тезисы. Тезисы работ по секции Химия
 Скачать 142.15 Kb.
|
Структуры капсульных полисахаридов Klebsiellapneumoniae03 и Klebsiellapneumoniae 05 (Химия)Касимова Анастасия Алексеевна, 11 класс, ГБОУ лицей № 1303 (Москва) Научный руководитель:Шпирт Анна Михайловна, Институт Органической химии им. Н. Д. Зелинского (Москва) Постановка задачи:Klebsiellapneumoniae вызывает целый ряд опасных заболеваний у детей и пациентов с ослабленной иммунной системой. Особенностями бактериальной культуры Klebsiellapneumoniaeявляются наличие капсульного полисахарида (КПС), участвующего в образовании пленки биофильма и являющегося защитой против фагоцитов, а так же высокая устойчивость к действию антибиотиков. В настоящее время актуальным становится вопрос поиска альтернативных способов борьбы с данными клиническими штаммами бактерий, включая фаготерапию, основанную на инфицировании бактериальных клеток бактериофагами и их последующем лизисе. Данная работа посвящена изучению строения капсульных полисахаридов и изучению продуктов их расщепления под действием фаговойдеполимеразы. Методы, использованные автором:первой стадией работы было изучение строения капсульных полисахаридов Klebsiellapneumoniae 03 и Klebsiellapneumoniae 05. Капсульные полисахариды выделялись из сухих бактериальных клеток водно-фенольной экстракцией [1] по классической методике. Выход капсульного полисахарида Klebsiellapneumoniae 03 составил 27,5%,Klebsiellapneumoniae05 – 10,7%. Основным подходом к структурному анализу полисахаридов была комбинация спектроскопии ЯМР на ядрах 1H и 13C, метода масс- спектрометрии и химических методов анализа. Основные результаты: строение капсульного полисахарида Klebsiellapneumoniae 03 совпало с известным в литературе [4] и имеет следующую структуру: →3)-β-D-Galf-(1→3)-α-D-Galp(1→ Далее был проведен метод сахарного анализа [2]: полный кислотный гидролиз полисахарида 2М CF3COOH при 120Сс последующей конверсией высвободившихся моносахаридов в ацетаты полиоловборгидридным восстановлением и ацетилированием при помощи раствора (CH3CO)2O в пиридине, подтвердивший наличие в полисахариде Klebsiellapneumoniae 05 галактозы (Gal) и маннозы (Man). Абсолютные конфигурации Man и Gal в полисахариде были подтверждены методом ГЖХ ацетилированных (S)-октил гликозидов [3]. Дополнительное подтверждение структуры Klebsiellapneumoniae05 было получено путем селективного расщепления полисахарида распадом по Смиту и метилированием. Заключение и возможные пути развития задачи:на основании данных результатов можно сделать следующие выводы: установлена структура нового капсульного полисахарида бактерии Klebsiellapneumonia 05, изучены продукты расщепления КПС Klebsiellapneumoniae 05 рекомбинантной хвостатой деполимеразой бактериофага K40. Список основной использованной литературыWestphal O.,Jann K. Methods Carbohydr. Chem. 1965, 5, 83-91. Sawardeker J.S., Sloneker J.N., Jeanes A. Anal. Chem.1965, 37, 1602-1603. Leontein K., Lonngren J. Methods Carbohydr. Chem. 1993, 9, 87-89. Vinogradov E, Frirdich E, MacLean LL, Perry MB, Petersen BO, Duus JO, Whitfield C. J. Biol. Chem. 277:2002, 25070-25081. |