Учение об инфекции. Факторы патогенности бактерий. Роль микроорганизма, внешней среды и социальных условий в развитии инфекции. Формы инфекции
 Скачать 0.88 Mb.
|
|
О СЛОЖНЕНИЯ СЕРОТЕРАПИИ Анафилактический шок - может развиться сразу после введения гетерологической сыворотки или гамма-глобулина. Сывороточная болезнь - может развиться спустя 5-12 суток после введения препарата, и длится 6-12 дней, как правило, с благоприятным исходом. У больного наблюдается лихорадка, отек слизистых, лимфаденит, пятнисто-папулезная сыпь, зуд, возможен радикулит, неврит, синовит. В последнее время сывороточная болезнь встречается довольно редко, что связано с использованием высокоочищенных сывороток. Во избежание вышеуказанных осложнений, необходимо придерживаться следующих обязательных правил перед использованием гетерологических сывороток и гамма-глобулинов: • Сыворотка вводится внутримышечно в ягодицу или область верхней трети передненаружной поверхности бедра. • Перед первым введением сыворотки в обязательном порядке ставится кожная проба с сывороткой, разведенной в соотношении 1:100 (красная маркировка ампулы), объемом 0,1 мл, которая вводится внутрикожно в сгибательную поверхность предплечья. • Через 20 минут смотрится реакция организма на пробу, которая считается отрицательной в случае, если диаметр отека в месте введения не превышает 1 см. • В случае отрицательной пробы, сыворотку (синяя маркировка ампулы) вводят подкожно в область средней трети плеча в объеме 0,1 мл. При отсутствии местной (общей) реакции через 45 минут вводится внутримышечно назначенная доза сыворотки, предварительно подогретая до 36°C. • Максимальный объем сыворотки, вводимой в одно место, не должен превышать 10 мл. • Больной, получивший сыворотку, должен находиться под наблюдением врача не менее1 часа. • В случае положительной пробы, или в случае развития реакции на подкожное введение 0,1 мл сыворотки, препарат применяют только по жизненным показаниям. При развитии анафилактического шока введение сыворотки проводится под наркозом. 5.Понятия о календаре прививок. Побочное действие вакцин. Календарь прививок смотри в методе стр 71( под редакцией В.А. Романова 2003) Побочные действия вакцин Абсолютно безопасных вакцин не существует. Все они способны оказывать побочное действие на любую из функций органов и систем организма. Были случаи, когда отказываться от применения определенных вакцин приходилось именно в связи с ярко выраженными побочными реакциями. Так давайте разберемся, какие же они все-таки бывают. В связи с иммунизацией могут возникнуть такие типы побочных реакций: ▪ вызванные вакциной; ▪ спровоцированные вакцинацией; ▪ связанные с ошибками, допущенными при вакцинации; ▪ случайное совпадение с вакцинацией. Итак, способность вакцины вызывать морфологические и функциональные изменения в организме, которые не связанные с формированием иммунитета и называются побочным действием. Оно может обуславливаться содержащимися в вакцине примесями или ее антигенами. В большинстве своем побочное действие вакцин проявляется через недомогание, незначительное повышение температуры, не особо выраженные местные реакции. Зачастую такие состояния проходят без надобности врачебного вмешательства. Параллельно с развитием иммунитета после прививки имеют место быть изменения характера неспецифического. Они касаются белкового состава и свертывающей системы крови, ферментной активности, функции надпочечников и остальных эндокринных органов. Такие изменения патологического характера, как правило, не носят. Их продолжительность – от нескольких дней до нескольких недель (в редких случаях до 2 месяцев). 6.Понятия об аллергии. Классификация аллергических реакций. Аллергия – это проявление повышенной и качественно измененной иммунологической реактивности (гиперэргия и дизэргия), возникающая в организме при повторном контакте с аллергеном и сопровождающаяся повреждением собственных тканей и/или нарушением функционирования отдельных органов и систем. Аллергены – это вещества, способные вызвать развитие аллергической реакции. Аллергены могут иметь как антигенную, так и неантигенную структуру; чаще это вещества макромолекулярной природы (липополисахариды, белки, гликопротеины и др.). Аллергия может проявиться в ответ на воздействие неполного аллергена (гаптена) после его соединения с веществами эндогенного происхождения. Для возникновения аллергической реакции необходимо, чтобы иммунная система организма воспринимала аллерген в качестве антигена, была сенсибилизирована к данному фактору, т.е. обладала повышенной чувствительностью к нему. Причины возникновения сенсибилизации и механизмы ее формирования до сих пор выяснены не полностью. Аллергены обладают следующими свойствами: 1) способностью индуцировать выработку антител и/или клеточные иммунные реакции; 2) связываться с антителами, образовавшимися в результате иммунного ответа. Аллергены принято классифицировать на экзогенные и эндогенные (аутоаллергены); по способу попадания – ингаляционные, пищевые, контактные, инъекционные, инфекционные, лекарственные. Каждая группа может быть подразделена по природе аллергена и другим принципам. Аллергические реакции протекают по типу классической иммунной реакции, свойственной проявлению гуморального иммунитета, но в отличие от нормального иммунного ответа сопровождаются нарушениями функционального и морфологического характера. Существует несколько классификаций аллергических реакций. В 1930 г была принята классификация, в основу которой положено время проявления реакции после контакта с аллергеном (R. A. Cooke): аллергические реакции немедленного типа (гиперчувствительность немедленного типа, ГНТ) – развиваются в течение 15-30 мин.; аллергические реакции замедленного типа (гиперчувствительность замедленного типа, ГЗТ) – через 24-48 ч. Однако даже при ГНТ нередки отсроченные проявления, возникающие через 4-24 ч. В связи с этим в настоящее время классифицируют аллергические реакции по особенностям механизма развития, т.е. по патогенезу (Gell P., Coombs R., 1968). Названная классификация включает 5 типов аллергических реакций. Несмотря на имеющиеся характерные особенности и существенные различия, все аллергические реакции протекают в три стадии. 7.Аллергический метод диагностики и его практическое применение для диагностики инфекционных болезней. Инфекционные аллергены. Аллергические пробы - биологические реакции для диагностики ряда заболеваний, основанные на повышенной чувствительности организма, вызванной аллергеном. При многих инфекционных заболеваниях за счет активации клеточного иммунитета развивается повышенная чувствительность организма к возбудителям и продуктам их жизнедеятельности. На этом основаны аллергические пробы, используемые для диагно- стики бактериальных, вирусных, протозойных инфекций, микозов и гельминтозов. Аллергические пробы обладают специфичностью, но нередко они бывают положительными у переболевших и привитых. Все аллергические пробы подразделяют на две группы — пробы invivoи invitro. К первой группе (invivo)относятся кожные пробы, осуществляемые непосредственно на пациенте и выявляющие аллергию немедленного (через 20 мин) и замедленного (через 24 — 48 ч) типов. Аллергические пробы invitroоснованы на выявлении сенсибилизации вне организма больного. Их применяют тогда, когда по тем или иным причинам нельзя произвести кожные пробы, либо в тех случаях, когда кожные реакции дают неясные результаты. Для проведения аллергических проб используют аллергены — диагностические препараты, предназначенные для выявления специфической сенсибилизации организма. Инфекционные аллергены, используемые в диагностике инфекционных заболеваний, представляют собой очищенные фильтраты бульонных культур, реже взвеси убитых микроорганизмов или АГ, выделенные из них. Кожные пробы. Инфекционные аллергены вводят, как правило, внутрикожно или накожно, путем втирания в скарифицированные участки кожи. При внутрикожном способе в среднюю треть передней поверхности предплечья специальной тонкой иглой вводят 0,1 мл аллергена. Через 28 — 48 ч оценивают результаты реакции ГЗТ, определяя на месте введения размеры папулы. Неинфекционные аллергены (пыльца растений, бытовая пыль, пищевые продукты, лекарственные и химические препараты) вводят в кожу уколом (прик-тест), накожно путем скарификации и втирания или внутрикожной инъекцией разведенного раствора аллергена. В качестве отрицательного контроля используют ИХН, в качестве положительного — раствор гистамина. Результаты учитывают в течение 20 мин (ГНТ) по величине папулы (иногда до 20 мм в диаметре), наличию отека и зуда. Внутрикожные пробы ставят в случае отрицательного или сомнительного результата прик-теста. По сравнению с последним, дозу аллергена уменьшают в 100-5000 раз. Кожные пробы на наличие ГЗТ широко применяют для выявления инфицированности людей микобактериями туберкулеза (проба Манту), возбудителями бруцеллеза (проба Бюрне), лепры (реакция Митсуды), туляремии, сапа, актиномикоза, дерматомикозов, токсоплазмоза, некоторых гельминтозов и др. Пробы invitro. Эти методы исследования безопасны для больного, достаточно чувствительны, позволяют количественно оценить уровень аллергизации организма. В настоящее время разработаны тесты для определения сенсибилизации, основанные на реакциях Т- и B-лимфоцитов, тканевых базофилов, выявлении общих специфических IgEв сыворотке крови и др. К ним относятся реакции торможения миграции лейкоцитов и бласттрансформации лимфоцитов, специфическое розеткообразование, базофильный тест Шелли, реакция дегрануляции тканевых базофилов, а также аллергосорбентные методы (определение специфических IgEв сыворотке крови). Реакция торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ). РТМЛ основана на подавлении миграции моноцитов и других лейкоцитов под действием медиаторов, вырабатываемых сенсибилизированными лимфоцитами, в присутствии специфического аллергена. Реакция бласттрансформации лимфоцитов (РБТ). В основе этой реакции лежит способность нормальных лимфоцитов периферической крови вступать в митоз и превращаться в бластные формы при культивировании их invitroпод действием специфических факторов — аллергенов и неспецифических стимуляторов митогенеза — митогенов (фитогемагглютинин, конканавалин А, липополисахариды и другие вещества). Реакция специфического розеткообразования. Розетки — характерные образования, возникающие invitroв результате прилипания эритроцитов к поверхности иммунокомпетентных клеток. Розеткообразование может происходить спонтанно, поскольку Т-лимфоциты человека содержат рецепторы к эритроцитам барана. Спон- танное розеткообразование здоровых людей составляет 52 — 53% и служит показателем функционального состояния Т-лимфоцитов. Этот феномен воспроизводится также и в том случае, если используют эритроциты, на которых фиксированы соответствующие аллергены. Реакция дегрануляции тканевых базофилов. Методика основана на том, что под действием аллергена происходит дегрануляция тканевых базофилов крысы, предварительно сенсибилизированных цитофильными AT из сыворотки крови больного. Базофильный тест Шелли. Известно, что базофильные гранулоциты человека или кролика также дегранулируются в присутствии сыворотки больного и аллергена, к которому чувствителен данный пациент. Определение антител класса IgEinvitro. Лабораторная диагностика заболеваний, в основе которых лежит ГНТ, основана на определении аллергенспецифических IgEанти- IgE. При использовании радиоактивной метки метод носит название радиоаллергосорбентного теста (PACT), но чаще в качестве метки используют фермент или флюоресцирующее вещество (ФАСТ). Время анализа — 6 — 7 часов. Принцип метода: фиксированный на твердой основе известный аллерген инкубируют с сывороткой крови больного; находящиеся в сыворотке специфические IgEанти-IgEсвязываются с аллергеном и, таким образом, остаются фиксированными на основе и могут вступать в специфическое взаимодействие с добавляемыми мечеными анти-IgE . 8.Гибридомы. Моноклональные антитела и их применение. Гибридомы В 1975 году была описана методика, позволяющая получать клеточные линии (гибридомы), секретирующие отдельные разновидности антител ( моноклональные антитела ) с желаемой антигенной специфичностью. Это открытие определило бурный прогресс в использовании антител как для исследовательских, так и для практических целей, и в настоящее время "гибридомная технология" является одним из основных направлений в биотехнологии. Гибридомы являются бессмертными клеточными клонами, продуцирующие антитела одной специфичности. Гибридомы получают при слиянии нормальных лимфоцитов , продуцирующих антитела, с подходящей опухолевой линией B- клеток. Затем гибридомы отбирают в культуральной среде, неспособной поддерживать рост родительских клеток. Путем последовательных разведений и пересевов получают одиночные клоны, которые можно выращивать в роллерных культурах или в форме асцита в брюшной полости мышей. В последнем случае удается получать особенно высокие титры моноклональных антител. При этом, естественно, все молекулы иммуноглобулинов , продуцируемые определенной гибридомой, идентичны: они относятся к одному классу и одному аллотипу , имеют одинаковые вариабельные области , структуру, идиотип , аффинность и специфичность к данному эпитопу На современном этапе созданы десятки тысяч высокоаффинных антител, связывающихся с белками, углеводами, нуклеиновыми кислотами, а также низкомолекулярными антигенами. На их основе получены коньюгаты с различными функциональными соединениями, токсинами, ферментами, магнитными частицами, радиоактивными и рентгеноконтрастными атомами и т.п. Эти коньюгаты находят широчайшее применение в научных исследованиях, медицине, ветеринарии. Описаны примеры получения с помощью указанной технологии антител, обладающих каталитической активностью, так называемых абзимов (abzyme от англ. antibody и enzyme). Клетки миеломы применяются для получения гибридом - линий клеток, производящих моноклональные антитела определенной специфичности. Поскольку эти клетки осуществляют эффективную секрецию рекомбинантных белков, они хорошо изучены в отношении экспрессии в них соответствующих рекомбинантных генов, введенных с помощью трансфекции Моноклональные антитела Применение моноклональных антител Наиболее широко используются моноклональные антитела в медицинской диагностике. Разработаны сумки-укладки для постановки диагнозов. Если к антителами присоединить радиоактивные или магнитоактивные материалы и ввести их в живой организм, то можно выявить в нем патологические зоны. Такие МКА присоединяются к пораженным болезнью клеткам организма, а соответствующие индикаторные материалы позволяют выяснить их местонахождение. МКА используются и в процессах очистки веществ. Современные технологии основаны на присоединении антител к твердой матрице носителя. К ним добавляют смесь молекул, содержащую искомый антиген. Затем комплексы антиген - антитело отмываются от примесей, не связанных с матрицей. После разрушения ковалентных связей антиген - антитело в растворе остаются свободные антигены. Если получить антитела определенного типа и иммунизировать ими животное, то образуются анти-антитела (анти-идиотипные антитела). Они действуют на иммунную систему как псевдоантиген и поэтому могут быть использованы для ее стимуляции. На этом принципе основано получение вакцин нового типа. Наборы МКА могут быть также предназначены для борьбы с аллергенами. Моноклональные антитела и “мишенная” лекарственная терапия. Предполагается, что большое разнообразие раковых заболеваний обусловлено активацией эндогенных генов, вызванной химическими агентами, внутренними хромосомными перестройками. Эти гены кодируют определенные белки, и поэтому раковые клетки могут содержать уникальные белки на поверхности клетки. Возможно, именно эти белки участвуют в супрессии роста здоровых клеток. Инактивируя эти белки, можно тормозить рост раковых клеток. Благодаря высокий специфичности МКА широко используются в качестве зондов для точного определения природы молекул поверхности клеток и клеточных органелл. С их помощью также можно проводить детекцию активности ферментов. Методы иммуноферментного анализа применяют в диагностике вирусных заболеваний растений. Это позволяет сократить время получения безвирусного посадочного материала, отбирать новые вирусоустойчивые сорта. При генно-инженерных экспериментах можно быстро отбирать клоны - продуценты. |