Микробиология. 1. Химический состав бактериальной клетки
 Скачать 1.8 Mb.
|
|
«пестрым» рядом. Образование индола и H2S. Обычно для определения способности к образованию индола и сероводорода также закрепляют бумажки: в первом случае пропитанные раствором щавелевой кислоты (при образовании индола - краснеет), во втором — раствором ацетата свинца (при образовании H2S - чернеет). Реакция на индол. Способ Эрлиха: в пробирку с культурой добавляют 2-3 мл эфира, перемешивают и добавляют реактив Эрлиха (парадиметиламидобензальдегид с HCl) – в присутствии индола наблюдается розовое окрашивание. Реакция на H 2 S. Посев культуры делают уколом в столбик с питательной средой, содержащей реактивы для выявления газа (сульфат железа, тиосульфат натрия, сульфит натрия). При наличии сероводорода происходит почернение агара. ПЛАН ОПИСАНИЯ КОЛОНИЙ 1) Форма-округлая, амебовидная, ризоидная, неправильная; 2) Размер (диаметр)-очень мелкие (точечные) (0,1-0,5 мм), мелкие (0,5-3 мм), средние (3-5 мм), крупные (более 5 мм); 3) Поверхность –гладкая (smooth) –S–форма; шероховатая, складчатая, морщинистая (rough) – R–форма, с концентрическими кругами или радиально исчерченная; 4) Профиль -плоский, выпуклый, конусовидный, кратерообразныйи т.д.; 5) Прозрачность -непрозрачная, прозрачная, полупрозрачная; 6) Цвет (пигмент) -бесцветная или пигментированная (белая, желтая, золотистая, красная), выделение пигмента в среду; 7) Край -ровный, волнистый, зубчатый, бахромчатый и т.д.; 8) Структура -однородная, мелко или крупнозернистая, волокнистая, струйчатая; 9) Консистенция -плотная, мягкая, слизистая, тягучая, крошащаяся. 12) Ген материал, гено- и фенотип, бактериальная хромосома, плазмиды, подвижные генетические элементы. Материальной основой наследственности бактерий является ДНК. По сравнению с геном ом эукариотов геном бактерий устроен более просто - это молекула ДНК, замкнутая в кольцо, которое прикреплено к одной из мезосом. В отличие от парных хромосом эукариотов, у бактерий одна хромосома, то есть гаплоидный набор генов, поэтому у них нет явления доминантности. Кроме хромосомы, у бактерий имеются внехромосомные генетические элементы - плазмиды. Это молекулы ДНК, которые или находятся вне хромосомы, в автономном состоянии, в виде колец, прикрепленных к мезосомам, или встроены в хромосому (интегрированное состояние). Плазмиды придают бактерии дополнительные наследственные признаки, но не являются обязательными для нее. Плазмида может быть элиминирована (удалена) из бактерии, что не влияет на ее жизнеспособность. В настоящее время известно свыше 20 типов плазмид у бактерий. Назовем некоторые из них : F-плазмида, фактор фертильности (лат. fertilis - плодовитый), или половой фактор, определяет способность бактерий к образованию половых ворсинок и к конъюгации. R-плазмиды определяют резистентность бактерий к лекарственным средствам. Передача R-плазмид от одних бактерий к другим приводит к быстрому распространению лекарственноустойчивых бактерий. Col-плазмиды кодируют синтез бактериоцинов - антибактериальных веществ, вызывающих гибель других бактерий того же илиродственных видов. Впервые они были обнаружены у Escherichia соН,отсюда и их название - колицины. Известны бактериоцины стафилококков (стафилоцины), палочек чумы (пестицины) и других бактерий. Наличие плазмиды бактериоциногенности придает бактериям селективные преимущества в биоценозах. Это может иметь для организма человека положительное значение, если колицины кишечной палочки губительно действуют на патогенные энтеробактерии, и отрицательное, если бактериоцины продуцируются патогенными микробами. Ent-плазмиды определяют продукцию энтеротоксина. Н1у-плаз-мида - гемолитическую активность. Дополнительными генетическими элементами являются также профаги - геномы умеренных фагов, которые, встраиваясь в хромосому бактерии, могут придавать ей определенные свойства. Например, tox-гены, кодирующие образование экзотоксинов коринебактерий дифтерии, клостридий ботулизма и др. Генотип- это общая сумма генов микроба. В отношении микроорганизмов "генотип" означает то же, что "геном". Фенотип- это весь комплекс свойств микроба, проявление генотипа в определенных, конкретных условиях существования. Генотип - это возможные способности клетки, а фенотип - видимое их проявление. Гены, ответственные за синтез какого-то соединения, обозначают строчными буквами латинского алфавита по названию соединения, например, при наличии гена, кодирующего синтез лейцина, - ieu+, при отсутствии - leu-. Гены, ответственные за резистентность к лекарственным средствам, бактериофагам, ядам, обозначают буквой г (лат. resistentia), а чувствительные - буквой s (лат. sensitiv - чувствительный). Например, чувствительность к стрептомицину обозначают str5, резистентность strr. Фенотип бактерий обозначается теми же знаками, но с прописной буквы: соотвественно Leu+, Leir, Str1, Str8. Подвижные генетические элементы В состав бактериального генома, как в бактериальную хромосому, так и в плазмиды, входят подвижные генетические элементы. К подвижным генетическим элементам относятся вставочные последовательности и транспозоны. Вставочные (инсерционные) последовательности IS-элементы (insertion sequences, англ.)— это участки ДНК, способные как целое перемещаться из одного участка репликона в другой, а также между репликонами. IS-элементы имеют размеры -1000 н.п. и содержат лишь те гены, которые необходимы для их собственного перемещения — транспозиции: ген, кодирующий фермент транспозазу, обеспечивающую процесс исключения IS-элемента из ДНК и его интеграцию в новый локус, и ген, детерминирующий синтез репрессора, который регулирует весь процесс перемещения. Отличительной особенностью IS-элементов является наличие на концах вставочной последовательности инвертированных повторов. Эти инвертированные повторы узнает фермент транспозаза. Транспозаза осуществляет одноцепочечные разрывы цепей ДНК, расположенных по обе стороны от подвижного элемента. Оригинальная копия IS-элемента остается на прежнем месте, а ее реплицированный дупликат перемещается на новый участок. Перемещение подвижных генетических элементов принято называть репликативной или незаконной рекомбинацией. Однако в отличие от бактериальной хромосомы и плазмид подвижные генетические элементы не являются самостоятельными репликонами, так как их репликация — составной элемент репликации ДНК репликона, в составе которого они находятся. Известно несколько разновидностей IS-элементов, которые различаются по размерам и по типам и количеству инвертированных повторов. Транспозоны —- это сегменты ДНК, обладающие теми же свойствами, что и IS-элементы, но имеющие структурные гены, т. е. гены, обеспечивающие синтез молекул, обладающих специфическим биологическим свойством, например токсичностью, или обеспечивающих устойчивость к антибиотикам. Перемещаясь по репликону или между репликонами, подвижные генетические элементы вызывают: Инактивацию генов тех участков ДНК, куда они, переместившись, встраиваются. Образование повреждений генетического материала. Слияние репликонов, т. е. встраивание плазмиды в хромосому. Распространение генов в популяции бактерий, что может приводить к изменению биологических свойств популяции, смене возбудителей инфекционных заболеваний, а также способствует эволюционным процессам среди микробов. Изменения бактериального генома, а следовательно, и свойств бактерий могут происходить в результате мутаций и рекомбинаций 13) Виды изменчивости, мутации, механизмы передачи ген. информации. 13) Изменчивость- различие в свойствах между особями одного вида. Различают изменчивость наследственную и ненаследственную. Ненаследственная или фенотипическая изменчивость (модификации) не затрагивает геном микроба, не передается по наследству. Модификации возникают в ответ на изменяющиеся условия окружающей среды. При устранении фактора, вызвавшего модификацию, изменение исчезает. Например, кишечная палочка только в присутствии лактозы продуцирует ферменты, разлагающие этот углевод. Стафилококки образуют фермент, разрушающий пенициллин, только в присутствии этого антибиотика. Примером модификаций является также образование L-форм бактерий под действием пенициллина и возврат к исходной форме после прекращения его действия. Наследственная или генотипическая изменчивость возникает в результате изменения самого генома. Изменение генома может наступить в результате мутаций или рекомбинаций. Мутации(лат. mutatio - изменение) - изменение последовательности нуклеотидов в молекуле ДНК, в результате которого происходит появление или потеря признака. Таким признаком может быть способность синтезировать какую-либо аминокислоту или резистентность к антибиотику. По происхождению мутации могут быть спонтанными или индуцированными. Индуцированные мутации получают в эксперименте под влиянием мутагенов: радиации, некоторых химических веществ. Спонтанные мутации возникают под влиянием естественных факторов. Частота спонтанных мутаций невелика, в среднем 1 на 10 млн. Образовавшиеся микробы называют мутантами. Если возникшая мутация выгодна для микроба и создает для него преимущества в определенных условиях среды, то мутанты выживают и дают многочисленное потомство. Если же мутация не создает преимуществ, мутанты погибают. Мутации микроорганизмов могут иметь важное практическое значение. Получены штаммы-мутанты грибов и актиномицетов, являющиеся продуцентами антибиотиков во много раз более активных, чем исходные культуры. Из мутантов с ослабленной вирулентностью могут быть получены вакцинные штаммы для получения живых вакцин. Диссоциация бактерий (лат. dissociatio - расщепление) - одно из проявлений мутаций. В популяции микроорганизмов появляются особи, вырастающие при посеве на плотную питательную среду в виде гладких S-форм и шероховатых R-форм колоний (англ, smooth - гладкий, rough - шероховатый). S- формы колоний - круглые, влажные, с гладкой блестящей поверхностью, с ровными краями. R- формы колоний неправильной формы, сухие, с изрезанными краями и шероховатой поверхностью. Процесс диссоциации, то есть расщепления особей в популяции, обычно протекает в одном направлении: от S- к R-форме, иногда через промежуточные формы. У большинства видов бактерий вирулентными являются S-формы. Исключение составляют возбудители,чумы, сибирской язвы, туберкулеза. Генетические рекомбинации- (лат. recombinatio - перестановка) у бактерий - это передача генетического материала (ДНК) от клетки-донора к клетке-реципиенту, в результате появляются рекомбинанты с новыми свойствами. Известны три типа генетических рекомбинаций: трансформация, трансдукция, конъюгация. Трансформация(лат. transforma-tio - превращение) - передача ДНК в виде свободного растворимого вещества, выделенного из клетки донора, в клетку реципиента. При этом рекомбинация происходит, если ДНК донора и реципиента родственны друг другу, и может произойти обмен гомологичных участков своей и проникшей извне ДНК. Впервые явление трансформации открыл Ф. Гриффите в 1928 г. Он ввел мышам живой невирулентный бескап-сульный штамм пневмококка и одновременно убитый вирулентный кап-сульный штамм пневмококка Мыши погибли, из их крови была выделена живая культура вирулентного капсульного пневмококка Сам Гриффите считал, что трансформация произошла путем поглощения невирулентным пневмококком капсульного вещества вирулентного штамма Позже, в 1944 г О Эвери, К Мак Леод и М Мак-Карти доказали, что трансформирующее вещество - это ДНК, которая является носителем генетической информации Гак впервые была доказана роль ДНК как материального субстрата наследственности Трансдукция (лат transductio - перенос) - передача ДНК от бактерии-донора к бактерии-реципиенту с помощью бактериофага Различают неспецифическую трансдукцию, специфическую и абортивную При неспецифической трансдукции может быть перенесен любой фрагмент ДНК донора При этом ДНК донора попадает в головку бактериофага, не включаясь в его геном Принесенный бактериофагом фрагмент ДНК донора может включиться в хромосому реципиента Таким образом, бактериофаг в этом случае является только переносчиком ДНК, сама фаговая ДНК не участвует в образовании рекомбинанта При специфической трансдукции гены хромосомы донора замещают собою некторые гены бактериофага В клетке реципиента фаговая ДНК вместе с фрагментом хромосомы донора включается в строго определенные участки хромосомы реципиента в виде профага Реципиент становится лизогенным и приобретает новые свойства Трансдукция называется абортивной, если фрагмент ДНК, принесенный бактериофагом, не вступает в рекомбинацию с хромосомой реципиента, а остается в цитоплазме и может кодировать синтез како- го-то вещества, но не реплцируется при делении, передается только одной из двух дочерних клеток и затем утрачивается. Конъюгация (лат. conjugatio - соединение) - это переход ДНК из клетки-донора ("мужской") в клетку-реципиент ("женскую") через половые пили при контакте клеток между собой. Донором является "мужская" клетка (F+-клетка), она содержит F-фактор - половой фактор, который кодирует образование половых пилей. Клетки, не содержащие F-фактора (F--клетки), являются женскими. При конъюгации клетки-доноры соединяются с клетками-реципиентами с помощью F-пилей, через которые происходит переход ДНК. Если клетка-реципиент получает F-фактор, она становится "мужской" F+-клеткой. Если F-фактор включен в хромосому, то бактерии способны передавать фрагменты хромосомы и называются Hfr-клетками (англ, high frequency of recombination - высокая частота рекомбинации). При конъюгации хромосома разрывается в месте нахождения F-фактора и реплицируется, причем одна нить ДНК передается в клетку реципиента, а копия остается в клетке донора. F-фактор включается в хромосому в определенном ее участке, поэтому перенос отдельных генов хромосомы совершается в строго определенное время. Таким образом, прерывая процесс конъюгации через разные промежутки времени путем встряхивания взвеси бактерий, можно выяснить, какие признаки передаются за это время. Это позволяет построить карту хромосомы, то есть последовательность расположения генов в хромосоме. Перенос всей хромосомы может длиться до 100 минут. F-фактор при этом переносится последним. 14. Бактериофаги: определение, свойства фагов как представителей вирусов, классификация фагов по морфологии, организация генома. Строение Т-четных фагов. Резистентность бактериофагов. Бактериофаги [от «бактерия», + греч. phagein, поедать] - группа вирусов, паразитирующих в бактериальных клетках. Чаще репродукция дочерних популяций бактериофагов внутри бактерий вызывают их разрушение. Бактериофаги, или фаги, широко распространены в природе — их выделяют из воды, почвы, организмов различных животных и человека. Свойства фагов как представителей вирусов: ● неклеточная форма жизни ● содержат одну нуклеиновую кислоту – ДНК или РНК ● отсутствуют белоксинтезирующие системы и самостоятельный метаболизм ● облигатные внутриклеточные паразиты на генетическом уровне Различные морфологические типы бактериофагов: а. Фаги 1 типа; представлены ДНК-овыми нитевидными фагами, лизирующими бактерии, содержащие F- плазмиды. б. Фаги 2 типа; представлены головкой и рудиментом хвоста. Геном большинства из них образован молекулой РНК и лишь у фага jc-174 — однонитевой ДНК. в. Фаги 3 типа; имеют короткий хвост: например, Т-фаги 3 и 7. г. Фаги 4 типа; включают фаги с несокращающимся хвостом и двухнитевой ДНК: например, Т-фаги 1 и 5. д. Фаги 5 типа; представлены ДНК-выми вирусами с сокращающимся чехлом хвоста, который заканчивается базальной пластиной: например, Т-фаги 2 или 4. Строение бактериофагов наиболее полно охарактеризовано на основе изучения Т-фагов кишечной палочки. Головка Т-фагов образована из однотипных субъединиц, организованных по принципу кубической симметрии, и может достигать размеров 100 нм. Капсомеры головки состоят из белковых молекул, построенных преимущественно из аспарагиновой и глутаминовой кислот, а также лизина. Содержание белка и ДНК в головке примерно одинаково. Геном большинства фагов образует спирально упакованная двойная нить ДНК. Число фагов, содержащих одноцепочечную молекулу ДНК или РНК, незначительно. У некоторых фагов (например, Т2) в головке находится внутренний белок, содержащий полиамины (спермин и путресцин) и обеспечивающий суперспирализацию большой молекулы ДНК. В таком виде она может упаковываться в сравнительно небольшом объёме. В составе фаговой ДНК обнаружены необычные азотистые основания (например, оксиметилцитозин). Хвост, или отросток, Т - фагов включает полый стержень и сократительный чехол, присоединяющийся к воротничку, окружающему стержень около головки. Чехол образован 120–140 белковыми молекулами, каждая из которых связывает одну молекулу АТФ и ионы Са2+. В дистальном отделе стержня расположена шестиугольная базальная пластина с шестью шипами и шестью нитями (фибриллами). У чётных фагов (например, у Т2) окончания фибрилл опущены вниз, а у нечётных - загнуты вверх. У некоторых Т-фагов в дистальной части хвоста находится лизоцим (эндолизин). По сравнению с бактериями, бактериофаги более устойчивы к воздействию различных химических и физических факторов. Они устойчивы в пределах рН 5,0-8,0, большинство из них резистентны к действию холодных водных растворов глицерина и этанола, а также цианидов, фторидов, динитрофенола, хлороформа, тимола и фенола. Бактериофаги хорошо сохраняются в лиофилизированном состоянии, но разрушаются при кипячении, под действием УФ облучения, кислот, химических дезинфектантов и формалина. Они хорошо сохраняются при низких температурах (до - 200 оС в глицерине), но быстро инактивируются при 65-70 С. Вследствие отсутствия чувствительности к антибиотикам, тимолу, хлороформу и ряду других веществ, уничтожающих сопутствующую микрофлору, эти вещества используют при выделении и сохранении фагов. 15. Вирулентные и умеренные фаги. Репродукция вирулентных бактериофагов. Характеристика умеренных бактериофагов: лизогения, фаговая конверсия, профаг, трансдуцирующие фаги. Виды бактериофагов: ● вирулентные фаги вызывают продуктивную инфекцию, при которой происходит репродукция фагов и лизис бактериальной клетки ● умеренные фаги встраиваются в генетический аппарат бактериальной клетки, не вызывая ее лизис (существуют в виде профага) Репродукция бактериофагов. В большинстве случаев бактерии, инфицированные бактериофагами, погибают, т.к. размножение и выход дочерних популяций из бактерии сопровождается её разрушением (лизисом). Взаимодействие бактериофагов с клеткой специфично так как они инфицируют бактерии только определённого вида. Репродуктивный цикл литических бактериофагов включает адсорбцию свободного фага на клеточных рецепторах, взаимодействие с ДНК клетки - хозяина, образование копий вирусных белков и нуклеиновых кислот, самосборку и выход дочерних популяций. Адсорбция. Прикрепление фага к бактерии происходит при помощи поверхностных структур бактериальной стенки, служащих рецепторами для вирусов. Например, рецепторы для фагов Т3, Т4 и Т7 расположены в липополисахаридном слое, для Т2 и Т6 — в наружной мембране. На бактериях без клеточной оболочки (протопласты, L-формы) бактериофаги не адсорбируются. Некоторые фаги в качестве рецепторов используют F-пили. Помимо рецепторов, адсорбция фага зависит от рН среды, температуры, наличия катионов и некоторых соединений (например, триптофана для Т2-фага). При избытке фага на одной клетке может адсорбироваться до 200–300 вирусных частиц. Адсорбция фага — пусковой момент его жизненного цикла, а специфичность взаимодействия с рецепторами на поверхности бактериальной клетки обусловливает, в том числе, возможность практического использования бактериофагов, например для идентификации, бактерий, а также для фаготерапии и фагопрофилактики. Инъекция фага. После адсорбции происходит ферментативное расщепление клеточной стенки лизоцимом, находящимся в дистальной части отростка. В чехле высвобождаются ионы Са2+, активизирующие АТФазу, что вызывает сокращение чехла и вталкивание стержня хвоста через цитоплазматическую мембрану в клетку. Затем вирусная ДНК «впрыскивается» в цитоплазму (внедрение вирусной ДНК). При этом структурные элементы фага - капсид и отросток - остаются вне клетки. Взаимодействие с геномом бактериальной клетки. Проникнув в клетку, нуклеиновая кислота фага «исчезает», т.е. диссоциирует, и уже через несколько минут обнаружить вирус не удаётся. В этот, так называемый скрытый период (эклипс) вирус берёт на себя генетическое управление клеткой, осуществляя полный цикл репродукции фага. К его окончанию составляющие фага соединяются в зрелый вирион. В зависимости от типа нуклеиновй кислоты, установление фагового генома может реализоваться через взаимодействия: а) однонитевой ДНК - с репликативным аппаратом для синтеза комплементарной ей нити и образования репликативной формы; далее ее поведение аналогично двунитевой ДНК; б) двунитевой ДНК - с транскрипционным аппаратом для синтеза мРНК и последующей трансляции вирусспецифичных белков (ферментов и структурных); в) РНК (через геном бактерии) - к трансляционному аппарату для синтеза вирусспецифичных белков (ферментов репликации и структурных). Поскольку большинство бактериофагов являются ДНК-овыми вирусами, то после инъекции вирусной ДНК (вДНК) в цитоплазму бактериальной клетки, клеточные РНК-полимеразы транскрибируют ДНК в мРНК, транслирующуюся на рибосомах. В результате осуществляется синтез вирусной полимеразы и других ранних вирусных белков. Вирусная полимераза участвует в образовании вДНК дочерних популяций. Часть образовавшейся в ДНК используется как матрица для синтеза белков головок и хвостов. После присоединения в ДНК последние образуют дочернюю популяцию фагов. Синтез фаговых белков. В первую очередь синтезируются ферменты, необходимые для образования копий фаговой ДНК. К ним относятся ДНК-полимераза, киназы (для образования нуклеозидтрифосфатов) и тимидилат синтетаза. Они появляются в клетке через 5–7 мин после её заражения. Клеточная РНК- полимераза транскрибирует вирусную ДНК в мРНК, которая транслируется бактериальными рибосомами в «ранние» белки фага, включая вирусную РНК-полимеразу и белки, способные посредством различных механизмов ограничивать экспрессию бактериальных генов. Вирусная РНК-полимераза осуществляет транскрипцию «поздних» белков (например, белков оболочки и эндолизина), необходимых для сборки фаговых частиц дочернего поколения. Некоторые вирусы расщепляют ДНК клетки-хозяина до нуклеотидов, чтобы использовать их для синтеза собственных нуклеиновых кислот. Репликация нуклеиновых кислот. Реализуется за счёт активности вновь синтезированных вирусных ДНК- полимераз, производящих множественные копии вирусных нуклеиновых кислот. Выход дочерних популяций. Вновь синтезированные белки формируют в цитоплазме пул предшественников, входящих в состав головок и хвостов дочерних вирусных частиц. Другой пул содержит ДНК потомства. Специальные аффинные области в вирусной ДНК индуцируют объединение предшественников головок вокруг агрегатов нуклеиновой кислоты и образование ДНК-содержащих головок. Заполненная головка затем взаимодействует с хвостовой частью, образуя функциональный фаг. Весь процесс (от адсорбции до появления вновь синтезированных вирусов) занимает около 40 мин. После образования потомства («урожай», или выход фага, составляет 10–200 из одной инфицирующей частицы) клетка хозяина лизируется, высвобождая дочернюю популяцию. В разрушении клеточной стенки участвуют различные факторы: фаговый лизоцим, увеличенное внутриклеточное давление. Вирус, по-видимому, также стимулирует образование аутолизинов либо блокирует механизмы, регулирующие их синтез. Лизогения - способности бактериальной культуры в бесчисленном ряду поколений нести в своем составе фаг в особой неинфекционной форме, называемой профагом. Бактерии, в составе которых есть профаг, называются ЛИЗОГЕННЫМИ. Лизогенная (фаговая) конверсия - изменение свойств микроорганизмов под влиянием профага. Изменение генотипа или фенотипа бактерий в результате фаговой конверсии приводит к изменению культуральных, биохимических, токсигенных, антигенных свойств, чувствительности к антибиотикам. Трансдукция – передача бактериальной ДНК посредством бактериофага. Неспецифическая (общая) трансдукция – это перенос бактериофагом (Р-фагом) фрагмента любой части бактериальной хромосомы. Специфическая трансдукция •Фаговая ДНК интегрирует в бактериальную хромосому с образованием профага (обычно в специфичном участке) •При исключении ДНК фага захватывается прилегающий фрагмент бактериальной хромосомы и образуется дефектный фаг. •Последующее инфицирование дефектной частицей – сайт- специфическая рекомбинация. Рекомбинант становится меродиплоидным по привнесенному гену (например, gal-ген у E.coli ) Трансдукция с высокой частотой (HFT от англ. high frequency transduction) – реализация дефектного трансдуцирующего фага при помощи вспомогательного. Абортивная трансдукция - внесѐнный фрагмент ДНК донора не встраивается в геном реципиента, а остаѐтся в цитоплазме. 16. Практическое применение бактериофагов (лечение, профилактика, диагностика). Титрование бактериофага в жидкой питательной среде по методу Аппельмана. Титрование бактериофага на плотной питательной среде по методу Грациа. Принцип проведения и учета титрования. Фагоидентификация и фаготипирование бактерий: понятие, цель применения, принцип проведения исследования и учета. Бактериофаги применяются в: Вирулентные: • Ф |