Вирусология. вирь. Вакцин требует знаний структурных и функциональных особенностей вирусных антигенов, различаемых иммунной системой организма. Вирусными антигенами
 Скачать 2.43 Mb.
|
|
Диагностика Диагноз ставится на основании эпизоотологического, клинического, патологоанатомического и серологического методов исследования. Следует использовать и гистологический метод, для чего отбирают кусочки органов и фиксируют их в 10%-ном растворе нейтрального формалина или жидкости Корнуа. При жизни зверей диагноз ставят на основании серологических реакций. Разработано несколько видов серологических реакций: реакция иммунофлюоресценции (РИФ), иммуноферментный метод (TLISA), тимоловая проба, реакция йодной агглютинации, проба мочи на белок Бенс-Джонса, реакция иммуноэлектроосмофореза (РИЭОФ), которыми можно выявить до 56%-тов инфицированных норок. Т и м о л о в а я проба основана на том, что при поражении печени изменяются белки крови и их соотношение, вследствие чего нарушается физико-химическое состояние коллоидных растворов. В тимоловом буфере белки выпадают в осадок и вызывают помутнение растворов. Данная реакция неспецифическая, а, следовательно, недостаточно чувствительная. Реакция й о д н о й агглютинации (Йодный тест) позволяет при жизни животного установить диагноз через 20-25 дней у взрослых зверей (через 2-3 месяца у молодняка) после заражения у 40-60%-тов инфицированных зверей. Проба довольно легко выполнима и ее можно использовать непосредственно в хозяйстве. Однако она не всегда специфична. Реакция может выпадать у больных зверей в период эпизоотий или быть положительной у норок больных туберкулезом, больных незаразными болезнями или накормленных незадолго до исследования. Реакция основана на свойстве раствора йода осаждать гамма-глобулины при повышении их концентрации в сыворотке крови. А повышение уровня гамма-глобулинов происходит только при прогрессирующей форме Алеутской болезни, поэтому при непрогрессирующей форме реакция диагностической ценностью не обладает. В стационарном очаге инфекции применение этой реакции мало эффективно, т.к. создается впечатление мнимого благополучия в отдельные периоды. Проба мочи на белок Б е н с - Д ж о н с а. В чистую пробирку вносят 5 мл мочи, подкисляют несколькими каплями уксусной кислоты и нагревают на водяной бане до 54-60°С; при этом белок выпадает в осадок, который обычно прилипает к стенкам пробирки. Последующее нагревание до кипения вызывает полное или частичное растворение осадка. И м м у н о э л е к т р о о с м о ф о р е з (РИЭОФ) - широко применяется для прижизненной диагностики алеутской болезни норок, т.к. отличается высокой специфичностью, выявляя 98% больных через 6-15 дней после заражения. У подсосных щенков - через 1 час после сосания молока инфицированных маток можно установить положительную реакцию. Реакция основана на определении гамма-глобулина в сыворотке крови норок после разделения белков крови. В норме у норок гамма-глобулинов в сыворотке крови 15%, а у больных - 35-55%. Шо и Ингрем (1973) предложили для прижизненной диагностики использовать реакцию иммуноэлектроосмофореза с антигеном фреоновых экстрактов печени, селезенки и лимфатических узлов экспериментально зараженных норок, что позволило выявлять больных животных уже через неделю после заражения. В СССР этот метод разработал гл. ветврач зверосовхоза "Пушкинский", профессор В.С. Слугин. В неблагополучных по Алеутской болезни хозяйствах зверей исследуют три раза в год: осенью - все племенное поголовье перед комплектованием стада; в январе-феврале - все поголовье перед гоном; в июне-июле - самок, оставшихся без приплода и самцов с низкой активностью или тех, которые покрыли самок, но у них регистрировали пропустование, появление мертворожденных щенков, гибель молодняка. Кроме того, исследуют норок с клиническими признаками Алеутской болезни. В благополучных хозяйствах исследуют только ввозимых зверей дважды в период карантина. Если получен положительный результат, то зверей из этой партии исследуют как в неблагополучном хозяйстве. Дифференциальный диагноз Алеутскую болезнь следует отличать от жировой дистрофии печени алиментарного происхождения и псевдомоноза. При жировой дистрофи и печени нет характерных изменений в почках, отрицательны результаты серологических исследований. Отмечают массовое распространение болезни, и не только среди норок. Чаще болезнь регистрируют среди молодняка норок летом или осенью. Необходимо учитывать доброкачественность корма, т.к. дистрофия печени связана с использованием в корм выбракованной рыбы, рыбьих голов, несвежих субпродуктов. Кроме того, жировая дистрофия может развиться при некоторых инфекционных болезнях, таких как - туберкулез, чума, микотоксикозы. При жировой дистрофии отмечают понос, каловые массы зеленого или серо-зеленого цвета с примесью крови, газа, слизи. Слизистые оболочки желтушны; судороги, эпилептические припадки; температура тела нормальная. У самок перед щенением кровотечения из половых органов, аборты, рассасывание плодов. На вскрытии в трупах отмечают желтушность слизистых оболочек. Печень дряблая, серо-желтого или охряно-желтого цвета, кусочки органа в воде не тонут. Желчный пузырь переполнен темно-зеленой желчью. Почки увеличены, серо-желтого цвета. Г и с т о л о г и я. Жировая, зернистая дистрофия печени и почек. Очаговых скоплений плазмоцитов в этих органах нет. Реакция иммуноэлектроосмофореза (РИЭОФ) - отрицательная. П с е в д о м о н о з (геморрагическая пневмония, синегнойная инфекция). К болезни более восприимчив молодняк норок и голубых песцов. Предрасполагающими факторами служат стрессы, применение антибиотиков в завышенных дозах и др. Болезнь контагиозна, возникает в любое время года, достигает максимума в октябре, стационарность выражена. Протекает остро с выделением из носа кровянистой жидкости, которая затрудняет дыхание, хрипы, животное старается поднять вверх голову. У щенков отмечают понос, каловые массы с пузырьками газа. Головы большие (большеголовость) кости черепа расходятся, заметна флюктуация мозга. На вскрытии трупов отмечают геморрагическое воспаление легких. Печень и селезенка сухие, светло-коричневого цвета. Головной мозг представляет собой гноевидную жидкость. Бактериологическими исследованиями устанавливают микроорганизм Pseudomonas pyocyanea. Лечение Специфических средств лечения нет. Показано симптоматическое лечение с применением антибиотиков, витаминов, белковых гидролизатов, иммунодепрессоров, гормонов. Основное внимание следует сосредоточить на лечении животных до созревании меха. Больных норок следует изолировать, обеспечить уход отдельным обслуживающим персоналом, снабдив отдельным инвентарем. Для лечения используют: витамин В-12 по 10 мкг в сочетании с фолиевой кислотой по 0,3 мг, К, гидролизаты-амидопептид (в корм - 5-10мл) . Для предотвращения дистрофии печени применяют: липокаин, холин; для нормализации водно-солевого обмена - физиологический раствор с 5% глюкозы (5 мл, подкожно) или с кормом (0,3-0,5 г); иммуномодулятор - левамизол (1 мг/кг); иммунодепрессанты - метотрексан (0,5 мг/кг), 6-мериптурин (5 мг/кг). Лечение должно быть длительным и регулярным. В этот период в рацион животным вводят печень, творог; хорошего качества - рыбу, мясо, свежедробленые кости. Необходимо учитывать, что у переболевших норок иммунитет не вырабатывается и такие животные подлежат выбраковке. В 1964 году была запатентована формолвакцина против Алеутской болезни норок, и хотя она создавала ненапряженный (слабый) иммунитет, с ее помощью удавалось прервать эпизоотический процесс. Профилактика и меры борьбы В благополучных хозяйствах проводят двукратное серологические исследования всех завозимых зверей в период карантинирования. В неблагополучных хозяйствах норок исследуют три раза в год: все племенное поголовье и некоторое количество резервных зверей, которым планируется восполнять поголовье после гона (осень); все поголовье перед гоном (январь-февраль); выборочное исследование самок, не давших приплода, абортировавших или принесших мертворожденных щенков, самцов не покрывших самок (март-июль). К подозреваемым в заражении относят (без исследований) всех щенков, полученных от положительно реагирующих или клинически больных иатерей; щенков тех пометов, в которых зарегистрирован положительный результат в серологических реакциях; отрицательно реагирующих матерей, в помете которых имеются подсаженные щенки от положительно реагирующих матерей. Для дезинфекции клеток, домиков, шедов, инвентаря чаще применяют 2%-ный раствор формальдегида, 2%-ный раствор едкого натра. Растворы нужно применять в горячем виде, но следует иметь в виду, что они коррозируют металлическую сетку. Можно растворами заливать домики, под клетками, инвентарь, посуду, другие деревянные части, а сетку после механической уборки обрабатывать огнем паяльной лампы или огнеметом. В таком случае следует применять все меры к предупреждению пожара. Хозяйства считаются благополучными, если в них не выявляются серопозитивные норки в течение трех туров исследований. Вывоз для племцелей разрешается только из благополучных хозяйств после исследования их серологически. Вирус чумы плотоядных. Чума плотоядных(лат. — Pestis carnivorum; англ. — Canine distemper; чума собак, болезнь Карре) — высококонтагиозная болезнь, проявляющаяся лихорадкой, воспалением слизистых оболочек глаз, дыхательных путей, кожной экзантемой и поражением центральной нервной системы. Историческая справка, распространение, степень опасности и ущерб Чума известна со времен одомашнивания собак. В России появилась в 1762 г. в Крыму и получила название крымской болезни. Вирусную природу впервые доказал француз Карре в 1905 г. У серебристо-черных лисиц чуму диагностировал Грин (1925), у енотов и норок — Рудольф (1928) и В.И. Миролюбов (1932). В настоящее время болезнь регистрируется среди домашних, промышленных и диких плотоядных во всех странах мира. Экономический ущерб от чумы плотоядных складывается из убытков от падежа и выбраковки животных, снижения объема и качества пушнины, нарушения технологического процесса выращивания, расходов на проведение противоэпизоотических мероприятий. Возбудитель болезни Чуму плотоядных вызывает РНК-содержащий вирус размером 115... 160 нм из семейства Paramyxoviridae. Вирус однороден в иммунобиологическом отношении, имеет антигенное и иммунобиологическое родство с вирусом кори человека, а также некоторую антигенную связь с вирусом чумы крупного рогатого скота. В лабораторных условиях вирус культивируют в куриных эмбрионах, культуре клеток тканей и в организме восприимчивых животных. При размножении вируса у зараженных эмбрионов появляются изменения главным образом на хорион-аллантоисной оболочке в виде отечности и образования светло-серых узелков величиной с просяное зерно или тяжей светло-серого цвета. Вирус устойчив к действию различных физико-химических факторов. Он не теряет своих вирулентных свойств в течение 5 лет хранения при минусовой температуре. При —20 "С в органах павших животных вирус выживает до бмес, в крови—до Змее, в слизи носовой полости —до 2 мес. Кипячение убивает вирус мгновенно. При нагревании до 60 °С он разрушается за 30 мин. Дезинфицирующие вещества и физические факторы инактивируют вирус довольно быстро: 1%-ный раствор лизола и ультрафиолетовые лучи — в течение 30 мин, 2%-ный раствор гидроксида натрия— 60 мин, солнечный свет и 0,1...0,5%-ные растворы формалина и фенола — через несколько часов. Эпизоотология Квирусу восприимчивы собаки, серебристо-черные и красные лисицы, песцы, норки, уссурийские еноты, белые африканские и бурые хорьки, куницы, медведи, ласки, горностаи, барсуки, выдры, шакалы, гиены, волки. Для различных видов животных патогенность вируса неодинакова — от скрытого бессимптомного течения болезни до острого, сопровождающегося 100%-ной смертностью. Наиболее чувствительны хорьки и тхорзофретки (помесь белого африканского хоря с черным лесным хорем). В условиях звероводческих хозяйств чума обычно начинается у животных одного вида, а через 1...2 мес могут заболеть звери другого вида. Такая закономерность объясняется тем, что при заражении от гетерологичного вида животных чума вначале протекает скрытно. Только после адаптации и пассирования вируса на наиболее слабых особях болезнь приобретает острое течение с охватом значительного числа зверей. Поэтому клинические проявления болезни часто отмечают тогда, когда большая часть стада бывает заражена. В подсосном возрасте щенки болеют редко, только при неудовлетворительных зоогигиенических условиях содержания и кормления и при заражении высоковирулентным вирусом. Щенки вакцинированных и естественно переболевших чумой матерей обычно не болеют. Колостральный иммунитет сохраняется у щенков в течение 2 нед после отсадки от матерей, после чего молодняк необходимо вакцинировать. Источником возбудителя инфекции при чуме плотоядных служат больные или переболевшие животные, а также животные в инкубационном периоде болезни. Переболевшие собаки могут выделять вирус до 3 мес, а пушные звери — 3...5 мес после выздоровления. Вирус содержится в истечениях из глаз и носа, фекалиях и других экскретах. Резервуаром вируса чумы служат бродячие собаки и дикие плотоядные, среди которых вирус поддерживается и от которых часто заражаются восприимчивые животные. Инфицирование может происходить при непосредственном контакте здоровых особей с больными, аэрогенно и алиментарно. Переносить вирус могут человек, грызуны, а также птицы и насекомые. Возможны передача возбудителя чумы через различные предметы, контаминированные вирусом, и даже разнос его по воздуху на расстояние до 12 м. Эпизоотический процесс при чуме плотоядных проявляется неодинаково и зависит от вирулентности возбудителя, степени восприимчивости животных, природно-географических и хозяйственных факторов. Однако индекс контагиозности при чуме плотоядных довольно высокий — от 70 до 100, и у плотоядных, живущих на свободе, отмечают регулярные вспышки заболевания. Распространение чумы зависит от многих факторов, и прежде всего от наличия иммунной прослойки в данной популяции животных. Болезнь может возникнуть в любое время года и проявляться эпизоотией или спорадически. На фоне массовой вакцинопрофилактики современный уровень заболеваемости пушных зверей и собак можно считать спорадическим. Патогенез Вирус проникает в организм восприимчивых животных через слизистые оболочки. Первоначальное размножение его происходит в клетках лимфоидной ткани, откуда он с кровью и лимфой разносится по всему организму, вызывая лихорадку и воспаление слизистых оболочек глаз, органов дыхания и желудочно-кишечного тракта. Одновременно вирус может вызывать воспалительные и дегенеративные изменения в печени, почках, головном и спинном мозге, а также на бесшерстных участках кожного покрова. В результате поражения клеток центральной и периферической нервной системы нарушается функция органов движения. Существенную роль в патогенезе чумы собак играют возбудители секундарных и смешанных инфекций: сальмонеллы, эшерихии, пастереллы, токсоплазмы, кокки и др. Болезнь у собак может протекать одновременно с инфекционным гепатитом или парвовирусной инфекцией. Возбудители секундарных и смешанных инфекций, а также гельминтозы обусловливают резкое снижение иммунологической резистентности макроорганизма, усиление тяжести патологических процессов и увеличение летальности. Течение и клиническое проявление Инкубационный период при экспериментальном заражении составляет 2...7 дней, при естественном он более длительный — до 40 дней. 431В зависимости от степени выраженности клинических признаков различают легочную, кишечную, нервную, кожную (экзантематозную) и смешанную формы болезни. Развитие той или иной формы чумы в значительной мере определяется реактивностью организма животного и вирулентностью возбудителя. У собак различают острое, подострое и хроническое течение чумы. Разнообразные признаки болезни в одних случаях хорошо выражены, в других стерты, что затрудняет своевременную постановку диагноза. Болезнь начинается, как правило, с повышения температуры тела на 1...3 "С. У щенков до 1,5-месячного возраста чума в большинстве случаев протекает атипично, без повышения температуры тела, что имеет определенное диагностическое значение. Для острого течения чумы типично яркое проявление клинических признаков. Оно характеризуется прежде всего лихорадочным состоянием (39,7.„41 °С). Через 1...2 дня температура снижается, умеренная лихорадка становится постоянной или ремиттирующей. В случае развития пневмонии температура тела снова повышается. В начале болезни отмечают изменение поведения животных, они становятся менее активными, дрожат, временами вскакивают как бы в испуге. Часто развивается острый катар дыхательных путей. Собака чешет лапами носовое зеркало. Из ноздрей вытекает вначале серозный или слизистый, а затем гнойный экссудат. Дыхание сопящее. Появляется кашель, вначале сухой, позднее затяжной и влажный, вызывающий судорожные припадки. В дальнейшем развиваются пневмония и плеврит. Вместе с этим появляются конъюнктивиты, паренхиматозные кератиты с язвенным распадом роговицы. Возможно воспаление радужной оболочки со скоплением гноя в передней камере глаза. Поражение органов пищеварения приводит к ухудшению аппетита, тяжелым фарингитам и тонзиллитам, явлениям острого катара желудочно-кишечного тракта. Часто повторяются приступы рвоты с извержением слизистых масс желтого цвета. Выделяемые при диарее фекалии жидкие, с примесью слизи и крови. Подострое течение также характеризуется высокой температурой, сохраняющейся 1...2 дня. Затем лихорадка становится умеренной. Развиваются депрессия, вялость, пугливость, фотофобия (светобоязнь), сухость носового зеркала, ухудшается аппетит. Через несколько дней появляются серозно-слизистые и гнойные истечения из носа, которые, высыхая, закупоривают носовые отверстия. Собаки часто чихают, фыркают и чешут лапами нос. Дыхание становится затрудненным и учащенным. При аускуль-тации обнаруживают влажные хрипы в легких, при перкуссии — очаги притупления. Пульс учащенный, аритмичный, нитевидный. Из глаз выделяются серозные, а затем гнойные истечения, которые высыхают и склеивают веки. Конъюнктива покрасневшая, опухшая, отмечают кератит или изъязвление. Наряду с перечисленными выше признаками устанавливают острое катаральное воспаление желудочно-кишечного тракта, проявляющееся запором, приступами рвоты и диареи. Больные собаки издают отвратительный запах. Весьма часто развивается чумная экзантема, характеризующаяся появлением мелких красных пятен на внутренней и наружной поверхности бедер, ушных раковин, брюшной стенки, около рта и в области ноздрей. На месте пятен образуются пузырьки величиной от чечевичного зерна до копеечной монеты с блестящей поверхностью, желтым серозным или гнойным содержимым. Позднее пузырьки лопаются, засыхают, превращаясь в бурые корки. Наблюдается также мокнущая экзема в области наружного слухового отверстия. У некоторых собак, больных чумой, на суставных изгибах наблюдают сильное ороговение наружных слоев кожи (гиперкератоз). Нередко чума протекает в нервной форме. Поражение нервной системы сопровождается кратковременным возбуждением и даже некоторой агрессивностью. Возникают тонические или клонические судороги мышц всего тела или их отдельных групп, в том числе судороги и подергивания (тики) мимической мускулатуры, мышц брюшной стенки, конечностей. При этом нарушается координация движений. Периодически наблюдаются эпилептические припадки, которые могут прекращаться или переходить в парезы и параличи конечностей (часто задних), сфинктера мочевого пузыря, прямой кишки, лицевого нерва. У собак, больных чумой, наблюдаются значительные изменения в картине крови. В первые дни инкубационного периода отмечают, как правило, лейкоцитоз, некоторое увеличение числа эритроцитов, содержания гемоглобина. По мере развития заболевания появляется анемия. Продолжительность болезни различная. Легкие случаи могут оканчиваться выздоровлением в течение 1 нед, тяжелые тянутся месяцами и годами. Обычно на 2...3-й неделе болезни к катаральным явлениям присоединяются нервные, которые в дальнейшем становятся преобладающими. При этом у переболевших животных судорожные подергивания отдельных групп мышц, парезы и параличи, а также слепота, глухота и потеря обоняния, рубцы на роговице, зарастание зрачка, пожелтение зубов сохраняются в течение долгого времени, иногда всю жизнь. Летальность составляет в среднем около 50 %, возрастая при нервной форме до 85 % и более. Клинические признаки чумы у животных других видов несколько иные. Улисиц и песцов кожную форму обычно не наблюдают, а катаральные явления у песцов выражены слабее, чем у лисиц. Особенностью клинического проявления чумы у норок можно считать опухание лап, которые приобретают форму боксерской перчатки, сильную болезненность при ходьбе. У хорьков наиболее выражены явления катара и дегидратации, летальность достигает 90 %. |