МБ13-14 (2). Занятие 13 Этиология гси (гнойносептические инфекции)
 Скачать 98.59 Kb.
|
|
5. Биологические свойства возбудителя гонореи. Гонококки. История открытия Возбудителя гонореи – инфекционного венерического заболевания с воспалительными проявлениями в мочеполовых путях открыл Альберт Нейссер в 1879 г. Первые культуры получили Лейстков и Леффлер (1882 г.), этиологическую роль доказал Бумм (1885). Таксономия. Семейство – Neisseriaceae Род – Neisseria Вид – N. gonorrhoeae Морфология. В свежих культурах гонококки представляют собой диплококки бобовидной формы, размером 1,25-1,0 х 0,7-0,8 мкм., образующие микрокапсулу. Жгутиков не имеют, спор не образуют. Хорошо окрашиваются анилиновыми красителями (метиленовым синим, бриллиантовым зеленым и др.). По Граму окрашиваются отрицательно. Образуют L- формы, в том числе и под действием пенициллина. Под влиянием химиопрепаратов могут быстро менять свойства и образовывать грамположительные формы. По наличию пилей гонококки разделяются на 5 типов. Ранее их обозначали Т1-Т5, сейчас Р+,Р++, Р+++… Бактерии типов Р+,Р++ снабжены нитями, имеют капсулу и вирулентны, бактерии прочих типов авирулентны. В составе клеточной мембраны (стенки) содержится до 60 % белка I, на его основе осуществляется серотипирование гонококком методом ИФА. Кроме белка I, имеется белок II, который определяет специфичность клинических проявлений заболевания. Культуральные свойства. По типу дыхания - аэробы. Хемоорганотрофы. Требовательны к питательным средам. Растут на свежеприготовленных, влажных питательных средах с добавлением нативного белка (кровь, сыворотка, асцитическая жидкость). Оптимум рН 7,2-7,4; температуры - 370С. Большинство свежевыделенныхштаммов для роста нуждаются в присутствии в атмосфере 4-10% СО2. При дальнейшем культивировании эти свойства утрачиваются. На плотных питательных средах через 24 часа инкубирования гонококки, содержащие в клеточной стенке белок II, образуют прозрачные колонии в виде капелек росы (диаметром 1-3 мм) с ровным краем. На жидких питательных средах растут диффузно и образуют поверхностную пленку, через несколько дней оседающую на дно. Биохимическая активность. Гонококки разлагают только глюкозу с образованием кислоты, образуют каталазу и цитохромоксидазу – типичные для нейссерий ферменты. Протеолитических свойств не имеют (аммиак, сероводород, индол не образуют), не вызывают гемолиза на кровяном агаре, на средах с добавлением молока, желатина и картофеля не растут. Антигенная структура. Антигенная структура гонококков изучена недостаточно, она неоднородна и меняется у дочерних популяций. Очевидно, что экспрессия некоторых антигенов гонококка определяется изменением условий окружающей среды. Во многом это явление связано с тем, что основную антигенную нагрузку несут детерминанты пилей и поверхностных белков, распознаваемых иммунокомпетентными клетками. Гонококки имеют ряд механизмов, снижающих эффективность иммунных реакций, в том числе и за счет изменения антигенной структуры. Основную роль играют фазовые вариации, заключающиеся в изменении или прекращении образования некоторых антигенных детерминант, и антигенные вариации, основанные на изменении структуры распознаваемых антигенов за счет включения новых детерминант. Например, хромосомы гонококка могут содержать 2 набора генов, кодирующих антигенную структуру пилей, а также 8-10 молчащих генов, обычно не отвечающих на регуляторные сигналы. При рекомбинации ДНК, зависящей от последовательного соединения гомологичных генов, молчащие гены присоединяются к образующейся копии и приобретают регуляторные свойства, а также способность участвовать в реакциях матричного синтеза, что приводит к появлению пилей с новой антигенной структурой. Антигены гонококков: а) капсульные антигены; б) пили; в) белки клеточной оболочки – на их основании выделяют 16 антигенных серотипов; г) липополисахариды. Факторы патогенности. Токсины. Гонококки не продуцируют экзотоксинов. Клеточная стенка содержит липополисахарид – эндотоксин, который оказывает токсическое воздействие. - Структурные и химические компоненты: а) капсула – обладает антифагоцитарным свойством, препятствует прямому контакту бактерицидных веществ с клеточной стенкой, маскирует ее антигенные детерминанты; б) пили – обеспечивают адгезию гонококков к клеткам эпителия, что имеет решающее значение в развитии инфекции; в) Ig А1 – протеаза. Гонококки синтезируют Ig А1 – протеазу, действующую внеклеточно и разрушающую пропин-треониновые связи в тяжелых цепях Ig, а также расщепляющую молекулу Ig в шарпирной части. Эти эффекты инактивируют антитела, препятствующие адгезии, что облегчает приклепление гонококков к рецепторам эпителиальных клеток, а также защищает их от фагоцитоза, опосредованного антителами; г) способность к синтезу β – лактамаз. Резистентность. Гонококки неустойчивы во внешней среде, вне организма человека быстро погибают. При нагревании до 560С гибнут за 5 мин., низкие концентрации перманганата калия (1:50) и нитрата серебра (1:10000), сулемы, карболовой кислоты губительно влияют на гонококков. Последние плохо переносят высушивание, УФЛ. Они чувствительны к антибиотикам (β – лактамные, аминогликозиды). Однако повышение заболеваемости гонореей связывают и с появлением пенициллинорезистентных штаммов гонококков. Эпидемиология. Источник инфекции – больной человек. Основной путь заражения – контактный половой, возможно инфицирование плода при прохождении через инфицированные родовые пути матери. Отмечены редкие случаи заражения при несоблюдении элементарных правил личной гигиены. Врожденная невосприимчивость отсутствует. Роль в патологии Гонококки вызывают гонореюу мужчин и женщин и являются возбудителями бленнореи новорожденных. Патогенез Гонорея – инфекционное венерическое заболевание, проявляющееся воспалением слизистых оболочек преимущественно половых путей. Термин гонорея (от греч. gone – семя, +rhoia – истечение) ввел К. Гален во II в. н.э. В настоящее время гонорея – одно из наиболее распространенных инфекционных заболеваний. Гонококки поражают, в основном, клетки цилиндрического эпителия. У новорожденных могут вызывать бленнорею (конъюктивит). При экстрагенитальной локализации могут поражать прямую кишку и миндалины.Они прикрепляются к цилиндрическому эпителию уретры, влагалищной части шейки матки, прямой кишки, конъюктивы глаза, а также к сперматозоидам и простейшим (трихомонады, амебы). Адгезия происходит за счет пилей и белков наружной мембраны клеточной стенки. Характерной особенностью гонококков является их способность проникать в лейкоциты и размножаться в них. Липополисахаридная часть клеточной стенки бактерий оказывает токсическое действие на организм человека. Капсулярные полисахариды подавляют фагоцитоз. Соединяясь с ворсинками цилиндрического эпителия слизистой уретры, а у женщин - и эндоцервикального канала, гонококки проникают внутрь клетки при участии белков наружной мембраны клеточной стенки. Это приводит к развитию острого уретрита, цервицита и поражению у женщин шейки матки, воспалению придатков (трубы, яичники), у мужчин происходит воспаление семенных семенных пузырьков, предстательной железы. Иммунитет. После перенесенного заболевания иммунитет не вырабатывается. Врожденная невосприимчивость к гонорее отсутствует, возможны супер- и реинфекции. Единственный чувствительный организм – человек. До сих пор остается неясным вопрос, почему антитела, определяемые в сыворотке больного (агглютинины, преципитины, опсонины), не обеспечивают защиту от повторного заражения. Профилактика. Средства специфической иммунопрофилактики отсутствуют, что обусловлено высокой антигенной изменчивостью гонококков. Гоновакцина, на которую возлагалось много надежд, оказалась неэффективной. Общая профилактика основана на мерах предупреждения венерических заболеваний. Для предупреждения гонобленореи новорожденным сразу после рождения закапывают в конъюктивальный мешок (девочкам также в половую щель) 1-2 капли раствора сульфацила натрия или антибиотика (пенициллины, цефалоспарины) Лечение. Основу терапии составляет антимикробная терапия. Препараты выбора – сульфаниламиды и антибиотики, подавляющие жизнедеятельность гонококков (β – лактальные антибиотики, аминогликозиды). Для лечения хронических или осложненных форм гонореи используют гоновакцину. Микробиологическая диагностика. Наиболее распространенным методом является бактериоскопическое исследование. Выделение чистой культуры проводится сравнительно редко, главным образом, при хронической гонорее, когда бактериоскопия дает отрицательный результат. Кроме того, в настоящее время используют РИФ и ПЦР. Серодиагностика при хронической гонорее (РСК) проводится редко 6. Лабораторная диагностика гонореи. В диагностике гонореи данные лабораторных исследований имеют решающее значение. Этиологическая диагностика проводится с использованием бактериоскопических (исследование отделяемого с обязательным окрашиванием метиленовой синью и по Граму) и бактериологических методов (посев отделяемого на специальные питательные среды). Диагностика гонореи основана на определении возбудителя Neisseria gonorrhoeae в отделяемом из уретры, с шейки матки, из прямой кишки, ротоглотки, со конъюнктивы и др. Отделяемое наносят тонким слоем на предметное стекло, высушивают, фиксируют с помощью этанола, затем производят окраску 1% раствором метиленовой сини и по Граму. Окрашенные препараты просматривают в светооптическом микроскопе при увеличении 10 100 с иммерсией.
В препарате, окрашенном 1% раствором метиленовой сини, ядра эпителиальных клеток и полиморфноядерных нейтрофилов окрашены в синий цвет, цитоплазма - в голубой цвет разной интенсивности. Гонококк темно-синего цвета, бобовидной формы, расположен парно. Наружная поверхность кокков выпуклая, вогнутой стороной они обращены друг к другу. Расположение гонококков напоминает форму кофейного зерна. Гонококки расположены внутриклеточно по отношению к лейкоцитам и поверхностно по отношению к клеткам плоского эпителия. Внутри лейкоцитов каждая пара диплококков располагается под углом к соседней. Определяющий дифференциально-диагностический признак получают при окраске по Граму: гонококк является грамотрицательным диплококком. При кратковременном выдерживании в обесцвечивающем растворе (смесь этилового спирта с ацетоном) окрашенные кристаллвиолетом гонококки отдают фиолетовый краситель и докрашиваются красным красителем (сафранином). Если при бактериоскопии обнаружены типичные гонококки, то культуральное исследование не проводится. Для точного определения локализации воспалительного процесса в уретре применяют двухстакан-ную пробу. Более точная топическая диагностика возможна с помощью уретроскопии, но можно выполнять только при хронической гонорее. При остром заболевании уретроскопия может способствовать распространению инфекции в лежащие выше отделы мочеполовой системы. Дифференциальная диагностика гонорейного уретрита с уретритами другой этиологии (вирусы, дрожжеподобные и другие грибы, разные кокки, трихомонады, хламидии, микоплазмы и др.) вследствие большого сходства клинической картины возможна практически лишь по результатам бактериоскопического и бактериологического исследований. 7. Микоплазмы и их роль в патологии человека. Методы лабораторной диагностики. Микоплазмы играют существенную роль в патологии человека. Вызываемые ими заболевания - микоплазмозы. Клиника их разнообразна, но выделяют основные формы: - поражение легких - респироторный микоплазмоз, - поражение мочеполовых путей - урогенитальный микоплазмоз. - часто является этиологическим фактором артритов. Микоплазмы обладают рядом уникальных свойств: 1. У них отсутствует ригидная клеточная стенка и ее предшественники. Они не окрашиваются по Граму. Размножаются почкованием и сегментацией с распадом на гранулы или бинарным делением. Не образуют спор. Неподвижны. Аэробы. 2. Микоплазмы являются самыми мелкими прокариотами. 3. Тело микоплазм покрыто трехслойной «объединяющей» мембраной выполняющей функции собственно цитоплазматической мембраны и клеточной стенки. 4. Паразитируют на мембране клеток эукариот. Это мембранные паразиты. В настоящее время установлено, что некоторые виды микоплазм могут проникать в клетку и располагаться в цитоплазме или перинуклеарном пространстве – «фьюзогенные микоплазмы». 5. Требовательны к питательным средам, для культивирования в них должен быть добавлен трипсинизированный перевар говяжьего сердца, обогащенный сывороткой крови лошади, дрожжевым экстрактом, аргинином, глюкозой. Температура культивирования 370 С в течение 48 ч -96 ч. При выращивании на жидких питательных средах образуется большое количество различных морфологических, форм; при выращивании на плотных питательных средах - образуют характерные колонии, напоминающие «яичницу-глазунью», круглые с зернистой поверхностью и втянутым темным центром, плотно спаянные со средой. 6. Геном микоплазм представлен двуцепочечной молекулой ДНК. 7. Факторы патогенности: а. Способность адсорбироваться на рецепторах клеток хозяина и взаимодействовать с ними. Основным адгезином является белок Р1, который способен взаимодействовать с сиалогликопротеиновым комплексом мембраны клетки - хозяина. б. Зкзотоксины. У Mycoplasma pneumoniaе выявлен нейротоксин, с чем связывают частое осложнение, после перенесенной пневмонии, заключающееся в повреждении нервной системы. 7. Эндотокисны - повреждающее действие на эпителий респираторного и дыхательного трактов. 8. Гемолизины – вызывают бета-гемолиз эритроцитов человека. 9. Наличием ферментов: нейраминидазы, протеазы, ДНК-полимеразы, нуклеазы. Основным таксономическим признаком, позволяющим дифференцировать микоплазмы от уреаплазм является способность последних гидролизовать мочевину. До 15 % заболеваний мочеполовой сферы у мужчин негонококковой этиологии обусловлены Ureaplasma urealyticum. Выделяют два биовара возбудителя Parvo и Т 960. Предполагают, что биовар Parvo является более патогенным, чем биовар Т 960. Ureaplasma urealyticum - комменсал урогенитальной системы человека. Микроорганизм способен к адгезии не только на эпителиальных клетка уретры, но и на фибробластах и эритроцитах человека. Их можно выделить из верхних дыхательных путей новорожденных, при острой пневмонии, хронических заболеваниях легких. Патогенность Ureaplasma urealyticum связана прежде всего с массивной контаминацией (выше 104КОЕ), что приводит к развитию воспалительного процесса. В последние годы установлено, что наиболее патогенными для человека являютcя M. genitalium, которые обладают уникальными адгезивными способностями. Путь передачи. Основной путь передачи инфекции – половой. Возможен и неполовой путь заражения женщин, особенно девочек. Возбудитель может передаваться контактно-бытовым путем через предметы обихода, через медицинское оборудование и медицинские манипуляции. Роль микоплазм в инфекционной патологии Мочеполовой микоплазмоз и уреаплазмоз. Возбудителями этих заболеваний являются Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealyticum . До 15 % заболеваний мочеполовой сферы у мужчин негонококковой этиологии обусловлены Ureaplasma urealyticum. Отмечают два биовара возбудителя Parvo и Т 960. Ureaplasma urealyticum является комменсалом урогенитальной системы человека. Возбудитель способен адгезироваться не только к эпителиальным клеткам уретры. Его возможно выделить из верхних дыхательных путей новорожденных при бессимптомной инфекции, острой пневмонии, хронических заболеваний легких. Микоплазменная и уреаплазменная инфекции могут быть причиной бесплодия, различной патологии беременности (выкидыши, преждевременные роды, мертворождения плода) и новорожденных. Инфицирование микоплазмами верхних отделов генитального тракта (цервикального канала, эндометрия, фаллопиевых труб) осуществляется сперматозоонами – носителями микоплазм. Проникнув внутрь, микоплазмы вызывают воспалительные процессы, нарушают овогенез, препятствуют оплодотворению, обуславливают женское бесплодие. Установлена роль микоплазм и уреаплазм в развитии хронических и рецедивирующих воспалительных процессах. Возможна генерализация процесса. В настоящее время рассматривается роль микоплазм (M.fermentas, M penetrans) в развитии СПИДа. M.fermentas выделена из мочи всех ВИЧ-инфицированных и к ней же обнаружены антитела. Существует мнение, что микоплазмы являются кофактором в развитии СПИДА. В основе такого положения лежит способность M.fermentas и M penetrans сливаться с мембраной Т-лимфоцитов, изменять их функциональную активность. Основной путь передачи инфекции – половой. Возможен и непрямой путь заражения женщин, особенно девочек. Возбудитель может передаваться контактно-бытовым путем через предметы обихода, через медицинское оборудование и медицинские манипуляции. Респираторный микоплазмоз. Респираторный микоплазмоз может протекать в виде двух основных клинических форм. Первая форма - ограниченная инфекция верхних дыхательных путей (ОРЗ), фарингит, ринофарингит, ларингофарингит и бронхит. Вторая форма - первичная пневмония. Протекает по типу атипичной пневмонии. Глубокие поражения респираторного тракта. |