МБ13-14 (2). Занятие 13 Этиология гси (гнойносептические инфекции)
 Скачать 98.59 Kb.
|
|
Микоплазменная пневмония Возбудитель острых респираторных заболеваний и атипичных первичных пневмоний человека - M. рneumoniae рассматривается как патогенный вид. Основные биологические и морфологические свойства типичны для рода Mycoplasma. В антигенном отношении вид имеет видоспецифический АГ, отсутствующий у других микоплазм. Основным фактором патогенности M. pneumoniae являются: капсулоподобное вещество, эндотоксин, гемолизин и адгезин. Этиопатогенез. M. рneumoniae обладает тропизмом к базальной мембране мерцательного эпителия дыхательных путей. Укрепившись на эпителии возбудитель поражает слизистую оболочку всех отделов дыхательного тракта с развитием в них периваскулярных и перибронхиальных воспалительно-инфильтративных процессов, тромбозов артериол и венул. Дальнейшее развитие патологических процессов приводит к блокаде механизмов мукоцилиарного клиренса, приводящее к гибели эпителиальных клеток воздухоносных путей. Результатом этих процессов является развитие местных воспалительных реакций, происходящих в бронхах и подлежащей ткани. При дальнейшем развитии болезни в процесс вовлекаются альвеолы, присоединяются диссеминированные поражения, протекающие с развитием артрита, менингоэнцефалита Эпидемиология. Источник – больной, носители, в том числе перенесшие болезнь в бессимптомной форме. Заражение происходит воздушно-капельным путем. Возбудитель локализуется, главным образом, на клетках реснитчатого эпителия дыхательных путей. Респираторный микоплазмоз малоконтагиозное заболевание, что объясняется кратковременным сроком выживания возбудителя во внешней среде, поэтому для заражения требуется тесное и длительное общение с источником инфекции. Болеют чаще дети от 1года до 30 лет. Материал для исследования – мокрота, слизь из глотки, плевральная жидкость, смывы с поверхности бронхеол. Микоплазмы - возбудители артритов Из синовиальной жидкости и ткани суставов при ревматоидном артрите выделяют M. arthritidis, M. fermentas, U. urealyticum. Источником возбудителя ревматоидного артрита является больной человек или бессимптомный носитель микоплазм. Микоплазмы, вызывающие суставные поражения запускают аутоиммунные процессы, результатом которых является длительная персистенция возбудителя в организме. Скапливаясь в большом количестве микоплазмыаккумулируются в суставных хрящах и костном мозге, и в дальнейшем при эндогенной активации становятся источником реинфекции. Патогенез суставных поражений может быть связан с тем, что вырабатываемые на микоплазмы АТ, перекрестно реагируют с АГ тканей организма (например, M. arthritidis имеет перекрестно реагирующие АГ с хондроцитами макроорганизма). При этом развиваются аутоиммунные процессы, приводящие к развитию повреждений хрящевой ткани. Микоплазменная инфекции у беременных, плода и новорожденного Наибольшую опасность микоплазменная и уреаплазменная инфекции представляют при беременности. Во время этого физиологического состояния высеваемость микоплазм увеличивается в 1,5 и 2 раза. У инфицированных микоплазмами и уреаплазмами женщин беременность протекает с осложнениями частым преждевременным излитием околоплодных вод. Инфицирование плода во время беременности происходит несколькими путями: - путем гематогенной диссеминации через инфицированные сосуды пуповины; - путем диссеминации из околоплодных вод в легкие, менингеальную оболочку мозга и кровеносную систему плода; - при контакте, во время родов, с колонизированными родовыми путями с последующим инфицированием кожи, слизистых и дыхательных путей. Частота внутриутробного инфицирования при микоплазмозе - до 20%, при уреаплазмозе до - 45%. Микоплазмы способны оказывать тератогенное влияние на плод, вызывая необратимые изменения в хромосомном аппарате клеток. Микробиологическая диагностика. 1.Бактериологическое исследование 2. Иммуноиндикация 3.Серодиагностика 4.Молекулярно генетические методы. Клинический материал при подозрении на мочеполовой микоплазмоз и уреаплазмоз - у женщин мазки или соскобы из уретры, канала шейки матки, больших вестибулярных желез; - у мужчин – отделяемое уретры, первая порция мочи, секрет предстательной железы, сперму (у мужчин при бесплодии). Клинический исследуемый материал при подозрении на респираторный микоплазмоз: смыв с носоглотки, мокрота, лаважная жидкость, бронхиальные смывы, плевральная жидкость, кровь. Культуральное исследование. Для культурального исследования лучше использовать пробы со слизистой оболочки мочеиспускательного канала, материал из канала шейки матки, влагалища, парауретральных протоков. Особенности биологии возбудителя, маленькие размеры генома, отсутствие многих ферментных систем микоплазмы очень требовательны к условиям культивирования. Наиболее значимым методом лабораторной диагностики мочеполового микоплазмоза и уреаплазмоза является бактериологическое исследование. Для культивирования используют: среды, содержащие все предшественники, необходимые для синтеза макромолекул, транспортную среду (бульон PPLO, лошадиная сыворотка, дрожжевой экстракт, бензилпенициллин); среда SP-4 , применяют для культивирования и выявления микоплазм у мужчин, больных негонококковым уретритом, и у женщин с воспалительными заболеваниями мочеполовых органов. Для всех видов микоплазм и уреаплазм необходимы холестерин, жирные кислоты и фосфолипиды. Наиболее часто используемые для культивирования микоплазм среды; среда Хайфлика, среда SP-4, Среда, разработанная Г.Я. Каган. Среды для выделения уреаплазм: бульон, содержащий мочевину и индикатор, агаризованная среда А5К, дифференцировочные агаровые среды А7 и А8. При интерпритации результатов необходимо учитывать, что микоплазмы и уреаплазмы в концентрации 103КОЕ/мл могут быть обнаружены у клинически здоровых лиц, поэтому диагностически значимым является обнаружение их в 104и более КОЕ. Иммуноиндикация. В микробиологической диагностике микоплазмоза используют выявление антигенов в реакциях агглютинации, иммунофлюоресценции (РИФ), иммуноферментного анализа (ИФА). Принцип РИФ основан на реакции АГ-АТ: меченные ФИТЦ антитела против микоплазм специфически соединяются с антигенами, которые находятся в фиксированных мазках. При положительной реакции в люминисцентном микроскопе наблюдается флюоресценция микоплазм. Микоплазмы светятся ярко желтым цветом. В случае обнаружения микоплазм культуральным методом, в РИФ делается заключение о наличие генерализованного инфекционного процесса. Молекулярно-генетическое исследование. В настоящее время для диагностики используют метод ДНК – зондирования, для обнаружения микоплазм в клиническом материале. Высокочувствительным является метод ДНК / РНК блот-гибридизации. Разработаны генные зонды с использованием рекомбинантных плазмид, позволяющие выявить микоплазмы, тест-системы для мультиплексной ПЦР, позволяющие одновременно выявлять в одном клиническом образце M. hominis ,Mgenitalium ,U. urealyticum . Положительные данные в ПЦР при отрицательных результатах культурального и иммунологических методов при отсутствии клинических проявлений свидетельствует о бессимптомном носительстве. 8. Хламидии и их роль в патологии человека. Методы диагностики различных форм хламидийной инфекции. Представители семейства Chlamydiaceae (хламидии) являются патогенными облигатными внутриклеточными бактериями, паразитирующими в чувствительных клетках теплокровных (млекопитающих, птиц, человека и др.). Они близки по структуре и химическому составу к классическим бактериям. Для них характерно сохранение морфологической сущности на протяжении всего жизненного цикла, деление вегетативных форм, наличие клеточной стенки, содержание ДНК и РНК, энзиматическая активность, чувствительность к антибиотикам широкого спектра, наличие общего родоспецифического антигена. В то же время хламидии по размерам меньше классических бактерий, имеют небольшой геном, являются облигатными внутриклеточными паразитами с уникальным циклом развития. Они не способны синтезировать высокоэнергетические соединения и обеспечивать собственные энергетические потребности (энергозависимые паразиты), что и определяет их облигатный паразитизм. С учетом своих особенностей хламидии занимают самостоятельное (особое) положение среди других микроорганизмов — прокариот. Для человека имеют значение преимущественно представители двух родов — Chlamydia и Chlamydophila. Наибольшее значение имеют три вида. Chlamydia trachomatis , различные серотипы которого вызывают трахому, венерическую лимфогранулему и наиболее распространенные урогенитальные хламидиозы. Chlamydophila psittaci вызывает орнитоз и зоонозные хламидиозы. Chlamydophila pneumoniae вызывает антропонозные пневмонии, ОРЗ, с этим возбудителем связывают развитие некоторых форм бронхиальной астмы, атеросклероза. Морфологические особенности. Клеточный цикл развития хламидий имеет две основных формы — элементарные тельца (ЭТ) — инфекционная форма и ретикулярные тельца (РТ) — вегетативная форма. Сферические ЭТ значительно меньше размерами (менее 300 нм в диаметре), имеют более жестную электронно- плотную структуру, метаболически мало активны, адаптированы к кратковременному внеклеточному существованию. Цикл развития хламидий осущесвляется в цитоплазматическом включении — фагосоме (вакуоле), куда ЭТ попадают путем стимулирования эндоцитоза. В процессе адсорбции и эндоцитоза участвуют термолабильные эффекторные белковые поверхностные антигены хламидий. ЭТ подавляют фагосомо — лизосомальное слияние и преобразуются при участии главного поверхностного протеина в РТ, которые обладают активным метаболизмом, более крупными размерами и активным бинарным делением. Цикл размножения заканчивается обратным переходом РТ в ЭТ, разрывом мембран включения и ограничивающих мембран клетки хозяина, выходом ЭТ из клеток, далее ЭТ инфицируют новые клетки. Тельца включений выявляются в клетках при помощи световой и иммунолюминесцентной микроскопии. Кроме того, хламидии способны образовывать L — формы, персистентные формы. Культуральные свойства. Хламидии не растут на питательных средах самого сложного состава (это сближает их по свойствам с риккетсиями и особенно — с вирусами), для их культивирования могут быть использованы лабораторные животные и куриные эмбрионы (биопроба) и особенно чувствительные линии клеток животных — чаще клетки McCoy (чаще с обработкой цитостатиками для повышения чувствительности), которые считались “золотым стандартом” диагностики. Биохимические свойства. Способны самостоятельно синтезировать нуклеиновые кислоты, некоторые белки и липиды. Являются энергетически зависимыми от хозяина эндопаразитами. Chlamydia trachomatis обладает гликоген — синтетазной системой (гликоген содержится и выявляется при определенных методах окраски во включениях), синтезирует предшественники фолиевой кислоты и соответственно биохимической активности чувствителен к сульфаниламидам. Антигенная структура. 1. Выделяют поверхностный родоспецифический антиген (ЛПС), локализующийся на наружной мембране клеточной стенки. ЛПС имееи две антигенные детерминанты, одна из них специфична для всего рода, другая перекрестно реагирует с некоторыми другими грамотрицательными бактериями (сальмонеллы серовара minnesota), термостабилен. 2. МОМР — главный белок наружной мембраны несет функцию структурного белка и порина. Включает термолабильные белковые детерминанты , обладающие видо — , типо — и сероварной специфичностью. Детерминанты патогенности. 1. Эндотоксин (липополисахарид), подобный эндотоксинам грамотрицательных бактерий. 2. Экзотоксины — термолабильные субстанции. 3. Антигены клеточной поверхности, подавляющие защитные реакции. Факторы патогенности хламидий препятствуют фагосомо — лизосомальному слиянию в фагоцитах. Краткая характеристика распространения. Урогенитальные хламидиозы — наиболее распространенные формы хламидиозов. В крупных странах (США, Россия) ежегодно регистрируют несколько миллионов случаев, в мире — от 50 до 90 млн. случаев. Скудность начальных проявлений и тяжелые последствия урогенитальных хламидиозов, особенно у женщих (нарушения репродуктиной сферы, инфекционные осложнения), предъявляют особые требования к своевременной лабораторной диагностике. Хламидии сероваров D — K Chlamidia trachomatis, вызывающие урогенитальные хламидиозы, передаются от человека к человеку половым путем. Бессимптомное носительство наблюдается не менее чем у 5 % мужчин и 10% женщин. Отдельные серотипы этого возбудителя вызывают такие распространенные в прошлом заболевания как трахома (сопровождается поражениями конъюнктивы и прилегающих тканей глаза, часто приводит к катарактам и слепоте) ивенерическая лимфогранулема (регистрируют преимущественно в слаборазвитых странах Азии, Африки и Латинской Америки с теплым климатом). Орнитоз — хламидийная инфекция, вызываемая C.psittaci. Человек заражается от птиц — основных хозяев этого возбудителя воздушно — пылевым и воздушно — капельным путем. В условиях города основную опасность представляют голуби (от 20% до 100% инфицировано этим возбудителем, чаще с ними контактируют дети. В домашних условиях источником могут быть канарейки и особенно попугаи (вызывают наиболее тяжелую форму — пситтакоз). Орнитоз часто протекает как тяжелая интерстициальная пневмония. Кроме этого, серотипы этого возбудителя вызывают зоонозные хламидиозы (например, так называемый вирусный аборт овец, хламидиозы крупного рогатого скота и др.), при контакте с больными животными могут развиваться различные формы хламидиозов у людей. Клинико — эпидемиологические особенности зоонозных хламидиозов у людей изучены недостаточно. Бронхопневмонии , вызываемые C.pneumoniae. Это антропонозные инфекции, передаваемые от человека к человеку, большая часть случаев протекает субклинически. Возникают поражения верхних дыхательных путнй с последующим развитием бронхопневмонии. Это распространенные инфекции (антитела к C.pneumoniae выявляют почти у половины взрослого населения), однако диагностируются до настоящего времени плохо. С этим возбудителем связывают развитие отдельных форм бронхиальной астмы и атеросклероза. С учетом многообразия клинических проявлений и необходимостью дифференциации различных клинических форм хламидиозов (прежде всего генитальных и экстрагенитальных) особое значение приобретает лабораторная диагностика. Методы лабораторной диагностики хламидийной инфекции Ни один из современных методов диагностики хламидийной инфекции не обеспечивает выявление возбудителя в 100% случаев. Поэтому лабораторная диагностика хламидийной инфекции, как правило, должна включать в себя сочетание не менее двух методов (прямых или непрямых). 1. Методы прямого выявления Chlamydia trachomatis: - микробиологическое исследование – выделение чистой культуры возбудителя; - цитологическое исследование мазков, окрашенных по методу Романовского-Гимза; - иммуноцитологическое исследование – выявление антигенов возбудителя в мазках с помощью специфических антител (реакция прямой иммунофлуо-ресценции – ПИФ), ДНК-зонды; - серологическое исследование – определение бактериальных антигенов (иммуноферментный анализ - ИФА); - методы экспресс-диагностики хламидий (иммунохроматография и ферментспецифическая реакция); - молекулярно-биологические методы – определение специфического участка ДНК/РНК в геноме возбудителя (полимеразная цепная реакция – ПЦР); 2. Непрямые методы выявления Chlamydia trachomatis, косвенно указывающие на наличие возбудителя у пациента: - серологическое исследование – определение специфических антител, образовавшихся в процессе иммунного ответа на микроорганизм, (реакция связывания комплемента – РСК, реакция непрямой иммунофлуоресценции – РНИФ, иммуноферментный анализ ИФА, реакция микроиммунофлуоресценции – МИФ, рекомбинантный липополисахаридный ИФА – r-ELISA). |