в течение 15 минут установить наличие или отсутствие в СМЖ специфических антигенов. Для выполнения этой реакции используют наборы латексдиагностических препаратов. ВИЭФ является экспресс-методом, так как позволяет с помощью специфических антисывороток выявлять полисахаридный антиген возбудителя в СМЖ и в сыворотке крови больного. РНГА является дополнительным методом лабораторного подтверждения генерализованной менингококковой инфекции и позволяет выявлять специфические антитела. Для получения достоверного результата исследуют парные сыворотки крови, полученные в динамике (в первые сутки заболевания и на 10-12 день). У больных менингококковой инфекцией антитела обнаруживаются с конца первой недели болезни, достигая максимума на 2-3-й неделе, а затем их титр снижается. В разгар менингококковой инфекции повышается уровень IgМ, особенно при генерализованных формах; в период реконвалесценции, в основном, обнаруживаются IgG. Материал для микробиологического исследования При менингококковой инфекции отбирают носоглоточную слизь, ликвор, кровь, гной с мозговых оболочек, соскоб из элементов геморрагической сыпи на коже и др. При гонококковых инфекциях - методом ПЦР можно исследовать мочу. Этот метод не рекомендован для исследования материала из ротоглотки и прямой кишки в связи с возможностью перекрестных реакций с другими нейссериями. Специфическая профилактика и специфическое лечение инфекционного заболевания Для лечения менингококковой инфекции используют антибиотики. Наиболее эффективными являются бензилпенициллин и полусинтетические пенициллины (ампициллин, оксациллин). Используют также левомицетин и рифампицин. Антимикробную терапию сочетают с симптоматическими средствами, корригирующими водно-солевой и кислотно-щелочной баланс, с седативными средствами и глюкокортикоидами. Для предотвращения отека головного мозга назначают диуретики. Профилактика менингококковой инфекции заключается в выполнении следующих мероприятий: - изолирование и лечение больного (источника инфекции); - выявление и санирование бактерионосителей; - разобщение детских коллективов, общежитий; - проведение текущей дезинфекции в очаге инфекции; - проведение специфической профилактики в очаге инфекции. Выявление носителей в окружении больного проводится бактериологическим исследованием носоглоточной слизи. Выявленных носителей санируют антибиотиками. Для создания пассивного иммунитета детям дошкольного возраста вводят однократно иммуноглобулин в дозе 1,5-3,0 мл не позднее 7-го дня после регистрации первого случая заболевания. Профилактический эффект иммуноглобулина сохраняется в течение нескольких месяцев после введения. Для активной иммунизации используют вакцины из очищенных капсульных полисахаридов менингококков серогрупп А и С. В России проводят вакцинацию групп риска менингококковой вакциной серогрупп А и С (бивакцина) или вакциной группы А. В случае возникновения хотя бы одного случая менингококковой инфекции в замкнутом коллективе возможно проведение химиопрофилактики с применением антибиотиков (экстренная антибиотикопрофилактика). Лечение гонококковой инфекции зависит от формы заболевания. При острой и подострой гонорее применяют антибиотики группы пенициллина. При непереносимости пенициллина используются другие антибиотики. Через 5-7 дней антибиотикотерапии воспалительные явления уменьшаются, выделения становятся скудными, гонококки в них не обнаруживаются. По истечении 7-10 дней определяют излеченность заболевания. При хронической гонорее применяют специфическую (гоновакцина) или неспецифическую (пирогенал) иммунотерапию и местное воздействие на пораженный орган. После такого воздействия в стационарных условиях проводят курс антибиотикотерапии повышенными дозами антибиотиков. Для контроля излеченности прибегают к провокации химическим, механическим, алиментарным или термическим методом. После провокации через 24, 48 и 72 часа исследуют выделения. При отсутствии после провокации гонококков в мазках и посевах больного оставляют для диспансерного наблюдения. Через месяц повторяют провокацию и делают уретроскопию. Если в течение этого срока возбудитель и клинические проявления болезни отсутствуют, то таких лиц снимают с диспансерного учета. В настоящее время в России в соответствии со стандартом медицинской помощи больным гонококковой инфекцией методы провокации не используются. Поэтому контроль излеченности проводят через 2 и 14 дней после окончания лечения. Профилактика гонококковой инфекции включает следующие мероприятия: - активное выявление и лечение больных и их половых партнеров с последующим контролем на излеченность; - обязательное обследование декретированных групп населения (работники детских дошкольных учреждений и общепита) перед поступлением на работу и в последующем через каждые три месяца; - обязательная первичная обработка новорожденного (закапывание в конъюнктивальную полость обоих глаз по одной капле 2% раствора азотнокислого серебра или сульфацила натрия) для профилактики бленнореи. Основное внимание в профилактике гонококковой инфекции принадлежит санитарно-просветительной работе, направленной на пропаганду здорового образа жизни и исключение случайных половых связей. Заключение Основными представителями этого рода Neisseria являются возбудители менингококковой инфекции и гонореи. В этот род включены также непатогенные представители, встречающиеся в полости рта, носоглотки, верхних дыхательных путей. Как правило, это парнорасположенные кокки, но могут образовывать и скопления. Менингококки хорошо растут на питательных средах с добавлением крови, молока или яичного желтка. В качестве источника углерода и азота менингококки используют аминокислоты — аспарагин, глутамин, глицин, поэтому их включают в среду культивирования. Элективная среда должна содержать ристомицин. Повышенная концентрация углерода стимулирует рост менингококков. Основной источник менингококковой инфекции — больной человек или бактерионоситель. Возбудитель передается воздушно-капельным путем. Инкубационный период менингита — 2—7 дней. Менингит начинается остро. Отмечаются высокая температура, рвота, судороги, очень сильная головная боль, при которой даже больно моргнуть или просто повернуть голову. Заболевание длится несколько недель. Иногда развивается менингококковый сепсис. Гонореей болеет только человек. Животные невосприимчивы к этой инфекции, в отличие от человека. Единственный источник инфекции — больной человек. Основной путь передачи — половой, возможно инфицирование плода при прохождении через родовые пути матери. Таким путем гонококки могут попасть в конъюнкти-вальный мешок глаза новорожденного и вызвать там воспаление (бленнорея). Возможно также заражение гонококком через кровь, взятой у инфицированных лиц на раннем этапе заболевания (что случается крайне редко). Список использованной литературы: Иванова И.Ф. «Аэробные Гр - кокки и коккобактерии - семейство Neisseriaceae», 2015 Литусов Н.В. Нейссерии. Иллюстрированное учебное пособие. – Екатеринбург: Изд-во УГМА, 2016 [Электронный ресурс] https://med-books.info/virusologiya_724/rod-neisseria.html |