ФС фармакогнозия. Валерианы лекарственной корневища с корнями Valerianae officinalis rhizomata cum radicibus
 Скачать 4.13 Mb.
|
|
Горца перечного трава Polygoni hydropiperis herba Собранная в фазу цветения высушенная трава дикорастущего однолетнего растения горца перечного (водяного перца) – Polygonum hydropiper L. сем. гречишных – Polygonaceae. ПОДЛИННОСТЬ Внешние признаки. Цельное сырье. Цельные или частично измельченные цветоносные олиственные побеги длиной до 45 см без грубых нижних частей, с плодами различной степени зрелости. Стебли цилиндрические, утолщенные в узлах. Листья очередные, короткочерешковые, продолговато-ланцетные, голые, с заостренной или притупленной верхушкой и цельным краем. Длина листьев 7 - 9 см, ширина до 1,8 см. У основания черешка находятся видоизмененные сросшиеся прилистники – раструбы. Раструбы пленчатые, часто с коричневато-красным оттенком, длиной до 1,5 см, плотно прилегают к стеблю. Поверхность раструбов голая, по верхнему краю заметны короткие щетинки до 2 мм длиной. Соцветия – тонкие прерывистые поникающие кисти длиной до 6 см. Цветки на коротких цветоножках; околоцветник простой, длиной 3 – 4 мм, с 4 – 6 туповатыми долями, заметны многочисленные буроватые точки (вместилища). Тычинок 6 (8), пестик с верхней одногнездной завязью и 2 – 3 столбиками. Плод – яйцевидно-эллиптический орешек, с одной стороны плоский, другой – выпуклый, при созревании остается заключенным в околоцветник. Цвет стеблей – зеленоватый, часто с красновато-коричневым оттенком, листьев – зеленый, раструбов – красноватый, цветков – розоватый, плодов – черный. Запах отсутствует. Вкус водного извлечения слегка жгучий. Измельчённое сырье. Кусочки листьев, стеблей и соцветий различной формы, отдельные цветки и плоды, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 7 мм. Цвет зеленый с красновато-коричневым оттенком. Запах отсутствует. Вкус водного извлечения слегка жгучий. Микроскопические признаки. Цельное сырье. При рассмотрении листа с поверхности должны быть видны клетки эпидермиса верхней стороны листа с прямыми стенками и складчатой кутикулой и нижней стороны – с извилистыми стенками; устьица аномоцитного типа, встречающиеся с обеих сторон листа; мелкие бесцветные или светло-бурые железки с 2-клеточным (реже 4-клеточным) основанием и 4-клеточной (реже 2- или 6-клеточной) головкой. По краю листовой пластинки и по жилке с нижней стороны должны быть видны конусовидные пучковые волоски, состоящие из нескольких сросшихся клеток. В мезофилле листа должны быть видны многочисленные крупные друзы кальция оксалата и округлые или овальные схизогенные вместилища с содержимым светло-бурого, бурого или желтовато-зеленого цвета. При рассмотрении давленого препарата стебля видны клетки эпидермиса удлиненно-прямоугольной формы с прямыми стенками, устьица аномоцитного типа, редкие. В состав проводящих пучков входят спиральные, кольчатые и сетчатые сосуды; встречаются друзы и вместилища. При рассмотрении препаратов околоцветника, раструба и эпидермы стеблей с поверхности также должны быть видны железки. По краю раструба видны пучковые волоски большей длины, чем по краю листовой пластинки. Погруженные схизогенные вместилища, заметны во всех надземных органах – листьях, стеблях, раструбах и околоцветнике.  1 – эпидермис верхней стороны листа со складчатой кутикулой (600×); 2 – эпидермис нижней стороны листа с устьицем и железкой с 2-клеточным основанием и 4-клеточной головкой (400×); 3 – пучковые волоски по краю листа (200×); 4 – пучковые волоски по краю листа (400×); 5 – друзы и вместилища с желтовато-зеленым содержимым в мезофилле листа (200×); 6 – вместилище в мезофилле листа (400×); 7 – пучковые волоски по краю раструба (200×); 8 – вместилища с зеленоватым содержимым (200×). Измельченное сырье, порошок. При исследовании микропрепаратов должны быть видны фрагменты листовой пластинки с эпидермисом, состоящим из клеток со слабоизвилистыми и сильноизвилистыми стенками и устьицами аномоцитного типа. На некоторых фрагментах (край листовой пластинки, раструбы) должны быть видны пучковые волоски. На поверхности фрагментов листа, стебля, раструба, околоцветника должны быть железки, в мезофилле - вместилища с зеленовато-бурым содержимым и друзы. Должны встречаться фрагменты кольчатых, спиральных и сетчатых сосудов. Определение основных групп биологически активных веществ Приготовление растворов. Раствор стандартного образца (СО) кверцетина: около 0,05 г СО кверцетина, предварительно высушенного при температуре 130 - 135 °С в течение 3 ч, растворяют в 85 мл спирта 96 % в колбе при нагревании на водяной бане, охлаждают, доводят объем раствора тем же спиртом до 100 мл и перемешивают. Срок годности раствора 1 мес. Тонкослойная хроматография Около 1,0 г сырья, измельченного до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм, помещают в колбу со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляют 30 мл спирта 90 %. Колбу присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане в течение 30 мин. Охлажденное до комнатной температуры извлечение фильтруют через бумажный фильтр (испытуемый раствор). На линию старта аналитической хроматографической пластинки со слоем силикагеля с флуоресцентным индикатором наносят 10 мкл (0,01 мл) испытуемого раствора; рядом наносят 10 мкл (0,01 мл) раствора СО рутина (см. раздел «Количественное определение») и 10 мкл (0,01 мл) раствора СО кверцетина. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе в течение 2-3 мин, помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение не менее 30 мин смесью растворителей бутанол - уксусная кислота - вода (4:1:2) и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80 – 90 % длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФсвете при длине волны 254 нм. На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции сине-фиолетового цвета выше зон адсорбции растворов СО кверцетина и рутина. Затем пластинку обрабатывают алюминия хлорида спиртовым раствором 1 %, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 100 – 105 °С в течение 2 – 3 мин и просматривают УФ-свете при длине волны 365 нм. На хроматограммах растворов СО рутина и кверцетина должны обнаруживаться две зоны адсорбции с флюоресценцией желто-зеленого цвета. На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться 2 зоны адсорбции с флуоресценцией желто-зеленого цвета на уровне стандартных образцов рутина и кверцетина; допускается обнаружение других зон адсорбции. ИСПЫТАНИЯ Влажность. Цельное сырье, измельченное сырье – не более 14 %. Зола общая. Цельное сырье, измельченное сырье – не более 8 %. Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Цельное сырье, измельченное сырье – не более 2,0 %. Измельченность сырья. Цельное сырье: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм – не более 5 %. Измельченное сырье: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм – не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм – не более 5 %. Посторонние примеси Сырье, изменившее окраску (побуревшее, пожелтевшее и почерневшее). Цельное сырье – не более 5 %; Органическая примесь. Цельное сырье, измельченное сырье – не более 3 %; Минеральная примесь. Цельное сырье, измельченное сырье – не более 0,5%. Тяжелые металлы и мышьяк. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах». Радионуклиды. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах». Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота». Количественное определение. Цельное сырье, измельченное сырье: суммы флавоноидов в пересчёте на рутин – не менее 1,5 %; Приготовление раствора СО рутина: около 0,05 г (точная навеска) СО рутина, предварительно высушенного до постоянной массы при температуре 130 – 135 °С, помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 85 мл спирта 96 % при нагревании на водяной бане, охлаждают, доводят объем спиртом 96 % до метки и перемешивают (раствор А СО рутина). Срок годности раствора 30 сут. 2,0 мл раствора А СО рутина помещают в мерную колбу на 25 мл, прибавляют 0,5 мл уксусной кислоты раствора 30 %, 1 мл алюминия хлорида раствора 1 % и доводят до метки спиртом 96 % и перемешивают (раствор Б СО рутина). Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм. Около 1,0 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в колбу со шлифом вместимостью 150 мл, прибавляют 30 мл спирта 90 %. Колбу присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане в течение 30 мин. После охлаждения до комнатной температуры содержимое колбы фильтруют через бумажный фильтр в мерную колбу вместимостью 100 мл так, чтобы частицы сырья не попадали на фильтр. Экстракцию последовательно повторяют таким образом еще 2 раза. Извлечения фильтруют через тот же фильтр в ту же мерную колбу. Объем фильтрата доводят спиртом 90 % до метки и перемешивают (раствор А испытуемого раствора). 2,0 мл раствора А испытуемого раствора помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, добавляют 0,5 мл уксусной кислоты раствора 30 %, 1 мл алюминия хлорида раствора 1 % и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки, перемешивают (раствор Б испытуемого раствора). Оптическую плотность раствора Б испытуемого раствора измеряют через 30 мин на спектрофотометре при длине волны 408 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют состоящий из 2,0 мл раствор А испытуемого раствора, 0,5 мл уксусной кислоты разбавленной 30 % и доводят спиртом 96 % до метки в мерной колбе вместимостью 25 мл. Параллельно измеряют оптическую плотность раствора Б СО рутина. Для приготовления раствора сравнения в мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 мл раствора А СО рутина, добавляют 0,5 мл уксусной кислоты раствора 30 % и доводят до метки спиртом 96 %, перемешивают. Содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин в абсолютно сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:  где 𝐴𝐴 – оптическая плотность раствора Б испытуемого раствора; 𝐴𝐴R o – оптическая плотность раствора Б СО рутина; 𝑎𝑎 – навеска сырья, г; 𝑎𝑎R o – навеска СО рутина, г; Р – содержание основного вещества в СО рутина, %; 𝑊𝑊 – влажность сырья, %. Допускается вычислять содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин в абсолютно сухом сырье с использованием удельного показателя поглощения комплекса рутина с алюминия хлоридом по формуле:  где 𝐴𝐴 – оптическая плотность раствора Б испытуемого раствора; 𝐴𝐴1см 1% – удельный показатель поглощения комплекса рутина с алюминия хлоридом при длине волны 408 нм, равный 248; 𝑎𝑎 – навеска сырья, г; 𝑊𝑊 – влажность сырья, %. Упаковка, маркировка и транспортирование. В соответствии с требованиями ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов». Хранение. В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов». |